蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1、SHP-2在γ射线诱发的小鼠胸腺淋巴瘤中表达的研究

目的　探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 1、SHP 2在γ射线体外诱发的小鼠胸腺淋巴瘤中的表达情况 ,为从细胞信号转导途径入手研究辐射致癌的分子机理奠定一定的基础。方法　 338只BALB c小鼠随机分为照射组及对照组 ,照射组经6 0 Coγ射线全身照射 ,病理证实出现胸腺淋巴瘤者为癌变组 ,未出现任何肿瘤者为未癌变组 ;对照组不经γ射线照射 ,与照射组同步喂养。分离胸腺细胞 ,应用Westernblot方法检测其SHP 1及SHP 2蛋白质的表达。结果　癌变组SHP 1蛋白 (吸光度A值为 15 2 7)的表达明显 ,而对照组 (吸光度A值为 3 80 )及未癌变组 (吸光度A值为 1 0 1)表达非常弱甚至无表达 ;SHP 2蛋白的表达总体上呈现癌变组 (吸光度A值为 2 88)明显高于对照组 (吸光度A值为 0 33)及未癌变组 (吸光度A值为 0 99) ,未癌变组略高于对照组的趋势 ;应用Westernblot分析SHP 2的表达时 ,癌变组除了SHP 2蛋白表达明显外 ,同时出现另外 1条表达明显的条带 ,相对分子质量约 5 5× 10 3,该蛋白的表达总体上明显高于对照组及未癌变组。结论　蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 1、SHP 2在γ射线诱发的小鼠胸腺淋巴瘤中表达明显增强 ,说明SHP 1、SHP 2可能与辐射致癌的发生有关 ,但有待进一步通过实验证实。     

加强实验课教学改革 培养合格医学检验人才

在医学检验专业的本科教育中，一方面要使学生具有扎实的医学基础知识，走与临床相结合的道路；另一方面应培养学生过硬的实验室技能，具备初步的科研能力，突出检验专业的特色，我们结合近几年的实验课教学实践，提出从实验单独设课、自成体系；完成考核机制，避免高分低能；在实验教学过程中培养学生的初步科研能力等几方面入手，对医学检验专业的实验课教学进行了一些必要的改革。     

99Tcm直接标记αvβ3受体拮抗剂环形RGD多肽

目的探讨^99Tc^m直接标记αvβ3受体配体——含2个二硫键的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）-九肽（RGD-4CK）的可行性和不同标记条件对标记率的影响。方法采用预锡化法^99Tc^m直接标记RGD-4CK，3MM色谱纸层析测定^99Tc^m-RGD-4CK的雕值，计算标记率与比活度。研究各种标记条件对^99Tc^m-RGD-4CK标记率的影响。通过高效液相色谱仪（HPLC）分析，Sep-Pak C18柱层析，进行体外稳定性实验、半胱氨酸置换实验以及血清蛋白结合实验，评价^99Tc^m-RGD-4CK的放射化学性质。结果^99Tc^m-RGD-4CK在以丙酮和V（氨水）：V（乙醇）：V（水）=1：2：5为流动相中的雕值分别为0与0．8～0．9，标记率为（97．8±0．4）％，基础标记条件下的比活度为（11．90±0．05）TBq／mmol。在以下条件下放化纯均〉95％：（1）酒石酸亚锡为150～300μg；（2）预锡化反应pH值为2．0～3．5，温度60℃，保温时间6h以上；（3）^99Tc^mO4^-活度为37～185MBq，体积在200μl内；（4）标记温度为95℃，标记时间30min.^99Tc^m-RGD-4CKHPLC的保留时间与其洗脱液的放射峰基本一致；^99Tc^m-RGD-4CK室温放置6h，放化纯仍〉95％；Sep—Pak C18柱层析测定的^99Tc^m O4^-峰仅比3MM纸层析高0．5％；标记物与300mmol／L半胱氨酸37℃保温1h，^99Tc^m O4^-峰仅增加1．88％；^99Tc^m-RGD-4CK与血清蛋白无明显结合。结论预锡化法^99Tc^m直接标记RGD-4CK方法简便、标记率高，无需分离纯化即可直接应用，还可用于制备冻干品药盒。标记产物^99Tc^m-RGD-4CK具有良好的放射化学性质。     

Fas、Bcl-2在γ射线体外诱发的白血病小鼠骨髓细胞中的表达

目的 :观察 Fas、Bcl- 2在 γ射线体外诱发的急性淋巴细胞白血病小鼠骨髓细胞中表达情况 ,以探讨辐射致癌的机制。方法 :采用 4次 1.75 Gyγ射线全身照射 BAL B/ c小鼠诱发白血病模型 ,通过流式细胞仪对照射后白血病组、未癌变组及对照组小鼠骨髓细胞中 Fas、Bcl- 2的表达进行检测 ;应用抗 Fas抗体诱导细胞凋亡 ,进一步观察 Fas、Bcl- 2的表达对骨髓细胞凋亡的影响。 结果 :白血病小鼠骨髓细胞 Fas表达较未癌变组及对照组明显下降 (P<0 .0 1) ,而 Bcl- 2的表达明显增强 (P<0 .0 1) ;白血病小鼠骨髓细胞明显耐受抗 Fas抗体诱导的细胞凋亡。 结论 :Fas低表达、Bcl- 2高表达导致了细胞凋亡受到抑制 ,这可能是辐射引起小鼠急性淋巴细胞白血病的机制之一。     

~(60)Coγ射线照射诱发小鼠恶性肿瘤

目的：建立γ射线诱发小鼠恶性肿瘤动物模型。方法：BALB／c小鼠经^60Coγ射线全身照射，每次吸收剂量1．75Gy，吸收剂量率0．88Gy／min，每周1次，共4次。照后每隔1～2个月处死一批小鼠，分别取胸腺、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、胃、生殖腺、肠系膜、盲肠、大脑等组织器官，甲醛溶液固定后进行病理学检查及裸鼠致瘤实验。结果：照后15个月BALB／c小鼠出现的肿瘤类型以白血病为主，并发现汗腺瘤及恶性卵黄囊瘤；白血病经病理学证实为淋巴细胞型白血病；白血病及汗腺瘤的裸鼠致瘤实验已稳定连续传至第12代。结论：成功建立^60Coγ射线体外诱发的小鼠恶性肿瘤动物模型。     

加强实验课教学改革培养合格医学检验人才

在医学检验专业的本科教育中,一方面要使学生具有扎实的医学基础知识,走与临床相结合的道路另一方面应培养学生过硬的实验室技能,具备初步的科研能力,突出检验专业的特色.我们结合近几年的实验课教学实践,提出从实验单独设课、自成体系;完成考核机制,避免高分低能;在实验教学过程中培养学生的初步科研能力等几方面入手,对医学检验专业的实验课教学进行了一些必要的改革.     

γ射线诱发的白血病小鼠骨髓细胞SHP-1 mRNA及蛋白表达变化的研究

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1 mRNA及蛋白表达在γ射线体外诱发的白血病小鼠骨髓细胞中的变化情况.方法实验分为白血病组、辐射未癌变组及对照组,应用荧光定量PCR法及Western blot法分别检测各组骨髓有核细胞中SHP-1 mRNA及蛋白表达的变化情况.结果白血病组SHP-1 mRNA含量为(5.26±2.14),明显高于辐射未癌变组(3.68±1.27)及对照组(2.95±1.09),(P《0.01);白血病组SHP-1蛋白表达量(光密度)为(5.378±2.905),明显高于对照组(1.852±0.711)及辐射未癌变组(1.559±0.506).结论在γ射线诱发的白血病小鼠骨髓细胞中,SHP-1 mRNA含量及蛋白表达量均明显增强.     

放射性骨显像在组织工程骨修复骨缺损实验中的应用

目的观察修复兔桡骨大段骨缺损时复合了血管内皮祖细胞（EPCs）的组织工程骨的血管化及成骨情况。方法自体骨髓通过不同方法的体外培养,分别获得EPCs及经成骨诱导的骨髓间充质干细胞（MSCs）,与脱钙骨基质（DBM）构建组织工程骨修复兔桡骨大段骨缺损,通过放射性核素骨显像技术评价术后不同时期组织工程骨的血管化进程及成骨情况。结果感兴趣区（ROI）计数和摄取比值显示：术后3d,各组间差异无统计学意义,但低于正常对照。术后2、4、8周,各组均呈逐渐上升的趋势,4周和8周时达到峰值,实验组在各个时相点均高于自身对照及阴性对照组。术后12周,各组均开始下降,其中延迟相结果显示：实验组与自身对照组差异无统计学意义,但二者均高于阴性对照组。术后16周,血池相结果显示：实验组低于自身对照组,与阴性对照组无差异;延迟相结果各组差异无统计学意义。结论放射性核素骨显像对骨修复过程中的血管化及成骨具有良好的监测作用。EPCs可以促进组织工程骨的血管化,加速骨愈合。