镧系元素时间分辨荧光免疫分析

一、概述 应用镧系元素的时间分辨荧光(TRF)分析技术,已在免疫检测中显示出它的优越性。在医学各学科中;如内分泌激素的检查、肿瘤标志物的检测,以及体内各种内或外源     

rr－烯醇化酶单克隆抗体双位点夹心ELISA的建立和临床应用

在自制的８株烯醇化酶（ＮＳＥ）ＭｃＡｂ中，经方阵排列滴定筛选出无交叉反应且效价较高的２株ＭｃＡｂ，用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）为标记物，建立了ＮＳＥ－ＭｃＡｂ双位点夹心ＥＬＩＳＡ。经直线回归方程、取代试验、阻断试验检验，该标准曲线近似直线关系，可测定标本中ＮＳＥ的范围为５～５０μｇ／Ｌ。对２３例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）（Ⅰ和Ⅱ期４例、Ⅲ期７例、Ⅳ期１２例）．３２例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ），２２例肺良性疾病（ＢＰＤ）和３６例健康体检者血清ＮＳＥ进行了测定，ＳＣＬＣ的阳性率为８２．６％（１９／２３），其中Ⅰ和Ⅱ期为５０％（２／４）；Ⅲ期为８５．７％（６／７），Ⅳ期为９１．７％（１１／１２）；ＮＳＣＬＣ的阳性率为３．１％（１／３２），ＢＰＤ阳性率为４．５％（１／２２）。ＳＣＬＣ的显著高于ＮＳＣＬＣ和ＢＰＤ（Ｐ＜０．０１）；ＳＣＬＣ的Ⅳ和Ⅲ期显著高于Ⅰ和Ⅱ期（Ｐ＜０．０１）。２３例ＳＣＬＣ经综合治疗后，完全缓解组和部份缓解组血清ＮＳＥ水平非常显著低于进展组和无改变组（Ｐ＜０．０１）。本文研究结果证明，ＮＳＥＭｃＡｂ双位点夹心ＥＬＩＳＡ具有灵敏、特异和简便快速的特点，对ＳＣＬＣ的血清学诊断有较高的灵敏度和特异性，对ＳＣ     

芥子气全身中毒对小鼠脏器细胞DNA生物合成的影响及抗毒剂的防护作用

应用[~3H]—TdR参入示踪方法,观察芥子气全身中毒对小鼠脏器细胞DNA合成的影响及抗毒剂的防护作用。结果表明,芥子气对脏器细胞DNA合成具有强烈的抑制作用(P<0.01),其抑制作用的规律相似,而程度、时相有显著差异(P<0.05)。抑制作用特点:迅速、严重、恢复迅速,且有超常水平,提示动物机体对DNA烃化损伤具有较强的代偿、再生和修复能力。抗毒剂硫代硫酸钠及其与二巯基丙磺酸钠合用对芥子气吸收中毒引起的脏器细胞DNA合成抑制作用有明显的防护作用。     

SHP-1蛋白在γ射线诱发的白血病小鼠胸腺细胞中的变化

目的:探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1蛋白在γ射线体外诱发的白血病小鼠胸腺细胞中的变化特点.方法:建立γ射线体外诱发BALB/c小鼠白血病模型.实验分为癌变组、未癌变组及对照组,从各组小鼠获取胸腺细胞,应用Western印迹、免疫沉淀法及生物化学方法检测各组胸腺细胞SHP-1蛋白质的表达、酪氨酸磷酸化水平及酶活性.结果:癌变组SHP-1蛋白的表达明显高于对照组及未癌变组(P＜0.01),但各组SHP-1的酪氨酸磷酸化水平及酶催化活性差异不显著(P＞0.05),且其酪氨酸磷酸化水平与酶活性间存在明显相关性.结论:在γ射线诱发的白血病小鼠的胸腺细胞中,SHP-1蛋白表达明显升高,但可能存在酪氨酸磷酸化障碍,导致其活性降低,即表现出SHP-1蛋白表达与其活性分离现象,提示辐射致癌中SHP-1蛋白可能存在功能障碍.     

超氧化物歧化酶拮抗内皮素的致心律失常作用

正常SD雄性大鼠48只,体重300～380g,随机分组,尿酯麻醉下作气管插管,股动脉插管接压力换能器,用四导生理仪监测动脉血压和心电图变化。经颈总动脉插入主动脉导管,尖端抵达冠状动脉口,沿此管分别注射内皮素-1或超氧化物歧化酶(SOD-1),主要结果如下:(1)内皮素对照组,向冠状动脉口分别注射150～900pmol/kg内皮素-1,观察到平均动脉压先显著降低(P<0.05),继之回升,脉压差减小(P<0.05),心率减慢及呼吸变浅变慢等反应。内皮素剂量为150pmol/kg组,有轻度血液动力学变化,但无心律失常发     

时间分辨荧光核酸杂交分析体系的建立及其初步应用

建立时间分辨荧光核酸杂交分析体系并应用于临床乙型肝炎病毒(HBV)DNA检测。采用本室自制螯合剂异硫氰酸苯基—EDTA制备铕离子标记的链霉亲和素(Eu~(3+)—SA),抽提患者血清中的DNA,包被于聚苯乙烯微滴板中,与生物素化HBV DNA杂交后,以Eu(3+)—SA为检测物,应用时间分辨荧光技术检测血清样本     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1、SHP-2在γ射线诱发的小鼠胸腺淋巴瘤中表达的研究

目的　探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 1、SHP 2在γ射线体外诱发的小鼠胸腺淋巴瘤中的表达情况 ,为从细胞信号转导途径入手研究辐射致癌的分子机理奠定一定的基础。方法　 338只BALB c小鼠随机分为照射组及对照组 ,照射组经6 0 Coγ射线全身照射 ,病理证实出现胸腺淋巴瘤者为癌变组 ,未出现任何肿瘤者为未癌变组 ;对照组不经γ射线照射 ,与照射组同步喂养。分离胸腺细胞 ,应用Westernblot方法检测其SHP 1及SHP 2蛋白质的表达。结果　癌变组SHP 1蛋白 (吸光度A值为 15 2 7)的表达明显 ,而对照组 (吸光度A值为 3 80 )及未癌变组 (吸光度A值为 1 0 1)表达非常弱甚至无表达 ;SHP 2蛋白的表达总体上呈现癌变组 (吸光度A值为 2 88)明显高于对照组 (吸光度A值为 0 33)及未癌变组 (吸光度A值为 0 99) ,未癌变组略高于对照组的趋势 ;应用Westernblot分析SHP 2的表达时 ,癌变组除了SHP 2蛋白表达明显外 ,同时出现另外 1条表达明显的条带 ,相对分子质量约 5 5× 10 3,该蛋白的表达总体上明显高于对照组及未癌变组。结论　蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 1、SHP 2在γ射线诱发的小鼠胸腺淋巴瘤中表达明显增强 ,说明SHP 1、SHP 2可能与辐射致癌的发生有关 ,但有待进一步通过实验证实。     

酸性成纤维细胞生长因子的分离纯化及活性鉴定

目的：从牛脑中分离纯化酸性成纤维细胞生长因子（aFGF)并鉴定生物活性，方法：根据DenisGOSPODAROW-ICZ的方法，新鲜牛脑匀浆，三步硫酸铵盐析。最后沉淀物溶解透析后予离子交换层析及琼脂糖胶亲和层析，促3T3细胞DNA合成率鉴定生物活性。结果：用1.0mol/LNaCl的缓冲液洗脱得到分子量为13600的多肽，得率为610μg/kg牛脑，氨基酸组成分析与已知的aFGF相同，促3T3细胞DNA合成的最低浓度为0.5ng/ml，最大效应浓度50ng/ml，ED50值为8ng/ml。结论：aFGF具有强烈的促细胞增殖作用。     

烫伤家兔超氧化物歧化酶活性变化与烫伤程度和预后的关系

自由基与多种疾病的发生发展有关，超氧化物歧化酶（SOD）起着自由基清除剂的作用，为探讨烫作对动物体内SOD水平的影响，本文以烫伤家兔为模型，结果发现：烫伤后血液SOD活性增高，烫伤越重越高越明显，死亡前家兔血液中SOD更高，烫伤局部组织SOD活性反而降低，烫伤越重组织中SOD水平降低越明显，死亡前家兔SOD更低。因此烫伤血液中和烫伤局部组织SOD的测定，对烫伤程度的判定及预后估计具有重要的参考价值。