抗生素对巨噬细胞中嗜肺军团菌的抑制作用

嗜肺军团菌是可在巨噬细胞和单核细胞内增殖的兼性胞内菌,这一特性被认为是嗜肺军团菌致病的主要机制。只有能渗入吞噬细胞中的抗生素才能起到有效的治疗作用。有些抗生素,特别是β—内酰胺类抗生素,由于难于渗入细胞内,抗菌效力与药物敏感试验结果不一致。评价药物对兼性胞内菌的抗菌效果应结合药物的抑菌活性及渗入细胞的情况。我们用对嗜肺军团菌易感的肺胞巨噬细胞,检测了10种抗生素对细胞内嗜肺军团菌的作用。 1 材料和方法     

华南地区质粒介导超广谱β-内酰胺酶的基因分型研究

目的：了解华南地区质粒介导超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的发生率及基因型特征。方法：收集2001年4月－9月革兰阴性菌临床分离无重复株共1184株，采用NCCLS表型筛选和确认试验进行了ESBLs产酶的识别，E-test法检测各亚型ESBLs的MICs值，质粒接合及电转化实验，耐药质粒提取及酶切指纹分析，等电聚焦电泳，PCR通用引物扩增TEM、SHV、CTX－M、VEB、PER、SFO基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果：革兰阴性苗ESBLs的检出率为14．6％（173／1184）；获得产ESBLs接合子67株，电转化子11株，其中产CTX－M－14型ESBLs为33．3％（26／78）、CTX－M－3为23．1％（18／78）、CTX－M－9为14．1％（11／78）及SHV-2a为2．6％（2／78），未定型为5．1％（4／78）；29．5％（23／78）野生株伴广谱酶TEM－1或SHV－1型；各型ESBLs基因约定位在35－190kb大小的可接合性低执行者拷贝数天然质粒上；CTX－M型ESBLs以对头孢噻肟高水平高耐为特征。结论：华南地区质粒介导的ESBLs以CTX－M型衍生酶为主，其次是SHV型酶。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清中黏附分子、肿瘤坏死因子和白细胞介素-8的变化

目的　探讨慢性阻塞性肺疾病 (COPD)急性加重期和稳定期血清中可溶性细胞间黏附分子 (sICAM - 1)、肿瘤坏死因子 (TNF -α)和白细胞介素 - 8(IL - 8)表达的变化 ,以了解三者在COPD发病中的网络调节关系。方法　采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测 15例COPD患者急性加重期、稳定期的sICAM - 1,TNF -α和IL - 8水平。结果　COPD患者急性加重期血清sICAM- 1水平明显高于稳定期 (P <0 .0 5 )。急性加重期与稳定期血清TNF -α ,IL - 8水平无明显统计学差异 ,治疗前后各分子水平变化之间无明显相关性。结论　COPD患者急性加重期血清sICAM - 1水平的增高 ,反映了疾病过程中sICAM - 1所介导的白细胞黏附活动增加 ,可作为一个新的治疗方向。     

E-test试条对异质性耐万古霉素葡萄球菌的检测

目的 探讨E—test对异质性耐万古霉素葡萄球菌的检测价值。方法 从连续接触万古霉素的脑心浸液琼脂(BHIA)平板上挑取万古霉素异质性耐药葡萄球菌苗株，应用万古霉素E—test试条、药敏纸片和琼脂平板对倍稀释法测定药敏结果。结果 E—test检测的对万古霉素异质性耐药葡萄球菌MRSHl09，MRSH2，MRSH13，MRSH31，MRSH60，MRSHl08，MRSH73，MRSH97，MRSH102的MIC依次为：16、24、48、48、16、32、24、24mg/L，其中耐药7株占77．8％(7/9)，中介2株占22．2％(2/9)；琼脂对倍稀释法的MIC为：16、32、64、32、16、32、32、16、32mg/L，耐药6株占66．7％(6/9)，中介3株占33．3％(3/9）；药敏纸片直径依次为：14、12、10、11、10、15、13、10，13mm，敏感率为11．1％(1/9)。结论 E—test可以便捷直观地鉴定对万古霉素异质性耐药葡萄球菌的药敏结果，与琼脂平板对倍稀释法接近，优于纸片法。     

阴沟肠杆菌质粒介导耐喹诺酮类药物的机制研究

目的了解深圳地区阴沟肠杆菌中qnrA基因的流行情况、基因定位及其介导喹诺酮耐药性产生的机制。方法收集临床分离的阴沟肠杆菌45株,采用PCR法结合测序的技术筛查qnrA基因,大质粒提取技术、Southern杂交和接合传递试验进行质粒定位,琼脂对倍稀释法进行药物敏感性检测。结果45株阴沟肠杆菌中,7株PCR法及测序证实为qnrA基因。7株菌中6株菌所携质粒被成功提取并进行Southern杂交,qnrA基因定位于80~200kb大小的低拷贝数天然质粒上。4株菌成功进行接合传递试验,使接合子对环丙沙星的MIC值提高了32~64倍。结论质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrA在深圳地区阴沟肠杆菌中具有较高的流行率,可能是导致阴沟肠杆菌对喹诺酮类抗菌药获得性耐药的重要原因。     

医院感染铜绿假单胞菌脉冲场凝胶电泳分析

目的确定铜绿假单胞菌不同基因型与抗菌谱的联系,以追踪院内感染中铜绿假单胞菌菌株在分子水平上的相关性。方法对2002年1月～2004年12月自该院住院患者各种标本中分离获得216株铜绿假单胞菌,用脉冲场凝胶电泳分析耐亚胺培南铜绿假单胞菌的同源性;液体稀释法测定携带blaIMP基因铜绿假单胞菌菌株的最小抑菌浓度,纸片扩散法检测亚胺培南敏感株和耐药株对10种常用抗菌药物的耐药性。结果分离的铜绿假单胞菌主要来自呼吸道标本,对常用抗菌药物的耐药率高,多重耐药现象严重。携带blaIMP基因与不携带blaIMP基因的铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性差异有显著性,未携带blaIMP基因的铜绿假单胞菌菌株在PFGE上表现出不同的分型,而携带blaIMP基因的10株中9株具有相同的PFGE分型。结论blaIMP基因在铜绿假单胞菌的耐药机制中起主要作用,了解铜绿假单胞菌的耐药现状,有利于为临床合理用药提供依据,抗生素的合理使用可减少细菌耐药性的产生,降低医院感染的发病率。     

MRSA PBP2a表达的影响因素及MecA基因的检测价值

【目的】探讨温度、pH、盐浓度对甲氧西林耐药金葡菌 (methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)青霉素结合蛋白2a(penicillin bindingprotein ,PBP)表达的影响 ,以及PBP2a编码基因MecA的检测价值。【方法】采用聚合酶链式反应(PCR)检测MRSA特异性MecA基因和美国临床实验室标准委员会 (NCCLS)推荐的琼脂板稀释法 (32℃ ,pH7 2 ,40g/LNaCl苯唑西林MIC≥ 4mg/L)筛选MRSA。检测 2 0株MRSA在不同温度、pH、盐浓度时对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶的体外药物敏感性 ,测定MIC范围 ,MIC50 和MIC90 ;SDS PAGE分析 10株MRSA膜青霉素结合蛋白 (PBP2a)在不同培养条件时表达数量的差异 ,并进行配对差值的t检验。【结果】 180株金葡菌检测出MecA基因阳性MRSA 5 6株 ,按琼脂板稀释法检出 5 2株MRSA ,4株未被检出 (苯唑西林MIC分别为 :2 ,2 ,1,0 5mg/L) ,37℃、pH 5 2和 9g/LNaCl分别与 32℃、pH 7 2和 40 g/LNaCl条件下诱导 10株MRSA ,所表达的PBP2a含量前后比较差值有显著性 (P∶0 .0 2～ 0 .0 5 ,0 .0 1～ 0 .0 0 5 ,0 .0 2～ 0 .0 5 )。【结论】不同温度、pH、盐浓度通过诱导耐药蛋白PBP2a的表达明显影响MRSA对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶耐药水平 ,而其MecA基因却不受培养条件的影响 ,可以快速检测MR     

N—乙酰半胱氨酸对缓解期肺心病的抗氧化和免疫调节作用

目的：研究Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）对缓解期肺心病的抗氧化和免疫调节作用。方法：３８例肺心病缓解期患者予ＮＡＣ ６００ ｍｇ．ｐｏ,ｑｄ,共６ｍｏ。比较治疗前和治疗后１,３,６ｍｏ血清ＭＤＡ,ＣＤ３,ＣＤ４,ＣＤ８水平,并与健康志愿者（对照组）比较。结果：与对照组比较肺心病缓解期ＭＤＡ明显升高（Ｐ＜０．０５）,而ＣＤ４显著降低（Ｐ＜０．０１）;经ＮＡＣ治疗后ＭＤＡ、ＣＤ４分别于１,３ｍｏ月恢复正常。结论：ＮＡＣ能降低肺心病缓解期患者的过氧化物水平,捉高免疫力,有可能减少急性加重的发生。     

头孢硫咪体外抗菌活性测定

目的：评价第一代头孢菌素头孢硫脒对近期从临床分离的致病菌的体外抗菌活性。方法：用对倍稀释法测定头孢硫咪的最小抑菌浓度（ＭＩＣ）并与头孢唑啉、头孢呋辛、头孢他啶体外抗菌活性进行了对比。结果：头孢硫脒对肺炎球菌、化脓性链球菌、ＭＳＳＡ、ＭＳＳＥ和卡他布汉氏菌有较强的抗菌活性。结论：头孢硫脒对Ｇ^＋球菌有较强的抑菌活性和杀菌活性,对肠球菌亦显示有很强的体外抗菌活性。