喹诺酮耐药基因qnrA的协同耐药分子机制研究

目的探讨喹诺酮类药物耐药基因qnrA介导的耐药性及其协同耐药分子机制。方法采用引物特异性PCR结合测序检测qnrA阳性株及gyraseA和parC基因变异情况,Phe-Aag-β-Naphthylamine(PAβN)抑制试验识别外排机制介导的耐药性,琼脂稀释法测定qnrA阳性株对喹诺酮类抗菌药的MIC值。结果QnrA阳性株对喹诺酮类抗菌药的耐药水平存在明显差异,gyraseA、parC基因变异或AcrAB-TolC外排泵等协同耐药机制存在与否与其关系密切。结论qnrA基因介导的耐药性存在协同机制,并加剧了qnrA阳性株的耐药性,给临床抗感染治疗带来严峻挑战。     

调节性B细胞的研究进展

B细胞主要通过产生抗原特异性抗体、辅助诱导CD4+T细胞活化发挥正向免疫调节作用[1]。然而近年动物试验研究表明B细胞可以负向调节免疫反应[2,3],这类B细胞被称为调节性B细胞,并发现缺乏调节性B细胞会导致自身免疫性脑脊髓膜炎、慢性结肠炎、接触性过敏性皮炎、类风湿性关     

应用微创锁定钢板技术治疗胫骨远端粉碎骨折

目的探讨应用微创锁定钢板（minimally invasive percutaneous plate osteosynthesis,MIPPO）治疗胫骨远端粉碎性骨折的方法和临床效果。方法采用MIPPO治疗胫骨远端粉碎性骨折29例,其中闭合性20例,开放性9例,开放性骨折按照Gustilo分型,型4例,型2例,a 3例。结果本组患者均得到随访,时间3~24个月,平均13.5个月。全部骨性愈合,无内固定物断裂现象。按照Joher-Wruh评分[1],优23例,良4例,中2例。结论采用微创锁定钢板治疗胫腓骨远端粉碎骨折,能够有效保护骨折端的血供,为骨折愈合维持良好的生物学环境,具有创伤小、操作简单、并发症少的优点,是治疗胫骨远端骨折的良好方法。     

重建椎体完整性和稳定性在胸腰椎骨折中的应用

目的探讨胸腰段骨折重建椎体完整性和稳定性的方法及临床意义。方法 35例胸腰椎骨折全部行后路椎体撑开复位病椎内植骨联合RF短节段内固定手术,平均15个月取出内固定。结果 35例患者平均随访19个月,X线片示全部骨性愈合,即刻矫正满意,远期矫正无丢失,采用F ranke l脊髓损伤分级进行神经功能评定有不同程度的恢复。结论胸腰段骨折经伤椎椎弓根椎体撑开复位椎体内植骨联合RF内固定以重建椎体的完整性和稳定性,可有效防止矫正度丢失、内固定松动断裂、晚期脊柱不稳及继发椎管狭窄等并发症,而且创伤小,效果可靠,操作简便。     

树突状细胞表面特异性非整联蛋白外显子4在中国裔丙型肝炎患者中的遗传多态性

目的探讨树突状细胞表面特异性非整联蛋白（DC—SIGN）及其同源物（DC-SIGNR）外显子4遗传多态性在中国裔丙型肝炎患者中是否存在遗传易感性。方法采用PCR结合DNA测序对300例丙型肝炎患者和520名健康人的DC-SIGN和DC-SIGNR外显子4重复序列多态性进行基因分型和测序分析。结果DC—SIGN外显子4基因型与等位基因频率在丙型肝炎患者和健康人群间差异无统计学意义（P〉0．05）。DC-SIGNR外显子4等位基因的频率差异也无统计学意义（P〉0．05）；但9／5基因型分布频率在丙型肝炎患者和健康人群间的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DC-SIGN外显子4遗传多态性与HCV感染易感性无明显相关性；9／5基因型DC-SIGNR外显子4在丙型肝炎患者中的分布频率较高，可能与HCV感染的易感性相关，值得进一步研究。     

miR-20a-5p调控结核分枝杆菌诱导巨噬细胞凋亡相关基因表达的研究

目的 明确小非编码RNA(microRNA,miR-20a-5p)对结核分枝杆菌(MTB)诱导人巨噬细胞凋亡相关基因表达的调控作用。方法 构建可表达或抑制miR-20a-5p、转染miR-20a-5p抑制剂(miR-20a-5p-inhibitor,简称“miR-20a-5p-inh”)、作为慢病毒载体的阴性对照(LV1-NC)的慢病毒载体,由oligo-dT引物通过固相亚磷酰胺法合成茎环寡核苷酸,并克隆到含绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体pGLV3-GFP内,将构建的miR-20a-5p、miR-20a-5p-inh、LV1-NC转染THP-1人巨噬细胞3h,培养72h后用流式细胞仪分选出GFP+THP-1细胞,并分别采用减毒MTB菌株(H37Ra)感染8h和过氧化氢(H₂O₂)处理30min 两种方法诱导。通过实时定量PCR技术测定细胞中线粒体相关抗凋亡基因Bcl-2,以及促凋亡基因Bax、Bim和Bad的转录水平。同时,用蛋白免疫印迹法检测细胞裂解物中相关蛋白的表达。结果 慢病毒转染细胞后,在无刺激的THP-1细胞中miR-20a-5p的相对荧光强度值为12.21±1.29、miR-20a-5p-inh为9.68±1.38、LV1-NC为10.64±0.96,三者的表达差异均无统计学意义(q=1.815,P=0.385;q=2.072,P=0.602);但在H37Ra和H₂O₂的刺激后,miR-20a-5p过表达时其相对荧光强度值分别为7.20±0.53、8.55±0.82,明显高于LV1-NC (4.46±0.07、5.49±0.44)(q=50.250,P=0.007;q=1.041,P<0.01),miR-20a-5p受抑制时(1.88±0.08、1.44±0.21)明显低于LV1-NC(q=3.457,P=0.031;q=4.384,P=0.001)。在感染miR-20a-5p慢病毒的THP-1细胞中,H37Ra诱导Bcl-2的表达增加(相对荧光强度值由10.67±0.89增至14.98±0.88)(q=1.064,P=0.008),而感染miR-20a-5p-inh慢病毒时Bcl-2表达减少(由10.67±0.89降至6.49±0.47)(q=3.518,P=0.003);在miR-20a-5p过表达的THP-1细胞中Bim的转录水平减少(由1.22±0.05降至0.98±0.04)(q=1.240,P=0.011),当miR-20a-5p受抑制时Bim的转录水平增加(由1.22±0.05增至1.51±0.08)(q=2.460,P=0.021)。蛋白印迹法检测凋亡相关基因Bcl-2和Bim的蛋白表达水平,结果与基因转录水平相符。 结论 miR-20a-5p的表达水平影响MTB诱导的巨噬细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bim的表达,并且与促凋亡基因Bim的水平呈负相关,提示miR-20a-5p可能通过调控Bim的表达而影响细胞凋亡。     

HCV-RNA病毒载量和肝脏病理的关系

目的:研究丙肝患者血清HCV-RNA含量和丙氨酸氨基转移酶(ALT)浓度及肝脏病理之间的关系。方法:采用荧光定量PCR法检测306例疑似HCV感染患者的血清HCV-RNA,ELISA法检测抗-HCV,全自动生化分析仪测定ALT,对部分患者行肝穿刺检查。结果:306例血清标本中,HCV-RNA和抗-HCV均阳性155例,HCV-RNA阳性而抗-HCV阴性36例,HCV-RNA阴性而抗-HCV阳性45例。在排除了甲型、乙型和戊型肝炎病毒感染后,23例丙肝患者在HCV-RNA检测前后10d内,曾进行过肝脏病理检查,HCV-RNA含量和ALT浓度水平与肝组织病理分级相关性不显著。结论:HCV-RNA和抗-HCV的检测是诊断HCV-RNA感染的重要指标。但HCV-RNA含量和ALT浓度水平与肝组织炎症及纤维化无明显相关。     

七叶皂甙钠治疗肛肠科术后肿痛的临床观察

目的探讨β-七叶皂甙钠治疗肛肠科手术后肿痛的临床效果。方法将肛肠科手术后的患者136例随机分为治疗组和对照组，治疗组用β-七叶皂甙钠，对照组不用消肿药。结果两组术后t，3，5，7d的疗效观察，经统计学处理，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论β-七叶皂甙钠具有抗渗出，维持细胞膜稳定，恢复毛细血管正常通透性，改善微循环的作用，促进消肿作用明显，在改善缺血组织的代谢，清除氧自由基方面的效果显著，防止了缺血再灌注损伤的的发生，减轻疼痛。     

改良Mitchell术治疗环状混合痔177例

目的 探讨改良Mitchell术治疗环状混合痔的临床疗效。方法外痔皮肤处用CO2激光作弧形切口，如为内痔单独结扎，如为混合痔CO2激光切割外痔处皮肤后一并结扎，术后配合中医中药理疗，观察创面愈合及并发症情况，术后随访3～24个月。结果改良Mitchell手术简便，创伤小，术后其创面基本上为闭合创面，无明显疼痛，无出血，术后无肛门狭窄、直肠黏膜外翻及肛门失禁等后遗症，肛门功能正常。结论改良Mitchell术运用于混合痔、环状混合痔，无疼痛，无出血，术后创面闭合，愈合时间短，是治疗混合痔、环状混合痔的有效术式。