喹诺酮耐药基因qnrA的协同耐药分子机制研究

目的探讨喹诺酮类药物耐药基因qnrA介导的耐药性及其协同耐药分子机制。方法采用引物特异性PCR结合测序检测qnrA阳性株及gyraseA和parC基因变异情况,Phe-Aag-β-Naphthylamine(PAβN)抑制试验识别外排机制介导的耐药性,琼脂稀释法测定qnrA阳性株对喹诺酮类抗菌药的MIC值。结果QnrA阳性株对喹诺酮类抗菌药的耐药水平存在明显差异,gyraseA、parC基因变异或AcrAB-TolC外排泵等协同耐药机制存在与否与其关系密切。结论qnrA基因介导的耐药性存在协同机制,并加剧了qnrA阳性株的耐药性,给临床抗感染治疗带来严峻挑战。     

20例院内感染SARS患者中西医结合诊治分析

目的：总结院内医务人员感染严重急性呼吸综合征(SARS)的流行病学、临床特征、诊断、治疗和预防等特点。方法：对我院2003年2-5月收治的20例患SARS医护人员的临床资料进行回顾性分析。结果：本组人员均有与SARS患者接触史，潜伏期2～7d，首发症状为发热，有明显的呼吸道症状，部分出现呼吸加速，外周血白细胞不高；X线胸片改变以斑片状肺部浸润影多见；综合治疗措施疗效较好，严格的隔离措施能有效防止SARS的继续传播。结论：医护人员感染SARS诊断相对容易；短期应用糖皮质激素是安全的；中西医结合治疗对改善症状有益。     

肺炎链球菌不同菌株自溶酶基因的克隆、序列分析及重组表达

目的克隆肺炎链球菌自溶酶(LytA)的基因序列，并进行重组表达。方法分别提取不同临床分离株的基因组DNA，根据已知肺炎链球菌野生R6株LytA基因序列设计引物，进行PCR扩增，将获得的目的基因片段克隆人原核表达质粒，然后测序；利用生物信息学方法，对不同临床分离株LytA基因序列进行比较分析，同时进行LytA基因的重组表达。结果从不同临床分离株的基因组中均扩增出完整的LytA基因片段，成功构建了重组质粒pGEX-4T-1-LytA。比较不同临床分离株LytA基因的DNA序列及推测的氨基酸序列，发现各株LytA基因序列及氨基酸序列间存在差异。通过异丙基巯基半乳糖(IPTG)诱导，LytA基因在大肠埃希菌JM109中得到高效表达，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示pGEX-4T-1-LytA融合蛋白相对分子质量约62000，与理论预测一致。结论序列分析发现各分离株的LytA基因序列及氨基酸序列间存在差异，但同源性极高，推测LytA基因序列保守，可用于疫苗研发。     

下呼吸道产AmpC酶细菌医院感染的危险因素分析

1对象和方法1．1对象 2003-01～2004-12我院符合2001年中华人民共和国卫生部下呼吸道医院感染诊断标准（试行），且病原菌为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌的病例124例，根据细菌是否产AmpC酶分为产AmpC酶组与非产AmpC酶组。其中产AmpC酶组30例，非产AmpC酶组94例。     

白细胞介素-12在荷瘤肺的变化

目的 为了观察肺癌患者肺泡巨噬细胞的抗肿瘤免疫功能。方法 以Elisa法检测肺癌患者荷瘤侧及非荷瘤侧肺泡巨噬细胞产生的IL－12，同时外周血单核细胞产生的IL－12，设良性肺病组为对照组。结果 肺癌组非荷瘤侧肺泡巨噬细胞产生IL－12较对照组低，而荷瘤侧肺泡巨噬细胞产生IL－12较对照组高；肺癌组外周血单核细胞产生IL－12较对照组低。结论 肺癌患者机体存在抗肿瘤免疫缺陷，但肺癌组织临近肺泡巨噬细胞抗肿瘤免疫活性增强，这可能是机体自身的一种抗肿瘤免疫调节。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌的流行状况与药敏谱调查

目的:了解超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)在中山大学附属第三医院临床分离肺炎克雷伯菌中的流行状况与产酶菌株的药敏谱特征。方法:采用K-B纸片法进行药敏试验和ESBLs的表型筛选与确证试验,应用WHONET5.4软件进行数据统计分析。结果:2008年7月至2009年6月临床分离的107株无重复肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率为43.0%(46/107)。产ESBLs菌株呈多重耐药表型,对亚胺培南的敏感率为100.0%,对大多数抗菌药物的敏感率明显低于非产酶菌株(P<0.05)。结论:ESBLs在肺炎克雷伯菌中广为流行,临床上宜严格限制广谱β-内酰胺类抗菌药物的应用,以减少ESBLs的产生与流行;产ESBLs细菌轻症感染应根据药敏结果选择抗菌药物,重症感染则首选亚胺培南。     

金刚烷胺和奥司他韦体外抗H5N1亚型禽流感病毒的作用

【目的】 观察体外单用金刚烷胺?奥司他韦及两药联合使用对两株H5N1亚型的禽流感病毒分离株(AIV127?AIV174)的抑制作用,了解广东地区分离的不同H5N1毒株之间药物敏感性的差异,为临床合理应用抗病毒药物提供科学依据?【方法】 建立体外H5N1感染模型,根据药物与病毒?细胞的不同作用,通过3种给药方式,使用细胞病变(CPE)?组织培养半数感染量(TCID50)评估抗病毒药物对H5N1的体外抑制作用? 【结果】 三种给药方式金刚烷胺联合奥司他韦,均比单用金刚烷胺体外抑制AIV127及AIV174效果明显(P < 0.01);而仅在治疗给药方式,两者联合比单用奥司他韦效果明显(P < 0.01)?三种给药方式金刚烷胺?奥司他韦及联合用药对同一亚型H5N1 AIV127比AIV174毒株均较敏感(P < 0.01)? 【结论】 抗病毒药物对不同的禽流感病毒毒株之间敏感性存在差异,应根据不同毒株给予相应的抗病毒治疗     

多发性骨髓瘤误诊为肺癌一例

男性,67岁,教师。因右侧胸痛1年,加重伴气促2ｄ于1999年5月入院。患者于1年前起无明显诱因出现右侧胸部隐痛,为阵发性,咳嗽时胸痛加剧,无放射痛。一直在当地医院按肋间神经痛治疗,无效。疼痛逐渐加剧,并有轻微咳嗽,咳白痰,无咯血及脓臭痰,无发热。2个月前到外院行胸片及ＣＴ检查发现右侧肺部肿块,疑为右侧肺癌,但纤支镜及肺部肿块穿刺活检均未找到癌细胞,未行特殊治疗出院。近2ｄ因胸痛加剧,伴低热,气促,且咳白痰,活动后明显,故来我院。起病后无骨、关节疼痛,近2个月体重下降约5ｋｇ,大小便无异常。既往史无特殊,吸烟40余年,每天20支。查体:…     

Study on the Genotype of Extended-spectrum Beta-lactamases Mediated by Plasmid in Southern China

Alongwiththewidespreaduseoftheextended spectrum beta lactamase(ESBL)antibioticswithinlast20years, theemergenceofESBLs producingstrainsamongmembers ofthefamilyEnterobacteriaceaehasbecomeaworldwide problem.TheESBLsdescribedtodatebelongtotheBush group2orAmbl…