抑制 BHK21细胞 STYK1/NOK基因的转录组分析 #br#

目的 转录组分析抑制丝氨酸-苏氨酸-酪氨酸激酶 1（STYK1/NOK）后仓鼠肾正常细胞 BHK21的基因表 达,并分析其可能作用的信号通路。方法 BHK21细胞分为空载体组（转染 6 µg空载体 pBs/U6）、低转染浓度组（2 µg si-STYK1/NOK质粒+4 µg空载体 pBs/U6）和高转染浓度组（6 µg si-STYK1/NOK质粒）。转染 48 h后,Western blot 检测 STYK1/NOK蛋白表达,基于检测结果,选取空载体组和高转染浓度组提取总 RNA进行转录组测序。将测序所 得的序列进行过滤比对,获得差异表达基因后,应用 R软件进行生物功能（GO）分析和 KEGG信号通路分析。应用 STRING蛋白质互作数据库中的互作关系进行差异基因蛋白互作网络的分析。采用 qRT-PCR验证关键差异表达基 因亚甲基四氢叶酸脱氢酶 2（Mthfd2）、转录激活因子 5（Atf5）,ⅡA分泌型磷脂酶 A2（Pla2g2a）、6-磷酸果糖-2-激酶/ 果糖-2,6-双磷酸酶 3（Pfkfb3）的表达。CCK-8法检测空载体组和高转染浓度组细胞增殖情况。结果 Western blot 结果表明高转染浓度组明显抑制 STYK1/NOK蛋白表达。高转染浓度组与空载体组相比,共发现差异表达基因 44 个,包括 19个上调基因和 25个下调基因。GO富集分析发现差异表达基因主要影响生物调控、细胞进程、代谢调控、 细胞生物过程、细胞、细胞部分、胞外区、配体和催化活性。KEGG通路分析发现差异表达基因主要集中作用于免疫 系统、癌症、细胞周期、信号转导和氨基酸代谢等方面。qRT-PCR结果表明,高转染浓度组Mthfd2、Atf5的相对表达量 显著上调（P＜0.05）,Pfkfb3、Pla2g2a的相对表达量显著下调（P＜0.05）,与测序结果相一致。细胞增殖实验表明高转 染浓度组细胞增殖明显高于空载体组（P＜0.01）。结论 抑制 BHK21细胞 STYK1/NOK表达后,致使 BHK21细胞原 癌基因表达增强,抑癌基因表达减少,促进细胞增殖。     

供体特异性调节性T细胞在肝移植免疫耐受中的意义

免疫耐受是器官移植的终极目标。尽管目前对于移植术后免疫耐受的探索很多,但大多处于试验阶段,应用于临床的方案甚少。对调节性 T细胞诱导免疫耐受的研究较为透彻,但供体特异性调节性 T细胞因其比例较低、制备困难,在移植免疫中的研究相对较少。本文从调节性 T细胞的共性、供体特异性调节性 T细胞的抑制功能、体外培养技术、胸腺移植等方面出发,总结供体特异性调节性 T 细胞在近年的研究热点,以期为临床研究提供新思路。     

器官移植中免疫抑制剂对调节性T淋巴细胞影响的研究进展

调节性T淋巴细胞作为一种具有免疫抑制功能的细胞,在移植免疫耐受中发挥着重要作用［1-2］。但在临床上,我们不得不考虑免疫抑制药物是否影响该细胞的功能。深入研究不同免疫抑制剂对调节性T淋巴细胞的影响,在器官移植中选择性地使用可诱导和维持调节性T淋巴细胞抑制功能的药物或者生物治疗方案,有利于诱导免疫耐受。     

肝性脊髓病肝移植术后的疗效观察

肝性脊髓病(hepatic myelopathy,HM)是慢性肝病晚期少见的一种神经系统并发症,以进行性双下肢痉挛性截瘫为特征性临床表现。本病缺乏有效治疗方法,肝移植治疗肝性脊髓病作为一种新的尝试,有较好的疗效[1-3]。我院自2004年以来,为4例终末期肝硬化合并肝性脊髓病的患者施行了原位肝移植术,报告如下。     

肾移植术后成功妊娠一例报告

肾移植是治疗终末期肾病的有效方法。近年来,由于器官移植技术、免疫抑制治疗水平及产科围生期治疗水平的不断进步,不仅明显改善了患者肾移植术后的生活质量,而且使年轻妇女在肾移植术后妊娠机会明显增加,并能与正常妇女一样正常分娩[1]。我院1998年1月—2007年4月共接受肾移植患者1806例,年龄<30岁的未孕女性16例,其中1例成功妊娠并顺利分娩,报告如下。     

肝脏移植术后HCMV感染先驱性诊断与治疗的探讨

目的 探讨肝移植术后患者人类巨细胞病毒（HCMV）感染的较好的诊治方法。方法回顾分析2003年6月-2006年6月进行的78例同种异体肝移植病例的临床资料。结果发生人类巨细胞病毒感染18例，出现发热12例，肺部感染5例，黄疸2例，6例无明显症状。经更昔洛韦治疗后，18例患者HCMV抗体、PP65和HCMV—DNA转变为阴性。结论 肝移植后HCMV感染与多种因素有关，积极预防、早期治疗是至关重要的，HCMV抗体、PP65和HCMV—DNA的应用能够对HCMV感染患者作出早期诊断，指导治疗。传统治疗与先驱性治疗其并发症相比较无明显差异。但先驱性治疗有针对性，能降低耐药的发生率，避免药物的毒性反应，有利于病人的康复。     

原位肝脏移植术后早期胆道并发症诊断与治疗

目的探讨原位肝移植术后胆道并发症的发生原因及防治措施。方法回顾性研究2002年7月-2005年1月该组肝脏移植32例原位肝移植的临床资料。结果该组32例肝脏移植受体中有6例发生胆道并发症，其中3例术后3d内出现单纯胆漏，给予小号导管置入T管周边引流，均在8d后未见胆漏。1例经影像学诊断肝动脉吻合口狭窄经介入置入支架扩张后，胆道并发症好转，肝功能恢复。1例术后1周出现霉菌感染，给予相应治疗，因出现肝昏迷多脏器功能衰竭死亡。1例术后第3天出现无胆汁，B超示肝内外胆管扩张，行T管造影术。发现T管胆管内的上支行成活瓣，随在介入下置入超滑导丝效果欠佳，第2天在超滑导丝的基础上置入4F管，引流通畅，肝功能快速恢复。结论手术技术不佳、移植物冷热缺血的时间不宜过长及胆管的血液供应不良是肝移植术后发生胆道少并发症的重要因素，联合应用胆道造影术和核磁共振胆管成像能了解胆道今新．有助干胆省犊窑与胆漏的论断．及时采用放射介入技术处理胆道并发症可取得良好疗效。     

肝移植术后迟发性流出道梗阻的诊断和治疗

目的 探讨肝移植术后迟发性流出道梗阻的诊断和治疗方法.方法 2001年6月至2004年11月,共施行肝移植821例次,其中6例患者(背驮式原位肝移植1例,经典原位肝移植4例,减体积肝移植1例)在手术6个月之后出现流出道梗阻,均经彩色超声、计算机断层扫描(CT)检查及下腔静脉造影明确诊断.6例患者均接受经皮腔内血管成形术(PTA),并放置血管内支架治疗,每天口服肠溶阿斯匹林100 mg抗凝治疗半年.治疗期间对患者进行监测和定期随访.结果 肝移植术后迟发性流出道梗阻的发生率为0.73%.6例患者均为肝后下腔静脉及肝静脉狭窄,经PTA并放置血管内支架治疗后,血流恢复通畅,下肢水肿消失,肾功能恢复良好,长期随访无复发.结论 经彩色超声检查怀疑流出道梗阻的患者应行腹部强化CT检查,可以为诊断提供有力的证据;高度怀疑流出道梗阻的患者应进行下腔静脉造影,检测狭窄部位的压力梯度变化.经皮腔内血管成形术并放置血管内支架治疗肝移植术后迟发性流出道梗阻安全可靠,长期疗效满意.     

原位肝脏移植术治疗纤维板层型肝癌一例

纤维板层型肝癌(FLC)属于一种特殊病理类型的肝细胞肝癌(HCC),生长缓慢,预后较其他类型的肝细胞肝癌好.我院于2005年10月采用原位肝移植术治疗1例纤维板层型肝癌患者,术后随访36个月余,至今效果良好.     

原位肝移植术中结扎门体分流静脉的临床研究

Objective To investigate the clinical significance of ligating the portasystemic shunt confirmed by preoperative CT evaluation during orthotopic liver transplantation. Methods From January 2007 to August 2008, 35 patients in Tianjin First Central Hospital underwent preoperative three-dimensional CT scan, among them 23 patients had spontaneous major portasystemic shunts, the other 12 patients did not have portasystemic shunts. 16 out of the 23 cases with significant shunts underwent shunt ligation based on portal blood flow volume measured by intraoperative portal vein flowmetry. The shunt of the other 7 patients were left untreated. Results The portal blood flow in the 12 patients without portasystemic shunt as judged by preoperative CT scanning were (1101±70) ml/min. The shunts in 7 patients with portal blood flow greater than 1000 ml/min were not ligated, that of the 16 patients with portal blood flow volume lower than 1000 mL/min were ligated. The portal blood flow volume in those 16 patients before and after ligating the shunt were (657±112) m//min and (1136±161) ml/min, respectively (P<0.05). Postoperatively 2 patients suffered from portal vein thrombosis, among them 1 patient suffered from intermittent disturbance of consciousness, 2 patients died within 3 months, with one dying of respiratory failure from pulmonary aspergillus infection one dying of hepatic failure in 2 months after operation because of graft dysfunction.The other 19 patients with normal blood flow and well-functioning graft were alive. Conclusion The ligation of portasystemic shunt is mandatory in patients when pretransplant CT evaluation showing a major porto-systemic shunts and portal blood flow volume was less than 1000 ml/min.