人白细胞介素7基因克隆及其真核表达载体的构建

目的：构建人白细胞介素7（hIL-7）的真核表达载体。方法：从人脾脏组织的总RNA中，用RT－PCR方法扩增出编码成熟hIL-7的cDNA，将其克隆于pMD18-T质粒中，并进行序列测定。再将hIL-7cDNA以正义及反义插入真核、原核双重表达载体pBK-CMV质粒，转化至大肠杆菌DH5α。最后将表达的lacz-hIL-7重组蛋白行SDS－PAGE电泳，并作考马斯亮蓝染色分析，western blot鉴定。结果：hIL-7序列测定结果与预期一致。pBK-CMV-hIL-7（正义插入）的无隆表达重组蛋白，western blot证实此蛋白为IL－7。结论：成功构建了hIL-7的真核表达载体，为进一步研究hIL-7的抗肿瘤作用创造了条件。     

牙周组织工程研究进展

牙周骨移植、引导组织再生 ( guidedtissueregeneration ,GTR)为牙周病治疗和牙周缺损修复带来新的希望 ,但在恢复牙周组织的生理结构和功能上还远未达到所期望的目标。组织工程学是近年来发展起来的一门新兴边缘学科 ,其基本方法是将体外培养的高浓度、功能相关的活细胞种植于具有良好生物相容性和生物降解性的细胞外基质材料上 ,经过一段时间的培养 ,将这种细胞与生物材料复合体植入机体病损部位以形成新的具有其原来特殊功能和形态的相应组织和器官 ,达到修复创伤和重建功能的目的。将组织工程技术引入牙周组织再生治疗 ,为牙周病的治…     

人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建

目的：构建人血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C，VEGF-C)基因的真核表达载体，以便进一步研究VEGF-C基因在淋巴管生成中的作用。方法：根据人VEGF-C的cDNA序列，设计合成一对5′端分别含有EcoR I和BamH I酶切位点的特异性引物，运用RT-PCR方法克隆人乳腺癌细胞MDA-MB-231中的VEGF-C cDNA(1．26Kb；回收PCR产物(1．28Kb），并将其连接至克隆载体pMDl8-T中；重组的pMDl8-T在大肠杆菌DH5α内扩增后，经质粒提取、EcoR I和BamH I酶切，筛选出阳性重组子，并进行基因测序鉴定；琼脂糖凝胶电泳回收含有VEGF-C cDNA全长的酶切片断(1．27Kb)，然后在DNA连接酶作用下将其与真核表达载体pcDNA3．1(-)连接，重组质粒经EcoR I和BamH I酶切予以鉴定。结果：RT-PCR产物合有VEGF-C cDNA，基因测序显示重组的pMDl8-T中含有正确的人VEGF-C cDNA全长序列，重组的pcDNA3．1（-)中含有人VEGF-C cDNA全长序列。结论：成功构建了人类VEGF-C真核表达载体VEGF-C／pcDNA3．1（-)。     

四种可溶性载体对骨形态发生蛋白在小鼠体内诱导成骨活性的影响

以四种可溶性物质作为牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）的载体，通过实验观察哪种物质是ｂＢＭＰ的有效缓释载体。将聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）、葡聚糖、羟乙基淀粉（ＨＥＳ）、甘露醇分别与等量ｂＢＭＰ复合后，注射入小鼠股部肌肉，观察组织学成骨及测定标本内钙含量。结果，ｂＢＭＰ／ＰＶＰ有良好成骨，吸收较快，未见炎症及排斥反应，其混悬液较稳定，具有良好的适针性及可注射性，ｂＢＭＰ／甘露醇只有很低成骨率。其余各组未见成骨。ＰＶＰ对ｂＢＭＰ具有满意助溶、助悬及缓释载体作用，对ｂＢＭＰ活性无损害，生物相容性好。     

修复骨缺损的局部基因释放载体技术

骨骼缺损是临床上常见的问题，骨结构异常严重地影响患者的外貌、功能和心理社会行为。局部基因释放载体技术是新近开展的一种修复组织缺损的新技术。本文对该技术的发展现状及其应用于修复骨骼缺损的前景简要作一综述。     

叶酸转运基因是中国人群神经管畸形发生的可疑危险因素

大量证据表明母亲妊娠前后增补叶酸可以有效预防神经管畸形（neural tube defects，NTDs）的发生，然而，目前对叶酸预防NTDs效果的作用机制尚不清楚。叶酸通道基因如还原叶酸载体基因（reduced folate carrier，RFCI），在叶酸吸收转运进入细胞过程中发挥着关键作用。生育NTDs的母亲血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平增高，提出Hcy代谢紊乱是NTDs发生的独立危险因素之一。因此，大量研究集中在叶酸和Hcy代谢酶基因上，     

噬菌体表面展示技术及其在靶向载体构建中的应用

目的 介绍噬菌体表面展示技术及其在靶向载体构建中的应用.方法 主要综述了近年来国内外的相关文献.结果 采用噬茵体表面展示技术可以高通量筛选单链抗体等靶向分子,将其连接至携载药物或基因的非病毒及病毒载体可提高其靶向性及产生更好的治疗效果.结论 噬茵体表面展示技术的发展和成熟将为构建具有高效、特异性的靶向载体提供条件.     

Kringle 5的真核植物细胞穿梭表达载体的构建

目的：构建含有目的基因kring5的真核植物细胞穿酸表达载体。方法：应用RT－PCR方法，从正常人肝脏组织中获得kringle5基因，测序后，再通过DNA重组技术，将kringle5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI121和pCAMBIA3301上。结果：得到的kringle5基因序列测定结果与文献相符，重组载体pB1k5和pC33k5经酶切鉴定正确，含有植物高效表达CaMV35S启动子。结论：重组载体pB1k5和pC33k5不仅可以在大肠杆菌中稳定复制，而且可以在植物细胞中表达。     

构建MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1表达的腺病毒载体

目的：构建串联的MYC反应元件修饰人端粒酶逆转录酶（hTERT)核心启动子引导酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1表达的复制缺陷型腺病毒载体。方法：将串联的MYC反应元件修饰的hTERT核心启动子及下游酵母胞嘧啶脱氨酶基因Fcy1克隆到穿梭质粒pDC316上，上辅助质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK293细胞获得重组复制缺陷型腺病毒并在HEK293细胞中扩增重组病毒。PCR法及斑形成实验鉴定重组腺病毒和病毒滴度。结果：成功获得由6倍和18倍MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的复制缺陷型腺病毒载体。结论：MYC反应元件修饰hTERT核心启动子引导Fcy1基因表达的腺病毒载体为进一步研究骨肉瘤转录靶向基因治疗奠定了基础。     

氧透射载体疗法治疗冠心病49例临床研究

目的 :研究氧透射载体疗法 ( OTIU)对冠心病的治疗作用。方法 :将 89例冠心病患者随机分为 OTIU组 49例和常规治疗组 40例 ,治疗 2周 ,记录分析患者血液流变学及心电图变化。结果 :OTIU组冠心病患者血氧分压显著升高 ,全血粘度、红细胞聚集指数、纤维蛋白原明显下降 ,ST段下移、T波低平或倒置等异常心电图恢复显著优于常规治疗组 ( P<0 .0 5 )。结论 :OTIU是治疗冠心病的较好疗法。