补肾活血方对高糖高脂诱导损伤的小鼠脑微血管内皮细胞内质网应激和RAGE/LRP-1蛋白表达的影响

目的:在细胞水平探索补肾活血方对高糖高脂诱导的小鼠脑微血管内皮细胞(BEND3细胞)损伤的改善作用,并探究补肾活血方对高糖高脂导致的内质网应激和转运Aβ相关受体蛋白的作用。方法:采用高糖高脂(25mmol/L葡萄糖,200μmol/L棕榈酸)刺激BEND3细胞,用CCK-8法筛选合适的补肾方(BS)、活血方(HX)、补肾活血方(BSHX)的最佳用药浓度;应用免疫蛋白印迹法检测BS、HX、BSHX最佳用药浓度对葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化真核起始因子2α(p-eIF2α)、活性转录因子4(ATF4)、核因子κB(NF-κB)抗体以及脑内与转运β淀粉样蛋白相关的晚期糖基化终产物受体(RAGE)和低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)的表达情况。结果:CCK-8检测细胞活力,最终选定补肾方100mg/L、活血方20mg/L和补肾活血方120mg/L;与正常对照组比较,高糖高脂刺激BEND3细胞后,GRP78、p-eIF2α、ATF4、NF-κB、RAGE表达显著增加(P<0.01),LRP-1表达下降(P<0.01);药物干预后,GRP78、p-eIF2α、ATF4、NF-κB、RAGE蛋白下调,BSHX组LRP-1表达显著上调(P<0.05,P<0.01);且以BSHX组最为明显。结论:补肾方、活血方、补肾活血方对高糖高脂诱导的BEND3细胞损伤均有改善作用,但以补肾活血方疗效最为突出,且对高糖高脂导致的内质网应激和转运β淀粉样蛋白受体的蛋白表达具有调节作用。     

基于网络药理学探讨清热活血方抗类风湿性关节炎的作用机制

目的:清热活血在治疗类风湿性关节炎(RA)中效果显著,但其成分多样,作用机制不明,通过网络药理学方法探讨清热活血方抗RA的作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选药物成分并利用SwissTargetPrediction数据库预测药物靶点,同时通过药物数据库(Drugbank)和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)收集疾病靶点。将药物靶点与疾病靶点取交集,拓展并拓扑获取关键靶点,利用DAVID数据库对关键靶点进行基因本体论(GO)分类富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,通过Centiscape计算获取hub节点。结果:从清热活血方中筛选出活性成分31个,预测靶点419个,数据库挖掘疾病靶点共430个。将药物靶点与疾病靶点取交集、拓扑分析获得清热活血方治疗类风湿性关节炎的关键靶点113个,GO分析共获得生物过程、分子功能、细胞组分共479个富集结果。KEGG富集表明清热活血方可能通过MAPK、Estrogen、PI3K-AKT、Thyroid hormone、Neurotrophin、HIF-1、ErbB、FoxO、B cell receptor等通路干预RA。拓扑得到CULI、EP300、HSP90AA1、TP53、HSPA8、CDC5L、UBC、RPS27A共8个干预RA的Hub节点。结论:清热活血方可能通过多靶点、多通路进行调控,达到治疗类风湿性关节炎的作用。     

复方降糖滴丸HPLC指纹图谱的研究

目的:建立复方降糖滴丸的HPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制制剂的质量提供有效可靠的方法。方法:采用HPLC梯度洗脱方法对样品进行分离分析,色谱柱:BDS C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相水-乙腈梯度洗脱,检测波长238 nm,柱温30℃。结果:10批样品得到的色谱指纹图谱有5个共有峰,相似度均在0.99以上。方法精密度、稳定性和重复性良好。结论:本方法为复方降糖滴丸的质量评价提供了依据。     

丹蛭降糖胶囊提取工艺的优选

目的优选丹蛭降糖胶囊的最佳提取工艺。方法采用直接水蒸气蒸馏法提取出牡丹皮中丹皮酚成分,再将其药渣与其他药味混合,选择三因素三水平正交试验,以出膏率、多糖、芍药苷含量为考察指标,对提取次数、提取时间、加水量进行考察。结果确定的最佳提取工艺为：加10倍量水提取3次,每次1．5h。结论此工艺可作为丹蛭降糖胶囊的提取工艺,方法简便,结果稳定。     

慢性再生障碍性贫血中西医结合优化治疗方案临床研究

目的评价补肾方联合雄激素及免疫抑制剂治疗慢性再生障碍性贫血（CAA）的临床疗效,以确立中西医结合治疗CAA的优化治疗方案。方法将39例CAA患者随机分为3组,对照组（16例）采用司坦唑醇片联合环孢素A（CsA）,试验一组（11例）辨证采用补肾Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方治疗,试验二组（12例）在对照组基础上加用补肾Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方治疗,疗程6个月。分别观察各组临床疗效及治疗前后患者外周血清促红细胞生成素（EPO）、干扰素-γ（IFN-γ）水平的变化情况。结果 3组在临床疗效、外周血象改善方面差异无统计学意义（P〉0.05）,但试验二组在贫血症状及中医证候的改善方面明显优于另外2组（P〈0.05）,并能显著降低IFN-γ水平（P〈0.05）。结论补肾方联合雄激素及免疫抑制剂治疗CAA在临床疗效、改善症状及提高血常规计数方面均优于单用中药或单用西药治疗。     

芪丹益肾降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠的保护作用

目的:研究芪丹益肾降糖胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠的保护作用。方法:采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制DN大鼠模型,分为假手术组、模型组、芪丹益肾降糖胶囊(QYJC)组,每组10只,ig给药,每天1次,12周后检测体重(BW)、空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿蛋白排泄率(UAE);光镜观察肾组织形态学改变并对损害程度进行评分。结果:与模型组相比,QYJC能显著降低DN大鼠的FBG,BUN,TC,TG,UAE,降低肾小球硬化指数和肾小管间质纤维化指数。结论:芪丹益肾降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠具有好的保护作用,可能与改善血脂代谢紊乱有关。     

左归降糖清脂方对2型糖尿病转基因MKR 鼠脂肪肝发生的影响

目的:探讨左归降糖清脂方对2型糖尿病转基因MKR鼠脂肪肝发生的影响。方法:30只MKR鼠随机分为MKR组、MKR高脂组和左归降糖清脂方组;左归降糖清脂方组以生药29.64 g.kg-1 ig干预治疗高脂饮食诱发脂肪肝的MKR鼠,观察其肝脏病理形态、血糖、血胰岛素、肝功能和血脂变化。结果:高脂饲料诱发MKR鼠形成非酒精性脂肪肝,肝细胞有大小不一的脂滴,呈脂肪性变;MKR高脂组小鼠空腹血糖、血胰岛素、肝质量、肝指数、肝功能指标[谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)]、血清总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于MKR组(P<0.05,P<0.01),甘油三酯(TG)下降,低于MKR组(P<0.01)。2型糖尿病并发脂肪肝MKR鼠经左归降糖清脂方治疗后,肝细胞内脂肪性变得到改善,空腹血糖、血胰岛素、肝质量、肝指数、肝功能指标(ALT,AST)和血脂(TCHO,LDL-C和TG)显著下降,低于MKR小鼠(P<0.05,P<0.01);HDL-C高于MKR小鼠(P<0.05)。结论:左归降糖清脂方可通过调节高脂饮食MKR鼠体内的糖脂代谢,改善肝脏脂肪性变。     

权重配方模型的非线性混合效应分析:一个药物相互作用研究实例

目的:基于权重配方模型,采用非线性混合效应分析(NONMEM),对尿囊素、甲硝唑及地塞米松联合抗炎作用的组方合理性进行定量评价,结果与原算法比较。方法:实验数据为昆明种小鼠组织纤溶酶原激活物(t-PA)样品于405nm处的吸光度值,以权重配方模型为基本模型,组方间相互作用为固定效应,并考虑随机效应,通过NONMEM法建立最终模型,定量评价尿囊素、甲硝唑和地塞米松的联合抗炎作用及其交互作用。结果:基于整体效应的权重配方模型建立成功(P<0.001),X1X2(X1尿囊素,X2地塞米松)作为固定效应加入模型,最终模型中甲硝唑对整体药效作用不明显,尿囊素与地塞米松存在较强协同作用,都是主要起效组分,最优剂量配比尿囊素∶甲硝唑∶地塞米松=400∶131∶8.0(mg/kg,i.p.)。结论:采用NONMEM法,可全面考虑各组分间交互作用及个体间和个体内误差等随机效应,使权重配方模型更加严谨,与原算法比较,提供的信息量更大。     

疏筋解毒方对PD大鼠黑质纹状体Bcl－2／BaxmRNA表达的影响

目的观察疏筋解毒方对帕金森病（PD）大鼠中脑黑质Bcl-2mRNA／BaxmRNA表达的影响,研究其对PD治疗作用的可能机制。方法采用6-羟多巴胺（6-OHDA）建立PD大鼠模型,应用原位杂交分子生物学技术,检测PD大鼠黑质纹状体Bcl－2mRNA／BaxmRNA分布及表达。结果疏筋解毒方有提高PD大鼠中脑Bcl-2mRNA／BaxmRNA分布及表达的趋势。结论疏筋解毒方可能在基因调控层面。通过提高Bcl-2mRNA／BaxmRNA比率,达到抑制PD大鼠中脑多巴胺能神经元凋亡。     

益气活血方对实验性高脂血症大鼠血脂及载脂蛋白的影响

日的观察益气活血对高脂血症动物模型血清中TC、TG、LDL—CxHDL—c、ApoAI、ApoB100的含量的影响,探讨益气活血法在治疗高脂血症中的作用及各项指标的变化与剂量之间的关系。方法选SD大鼠60只,随机分为六组,造高脂血症模型后,分别给予益气活血方高、中、低剂量及非诺贝特治疗,从腹主动脉取血,检测TC、TG、LDL—c、HDL—c、ApoAI、ApoB100的含量。结果益气活血方能显著降低大鼠血清中TG、TC、LDL—c、APOB100水平,显著提高大鼠血清中HDL—C和APOAI水平,并有一定的量效关系。