Preliminary study of single nucleotide polymorphisms of PRPS2 gene in overproducing type of gouty patients

目的 :探讨编码人磷酸核糖焦磷酸合成酶亚单位 2的基因 PRPS2单核苷酸多态性与产生过剩型痛风患者的关系。方法 :利用聚合酶链反应扩增健康人和产生过剩型痛风患者 PRPS2基因全部外显 (包括外显子与内含子交界区 )的片段 ,采用多荧光标记的 PCR单链构象多态性分析技术对扩增的片段进行了筛选 ,对筛选到的片段进行序列测定 ,并与正常序列进行对照分析。结果 :在 PRPS2基因的第一个外显子区发现了一个 SNP( exon1+45A/G) ,第六个内含子区发现了一个 SNP ( intron6+12G/A) ,健康人与患者间的频率比较分别为 P =0 .0 96和 P =0 .2 73。结论 :提供了 PRPS2基因 SNP的数据库信息 ,为研究痛风发病机制提供了新的途径。     

一种简便快速回收DNA的试剂盒研制

多年来已提出过许多从凝胶中回收DNA的方法[1],但没有一种方法能够完全满足进一步实验的要求.目前国内多使用进口DNA回收试剂盒,但价格昂贵.我们通过对进口DNA回收试剂盒的分析研究,采用国产玻璃毛为DNA载体,依据化学键与分子结构理论及分子运动规律,结合DNA分子的特性,研制出一种简便、快速、高质量、低成本的DNA回收试剂盒,所回收的DNA量大、纯度高,可以用于分子生物学等的各种实验.     

广东省绿头鸭场鸭乙肝病毒自然携带状况调查

目的　调查两个鸭场携带乙肝病毒(DHBV)状况。方法　在对广东省家养绿头鸭分布状况进行系统调查的基础上,对南海市和顺镇、里水镇两个绿头鸭场作了随机抽样调查,采集了雏鸭、青年鸭和种鸭的血标本共519份,应用斑点分子杂交(DotBlot)测定法观察绿头鸭乙型肝炎病毒(DHBV)自然携带率。结果　两鸭场绿头鸭的DHBV自然携带率为36.0%(187/519),其95%可信限为31.0%～44.0%。不同鸭龄组绿头鸭DHBV自然携带比较,两鸭场同日龄绿头鸭DHBV自然携带率比较,绿头鸭DHBV自然携带率的性别比较,差异均无显著意义。不同鸭龄的绿头鸭DHBV-DNA含量定量分析(A值),差异有非常显著性(P＜0.01),其含量由高到低顺序为雏鸭＞种鸭＞青年鸭,和顺鸭场的绿头鸭DHBV-DNA含量高于里水鸭场。结论　两鸭场绿头鸭携带的DHBV可能源于不同的亚株。     

人乳头瘤病毒16型E7DNA疫苗的构建及其诱导特异性淋巴细胞增殖的研究

目的 :探讨人乳头瘤病毒 16型 (HPV16 )E7DNA疫苗诱导机体特异性细胞免疫应答的情况。方法 :采用分子克隆技术 ,构建HPV16野生型E7基因的真核表达重组体 ,将其转化大肠杆菌JM10 9进行筛选 ,通过限制性内切酶酶切鉴定和PCR分析 ,证明重组质粒中目的基因插入片段及载体DNA大小、方向、插入位点均正确 ,获得HPV16E7DNA疫苗 ,将E7DNA疫苗经皮内注射免疫动物 ,MTT比色法体外检测特异性淋巴细胞增殖反应。结果 :野生型E7DNA疫苗免疫组脾淋巴细胞在体外受到E7蛋白的再次刺激后出现特异性淋巴细胞增殖反应。结论 :野生型E7DNA疫苗可诱导特异性的细胞免疫应答 ,皮内注射HPVDNA疫苗是一种简便有效的免疫接种途径     

pCD-rbFGF重组质粒的构建及其在成骨细胞中的表达

为了构建碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)真核表达质粒,并探讨应用bFGF基因治疗骨科各种疾患的可能性,将鼠碱性成纤维细胞生长因子cDNA克隆至真核表达载体pcDNA3中,构建了重组质粒pCD-rbFGF.通过Liofectin介导将pCD-rbFGF转染兔成骨细胞,经免疫组化检测证实兔成骨细胞获得了bFGF的瞬时表达.提示该bFGF真核表达质粒有效,可用于进一步基因治疗研究.     

缺氧和血清剥夺诱导的PC12细胞DNA损伤与修复

探讨 PC12细胞在缺氧 ( 3 7℃ ,5 % O2 ,95 % N2 )、血清剥夺条件下 DNA损伤与修复、凋亡、坏死或生存的变化规律。应用单细胞凝胶电泳技术、流式细胞学技术检测在不同时间点 ,缺氧、无血清培养等诱导下对 PC12细胞单链 DNA损伤与修复、凋亡的影响。结果发现在 PC12细胞 DNA损伤值均在 0 .5 h时达第一个峰值 ,随后下降。 3 h后DNA损伤数值再次逐渐增加并达到最高值。细胞凋亡峰值略滞后于 DNA损伤峰值 ,并于 DNA损伤程度基本相平行。提示 PC12细胞在缺氧和血清剥夺条件下存在 DNA损伤与修复的动态变化过程 ,DNA损伤后可能直接诱导细胞凋亡 ,DNA损伤程度在早期与细胞凋亡程度相一致     

日本血吸虫多价DNA疫苗pBK-Sj26(Sj32)-Sj23免疫效果的观察

为了观察血吸虫病多价DNA疫苗的保护力,将小鼠分成5组空白对照组、空质粒对照组、单价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj23组、多价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj26-Sj23和pBK-CMV-Sj32-Sj23组.大量提取各组质粒DNA后,各组于0、3、5周在BALB/c小鼠股四头肌注射相应质粒DNA,9周用血吸虫尾蚴攻击感染,15周剖杀小鼠计算减虫率及减卵率.结果显示与对照组比较,实验组小鼠减虫率及减卵率有极显著性差异(P<0.01);与单价pBK-CMV-Sj23组比较,多价DNA疫苗组的减虫率及减卵率有显著性差异.提示血吸虫多价DNA疫苗诱导小鼠对血吸虫的保护力优于单价DNA疫苗.     

精准疫苗学研究进展

疫苗在对抗传染性疾病中发挥着关键的作用,特别是在新型冠状病毒感染疫情防控期间,疫苗的广泛使用显著降低了感染率与死亡率。然而,由于个体之间的免疫应答差异,不能使所有人都能获得好的疫苗保护。精准疫苗学理念的引入,正引领疫苗应用与研发向个性化、精确化的方向转型。本文系统性地梳理和阐述了精准疫苗学研究的进展,介绍其在全球公共卫生及个体健康保护领域的重要意义。     

乙型肝炎病毒相关肾炎临床与病毒血清学特点关联研究

目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）感染与肾小球肾炎的关系,探讨HBV复制在HBV相关肾炎发病中的作用。方法 对338例经肾穿刺证实的肾炎患者的临床病理和病毒血清学特点进行分析。结果 HBV相关肾炎占肾炎总数的5．3％。在血HBsAg( )的肾炎患者中,HBV相关肾炎发病与HBeAg相关（P＜0．05）,与血清HBV DNA含量（bDNA)显著相关（P＜0．01）。分支链DNA（bDNA)阳性率明显高于HBeAg阳性率（P＜0．05）。结论 bDNA是反映HBV复制的最佳指标。HBV相关肾炎与体内HBV复制程度密切相关,HBV在体内大量复制,可能通过循环中的病毒抗原沉积于肾脏和肾脏中该抗原原位表达而致病。     

T细胞疫苗在自身免疫性疾病中的应用

自身免疫性疾病的发生与体内自身反应性T细胞异常活化有关。T细胞疫苗是治疗自身免疫性疾病的一种新方法。用亚致病量的自身反应性T细胞接种自身免疫病患者,可减轻自身免疫反应,这可能是通过激活抗克隆型T细胞以抑制患者的自身反应性T细胞实现的。T细胞疫苗在许多动物实验及临床应用证明,是可行有效及安全的。