P21作为宫颈癌标志物和P21单抗临床应用的研究

以人宫颈癌为材料,同一份样品用四个实验指标来检测和分析癌蛋白P21的表达变化。结果发现:宫颈癌组织中存在有P21的表达;表达蛋白的分子量约为21KD;表达的主要部位在恶变细胞胞浆和胞膜中;表达水平高于慢性炎症约六倍。实验结果在临床应用中得到了验证。54例宫颈石蜡切片用ABC免疫酶标法进行了检测。宫颈癌组P21阳性率和阳性强度明显高于慢性炎症组,二者有显著性差异(P<0.05)。     

白细胞介素2(Interleu kin2简称IL-2)——肿瘤治疗的新希望

 自1982年以来.IL-2基因工程已成为国内外热衷的课题。人们不仅从大肠杆菌中生产出纯化的重组白细胞介素2 (rIL—2),即将Jurkat细胞的一个基因与质粒重组,重组体再转染到大肠杆菌中,而且从分子生物学、免疫学等角度来探索其抗肿瘤机制,期待着IL-2成为肿瘤的克星。本文就其在肿瘤治疗中的研究近况作一概述。     

家族性阿耳茨海默病SORL1基因SNP位点的筛选

目的:研究在家族性阿耳茨海默病(FAD)和无家族史健康人群中枢载脂蛋白E受体(SORL1)基因单核苷酸多态性(SNP)位点的筛选。方法:收集武汉地区具有家族史的阿耳茨海默病(AD)血样品41例,无家族史的健康人群50例,利用SNaPshot分型系统,针对SORL1基因5'端中8,9,10( rs668387,rs689...     

CDC 25A和CDC 25B基因在宫颈癌中的表达和临床意义

目的：检测及讨论CDC 25A和CDC 25B基因在宫颈癌中的表达水平及其临床意义。分析CDC 25A和CDC 25B基因剪切变异分子CDC 25A1—2、CDC 2581—4在宫颈组织中的表达分布规律。方法：采用RT—PCR和Western印迹法检测61例宫颈癌组织、18例宫颈良性病变组织中CDC 25的表达情况，并分析CDC 25的表达水平与宫颈癌临床病理参数之间的关系。结果：CDC 25A和CDC 25B基因在宫颈癌组织和宫颈良性病变组织中的表达差异有统计学意义（P〈0．05）；CDC 25的各剪切变异分子表达在宫颈癌患者不同年龄、癌组织病理类型、临床分期及癌细胞分化程度间差异有统计学意义（P〈0．05），而与宫颈癌的淋巴结转移无关（P〉0．05）。结论：宫颈癌组织中存在CDC 25A和B的高表达，CDC 25分子及其剪切变异体的表达异常可能是宫颈癌发生、发展的重要细胞内调控机制之一。     

PCR-SSCP分析法检测宫颈癌中H-ras、p53基因突变与HPV感染

 我们对40例宫颈癌活检组织同时进行HPV、H－ras、p53基因的检测，应用GP－PCR技术检测了多型HPV的感染，发现阳性率为85％（34／40）。HPV16转化基因E7占61．8％（21／34）。此外，利用PCR－SSCP（单纯DNA构象多态性）分析方法，对宫颈癌中H－ras、p53基因点突变进行了检测，H－ras突变占22．5％（9／40），p⁵³占2．5％（1／40），而H－ras突变在HPV感染阳性组织中占14．7％（5／34），其中3例的病程分期为Ⅲ期以上。结果表明：HPV16E7转化基因在宫颈癌的致癌过程中为关键基因，H－ras突变很可能与有关报道相一致，属于“迟发”事件，与肿瘤的恶性程度及浸润有关。而p⁵³5—6外显子基因突变在HPV感染的宫颈癌中发生率很低。     

宫颈癌患者基因组遗传不稳定性分析

目的 研究中国宫颈癌高发区宫颈癌患者基因组遗传不稳定性改变，为寻找宫颈癌相关内源因子提供依据。方法 从GenBank中选取8对微卫星DNA引物，采用PCR-变性PAGE-银染方法检测50例宫颈癌(来自高发区)活检组织及其对照(同病例血液)样品的杂合性丢失(LOH)和微卫星不稳定(MI)。结果 LOH总检出率为66％(33／50)，其中，D18S474(染色体18q21)LOH达40．5％；染色体3p21．2—3p21．3中微卫星位点D3S1478，LOH达31．7％；并且在原位癌与浸润癌中，LOH分布也有一定差异。MI在宫颈癌患者基因组中仅存在少数微卫星位点，总的发生率较低，为8％(4／50)。结论 除高危型人乳头瘤病毒(HPVhr)感染外，细胞内源基因的改变在宫颈癌发生发展过程中也起着重要作用。高频LOH位点18q21 D18S474、3p21．2-3p21．3 D3S1478可能存在潜在的宫颈癌抑癌基因。     

GENETIC INSTABILITY IN CERVICAL CARCINOMA

Cervical carcinoma is one of the most common malignancies in women in developing countries. Many studies have linked the presence of specific types of human papillomavirus (HPV) such as HPV16 and 18 with the development of cervical carcinoma[1]. However,HPV infection alone is probably insufficient for complete neoplastic transformation of the cervical epithelium. Additional genetic alterations, especially involving tumor suppressor gene (TSGs) seem to be required for development and progr…     

人乳头瘤病毒16型E7DNA疫苗的构建及其诱导特异性淋巴细胞增殖的研究

目的 :探讨人乳头瘤病毒 16型 (HPV16 )E7DNA疫苗诱导机体特异性细胞免疫应答的情况。方法 :采用分子克隆技术 ,构建HPV16野生型E7基因的真核表达重组体 ,将其转化大肠杆菌JM10 9进行筛选 ,通过限制性内切酶酶切鉴定和PCR分析 ,证明重组质粒中目的基因插入片段及载体DNA大小、方向、插入位点均正确 ,获得HPV16E7DNA疫苗 ,将E7DNA疫苗经皮内注射免疫动物 ,MTT比色法体外检测特异性淋巴细胞增殖反应。结果 :野生型E7DNA疫苗免疫组脾淋巴细胞在体外受到E7蛋白的再次刺激后出现特异性淋巴细胞增殖反应。结论 :野生型E7DNA疫苗可诱导特异性的细胞免疫应答 ,皮内注射HPVDNA疫苗是一种简便有效的免疫接种途径     

SBT、SSOP法分析湖北土家族妇女HLA-A2超型各等位基因及与宫颈癌的关联

目的通过检测湖北土家族人群HLA-A2超型(包含A*0201、A*0202、A*0203、A*0204、A*0205、A*0206、A*0207、A*6802、A*6901)各等位基因,分析与宫颈癌关联的等位基因及其结构与功能特点.方法提取湖北土家族正常人群236名育龄妇女及59例原发性宫颈癌患者外周血DNA,采用SBT(sequence based typing)、SSOP(Sequence Specific Oligonucleotide Probes)HLA基因分型技术,对HLA-A2超型各等位基因型进行分型,比较宫颈癌病例组和正常对照组中HLA-A2超型中相应等位基因型构成比的差异,并分析相关等位基因的结构特点.结果有7种HLA-A2超型等位基因HLA-A*0201(17.3%)HLA-A*0202(9.5%)HLA A*0203(1.4%)HLA-A*0204(3.8%)HLA-A*0205(3.1%)HLA-A*0206(10.8%)HLA-A*0207/0215N(9.8%),其中HLA-A*0202和HLA A*0206在正常对照组和宫颈癌病人组的构成比有显著性差异(p＜0.05),HLA-A*0202(OR=0.24,95%CI=0.05～0.48)和HLA A*0206(OR=0.2,95%CI=0.67～1.07)对于宫颈癌发生的易感性有保护作用.结论湖北土家族人群HLA-A*0201所占比例最高达17.3%,HLA-A*0202和HLA-A*0206对于宫颈癌发生的易感性有保护作用.