应用iTRAQ技术对支原体肺炎患儿血清差异蛋白的定量分析

【摘要】 目的 应用同位素相对标记与绝对定量技术（iTRAQ）分析支原体肺炎患儿血清蛋白,筛选出差异蛋白并行其功能分析。方法 采用强阳离子交换色谱分析法对8种不同同位素标记的iTRAQ和液相色谱法以及串联质谱分析支原体肺炎组（MPP组）和健康对照组血清蛋白并通过Mascot软件分析和GO分析表达差异的蛋白。 结果 与对照组相比,MPP组中共鉴定出有定量信息的蛋白质66个,包括52个上调蛋白和14个下调蛋白。生物信息学分析显示差异表达的蛋白主要参与急性期反应、急性炎症反应、氧气输送、空气运输、过氧化氢分解过程、细胞氧化解毒、凝血、及细胞解毒等过程,这些表达差异的蛋白中选择6个显著表达差异作为候选蛋白,分别是上调蛋白SAA、CRP、HBB、APOM和下调蛋白APOC3、GPX3。 结论 本研究发现这6种蛋白在小儿支原体肺炎过程中发挥重要作用,可能作为该病潜在的临床筛查生物标志物。     

流式细胞技术和CCK-8法检测 γδ T细胞活性的比较

目的:比较流式细胞技术和CCK-8法检测γδ T细胞的活性。方法:密度梯度离心法分离外周血中单个核细胞（PBMCs）,经磷酸抗原IPP刺激扩增培养14天,收集 γδ T细胞。将收获的γδ T细胞分为两组:一组将乳腺癌MCF-7细胞与 γδ T细胞共培养4 h,Calcein-AM/PI 双染后流式细胞仪检测;另一组将乳腺癌MCF-7细胞与γδ T细胞共培养4 h,采用CCK-8试剂盒检测。比较两种方法检测γδ T细胞对MCF-7细胞毒活性的差别。结果:效靶比为5∶1、10∶1、20∶1两种方法检测细胞毒活性结果分别为:流式细胞术组为37.30%±0.14%、40.30%±0.11%、50.70%±0.19%;CCK-8法组为17.90%±1.14%、25.70%±1.99%、43.10%±1.42%,两组之间差异有统计学意义（P＜0.05）。Calcein-AM/PI 双染后经流式检测法能较好的区分活细胞和凋亡细胞,且其结果的准确性、稳定性和重复性强于CCK-8法。结论:流式细胞术较CCK-8法稳定性好,准确性高,是一种优于CCK-8法的检测免疫细胞毒活性的方法。     

miR-375对人类诱导多能干细胞向胰岛素分泌细胞分化的影响

目的:探讨微小RNA-375(miR-375)在调控人类诱导多能干细胞(hiPSCs)分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)过程中的作用及可能机制。方法:构建miR-375过表达的慢病毒载体,转染hiPSCs获得miR-375稳定表达的miR-375-hiPSCs,体外诱导其定向分化为IPCs,采用real-time PCR、流式细胞术及ELISA等方法对其标志性基因、分化效率、胰岛素和C肽释放量等进行检测;生物信息学结合萤光素酶报告基因实验预测并验证miR-375的靶基因,real-time PCR及Western blot检测靶基因的表达。结果:过表达miR-375可上调胰岛β细胞标志性转录因子HNF4α、MafA、Pdx1、Pax6、Nkx6.1、glucokinase和insulin的表达,分化效率由对照组的22.3%提高至38.6%;高糖刺激后胰岛素释放量由成年胰岛细胞分泌量的1/8提高到1/5;过表达miR-375可影响靶基因REST和WNT5A的蛋白翻译水平。结论:miR-375可通过干扰靶基因REST和WNT5A的翻译水平,开启胰岛素分泌相关特异性基因的表达,从而促进hiPSCs向IPCs定向分化。     

Gardner综合征诊疗现状及进展

Gardner综合征是口腔颌面部疾病中比较罕见的一类疾病,以多发结直肠道息肉、多发性骨瘤、皮肤和软组织肿瘤三联征为特征.其早期治疗有更好的预后,因此早期诊断非常重要.Gardner综合征早期病变一般在口腔颌面部表现出来,因此,口腔医生在本病的早期诊断中扮演了重要角色.本文总结了Gardner综合征与基因突变相关的病因研究,并且归纳了Gardner综合征以口腔颌面部畸形、多发胃肠道息肉以及硬纤维瘤为特点的临床表现及其相关治疗的进展,综述如下.     

人脐带间充质干细胞移植减缓大鼠局灶性节段性肾小球硬化的进展

目的 探讨人脐带间充质干细胞移植对局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)进展的保护作用.方法 贴壁法培养人脐带间充质干细胞,SD大鼠随机分为3组:对照组为正常SD大鼠,无任何干预措施;模型组及移植组大鼠分别在第1天、第8天尾静脉注射4 mg/kg、3.5 mg/kg阿霉素;移植组大鼠在第1、8、15、22天尾静脉注射HuMSCs细胞悬液(2×106个),而模型组尾静脉注射等剂量的DMEM 1 mL.结果 人脐带间充质干细胞移植后能改善阿霉素肾病的尿蛋白及低白蛋白血症、降低血胱抑素C及改善肾脏病理损伤及肾间质炎性细胞浸润,肾组织TGF-β1和结缔组织生长因子(CTGF)表达降低,且血清中IL-6及TNF-α水平明显下降.结论 人脐带间充质干细胞移植可减慢或阻止大鼠FSGS的进程.机制可能与调节炎性介质的合成、释放和抑制炎性细胞的浸润有关.     

八段锦对社区老年人平衡功能影响效果的整群随机对照试验研究

目的 评价八段锦锻炼6个月对社区老年人平衡功能的影响。方法 使用两平行组整群随机对照试验的方法对我国5个省（市）40个社区的1 028名60~80岁社区居住老年人进行干预研究。干预组研究对象（20个社区、523名）进行每天1 h、每周5 d、持续6个月的八段锦锻炼和3次预防老年人跌倒健康教育；对照组研究对象（20个社区、505名）仅接受3次预防跌倒健康教育。研究主要指标为Berg平衡量表（BBS）得分，次要指标包括单脚站立时间、双脚前后站立时间、闭目原地踏步时间、计时起立行走时间。结果 1 028名研究对象进入分析，包括731名女性（71.11%）和297名男性（28.89%），年龄（69.87±5.67）岁。与基线调查相比，干预3个月后干预组BBS得分较对照组增加3.05（95%CI：2.23~3.88）分（P<0.001）；干预6个月后干预组BBS得分较对照组增加4.70（95%CI：4.03~5.37）分（P<0.001）。与对照组相比，干预6个月后干预组研究对象的各项次要指标均有改善（P<0.05）。结论 八段锦运动可以提高60~80岁社区老年人的平衡功能，运动时间越长，改善效果越好。     

13-三体综合征胎儿的孕中期超声指标分析

目的 评估孕中期超声检查对13-三体综合征胎儿的诊断价值。方法 回顾分析本院26胎经染色体核型分析确诊为13-三体综合征胎儿的声像图资料。结果 前脑无裂畸形12胎(12/26,46.15%)、唇/腭裂9胎(9/26,34.62%)、室间隔缺损9胎(9/26,34.62%)、肾脏异常8胎(8/26,30.77%)、眼眶异常7胎(7/26,26.93%)、鼻发育异常5胎(5/26,19.23%)、脑室增宽4胎(4/26,15.38%)、羊水过多伴宫内生长受限2胎(2/26,7.69%)、独眼1胎(1/26,3.85%)。声像图异常率为92.31%(24/26),均表现为2种及以上异常指标。结论 孕中期超声检查对诊断13-三体综合征具有一定的意义;结合染色体核型分析可提高13-三体综合征的产前诊断率,并能降低其出生率。     

HIV阳性孕产妇全程管理专家共识（2024年版）

<正>HIV感染与传播是全球严峻的公共卫生挑战,其中女性感染尤其是孕产妇是艾滋病预防与治疗的重点人群^[1]。实施HIV阳性孕产妇全程管理,是阻断HIV垂直传播的重要保障,对于保障母婴安全,提高母亲和婴儿健康水平意义重大。据世界卫生组织统计,2022年全球约有120万HIV感染孕产妇^[2]。我国女性感染者人数较多,截至2020年底,我国女性HIV感染者约有27万人,其中近15万人年龄在15～49岁,占55%^[3]。育龄妇女存在生育需求的同时,     

儿童新型冠状病毒感染诊断、治疗和预防专家共识(第一版)

2019年12月以来,随着国内各省市新型冠状病毒感染的肺炎疫情的蔓延,已陆续出现多例儿童病例[1]。为进一步指导儿童新型冠状病毒感染的救治工作,参考国家卫生健康委员会发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》和儿科相关病毒感染诊疗策略,特制订《儿童新型冠状病毒感染诊断、治疗和预防专家共识(第一版)》,供临床参考。     

卵巢巧克力囊肿与输卵管系膜囊肿伴生的“陷阱”

卵巢子宫内膜异位囊肿(又称卵巢巧克力囊肿，简称巧囊)是最常见的子宫内膜异位症类型，可破坏正常卵巢组织的结构和微环境，进而影响卵巢储备功能；尽管经腹腔镜巧囊剥除术是一线的治疗手段，但由于对手术可能影响卵巢储备功能的顾虑，年轻未生育女性的巧囊处理越来越谨慎，越来越多的病例选择药物治疗。但并非所有的巧囊都对药物敏感，保守治疗中的定期随诊是必要的。囊肿没有如预期逐渐缩小，达到手术指征时仍需考虑手术明确诊断。本例报道的正是一例以巧囊伴痛经为指征采用炔雌醇屈螺酮复合片(Ⅱ)和地诺孕素治疗2年的病例，因囊肿持续存在且缓慢增大行手术，证实为输卵管系膜囊肿而非巧囊。本病例提示临床医生应保持对附件囊肿鉴别诊断的意识，在治疗效果与预期出现偏差的情况下，手术探查明确诊断是指导下一步治疗的金标准。