重组4-1BB配体对治疗性重组人乳头瘤病毒16型蛋白疫苗的佐剂作用

目的 研究重组4-1BB配体(recombinant 4-1BB ligand,r4-1BBL)作为佐剂对治疗性重组人乳头瘤病毒16型(human papillomavirus-16,HPV16)蛋白疫苗(HPV16蛋白疫苗)免疫效果的影响.方法 对4-1BBL胞外功能区进行密码子优化,并通过NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点定向插入pET28a表达载体.将获得的重组表达载体转化至大肠埃希菌BL21 (DE3),并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白表达.用蛋白质印迹法对重组蛋白进行鉴定,并用非还原性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和电子显微镜分析重组蛋白结构.用CCK-8试剂盒检测纯化r4-1BBL对小鼠T细胞体外增殖的影响.同时将r4-1BBL与HPV16蛋白疫苗联合免疫C57BL/6小鼠,用酶联免疫斑点试验检测小鼠的细胞免疫应答水平,观察r4-1BBL对HPV16蛋白疫苗抑制肿瘤生长的影响.结果 密码子优化的4-1BBL胞外功能区能在重组表达载体中表达,且表达产物同时以包涵体和可溶性形式存在.可溶性产物的结构主要为二聚体,电子显微镜下可以观察到类似亚单位的结构.纯化r4-1BBL可促进小鼠脾淋巴细胞的体外增殖.与单纯HPV16蛋白疫苗相比,r4-1BBL联合HPV16蛋白疫苗能诱导更强的特异性细胞免疫应答(t=3.525,P=0.024)和产生更明显的肿瘤生长抑制作用(t=2.534,P=0.021).结论 r4-1BBL能在小鼠中提高HPV16蛋白疫苗的免疫效果,具有作为HPV16蛋白疫苗佐剂的潜力.     

纳米制剂在糖尿病创面愈合中的应用研究

由于高血糖引起代谢障碍导致的氧化应激、感染、血管病变、炎症和神经病变,使得糖尿病（diabetes mellitus,DM）患者往往伤口愈合不良,发生糖尿病足溃疡（diabetic foot ulcers,DFUs）,严重的可导致截肢。通过对糖尿病创面愈合过程和病理生理学的深入了解,可以获得治疗创伤损伤的有效策略。近年来,纳米制剂在加速糖尿病伤口愈合中有广泛的应用。一方面纳米颗粒有利于伤口愈合,另一方面可用于递送一种或多种治疗药物,如生长因子、核酸、抗生素和抗氧化剂,使它们可以在目标组织内持续释放。本文综述了近年来各种纳米制剂在促进糖尿病创面愈合方面的应用和作用机制。     

万氏牛黄清心丸及其单个组分减缓朱砂肝毒性的研究

目的明确万氏牛黄清心丸及其组方中各单味药对朱砂致大鼠肝毒性的减毒作用。方法成年SD大鼠,分别灌胃给予朱砂、万氏牛黄清心丸(全方)及其单味药与朱砂伍用(即黄连+朱砂、栀子+朱砂、郁金+朱砂、黄芩+朱砂、牛黄+朱砂)。朱砂在每组的剂量均为1 g/kg·bw。大鼠每组6只,雌雄各半。1次/d,连续给药12周。试验结束后次日取全血和肝组织,检测血汞、肝汞含量、血清肝功能指标和肝组织病理。结果实验期间所有动物一般状况良好,体重增长正常,各组间差异无统计学意义(P0.05)。血汞、肝汞含量,黄连、栀子、郁金、黄芩与朱砂配伍组均低于朱砂组、高于全方组(P0.05);血清总蛋白,各单味药与朱砂伍用,均低于单用朱砂组,差异有统计学意义(P0.05),与全方组相比各组间差异无统计学意义(P0.05)。光学显微镜下,朱砂组可见肝索紊乱、肝细胞肿胀、空泡变性和炎症细胞浸润等病理改变,牛黄朱砂组病变类型与朱砂组相似,程度略轻,其他各组肝组织病变轻微,偶见肝细胞肿胀、空泡变性,栀子朱砂组和全方组可见色素沉积。结论黄连、栀子、郁金、黄芩与朱砂伍用,可减少汞吸收,进而降低肝汞蓄积水平;黄连、栀子效果明显,郁金、黄芩次之;万氏牛黄清心丸全方比各单味药与朱砂伍用拮抗朱砂肝毒性的效果更明显。     

1,2-二氯乙烷对NIH小鼠学习记忆的影响

目的研究1,2-二氯乙烷(1,2-DCE)亚急性全身动式吸入暴露对NIH小鼠学习记忆能力的影响。方法无特定病原体级健康7周龄NIH小鼠45只,随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组雌鼠5只,雄鼠10只。采用全身动式吸入染毒方式,分别予剂量为0.00、100.00、350.00 mg/m3的1,2-DCE染毒,6 h/d,连续28 d。分别于染毒前和染毒第1~4周采用Morris水迷宫实验对NIH小鼠进行神经行为学测试。结果 3组小鼠的体质量和游泳速度分别比较,差异均无统计学意义(P0.05)。定位航行实验结果显示,染毒第1~4周,低和高剂量组小鼠的逃避潜伏期均较同时间点对照组延长(P0.05);对照组小鼠染毒第1~4周的逃避潜伏期均较同组染毒前缩短(P0.05);而高剂量组小鼠逃避潜伏期随染毒时间增加而延长,在染毒第4周逃避潜伏期较同组染毒前出现有统计学意义的延长(P0.05)。空间探索实验结果显示,低和高剂量组小鼠染毒第2~4周的第1次穿越平台时间均较同时间点对照组延长(P0.05);低和高剂量组小鼠的目标象限停留时间和穿越平台次数均低于对照组(P0.05)。结论 1,2-DCE亚急性吸入暴露可致NIH小鼠的学习记忆能力损伤;高剂量染毒时可致学习能力呈时间-效应性降低。     

早发性卵巢功能不全与TGF-β超家族基因突变关系探讨

早发性卵巢功能不全(POI)指女性在40岁以前的卵巢功能减退,临床表现为4~6个月的闭经和高促性腺激素水平,人群发病率为1%。POI病因复杂,可能与遗传因素、自身免疫性疾病、环境因素、感染性疾病、化疗、盆腔手术等有关,患者大多数为特发性。转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员常指TGF-β、骨形态发生蛋白(BMP)、生长分化因子(GDFs)、抑制素、激活素、卵泡抑素和AMH,通过旁分泌和(或)自分泌途径参与调节卵泡的生长发育。本文从遗传角度对POI患者中TGF-β超家族成员的基因突变情况做一综述。     

靶向硬膜外血贴治疗自发性低颅压致硬膜下血肿一例北大核心CSCD

患者,男,53岁,170 cm,65 kg,BMI 22.5 kg/m^(2),ASAⅢ级。患者主诉“体位性头痛38天,反复加重20天”,于2020年10月28日以“低颅压性头痛”收入神经内科。患者于38 d前无明显诱因出现头痛,表现为双侧颞顶部闷痛,无视物模糊,无言语不清,无饮水呛咳,无听力下降,无肢体麻木无力,回家卧位休息后症状缓解。次日患者工作时出现双侧面部抽动,持续30 s后症状缓解,并再次出现头痛,疼痛性质较前无变化,躺下后头痛好转。     

高单克隆IgG对无机磷检测干扰的解除

目的报道1例高单克隆Ig G对无机磷检测干扰的案例并对不同方法解除单克隆IgG干扰无机磷的情况进行比对。方法在Beckman AU5800全自动生化分析仪上用磷钼酸-紫外法检测1例多发性骨髓瘤患者无机磷结果为2.84 mmol/L,仪器出现异常报警,用稀释法、超滤法、聚乙二醇PEG6000蛋白沉淀法对标本处理后进行检测,同时分别用聚乙二醇PEG6000蛋白沉淀法检测9份正常标本和用超滤法检测6份正常标本,计算回收率。结果用蒸馏水3、6倍稀释后无机磷结果分别为1.284 mmol/L、1.128 mmol/L,反应曲线仍然异常。超滤法结果为0.634 mmol/L,反应曲线正常,6份标本回收率为101.1%~108.5%。蛋白沉淀法检测结果为0.562 mmol/L,反应曲线正常,9份标本回收率为92.2%~103.0%。结论对于此例高单克隆免疫球蛋白IgG对无机磷测定的干扰,可以使用超滤法和蛋白沉淀法对标本进行处理后测定,效果优于稀释方法。