免疫印迹法测定Tp47蛋白与梅毒患者血清的免疫反应性

目的克隆Tp47基因、构建原核表达载体、表达并纯化Tp47蛋白,通过免疫印迹法(Western-Blot)检测其免疫反应活性。方法聚合酶链反应扩增Tp47基因,将Tp47克隆至pGEX-6P-1载体,构建重组表达质粒pGEX-6P1-Tp47,经测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经诱导表达后,用亲和层析方法纯化重组蛋白,鉴定正确后采用Western-Blot检测重组蛋白与梅毒阴性、阳性血清的免疫反应性。结果成功构建pGEX-6P1-Tp47原核表达质粒,表达、纯化后获得了相对分子质量约为71×103的重组蛋白;Western-Blot检测显示其能与梅毒阳性患者血清发生特异性反应,而与梅毒阴性患者血清无交叉反应性。结论成功克隆、表达、纯化Tp47重组蛋白,其与临床各期梅毒患者血清具有较好的免疫反应性,为Tp47重组蛋白用于梅毒早期诊断提供了理论依据。     

肾透明细胞癌伴肉瘤样癌的病理和超声造影特征

肾脏肉瘤样癌是由Farrow于1968年首次发现并命名的少见肿瘤,指一种特殊的、具有肉瘤样成分的癌,其来源于上皮组织,但形态上存在上皮与间叶两种分化成分[1]。肾肉瘤样癌比肾癌更具侵袭性且更易发生远处转移,其预后极差,生存期仅为9~19个月[2]。本文旨结合病理特征及其生物学特性,分析3例肾透明细胞癌伴肉瘤样癌病例的超声造影表现。1资料与方法1.1一般资料收集2012年7月—2014年5月于本院接受超声造影检查、病理证实为肾透明细胞癌伴肉     

超声引导经皮肾镜取石术治疗孤立肾肾结石的安全性分析

目的:探讨超声引导经皮肾镜取石术(percutaneous nephrolithotomy,PCNL)治疗孤立肾肾结石的安全性及临床疗效.方法:回顾性分析2005年7月~2012年12月在我科行PCNL治疗的孤立肾合并肾结石患者138例,其中解剖性孤立肾16例,功能性孤立肾122例(对侧肾GFR <10 mL/min).肾功能异常35例.鹿角状结石41例,多发结石85例,单发结石12例,其中有同侧开放手术史者11例.采用实时彩色多普勒超声引导经皮肾穿刺,建立F18微创通道或F24标准通道,使用气压弹道超声碎石清石系统或钬激光清除结石.结果:138例均一期建立通道.采用单通道125例(90.6%),双通道13例(9.4%).平均通道建立时间(4.7±0.9) min,平均手术时间(49.5±12.6) min.术后血常规Hb平均下降5.8 g/L.6例患者接受输血,其中3例行超选择性肾动脉介入栓塞控制出血.35例肾功能异常者中,术后第1天SCr增高者32例(91.4%),平均增高(19.8±7.4) μmol/L;术后第7天降至正常水平者26例(74.3%).一期PCNL结石清除117例(84.8%),术后1月复查结石总清除率91.3%(127例).12例有残石者行体外震波碎石(extracorporeal shock wave lithotripsy,ESWL)治疗或保守观察.15例(10.9%)患者术后出现发热(体温>38.5 ℃),本组无脏器损伤和感染性休克病例.结论:超声引导经皮肾镜取石术治疗功能性或解剖性孤立肾合并肾结石是安全和有效的.     

超声自动全容积扫描与弹性成像对乳腺病变的鉴别诊断

目的评价观察者间超声自动全容积扫描(ABVS)和弹性成像鉴别乳腺病变的可信度,以及ABVS、弹性成像及两者结合在乳腺病变鉴别诊断中的价值。方法 41例患者分别接受ABVS和弹性成像检查,分析ABVS和弹性成像在两位医师中的诊断一致性,ABVS、弹性成像及ABVS结合弹性成像与病理结果的一致性,比较三种方法的诊断价值。结果两位医师的ABVS诊断结果(K=0.620)和弹性成像诊断结果(K=0.654)均具有良好的一致性;ABVS诊断结果(K=0.810)、弹性成像诊断结果(K=0.765)、ABVS与弹性成像结合的诊断结果(K=0.901)均与病理结果具有良好或极好的一致性,其对乳腺病变的诊断准确率分别为91.30%、89.13%及95.65%,敏感性分别为100%、96.42%及100%,特异性分别为77.78%、77.78%及87.50%,阳性预测值分别为87.50%、87.10%及93.75%,阴性预测值分别为100%、93.33%及100%。结论 ABVS和弹性成像在观察者间具有良好的一致性,与病理结果有良好的一致性,在乳腺病变的鉴别诊断中具有较高的应用价值,ABVS和弹性成像结合更有助于提高诊断准确率。     

被动躯体运动对ICU呼吸衰竭机械通气病人获得性衰弱的干预效果

目的探讨被动躯体运动对ICU呼吸衰竭机械通气病人获得性衰弱的临床效果。方法选取入住ICU病房且符合纳入标准的病人60例,分为对照组和观察组,各30例。对照组采取常规护理,观察组在常规护理基础上采取早期被动躯体运动来对病人进行干预。比较2组病人获得性衰弱的发病率、独立功能状态、呼吸机机械通气时间和住院时间。结果观察组病人获得性衰弱的发病率低于对照组,使用呼吸机进行机械通气的时间短于对照组,住院时间少于对照组（P < 0.01）。结论临床中,对ICU呼吸衰竭机械通气病人进行被动躯体运动,能够有效降低获得性衰弱的发病率,缩短机械通气时间和住院时间。     

不同溃疡程度糖尿病足的临床特点及预后分析

目的分析不同溃疡程度的糖尿病足患者临床特点及其相关预后情况。方法选择90例该院于2016年8月—2018年8月收治的糖尿病足患者,按照其Wagner分级情况的不同,分别统计其相关临床资料与预后情况,从而分析不同溃疡程度糖尿病足的临床特点及预后关系。结果随着糖尿病足严重程度的增加,患者糖尿病病程、WBC、FIB、ESR、CRP等指标情况也表现出逐渐升高变化,其TG、TC、白蛋白、Hb等指标则表现出逐渐降低变化(P<0.05)。Wagner1、2级,3级,4、5级的创面愈合率分别是100.00%(61/61)、90.91%(20/22)、71.43%(5/7)。其中,创面未愈合的2例3级患者随访3个月后愈合。1例4级患者因重度感染截1趾;1例5级患者行小截肢。结论糖尿病足患者溃疡程度越大,其机体炎性反应越严重,营养状况与临床预后情况越差。以此提示广大临床工作人员可有效结合患者自身糖尿病足溃疡Wagner分级、炎性和营养状态指标情况采取相应的治疗策略,以期改善患者预后。     

血小板输注疗效的影响因素分析

目的分析血小板输注疗效的影响因素。方法观察84例血小板输注治疗患者共363次血小板输注的治疗效果,运用校正血小板增加值和血小板回收率作为量化判断标准,并结合患者的临床出血表现,综合分析患者各项临床基本情况对血小板输注疗效的影响。结果二分类Logistic回归分析结果显示,细菌培养阳性(OR=1. 752,95%CI:1. 055～2. 910)、脾大(OR=2. 133,95%CI:1. 035～4. 395)及活动性出血(OR=1. 784,95%CI:1. 113～2. 861)为血小板输注无效的危险因素(P 0. 05)。结论影响血小板输注疗效的因素包括细菌培养阳性、脾大及活动性出血。     

小剂量阿加曲班治疗TOAST分型下急性缺血性卒中的疗效分析

目的〖KG*2〗观察小剂量阿加曲班治疗不同病因分型下急性缺血性卒中患者的有效性与安全性。 〖HTH〗方法〖KG*2〗回顾性分析发病48 h内的急性缺血性卒中患者124例,按愿意接受阿加曲班治疗的患者依据TOAST（Trial of Org 10172 in Acute Stroke Treatment）分型分为大动脉粥样硬化型(large-artery atherosclerosis,LAA)42例,心源性栓塞型(cardiac embolism,CE)39例,小动脉闭塞型(small artery occlusion,SAO)38例。入院后7 d内每天给予阿加曲班注射液20 mg,同时联合阿斯匹林100 mg等常规治疗。于治疗前与治疗后7 d、14 d美国国立卫生院卒中（National Institutes of Health Stroke Scale,NHISS）量表、Barthel指数（Barthel Index,BI）评定量表评分,比较近期临床疗效;观察住院期间消化道、皮肤黏膜、颅内等部位出血以及病情恶化、死亡等不良事件发生情况。 〖HTH〗结果〖KG*2〗3组治疗后NHISS评分均呈下降趋势,BI指数均呈升高趋势,CE组变化幅度最大,组间、时间点、组间·时间点交互作用差异有统计学意义（P＜0.05）。CE组治疗总有效率高于LAA组和SAO组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3组不良事件发生率差异无统计学意义（P＞0.05）。 〖HTH〗结论〖KG*2〗TOAST病因分型下的急性缺血性卒中患者早期联合应用小剂量阿加曲班治疗均可获益,且不增加出血风险,其中CE类型疗效最佳。     

微电极阵列技术研究肌质网钙ATP酶过表达对大鼠衰竭心肌电活动的改善作用

目的 探索重组腺病毒(rAd)介导的肌质网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)过表达对大鼠心肌梗死后心力衰竭心肌电活动节律和传导的改善作用,并探讨可能的电活动机制.方法 将26只成年雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=l0),空病毒对照组(rAd.β-gal组,n=8)和肌质网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)转染组(rAd.SERCA2a组,n=8).假手术组仅开胸不结扎动脉,rAd.β-gal组和rAd.SERCA2a组分别进行左冠状动脉前降支结扎建立大鼠心肌梗死后心力衰竭动物模型,同时分别将携带β-gal和SERCA2a基因的重组腺病毒(rAd)导入衰竭心脏,术后2周超声心电图检测心脏舒张功能和收缩功能,心电图监测体表心电活动以及微电极阵列(MEA)技术监测离体心脏组织电活动情况.结果 rAd携带SERCA2a与β-gal基因均成功转入大鼠衰竭心脏.rAd.SERCA2a组可改善心功能,与假手术组相比心室舒张末期容积与心室收缩末期容积轻微增加[(0.41±0.13)cm2对(0.39±0.02)cm2,(0.08±0.02)cm2对(0.06±0.01)cm2,P＞0.05],左心室射血分数[(0.82±0.05)对(0.86±0.01),P＞0.05]和短轴缩短率[(46.6±2.32)％对(49.58±1.71)％,P＞0.05]无明显改变.与假手术组相比,rAd.β-gal组体表心电图QT间期延长[(111.02±7.42) ms对(94.7±1.55) ms,n=6,P＜0.05],室性早搏发生率达71.5％ (5/7),而rAd.SERCA2a组QT间期缩短[(81.45±4.97)ms对(94.7±1.55)ms,n=6,P＜0.05],室性早搏发生率达14.3％(1/7).MEA记录可发现rAd.SERCA2a组心率与假手术组相比差异无统计学意义[(435±31)次/min对(442 ±22)次/min,n=6,P＞0.05],与rAd.β-gal组相比,rAd.SERCA2a组最大场电位[(0.82±0.39)mV对(0.64±0.13) mV,n=6,P＜0.05]、最小场电位[(1.88±0.57) mV对(1.35±0.12) mV n=6,P＜0.05]、场电位时限[(124.17±21.08)ms对(113.23±12.02) ms n=6,P＜0.05]均延长;rAd.β-gal组梗死区与梗死对侧区心肌组织场电位时限差异有统计学意义[(60.36±2.08)ms对(103.24±7.35) ms,n=5,P＜0.05],并且60通道记录梗死区心肌组织场电位时限离散度大于rAd.SERCA2a组[(38.5ms±4.62)ms对(26.88±5.09) ms,n=5];rAd.SERCA2a组传导基本一致,使心肌梗死面心室肌组织电活动呈均一性传导.结论 SERCA2a转基因治疗可以显著改善心力衰竭大鼠的左心室收缩功能、舒张功能,同时可以降低心肌梗死后心力衰竭伴发心律失常的发生,改善心脏电活动的均一传导.MEA技术是一项检测心血管疾病动物模型心脏组织电生理节律和频率以及传导活动的理想技术.     

注意缺陷多动障碍男童SNAP-25基因MnlI多态性与静息态脑功能和工作记忆的相关性研究

目的研究注意缺陷多动障碍男童SNAP-25基因MnlI多态性与静息态脑功能和工作记忆的相关性,探讨SNAP-25基因MnlI多态性对ADHD儿童脑功能的影响机制。方法采集36例TT纯合子基因型ADHD男童(简称TT组)和20例G等位基因型ADHD男童(简称TG组)静息态脑功能数据,采用局部一致性方法进行分析,比较两组之间静息态脑功能的差异。采用韦氏儿童智力量表第四版(WISC-Ⅳ)评估两组男童的工作记忆指数,独立样本t检验比较两组之间工作记忆能力的差异。当P0.05认为差异有统计学意义。结果 1.静息态脑功能结果:与TG组比较,TT组:1)ReHo值高的脑区有:①默认模式网络(左后扣带回、双侧楔前叶、双侧额内侧回、左颞中下回、右颞中回);②语言功能区:左额上、中、下回,右额中回;③左中央前回等。2)ReHo值低的脑区有:①右中央后回;②左前扣带回,右前扣带回;③左顶上回等。2.工作记忆结果,TT组的工作记忆能力较TG组高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 SNAP-25基因MnlI多态性对ADHD男童脑功能具有不同的遗传效应,其不同基因型的工作记忆存在差异,fMRI可从神经网络角度解释其差异的脑功能基础。