| 免疫印迹法测定Tp47蛋白与梅毒患者血清的免疫反应性 |
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| 引用本文： | 郑和平,覃晓琳,黄进梅,薛耀华,白顺,吕萍,杨斌.免疫印迹法测定Tp47蛋白与梅毒患者血清的免疫反应性[J].国际检验医学杂志,2015(10). |
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| 作者姓名： | 郑和平 覃晓琳 黄进梅 薛耀华 白顺 吕萍 杨斌 |
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| 作者单位： | 广东省皮肤性病防治中心,广东广州,510091 |
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| 基金项目： | 广东省科技计划项目(2011B031800225，2012B031800175)。 |
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| 摘 要： | 目的克隆Tp47基因、构建原核表达载体、表达并纯化Tp47蛋白,通过免疫印迹法(Western-Blot)检测其免疫反应活性。方法聚合酶链反应扩增Tp47基因,将Tp47克隆至pGEX-6P-1载体,构建重组表达质粒pGEX-6P1-Tp47,经测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经诱导表达后,用亲和层析方法纯化重组蛋白,鉴定正确后采用Western-Blot检测重组蛋白与梅毒阴性、阳性血清的免疫反应性。结果成功构建pGEX-6P1-Tp47原核表达质粒,表达、纯化后获得了相对分子质量约为71×103的重组蛋白;Western-Blot检测显示其能与梅毒阳性患者血清发生特异性反应,而与梅毒阴性患者血清无交叉反应性。结论成功克隆、表达、纯化Tp47重组蛋白,其与临床各期梅毒患者血清具有较好的免疫反应性,为Tp47重组蛋白用于梅毒早期诊断提供了理论依据。
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| 关 键 词： | 梅毒 重组蛋白 免疫印迹法 |
Immunoreactivity analysis of Tp47 recombinant protein of Treponema Pallidum by Western-Blot assay |
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| Zheng Heping,Qin Xiaolin,Huang Jinmei,Xue Yaohua,Bai Shun,Lv Ping,Yang Bin.Immunoreactivity analysis of Tp47 recombinant protein of Treponema Pallidum by Western-Blot assay[J].International Journal of Laboratory Medicine,2015(10). |
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| Authors: | Zheng Heping Qin Xiaolin Huang Jinmei Xue Yaohua Bai Shun Lv Ping Yang Bin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Treponema pallidum recombinant protein Western-Blot |
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