乙型肝炎病毒对不同ALT状态下慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞及其亚群的影响

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）在不同丙氨酸氨基转移酶（ALT）状态下对T淋巴细胞及其亚群的影响,阐明以ALT分组抗病毒治疗乙型肝炎（乙肝）的免疫学机制。方法：选取慢性乙肝患者363例作为研究对象,根据ALT异常情况分为ALT正常组（131例）、ALT大于等于正常上限且小于2倍增高组（110例）和ALT大于等于正常上限2倍增高组（122例）。对ALT大于等于正常上限2倍增高组患者给予恩替卡韦治疗,随访24周。采用化学发光免疫分析仪检测乙肝抗原抗体指标,采用全自动生化分析仪检测肝功能指标,采用全自动荧光定量PCR分析仪检测被测者的病毒载量,采用流式细胞仪检测T淋巴细胞分类,酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测患者血清中白细胞介素12（IL-2）、干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）和白细胞介素10（IL-10）水平,检测不同组别中不同载量HBV对机体免疫学指标的影响及抗病毒治疗前后患者病毒学及免疫学指标的变化。结果：在ALT正常组中,不同载量HBV患者T淋巴细胞总数、Th/i淋巴细胞数、Ts/c淋巴细胞数及血清中IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平比较差异无统计学意义（P>0.05）;在ALT大于等于正常上限2倍增高组,随着病毒载量的增加,患者T淋巴细胞总数和Th/i淋巴细胞数明显下降（P<0.05）,Ts/c淋巴细胞数明显升高（P<0.05）,反映Th1细胞的细胞因子IL-2和IFN-γ水平明显升高（P<0.05）,反映Th2细胞的细胞因子IL-4和IL-10水平明显下降（P<0.05）。与治疗前比较,恩替卡韦治疗24周后,患者HBVDNA明显下降（P<0.05）,T淋巴细胞总数和Th/i淋巴细胞数明显升高（P<0.05）,Ts/c淋巴细胞数明显下降（P<0.05）,血清中IL-2和IFN-γ水平明显下降（P<0.05）,IL-4和IL-10水平明显升高（P<0.05）。结论：HBV在不同ALT状态下对机体免疫功能有不同的影响,对于ALT大于等于正常上限2倍增高的乙肝患者进行抗病毒治疗可明显改变机体的免疫状态。     

smad1/5信号通路在诱导多能干细胞成釉分化中的作用研究

目的 研究smad1/5信号在诱导多能干细胞(induced pluripotent stem,iPS)成釉分化中的作用。方法 采用小鼠胚胎成纤维细胞作为滋养层培养iPS细胞,采用Western blot法检测成釉细胞无血清条件培养液(ameloblast serum-free conditioned medium,ASF-CM)或对照培养基培养iPS细胞14天后,其smad1/5及MAPKs通路蛋白表达情况;分别在ASF-CM中加入smad1/5或MAPKs抑制剂后培养iPS细胞,采用RT-PCR法及免疫荧光染色分别检测iPS细胞成釉标志分子mRNA及阳性细胞率的情况。结果 ASF-CM组iPS细胞p-smad1/5(6.1±1.3)、p-P38(3.2±0.6)以及p-ERK1/2(4.1±0.8)蛋白的表达均较对照组增高(P<0.05),其成釉蛋白(mRNA:6.6±1.3;阳性细胞率:46.6%±11.3%),釉质素(mRNA:5.4±0.9;阳性细胞率:51.4%±10.9%)及细胞角蛋白-14(mRNA:5.9±1.1;阳性细胞率:41.9%±8.1%)mRNA及蛋白的表达较对照组也增高(P<0.05),smad1/5通路抑制剂LDN-193189可显著逆转ASF-CM的上述促iPS细胞成釉分化的效应 (P<0.05),但p38 MAPK及ERK1/2通路抑制剂对上述效应无显著影响(P>0.05)。结论 smad1/5信号通路在ASF-CM诱导的iPS细胞成釉分化过程中发挥关键调控作用。     

血友病足踝部病变的外科治疗

目的探讨外科治疗血友病足踝部病变围术期处理方法、术式选择及疗效。方法 1998年6月-2012年2月,收治血友病足踝部病变男性患者10例(12足)。年龄13～41岁,平均22.6岁。其中甲型血友病9例(11足),乙型血友病1例(1足)。单足受累8例,双足2例;左侧3足,右侧9足。病程5～84个月,平均32.2个月。术前根据美国矫形足踝协会(AOFAS)评分为(43.2±21.1)分,简明健康调查量表(SF-36量表)评分总分为(45.4±20.0)分。入院后给予凝血因子2 000～3 500 U行预试验,围术期行凝血因子替代方案治疗。行踝关节融合术4例(4足),单纯跟腱延长/肌腱转移术7例(8足);其中1例左足行单纯跟腱延长术,右足行踝关节融合术。结果手术时间65～265 min,平均141.1 min;除1例术中出血400 mL、术中回输200 mL自体血外,其余患者出血量均<50 mL,围术期均未输血。患者切口均Ⅰ期愈合,术后无感染、下肢深静脉血栓形成、神经损伤等并发症发生。患者均获随访,随访时间6个月～14年3个月,中位时间22个月。行踝关节融合术患者末次随访时X线片检查示踝关节完全融合。术后6个月及末次随访时,AOFAS评分分别为(78.8±14.7)分和(75.8±14.5)分,SF-36量表评分总分分别为(76.6±13.1)分和(75.5±13.2)分,两指标与术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);术后6个月与末次随访时比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对于血友病足踝部病变患者,手术治疗可以缓解足踝部疼痛,改善功能。术前行凝血因子预试验,围手术期行凝血因子替代方案,可降低术后大出血发生率。     

三种方法治疗骨性锤状指的疗效分析

目的 对骨性锤状指损伤的不同类型采用克氏针法、钩钢板法及微型锚钉法治疗并评估其临床疗效.方法 在2005年1月至2012年1月本院治疗的66例骨性锤状指病例中,随机抽取应用以上3种手术方法 治疗的病例各12例,术后患者均获得4月～1年的随访,平均8个月,疗效评估采用Crawford标准.结果 克氏针法组优6例,良4例.可2例,优良率83.3%;钩钢板法组优8例,良3例,可1例,优良率91.6%;微型锚钉法组优5例,良4例,可2例,差1例,优良率75%.结论 对于Ⅰ型Ⅱ型中的a和b亚型,采用钩钢板内固定法治疗骨性锤状指较其他两种方法 能获得更高的优良率.     

成人锁骨中段移位骨折的手术治疗

目的 探讨切开复位内固定治疗成人锁骨中段移位骨折的疗效.方法 2006年1月至2010年12月手术治疗118例成人单纯锁骨中段移位骨折,男93例,女25例;年龄18～85岁,平均47.6岁.骨折按Robinson分类:2A2型4侧,2B1型61侧,2B2型55侧,均为闭合性骨折.均行切开复位,用重建接骨板固定,7例于骨折处植骨.按美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)肩关节评分标准(Ellman法)评定术后功能.结果 107例患者术后获6～43个月(平均16.0个月)随访.伤口均一期愈合,无感染发生.骨折均获骨性愈合,平均愈合时间为10周.3例出现内固定失效.按UCLA肩关节评分标准(Ellman法)评定术后功能:优56例,良47例,可4例,优良率为96.3％.结论 对于成人锁骨中段移位骨折,一期采用切开复位、接骨板内固定疗效较好.     

全麻唤醒中声门外通气设备的系列研制

目的 研制一种能讲话的声门外通气装置,以满足脑功能语言区手术中唤醒条件下监测、定位的需要,解决通气与讲话不能兼顾的难题.方法 根据咽喉部解剖及通气和讲话原理研制成食道咽腔导管(Ⅰ型)、食道鼻咽腔导管(Ⅱ型)和带吸引导管的食道鼻咽腔导管(Ⅲ型).临床应用60例,其中妇科全麻手术40例,术毕患者清醒于拔管前让患者讲话;脑部语言区手术全麻术中唤醒20例,唤醒后发音.结果 60例患者插管顺利,术中通气良好,潮气量泄露＜56 ml,均低于20 cm H2O(1 cm H2O=0.098 kPa),血气正常,无二氧化碳蓄积及缺氧.患者清醒带管均能讲话,讲话的清晰度Ⅱ型和Ⅲ型导管显著优于Ⅰ型(P＜0.01).无严重并发症.结论 Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型导管,可安全实施全麻和机械通气,尤其是Ⅱ型和Ⅲ型通气效果满意,讲话清晰,患者易耐受,显著地提高了脑功能语言区手术麻醉的安全性和可控性.解决了语言功能术中唤醒麻醉带管讲话的难题.     

糖尿病肾病患者血清HMGB1和TNF-α水平与心功能的相关性研究

目的：　探讨糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）患者血清高迁移率族蛋白B1（high-mobility group box-1,HMGB1）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平与心功能的关系。方法：　收集2019年6月至2020年6月在南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科住院的DKD患者122例（DKD组）为研究对象,根据尿蛋白-肌酐比值将研究对象分为微量蛋白尿组58例、大量蛋白尿组42例和肾功能损害组22例。选择同期体检的健康人群106例为健康对照组。检测所有受试者空腹血糖、血脂、肾功能（尿素氮和肌酐）水平和尿蛋白-肌酐比值。酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测血清HMGB1和TNF-α水平。采用超声心动图测量左室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）、左室舒张末径（left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD）和左室收缩末径（left ventricular end-systolic dimension,LVESD）。组间比较采用方差分析。应用Pearson相关性检验分析DKD患者血清HMGB1和TNF-α水平与心功能的关系;logistic多元线性回归分析DKD患者心功能的影响因素。结果：　①DKD组患者空腹血糖、低密度脂蛋白胆固醇、尿素氮、肌酐和尿蛋白-肌酐比值均明显高于健康对照组（均P<0.05）,而血清高密度脂蛋白胆固醇水平与健康对照组相比明显降低（P<0.05）。②HMGB1、TNF-α、LVEDD和LVESD随DKD病情进展逐渐升高,而LVEF随病情进展逐渐下降。③DKD组患者血清HMGB1和TNF-α含量与LVEF均呈负相关,与LVEDD、LVESD均呈明显正相关（均P<0.05）。④Logistic多元线性回归显示,HMGB1对DKD患者心功能影响最大,HMGB1每增加1 mmol/L,LVEF下降0.298%、LVEDD增加0.324 mm、LVESD增加0.318 mm。结论：　HMGB1和TNF-α均随DKD病情进展上升,而HMGB1对DKD患者心功能影响最大。HMGB1可能在DKD患者心血管事件的发生发展中发挥重要作用,及早检测HMGB1有利于减少DKD患者心血管并发症的发生。