K值校准法在5''''-NT测定中的应用

5’-核苷酸酶(5’-NT),在岛津CL-7200全自动生化分析中,采用测定次黄嘌呤释放速率5’-NT比色分析法,选择[装置定数]和[K值接受]校准模式,以底物次黄嘌呤为标准,进行510 nm/600 nm双波长终点比色,测装置K值,由5’-NT连续监测法反应程序接受K值后,用于一般样品分析,结果在设定的次黄嘌呤标准浓度选择性试验中,次黄嘌呤在200～1000μmol/L时,可求得理想K值;准确性:质控结果均值与靶值误差<2％,符合WHO允许误差范围;重现性:高低值5’-NT批内CV<2％,日间<7.5％;线性试验中,5’-NT线性范围是0～300 U/I。,相关系数r=0.998 8,回归方程Y=1.052 8X-2.413,呈高度直线相关且离散度小,回收率为98.2％～99.4％,30例病人结果同手工法相关统计为r=O.897 O,Y=1.209 4X+O.857 8;40例正常组试验为0.3～10.0 U/L,可作为正常参考值。     

氮酮对利巴韦林凝胶透皮吸收的影响

目的 考察氮酮对利巴韦林凝胶透皮吸收的影响。方法 采用改良Franz直立式扩散池，以离体小鼠皮肤为透皮屏障使用不同浓度的氮酮，测定75％的利巴韦林凝胶经皮渗透2、4、6、8、10、12、24h后累积透过量Q(μgocm^-2)和稳态流量J(μgocm-20h^-t)。结果含10％、20％、5．0％氮酮的利巴韦林凝胶与不合氮酮的利巴韦林凝胶间，其透皮吸收在24h后有极显著性差异CP＜0.01。结论 氮酮对利巴韦林凝胺有极显著的透皮促进作用。     

黄酮类化合物和咖啡酸衍生物抑制次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶诱导的人细胞氧化损害

实验用黄酮类化合物为儿茶素、白杨黄素、杨梅黄酮、柑桔素、柑桔苷、表桔儿茶素桔酸酯、芹黄素、绿原酸、藤黄菌素葡糖苷、迷迭香酸、洋芫荽苷和金丝桃苷等，槲皮素做阳性对照。将人ECV304细胞与次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶与(或不与)不同浓度的上述黄酮类化合物和咖啡酸衍生物共同培养，用MTT法进行细胞毒试验。结果显示，     

次黄嘌呤与新生儿缺氧

新生儿缺氧是儿科常见的危重症，多年来人们一直探索寻找一种评价缺氧的灵敏方法，1975年Saugstad等发现宫内窘迫的患儿脐血中有高水平的次黄瞟吟（Hypoxan－thine简称Hx），便预言Hx可作为一种缺氧指标[1]。HX反映细胞缺氧和能量代谢状态，它不仅比PH值和乳酸值敏感，而且能评价缺氧的失代偿程度。一、Hx的代谢Hx为ATP分解产物，正常体内有较稳定的Hx水平，约90％Hx由补救途径与1-焦磷酸-5-磷酸核糖（PRPP）产生次黄源吟酸（IMP），其余的HX被氧化分解为尿酸从尿液中排出。在黄源吟的脱氧酶和氧化酶系统中，正常情况下黄源吟氧化…     

吗啡对PC12细胞嘌呤核苷酸代谢相关酶基因表达的影响

目的：研究吗啡对神经细胞模型PC12嘌呤核苷酸补救合成酶与分解代谢关键酶基因表达的影响。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测暴露于吗啡不同时间的PC12细胞次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）、腺苷激酶（AK）和腺苷脱氨酶（AD A）mRNA的表达水平。结果：与相应时段对照组相比，PC12细胞暴露于吗啡12及24 h时，HGPRT mRNA水平均明显增高(P<0.05)，作用48 h时HGPRT mRNA水平显著降低(P<0.05)，72 h后HGPRT mRNA水平再次升高(P<0.05)；吗啡处理的PC12细胞于12和24 h时，AK mRNA水平均明显降低(P<0.05)，作用48 h时AK mRNA水平升高(P<0.05)，72 h后AK mRNA水平恢复正常；ADA mRNA水平均表现为轻度降低，12 h差异有显著性(P<0.05)。结论：吗啡影响神经细胞嘌呤核 苷酸代谢，使细胞内腺苷酸及腺苷水平增高，这可能是吗啡依赖和耐受形成的机理之一 。     

九香虫药材中4种核苷类成分的高效液相色谱分析

目的:建立九香虫药材中尿苷、尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤等4种核苷类成分的高效液相色谱分析方法。方法:高效液相色谱法,柱Agi Lent zorbax 250 mm×4.6 mm,5μm,流动相0.05 mol·L-1磷酸氢二铵、pH7.8~8.0;流速1mL·min~(-1);柱温30℃;检测波长254 nm。结果:13批次九香虫药材样品中,除10#药材未检出次黄嘌呤成分外,其余均检出尿苷、尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤4种成分;但4种成分的含量均较低,可能与样品均经过炮制有关;方法学考察结果符合分析要求。结论:该实验所建立的高效液相色谱测定方法,适用于九香虫药材中尿苷、尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤等4种核苷类成分的含量测定,为九香虫药材质量控制提供了方法。     

关于肌氨肽苷注射液次黄嘌呤含量测定的讨论

肌氨肽苷注射液的现行的质量标准中，按照次黄嘌呤含量测定的色谱条件实验，系统适用性很难达到标准要求，严重影响检验结果的准确性。本文为药品检验人员提供了三种操作方式以达到系统适用性的要求，供药品检验人员参考。并根据实验中出现的问题对现行标准提出了修改建议，以便更好地控制肌氨肽苷注射液的药品质量。     

槲皮素、别嘌醇对高尿酸血症大鼠血清尿酸水平及肝、肾功能影响的对比研究

对比研究槲皮素、别嘌醇对高尿酸血症大鼠的治疗作用并观察对肝、肾功能的影响。雄性SD大鼠,连续灌胃给药7 d,第5天采用次黄嘌呤法制备大鼠高尿酸血症模型。采用比色法、连续监测法、化学氧化法、酶联免疫吸附法等测定大鼠血清中尿酸(UA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、β₂-微球蛋白(β₂-MG)、胱抑素C(Cys-C)、尿素及肌酐(Cr)含量。结果显示:别嘌醇能够显著降低大鼠血清尿酸水平(P<0.01),而槲皮素对血清尿酸无影响;槲皮素和别嘌醇显著降低大鼠ALT和AST水平(P<0.01),对TBIL和DBIL水平无明显影响,显著提高β₂-MG,Cys-C水平(P<0.01),别嘌醇治疗组大鼠血清尿素和Cr水平明显高于正常对照组(P<0.01);造模组和给药组可见大鼠肾脏轻度病理组织学改变。结果表明:槲皮素对大鼠血清尿酸水平无明显影响,而别嘌醇降尿酸作用显著。造模和给药对肝功能均无明显影响,但造模可能导致肾功能不同程度的损害,槲皮素对轻度肾损伤未见明显的保护作用,别嘌醇给药后加重肾功能损伤。     

从运动神经元的TDP-43蛋白表达和ADAR2活性探讨肌萎缩侧索硬化症的发病机制

肌萎缩性侧索硬化症(ALS)是以上下两级运动神经元进行性丢失为特征的神经系统变性疾病,是运动神经元病(MND)中最常见的类型。运动神经元中的病理性TDP-43是ALS的病理特征。此外,散发性ALS运动神经元中作用于RNA的次黄嘌呤腺苷脱氢酶(ADAR2)减少、具有未经编辑Q/R位点的谷氨酸受体2(GluR2)表达增加,α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(AMPAR)属性受影响,Ca2+通透性增加,Ca2+流入胞质增加导致神经元死亡。ALS运动神经元死亡包含病理性TDP-43和ADAR2活性下降,两种病理变化可能在细胞死亡中存在一定联系。ADAR2 mRNA是TDP-43蛋白的靶RNA,TDP-43蛋白在ADAR2的表达中起调节作用。近年来,研究者探讨ALS的基因治疗可能性:动物实验结果提示,外周静脉给予9型腺相关病毒载体(AAV9),可上调鼠运动神经元ADAR2,引发外源性ADAR2在中枢神经元表达,从而有效防治运动功能障碍。运动神经元的获救可能与TDP-43基因的正常表达有关。AAV9介导的ADAR2基因植入可能为ALS的基因治疗提供新的前景。     

6-巯基嘌呤减量治疗3例急性白血病患儿基因突变分析及临床表现

目的：分析6-巯基嘌呤（6-MP）减量化疗的急性白血病（AL）患儿维持治疗阶段临床资料及其巯嘌呤甲基转移酶（TPMT）、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）基因突变情况,探讨其基因型和临床表型的相关性。方法分别提取3例AL患儿骨髓液及77例对照组儿童外周血总RNA并逆转录成cDNA,PCR特异性扩增TPMT和HGPRT基因蛋白质编码区序列并测序。采用美国国立癌症研究所第3版常规毒性判定标准（NCI CTC 3．0）对维持治疗阶段药物不良反应进行评价和分级,应用国家食品药品监督管理局（SFDA）推荐的药物不良反应关联性评价标准评价6-MP与不良反应发生的相关性。结果1例AL患儿为TPMT＊3C（Try240Cys）纯合突变基因型,减少6-MP剂量至常规剂量1/3～2/3可使骨髓抑制及肝脏毒性等重度不良反应转为轻度。对照组发现2例TPMT＊3 C杂合突变,该位点在人群中的等位基因频率为1.3％。以上两组均未发现HGPRT基因突变。结论 TPMT＊3 C纯合突变患儿可出现与6-MP剂量相关的不耐受现象,中断或减量治疗能够减少维持期间严重药物不良反应的发生。提示TPMT＊3 C基因型的检出可能有利于提高6-MP用药的安全性。