不同加工方法梅花鹿鹿茸中尿嘧啶等五种核苷成分的含量分析

目的建立高效液相色谱法测定梅花鹿鹿茸药材中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、鸟苷和肌苷5种核苷成分含量的方法,并比较不同的加工方法梅花鹿鹿茸药材中5种核苷类成分含量的差异。方法采用Aglient Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),甲醇-0. 07%冰醋酸水溶液为流动相,流速1. 0 ml·min-1,柱温28℃,检测波长254 nm。结果测定了不同加工方法梅花鹿鹿茸药材中5种核苷类成分的含量,在线性范围内线性关系良好(r 0. 9998),平均回收率为96. 7%～103. 3%。结论不同加工方法梅花鹿鹿茸药材核苷成分的组成存在显著性差异,梅花鹿鹿茸药材加工方法对其质量有明显的影响。该方法适用于梅花鹿鹿茸中尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷、鸟苷和肌苷的含量测定,为其质量控制提供保证。     

鹿鞭商品药材中核苷类成分分析

目的:比较不同品种与商品地的鹿鞭药材中5种核苷类成分的含量,同时探讨5种核苷类成分含量对总核苷含量的影响程度.方法:采用HPLC法分别测定9个鹿鞭商品中腺苷、黄嘌呤、次黄嘌呤、尿嘧啶、尿苷的含量;应用逐步回归分析方法,得到5种核苷类成分含量对总核苷含量影响程度的最优方程.结果:不同样品的5种核苷类成分及总核苷含量均有一定差异,其中以黄嘌呤含量对总核苷含量影响最为显著.结论:黄嘌呤含量为标示鹿鞭药材中总核苷含量的最佳指标,可用于该药材中总核苷类成分含量的测定指标.     

HPLC-PDA同时测定不同品种及产地蜈蚣中8种核苷类成分

目的:建立同时检测不同品种、不同产地蜈蚣样品中8种核苷类成分(胞嘧啶,胞苷,次黄嘌呤,黄嘌呤,尿苷,胸腺嘧啶,2'-脱氧肌苷和胸苷)含量的高效液相色谱法。方法:不同品种及产地蜈蚣提取物的分析选用Hedera ODS-2 C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),柱温30℃,检测波长254 nm,进样量5μL。结果:8种核苷类成分分离良好;在一定质量浓度内线性关系良好(r0.999 9);加样回收率在95.73%~102.6%;11个批次蜈蚣样品中均含有8种核苷类成分,但含量存在差异。不同品种、不同产地的蜈蚣中核苷成分总量墨江蜈蚣含量最高,多棘蜈蚣其次,少棘巨蜈蚣和黑头蜈蚣中核苷类总成分比较接近。蜈蚣中次黄嘌呤和黄嘌呤明显高于其他核苷成分,少棘巨蜈蚣中次黄嘌呤的含量要高于其他品种。结论:该文所建立的方法快速简便,重复性、准确度良好,为蜈蚣的质量控制提供依据。     

HPLC同时测定全蝎不同工艺提取物中5种核苷类化合物含量

目的:比较水煎煮、醇提取以及湿法超微粉碎3种提取工艺对全蝎中尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟苷、腺苷5种核苷类成分含量的影响.方法:全蝎经不同工艺提取,采用HPLC外标法测定提取物中5种核苷化合物含量.Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.07％冰乙酸-甲醇梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,检测波长254 nm,柱温35℃.结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟苷、腺苷5种核苷化合物均在一定质量浓度范围内线性关系良好,r均＞0.999 5,样品中5种核苷化合物的加样回收率98.9％ ～ 103.9％,RSD均＜3％.结论:该HPLC简便快速、灵敏度高、重复性好,可应用于同时测定尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟苷、腺苷5种核苷化合物含量并比较不同全蝎提取物之间的差异.     

HPLC同时测定西藏栽培天麻中天麻素和8种核苷及碱基类成分

本实验建立了同时测定天麻药材中天麻素及8种核苷和碱基类成分的高效液相色谱法:Agilent Zorbax BonusRP(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-(0.04%冰乙酸)水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温36℃,流速1.0 m L·min-1,检测波长254 nm,进样量20μL。该方法分离度良好,天麻素、胞嘧啶、胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、鸟苷和腺苷等的质量浓度在2.04~262.00,0.20~24.67,0.18~23.75,0.20~25.83,0.20~26.67,0.16~20.00,0.22~27.71,0.20~24.29,0.24~30.58 mg·L-1内,相关系数r在0.998 9~0.999 9,具有良好的线性。天麻素和8种核苷及碱基平均加标回收率在96.4%~99.6%,RSD均小于2.7%(n=6)。测定了7个西藏栽培天麻药材中上述9种成分的含量。结果表明,7个天麻样品中天麻素的含量均高于2.0 mg·g-1,均含有较高的腺苷、鸟苷、尿苷和胞嘧啶,而胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤和胸腺嘧啶含量较低。该方法简便、准确,重复性好,适用于天麻药材中天麻素和腺苷等8种核苷及碱基类成分的含量测定。     

川贝母新资源太白贝母中水溶性成分的含量测定

目的:建立RP-HPLC-DAD同时测定太白贝母药材中7种核苷类活性成分(胞苷、尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷)及碱基(尿嘧啶、腺嘌呤)含量的方法.方法:采用Zorbax SB-AqC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇和水,梯度洗脱,流速1mL·min-1,检测波长260nm,柱温25℃.结果:尿嘧啶、胞苷、尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷、腺嘌呤分别在0.312～37.440,1.095～65.700,1.020～61.200,1.075～64.500,0.812～48.720,1.070～64.200,0.432～25.920mg·L-1与峰面积呈良好线性关系.平均回收率为96.96%～103.5%,RSD≤3.8%.结论:太白贝母有紫外吸收的水溶性成分主要是核苷类成分,所建立方法简单、重复性好,准确可靠,可用于贝母药材中核苷类化合物的含量测定,为全面开发利用贝母药材提供进一步依据.     

RP-HPLC法测定青黛中核苷类成分

目的建立RP-HPLC法同时测定青黛药材中尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、肌苷和胸苷5种核苷类成分的方法。方法色谱柱Agilent TC-18(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈(A)-0.05 mol/L KH_2PO_4(B)梯度洗脱:0~9 min(A,0%~0%;B,100%~100%):9~40 min(A,0%~8%;B,100%~92%);体积流量为:1 ml/min;柱温:30℃;检测波长为254 nm;进样量:20μl。结果所建RP-HPLC方法适合于检测青黛药材中的核苷类成分,尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、肌苷和胸苷5种核苷成分别在1.04~5.21、1.08~5.42、2.40~12.02、0.38~1.89、0.55~2.74μg内呈良好的线性关系(r≥0.999 5),平均回收率为98.74%、100.35%、98.14%、99.80%、99.30%,RSD2.00%。结论所建RP-HPLC分析方法简单、准确可靠、重现性良好,可应用于青黛药材中的核苷类成分含量测定。     

HPLC法测定乌梢蛇中六种核苷类成分含量

目的建立同时测定乌梢蛇中尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、腺嘌呤、肌苷和鸟苷6种核苷类成分的HPLC测定方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱Agilent TC-18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:0.05 mol/L KH2PO4-乙腈(99:1);体积流量为:0.6 ml/min;柱温:25℃;检测波长为260 nm;进样量:10μl。结果测定了乌梢蛇药材种6种核酸的含量,尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、腺嘌呤、肌苷和鸟苷6种核苷类成分分别在1.73~8.65、1.79~8.97、2.22~11.10、3.28~16.42、4.28~21.40、4.71~23.56μg内呈良好的线性关系(r≥0.999 5),平均回收率为99.47%、97.70%、99.54%、99.15%、99.10%、99.91%,RSD2.00%。结论该方法简单、准确可靠、重现性良好,可用于乌梢蛇核苷类成分含量测定及质量评价。     

何首乌中核苷类成分QTRAP UPLC-MS/MS分析

目的:建立同时测定何首乌中10种核苷类成分的QTRAP UPLC-MS/MS分析方法,分析比较生何首乌和制何首乌中核苷类成分的差异。方法:采用QTRAP UPLC-MS/MS技术,Waters Atlantis T3色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm),流动相甲醇-5 mmol·L-1乙酸铵(含0.1%冰乙酸),0.4 m L·min-1梯度洗脱,采用正离子多反应监测模式测定何首乌商品药材中10种核苷类成分的含量。结果:10种核苷类成分具有良好的线性关系,相关系数均0.99;何首乌商品药材中核苷类成分尿苷、腺嘌呤、鸟苷、胞苷含量均较高;生何首乌与制何首乌中核苷类成分含量差异明显。结论:该方法简便、灵敏、准确。该研究为何首乌药材内在质量的评价和控制提供可靠的检测方法。     

HPLC法测定商品乌梢蛇中核苷类成分的含量

目的:建立HPLC法测定乌梢蛇药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤的含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱条件为DoamonsilC18(5μm,200mm×4.6mm)柱,以0.05mol/L磷酸水溶液(pH=8.4)为流动相;检测波长为254nm;流速:1mL/min。结果:尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤分别在0.06~0.14μg、0.17~0.50μg、0.27~0.6μg范围内具有良好线性关系(r分别为0.9996、0.9998、0.9996);平均加样回收率分别为102.0%、98.4%、100.3%;RSD分别为2.10%、2.67%、2.89%。结论:该法可用于测定乌梢蛇药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤的含量,从而控制乌梢蛇药材的质量。     

UPLC-MS/MS法同时测定生地黄饮片中7种核苷类成分的含量

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定生地黄饮片中7种核苷类成分(2′-脱氧腺苷、次黄嘌呤、腺嘌呤、腺苷、肌苷、尿嘧啶、尿苷)的含量。方法:采用Waters BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸溶液﹣甲醇为流动相,梯度洗脱;正离子多反应监测(MRM)模式来检测生地黄饮片中7种核苷类成分的含量。结果:7种核苷类成分在相应的浓度范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.9913,加样回收率为98.54%～102.07%,RSD值均小于3.19%。结论:该方法可快速、准确地对生地黄饮片中7种核苷类成分进行定性定量分析。     

疏血通注射液UPLC指纹图谱及5种核苷类成分含量测定研究

[目的] 建立疏血通注射液超高液相色谱（UPLC）指纹图谱及尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷和鸟嘌呤核苷含量测定的方法。[方法] 采用ACQUITY UPLC®BEH Amide色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱，柱温25 ℃，流速0.3 mL/min，检测波长254 nm。建立33批疏血通注射液的UPLC指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件进行相似度分析，同时测定其中5种核苷类成分的含量。[结果] 疏血通注射液指纹图谱及5种核苷类成分含量测定方法的各项方法学考察结果均良好。不同批次疏血通注射液相似度均在0.998以上。33批样品标定了10个共有峰，其中有5个已知峰，分别为尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷、鸟嘌呤核苷。该5种核苷类成分的平均含量分别为34.57、153.50、52.76、53.23和14.46 μg/mL。[结论] 建立的疏血通注射液UPLC指纹图谱及含量测定方法稳定可靠、操作简便，可以为疏血通注射液的质量评价提供参考。     

不同产地和商品等级延胡索中尿苷、鸟苷、腺苷的含量分析

目的:建立高效液相色谱法同时测定延胡索药材中尿苷、鸟苷和腺苷3种核苷成分含量的方法,并比较不同产地、不同商品等级中3种核苷类成分含量的差异和各成分间的结构比。方法:采用Venusil MP C18(2)色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以甲醇(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0~10 min,1%~5%A;10~15 min,5%~15%A;15~22 min,15%~17%A;22~26 min,17%~20%A;26~32 min,20%~24%A),流速1.0 m L·min-1,柱温35℃,检测波长260 nm。运用上述方法对38批延胡索药材进行测定,并对测定结果进行聚类分析。结果:测定了延胡索药材中3种核苷类成分的含量,在线性范围内线性关系良好(r0.999 8),平均回收率为99.63%~104.24%,RSD为0.7%~2.3%。38批延胡索样品中尿苷、鸟苷和腺苷均可检测到,不同产地延胡索药材中尿苷、鸟苷、腺苷量及组成结构比差异显著;同一产地不同种植户的延胡索药材其3种成分量及组成结构比也存在明显差异。采用聚类分析能将不同产地的38批延胡索药材分为3类。结论:总体上来说,不同产地延胡索药材成分的组成存在显著性差异,不同商品等级延胡索中核苷类含量无明显差异,延胡索药材的质量受自然环境、栽培技术因素的影响。该方法适用于延胡索中尿苷、鸟苷和腺苷的含量测定,为其质量控制提供保证。     

HPLC测定地龙中次黄嘌呤,黄嘌呤,尿嘧啶,尿苷的含量

用反相高效液相色谱法对两种地龙中次黄嘌呤、黄嘌呤、尿嘧啶及尿苷进行了含量测定。为检测地龙质量提供了快速可行的新方法和客观指标。     

冬虫夏草中核苷类成分的毛细管区带电泳定量分析研究

目的:建立冬虫夏草中核苷类成分(腺苷、鸟苷、尿苷和次黄嘌呤核苷)的毛细管电泳定量分析方法,研究青海产天然冬虫夏草和人工发酵虫草菌粉的核苷类成分差异。方法:采用0.025mol·L^-1硼砂缓冲液,pH9.5,工作电压为20kV,毛细管温度25℃,波长检测260nm,对4种核苷定量分析。结果:用毛细管区带电泳法定量分析冬虫夏草及人工发酵虫草菌粉中的腺苷、尿苷、鸟苷和次黄嘌呤核苷,平均加样回收率分别为98.9%,95.1%,97.8%和98.8%,RSD分别为0.4%,1.7%,1.3%和5.0%。在天然冬虫夏草中未检测到腺苷,而在人工发酵虫草菌粉中未检测到次黄嘌呤。结论:本研究方法可满意地用于腺苷、尿苷、鸟苷和次黄嘌呤核苷的定量分析。青海产地道药材冬虫夏草核苷类成分组成与人工发酵虫草菌粉有明显差异。     

HPLC法测定商品蛤蚧中核苷类成分的含量

目的建立HPLC法测定蛤蚧药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤的含量.方法采用高效液相色谱法.色谱条件为Doamonsil C18柱(5 μm,200 mm×4.6 mm),以0.05 mol/L磷酸氢二铵水溶液(pH=8.4)为流动相;检测波长为254 nm;流速1 ml/min.结果尿嘧啶、黄嘌啶、次黄嘌呤分别在0.06～0.14 μg、0.17～0.50 μg、0.27～0.6 μg范围内具有良好线性关系(r分别为0.9996、0.9998、0.9996);平均加样回收率分别为102.3%、100.6%、100.7%;RSD分别为1.84%、1.72%、1.65%.结论该法可用于测定蛤蚧药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤的含量,从而便于控制蛤蚧药材的质量.     

高效液相色谱法测定不同产地猴头菇5种核苷类成分含量

目的:建立高效液相法同时测定猴头菇中胞嘧啶、肌苷、尿嘧啶、尿苷和腺苷5种核苷类成分的方法,并比较不同产地猴头菇5种核苷类成分含量。方法:以Inertsil ODS-SP Extend C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)为色谱柱,甲醇-水为流动相,进行梯度洗脱,检测波长260 nm,流速1.0 m L/min,柱温25℃,进样量10μL。结果:胞嘧啶、肌苷、尿嘧啶、尿苷和腺苷5种核苷类成分分别在0.074~1.48、0.0975~1.85、0.068~1.36、0.071~1.42、0.058~1.16μg内呈良好的线性关系(R~2≥0.9995),平均加样回收率分别为98.3%、101.5%、98.9%、99.1%、100.6%,RSD≤2.00%。结论:该方法简单、重现性良好,准确可靠,可为控制猴头菇质量提供参考。     

UPLC法测定不同加工方式梅花鹿鹿茸中的核苷类成分

目的建立UPLC法同时测定梅花鹿鹿茸(花鹿茸)中胞嘧啶、尿嘧啶、腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、肌苷、鸟苷、腺苷、2′-脱氧鸟苷、β-胸苷13种核苷类成分含量的方法,研究不同加工方式的花鹿茸核苷类成分含量的差异及其在不同部位中的分布差异。方法水超声辅助提取花鹿茸样品中的核苷类成分,色谱柱Acquity UPLC?HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm),乙腈(A)-0.006%甲酸水溶液(B)梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min;柱温30℃;进样量3μL;检测波长260 nm。结果 13种成分基本达到基线分离,线性范围内均具有良好的线性关系(r0.999 6);排血茸和带血茸的蜡片、粉片、纱片部位核苷类成分的总量分别是4.47、3.95、2.68 g/kg和4.14、3.44、2.51 g/kg,煮炸茸和冻干茸3个部位核苷类成分的量分别为4.60、2.95、2.74 g/kg和5.06、4.24、2.31 g/kg。结论就核苷类成分总量而言,排血茸蜡片、粉片、纱片部位高于带血茸,冻干茸蜡片、粉片部位高于煮炸茸,纱片部位低于煮炸茸。     

冬虫夏草中核苷类成分含量测定及HPLC指纹图谱研究

目的:建立冬虫夏草中尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷4种核苷类成分含量测定及HPLC指纹图谱分析的方法。方法:采用Grace Prevail C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-甲醇,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长260 nm,柱温25℃。结果:测定了不同产地冬虫夏草药材中4种核苷类成分的含量,并建立了该药材的HPLC指纹图谱,在指纹图谱中共有13个共有峰,并指认了尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷,指纹图谱的相似度均大于0.95,各色谱峰分离效果良好,符合指纹图谱要求。10个不同产地冬虫夏草样品指纹图谱的聚类分析和主成分分析结果相似。结论:该方法较好的反映了冬虫夏草药材中的化学成分信息,重复性好,样品间的相似性良好,说明这一药材所含的核苷类化学成分分布及比例较稳定。将指纹图谱与主成分分析、聚类分析运用于不同来源冬虫夏草的质量鉴别,可为药材特征评价方法的建立提供依据。     

HPLC-DAD同时测定太白贝母中9种核苷类成分的含量

目的:建立同时测定太白贝母中尿嘧啶、胞苷、尿苷、胞腺嘧啶、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、胸苷和腺苷9种核苷类成分的HPLC-DAD方法。方法:采用Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为水-甲醇,梯度洗脱;DAD检测器检测波长260 nm;流速1.0 m L/min;柱温25℃。结果:尿嘧啶、胞苷、尿苷、胸腺嘧啶、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷的线性范围分别为35.6~534 mg/m L、45.2~678 mg/m L、62.1~930 mg/m L、43.2~648 mg/m L、250.2~750 mg/m L、105.3~1 575 mg/m L、206.6~3 099 mg/m L、211.2~3 168 mg/m L、52.6~789 mg/m L,平均加样回收率为97.83%~103.62%,RSD为0.56%~3.22%。不同产地太白贝母样品的9种核苷类成分含量差异较大,其中尿苷、鸟苷含量较高,含量分别为1.41~2.92 mg/g和2.98~7.11 mg/g。结论:该文所建立的方法操作简便,重复性好,准确可靠,可用作太白贝母中9种核苷类成分的含量测定,为太白贝母药材的深度开发提供了研究基础。