6-巯基嘌呤减量治疗3例急性白血病患儿基因突变分析及临床表现

目的：分析6-巯基嘌呤（6-MP）减量化疗的急性白血病（AL）患儿维持治疗阶段临床资料及其巯嘌呤甲基转移酶（TPMT）、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）基因突变情况,探讨其基因型和临床表型的相关性。方法分别提取3例AL患儿骨髓液及77例对照组儿童外周血总RNA并逆转录成cDNA,PCR特异性扩增TPMT和HGPRT基因蛋白质编码区序列并测序。采用美国国立癌症研究所第3版常规毒性判定标准（NCI CTC 3．0）对维持治疗阶段药物不良反应进行评价和分级,应用国家食品药品监督管理局（SFDA）推荐的药物不良反应关联性评价标准评价6-MP与不良反应发生的相关性。结果1例AL患儿为TPMT＊3C（Try240Cys）纯合突变基因型,减少6-MP剂量至常规剂量1/3～2/3可使骨髓抑制及肝脏毒性等重度不良反应转为轻度。对照组发现2例TPMT＊3 C杂合突变,该位点在人群中的等位基因频率为1.3％。以上两组均未发现HGPRT基因突变。结论 TPMT＊3 C纯合突变患儿可出现与6-MP剂量相关的不耐受现象,中断或减量治疗能够减少维持期间严重药物不良反应的发生。提示TPMT＊3 C基因型的检出可能有利于提高6-MP用药的安全性。     

颅脑损伤继发肾上腺皮质功能不全危险因素的研究进展

颅脑损伤因其伤情的严重程度一直具有较高的死亡率,大多数患者的预后较差。近年来随着颅脑损伤急危重症救治理论与临床救治技术的发展,其死亡率有所下降,但与脑外伤后神经内分泌功能广泛异常相关的不利因素,特别是继发的肾上腺皮质功能不全仍在很大程度上影响着患者的预后。对颅脑损伤患者的肾上腺皮质功能进行及时、准确、动态的评估仍然是一个较大的挑战。国内外对肾上腺皮质功能不全危险因素的研究也不断深入,有望对颅脑损伤继发肾上腺皮质功能不全作出早期、及时、全面的评估。     

MTHFR基因多态性与急性白血病易感性的研究

目的 研究汉族儿童亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因多态性与急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)以及急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)发病风险的相关性.方法 对87例ALL患儿、22例AML患儿和120名对照儿童用逆转录-聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳结合DNA测序技术进行MTHFR 677C/T和1298A/C基因的多态性筛查.结果 MTHFR 677CT基因型的个体AML易感性降低(OR=0.23,95％CI:0.07～0.79).未发现MTHFR 1298A/C各基因型与ALL和AML发病风险间存在显著关联.MTHFR 677TT/1298AA和677CC/1298AC基因型ALL发病风险增高(OR=3.78,95％ CI:1.38～10.40;OR=3.17,95％CI:1.18～8.53),677CT/1298AA基因型者AML风险降低(OR=0.23,95％ CI∶0.06～0.97).结论 MTHFR基因677位碱基变异可能是儿童AML遗传易感因素.     

急性白血病儿童γ-谷氨酰水解酶基因452C/T单核苷酸多态性研究

目的 研究γ-谷氨酰水解酶( γ-glutamyl hydrolase,GGH)基因452C/T单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)在急性白血病(acute leukemia,AL)患儿和正常儿童中的频率及分布特征.方法 应用逆转录-PCR-变性梯度凝胶电泳结合DNA直接测序技术,对92例AL患儿和124名正常儿童的cDNAs进行GGH基因第452位点SNP筛查.结果 AL组中GGH 452 TT、CT及CC基因型频率分别为2.2％、13.0％和84.8％;对照组中相应3种基因型频率分别为1.6％、l6.9％和81.5％;两组T等位基因频率分别为8.7％和10.1％;两组间的基因型频率及等位基因频率差异无统计学意义(P＞0.05),但中国儿童与日本、非裔-美洲及墨西哥人群的T等位基因频率差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 确定了中国汉族儿童GGH 452C/T的等位基因频率,并初步确认GGH 452C/T基因多态性存在种、族差异.     

汉族儿童TPMT基因全蛋白编码区SNP检测与分析

摘要：目的：分析汉族儿童巯嘌呤甲基转移酶（TPMT）基因的蛋白质编码区（CDS）突变,探讨其在急性白血病（AL）患儿中的单核苷酸多态性（SNP）。 方法：变性梯度凝胶电泳结合DNA测序检测103例AL患儿及111例对照组儿童的TPMT基因CDS碱基位点突变情况。 结果：汉族儿童TPMT基因筛查出2个蛋白编码区单核苷酸多态性（cSNPs）,分别为TPMT*3C（A719G）和*1S（C474T）。TPMT*3C AA、AG、GG基因型频率在AL患儿组中分别为95.1%、3.9%和1.0%,在对照组中分别为97.3%、2.7%和0,其G等位基因频率分别为2.9%和1.4%;TPMT*1S CC、CT、TT基因型频率在AL患儿组分别为5.8%、24.3%和69.9%,在对照组中分别为8.1%、28.8%和63.1%,其C等位基因频率分别为18.0%和22.5%。2个cSNPs基因型及等位基因频率在两组中分布差异无统计学意义（P＞0.05）。对照组筛查出C210T和TPMT*26（T622C）基因突变。 结论：汉族儿童存在TPMT*26突变基因型,且TPMT*3C、TPMT*1S可能均与儿童AL易感性无关。     

6-巯基嘌呤致急性淋巴细胞白血病患儿不良反应及其与TPMT基因多态性的关系

目的 分析6-巯基嘌呤（6-MP）维持治疗急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿不良反应的发生情况,探讨巯嘌呤甲基转移酶（TPMT）基因多态性与6-MP毒副作用的关系。方法 提取46例ALL患儿骨髓细胞总RNA并逆转录成cDNA。应用变性梯度凝胶电泳（DGGE）结合DNA测序,对ALL患儿TPMT*S和*3C基因型进行检测。采用美国国立癌症研究所第3版常规毒性判定标准（NCI CTC 3.0）行药物毒性分级,分析TPMT基因多态性与6-MP不良反应发生的关系。结果 在维持治疗阶段,22%（10/46）患儿因6-MP所致严重不良反应停药,不良反应主要表现为骨髓抑制、肝脏毒性和胃肠道反应。2例TPMT*3C突变基因型（AG+GG）患儿均出现重度不良反应,其中1例纯和突变患儿出现与6-MP剂量相关的骨髓抑制和肝脏毒性。TPMT*1S各基因型与6-MP所致的重度骨髓抑制及肝脏毒性无明显相关性（P>0.05）。结论 TPMT*3C多态性可能与6-MP所致严重不良反应发生有关。     

急性淋巴细胞白血病患儿MTHFR基因多态性与大剂量甲氨蝶呤毒副反应的关系

目的：探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因单核苷酸多态性对急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿使用大剂量甲氨蝶呤（HD-MTX）化疗后毒副反应的影响。方法：应用RT-PCR-变性梯度凝胶电泳结合DNA测序技术,对52例ALL患儿MTHFR C677T、A1298C和G1793A基因型进行检测。按照国立癌症研究所常规毒性判定标准（NCI-CTC）对患儿HD-MTX化疗后的不良反应统一评价。结果：MTHFR 1298AC基因型患儿发生血小板减少的风险较AA型提高了13.7倍（OR=13.7,95%CI=1.18～159.36,P=0.036）。MTHFR C677T和G1793A各基因型发生各类HD-MTX化疗不良反应的差异无统计学意义（P>0.05）。结论：MTHFR A1298C多态性可能与ALL患儿HD-MTX化疗后的毒副反应相关。     

蛋白质精氨酸甲基转移酶调控骨形成与骨愈合的研究进展

蛋白质精氨酸甲基化是由蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMTs)介导的调控蛋白质功能的重要翻译后修饰(PTM),其与众多疾病的发生发展密切相关。精氨酸的甲基化修饰与炎症相关疾病及骨折愈合关系密切,PRMTs表达下降可导致骨折延迟愈合甚至不愈合。PRMT5、PRMT6在骨折愈合方面均有重要意义,其与PI3K-AKT通路、NF-κB通路息息相关。探讨蛋白质精氨酸甲基化与骨折愈合之间的联系,可为预防骨折延迟愈合甚至不愈合提供新思路。     

急性白血病患儿MTHFR基因G1793A多态性的相关研究

目的 研究亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因G1793A多态性在AL患儿中的等位基因频率和基因型分布特征,及其与儿童AL发病风险的相关性.方法 应用反转录-PCR-变性梯度凝胶电泳结合DNA测序技术,对109例AL患儿和120例对照儿童的cDNA MTHFR G1793A基因型进行检测.结果 在AL组、ALL组、急性髓细胞白血病(AML)组和对照组中MTHFR 1793 GG、GA、AA基因型频率分别为83.5％、15.6％、0.9％;82.8％、16.1％、1.1％;86.4％、13.6％、0和89.2％、7.5％、3.3％;而MTHFR 1793A等位基因频率分别为8.7％、9.2％、6.8％和7.1％;分别将各病例组人群A等位基因频率及基因型分布与对照组进行比较,发现差异均无统计学意义(P均＞0.05);MTHFR 1793 GA+ AA增加了AL、ALL和AML发病风险(AL:OR=1.71,95％ CI:0.77～3.80,P=0.19;ALL:OR =2.00,95％ CI:0.85 ～4.49,P=0.12;AML:OR=1.36,95％ CI:0.33～5.62,P=0.67),但差异均无统计学意义(P均＞0.05);全部标本中A等位基因总频率为7.9％,与德国犹太人、巴西人、奥地利人、伊朗人及中国哈尔滨人群的差异均具有统计学意义(P均＜0.05).结论 MTHFRG1793A基因多态性与汉族儿童AL的发病无相关性,但该位点多态性分布具有种族差异性.     

GGH基因多态性研究及一个新的错义突变T191G的发现

  目的  研究γ-谷氨酰水解酶基因(γ-glutamyl hydrolase, GGH)T16C单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)在急性白血病(acute leukemia, AL)患儿和正常儿童中的频率分布特征, 并以期发现新的多态性位点。  方法  应用DNA直接测序技术, 对90例AL患儿和120例正常儿童的cDNAs进行GGH T16C基因型的筛查。  结果  在GGH的第2外显子发现一新的错义突变T191G, 导致第64位氨基酸由亮氨酸(Leu)被色氨酸(Trp)替代。首次鉴定了中国儿童GGH T16C多态性, 其在AL患儿及正常儿童中的等位基因频率分别为20.0%和17.1%, 两组间的等位基因频率差异无统计学意义(P > 0.05), 表明与白血病的易感性无相关性。  结论  首次确定了国内汉族儿童GGH T16C的等位基因频率, 并发现一新的错义突变GGHT191G。