Ⅳ.MISO对化疗药物的增效作用

肿瘤乏氧细胞对放射抗拒,对化疗药物也抗拒。硝基咪唑类药物是一类有效的乏氧细胞放射增敏剂。其中Miso〔Misonidazole;1-(2-硝基咪唑)-3-甲氧基丙醇-2〕早已作为放射增敏剂在临床试用,也是当今研究最多的一种化疗药物增效剂。所增效的抗癌药物MISO 对双功能基烷化剂和亚硝脲类抗癌药物的增效作用最强。迄今,对环磷酰胺、苯丙氨酸氮芥、环己亚硝脲和阿霉素的研究最多。1979年,Rose 等首先报道MISO 增强苯丙氨酸氮芥对小鼠肿瘤的疗效,对正常组织毒性的影响较小,从而取得了较好的治疗增益。继而,MISO与环己亚硝脲合用,也取得了显而易见的增益效果。对环磷酰胺的研究报道颇多。McNally 对此作了归纳,比较了合用MISO 对不同肿瘤和正常组织的作用,可以作为了解MISO 对环磷酰胺增效的一     

5-硝基吲唑衍生物对HeLa细胞的放射增敏作用

目的 研究5-硝基吲唑-3-甲酰亚氨基二乙酸的细胞毒性,以及对HeLa细胞的放射增敏作用。方法 取指数生长期的HeLa细胞,接种于96孔板,加入不同浓度的药物作用后,用噻唑蓝比色法(MTT法)测定存活分数,并比较不同药物剂量加照射的实验组与单纯照射组的细胞存活分数。结果 5-硝基吲唑-3-甲酰亚氨基二乙酸对HeLa细胞的毒性较小。该药物对HeLa细胞有放射增敏作用,且乏氧处理的效果优于有氧处理:0、6、12、24、48、96μg/ml药物乏氧处理,存活率分别为0.91、0.87、0.84、0.81、0.76、0.60;48、96μg/ml药物有氧处理,存活率分别为0.85和0.73。结论 5-硝基吲唑-3-甲酰亚氨基二乙酸对HeLa细胞的毒性较小,且具有一定的乏氧放射增敏剂特征。     

99Tcm-MAVGG-硝基咪唑硫嘌呤荷瘤小鼠乏氧显像

目的探讨有氧与乏氧条件下^99Tc^m-巯基乙酰基-缬氨酸-甘氨酸-甘氨酸（MAVGG）-硝基咪唑硫嘌呤在肿瘤细胞的摄取及其在荷瘤小鼠体内的生物学分布和显像特点。方法用^99Tc^m-标记双功能螯合剂MAVGG偶联的硝基咪唑硫嘌呤。体外测定有氧与乏氧条件下标记物在S180肉瘤细胞内的滞留率。观察荷瘤小鼠体内生物学分布及其γ显像。结果乏氧条件下标记物与S180肉瘤细胞结合5h后，在S180肉瘤细胞内的滞留率为0．59，高于有氧条件下的0．36。生物学分布显示肿瘤摄取率高，注射后3h肿瘤与肌肉和血液的摄取率比值分别为4．24和1．55。γ显像示肿瘤显影清晰。结论^99Tc^m-MAVGG-硝基咪唑硫嘌呤有望作为新的肿瘤乏氧显像剂。     

新的核苷类药物RP-170的的辐射增敏作用

Miso的神经毒作用主要是由于它的亲脂性.本文介绍了一种核苷类乏氧细胞增敏剂RP-170〔即:1-(2-羟基-1-羟甲基)乙氧基甲基-2-硝基咪唑〕,并与Miso和SR-2508在体内外的增敏、毒性等方面作了比较.体外实验选用Balb/c小鼠的EMT6/KU乳瘤细胞株.经培养的细胞用~(60)Co γ线(剂量率为1.0Gy/min)照射后以集落形成分析检测细胞活性.Balb/c Cr Slc小鼠EMT6/KU瘤和C3H/He N Slc小鼠SCCVⅡ瘤的增长研究用于体内实验.经接种二周后的两     

新的亲电子性硝基呋喃羰酰胺和硝基呋喃羧酸酯的化学合成及其对辐射增敏和生物还原细胞毒素活性的评价

硝基杂环类化合物可用作乏氧细胞辐射增敏剂,它们的增敏效应与单电子还原电位(E_7~1)有关.本文介绍了具有较高电子亲和力的硝基呋喃类化合物的化学合成及其生物效应.5-硝基呋喃类化合物的亲电子能力大于2-硝基咪唑,因此它们的增敏效应比硝基咪唑类化合物     

乏氧组织显像剂99mTc-PnAO-硝基咪唑的制备和初步动物实验

乏氧组织显像剂９９ｍＴｃＰｎＡＯ硝基咪唑的制备和初步动物实验朱霖黄丽娟洪涛孟繁敏张继红张淑秀姚稚明郭风刘蕴忠刘秀杰乏氧组织显像剂可用于心、脑血管及肿瘤疾病的诊断。近年来，国际上已经将９９ｍＴｃＰｎＡＯ硝基咪唑类用于乏氧组织ＳＰＥＣＴ显像研究〔...     

Stattic对乏氧食管癌细胞放射增敏作用机制的研究

目的 观察Stattic对乏氧人食管癌ECA109细胞的体外放射增敏作用,并探讨其可能机制。方法 应用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测Stattic对食管癌ECA109细胞的毒性,细胞克隆形成法确定1.0 μmol Stattic对ECA细胞放疗敏感性的影响,流式细胞法检测细胞的凋亡率,γ-H2AX免疫荧光染色法检测不同时间点下ECA109细胞中双键断裂情况,Western blot检测Stattic照射前后STAT3、pSTAT3、HIF-1α、VEGF蛋白的表达。结果 Stattic对ECA109细胞具有毒性,24 h IC₅₀为5.499 μmol/L,克隆形成实验通过单击多靶模型拟合细胞的存活曲线,计算出1.0 μmol/L Stattic的放射增敏比SER_Do分别为1.20（常氧）和1.28（乏氧）,γ-H2AX荧光染色提示Stattic能增加双键断裂情况,尤其是在照射之后0.5 h最为明显。照射联合给药组的乏氧细胞凋亡率较单独乏氧照射组的细胞凋亡增加（t=7.33,P < 0.05）,Western blot显示乏氧食管癌细胞株pSTAT3、乏氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达升高,Stattic作用24 h表达显著下调。结论 Stattic对乏氧人食管癌细胞株ECA109细胞的毒性呈剂量依赖性,放射增敏作用明显,随药物剂量的增加而增强,其机制可能与抑制pSTAT3、HIF-1α和VEGF蛋白表达有关。     

辐射增敏剂和生物还原剂的作用机理与近期发展概况

辐射增敏剂的基本原理是它能够增加细胞(特别是乏氧细胞)对射线的生物学效应,其中研究得较多的是具有亲电子性的2-硝基咪唑类化合物,如SR-2508,Ro03-8799和RSU-1069等,这些辐射增敏剂都具有较强的增敏作用及各自的特点.在RSU-1069基础上发展起来的双功能性化合物,即具有辐射增敏与生物还原毒性的化合物,能在乏氧条件下通过酶的作用(如细胞色素P450酶系)转变为一系列对乏氧细胞有选择性毒性的代谢物.     

3-硝基三氮唑类衍生物体外放射增敏作用的生物学评价

探讨３－硝基三氮唑衍生物的放射增敏作用，并对其生物学效应作出评价。方法本文用克隆形成法研究了２２个３－硝基－１，２，４－三氮唑衍生物的体外放射增敏活性和乏氧、富氧细胞毒性。结果两个化合物的活性胜过ＭＩＳＯ，有三个化合物与ＭＩＳＯ和ＳＲ－２５０８相当，其余的其活性均较低。３－硝基三唑衍生物也像２－硝基咪唑类那样，其放射增敏活性与电子亲和性（用半波还原电位Ｅ１／２表示）有关。亲和性越大，即Ｅ１／２值越偏正，增敏活性越强。环核Ｎ１位和５位上取代基的结构和性质影响着化合物的Ｅ１／２、分配系数ｐ和细胞毒性。结论３－硝基三唑衍生物对乏氧和富氧（空气）细胞的毒性差别是很有限的，所以它们不是有效的乏氧调节细胞毒剂。但某些的放射增敏作用是值得深入研究的。     

99Tcm-PnAO-硝基咪唑和99Tcm-HL91对乏氧心肌的实验研究

目的 探讨＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＰｎＡＯ－硝基咪唑和＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＨＬ９１２种乏氧心肌显像剂用于实验性心肌缺血、缺氧的作用。方法 进行小鼠体内分布与离体大鼠心脏模型研究,以９５％Ｏ２和５％ＣＯ２平衡的Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ缓冲液进行主动脉逆行灌注为对照组;以Ｎ２取代Ｏ２和ＣＯ２平衡的Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ缓冲液进行逆行灌注为乏氧组;以９５％Ｏ２和５％ＣＯ２平衡的Ｋｅｒｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌ     

微环境乏氧通过肿瘤干细胞途径对脑胶质瘤细胞放射敏感性的影响

目的 探讨微环境乏氧是否能通过肿瘤干细胞途径引起脑胶质瘤放射敏感性的改变以及可能的相关机制。方法 选择脑胶质瘤SHG44和U251细胞株分别在常氧(20% O₂)、乏氧(1% O₂)12和24 h的条件下培养后,应用流式细胞仪检测CD133表达阳性细胞的比例,细胞克隆形成实验绘制细胞存活曲线以观察其放射敏感性,采用Western blotting方法测定基因HIF-1α及其下游基因Notch 1蛋白的表达水平。结果 与常氧培养条件比,SHG44和U251细胞乏氧12和24 h后CD133阳性表达比例明显升高;SF₂(2 Gy照射时的存活分数)均升高。在乏氧12和24 h培养时,SHG44细胞株的氧增强比的值分别为1.54和1.38,而U251细胞株则分别为1.44和1.23,提示在乏氧培养时细胞的放射敏感性下降;与常氧培养条件比,乏氧时HIF-1α和Notch 1的蛋白表达水平均明显升高。结论 微环境乏氧能通过提高肿瘤干细胞的比例而降低脑胶质瘤细胞的放射敏感性,其可能的作用信号途径为HIF-1α - Notch 1。     

一种新的乏氧细胞辐射增敏剂RK—28在肿瘤内的药代动力学

RK—28是日本研制的新的乏氧细胞增敏剂,已进行临床试验,它是2—硝基咪唑核苷类似物,对神经系统毒性较低。实验对手术中放疗(IORT)时肿瘤内RK—28的药代动力学作了详细研究。     

烟酰胺在体内的放射增敏作用:增加肿瘤损伤比正常组织大

一般认为,实体瘤中的乏氧细胞是肿瘤放射治疗存在的主要问题。解决这一问题的最有希望的疗法之一是应用亲电子制剂,增强放射对乏氧细胞的致死效应。最有效的放射增敏剂是硝基咪唑类化合物Misonidazole(MISO)和第二代类似物SR2508与RO03-8799。这三个化合物现已进行广泛的临床试用,但由于神经毒副作用限制了疗效。本文作者试图克服神经毒副作用,研究了结构与硝基咪唑不同、特别是不含硝基的化合物,报告烟酰胺在小鼠体内作用特性的实验结果。资料指出了烟酰胺对小鼠的一般毒性、药代动力学和三种不同肿瘤与二种正常组织的放射增敏作用,并讨论了     

18F-氟赤式硝基咪唑肿瘤乏氧显像实验研究

目的 探讨18F-氟赤式硝基咪唑(FETNIM)在肿瘤乏氧诊断中的应用价值.方法 30只SPCA-1人肺腺癌荷瘤BALB/c裸鼠采用随机数字表法分为A和B 2组(鼠数分别为16和14只).尾静脉注射37 MBq18F-FETNIM后A组分别于注射后0.5,1,2,3 h处死裸鼠,取血液、肺、心、肝、脾、肾、肿瘤等组织测量质量,用γ计数仪测定放射性计数,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g);B组用PO2微电极测量肿瘤组织内乏氧情况.结果 18F-FETNIM在肾中代谢最高,在脂肪和骨骼中代谢较低,肿瘤/正常组织的放射性比值较高,且随时间而增加,2 h达最高,肿瘤/血液放射性比值为1.69±0.37,肿瘤/肌肉放射性比值为1.57±0.47.HE染色显示瘤内有大量的乏氧坏死组织.组织内PO2微电极测量示肿瘤内均有乏氧,肿瘤内PO,1.1～27.7 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).结论 18F-FETNIM在荷瘤裸鼠体内具有较低的外周代谢,脂溶性较低,能被肿瘤乏氧组织摄取,可用于肿瘤乏氧诊断.     

放射增敏剂研究概况

肿瘤乏氧是导致放疗失败的一个重要原因,放射增敏剂由于能提高乏氧细胞对射线的敏感性而受到广泛重视。目前,放射增敏剂的研究包括传统硝基咪唑类化合物、乏氧细胞毒性物、一氧化氮供体、血红蛋白别构效应物和金属卟啉等,它们通过不同作用机制改善组织氧合状态或选择性杀死乏氧细胞,从而提高细胞对射线敏感性。由于肿瘤微环境极其复杂,尽管已合成了大量不同类型的化合物,但尚未发现真正能适用于临床的药物。     

放射增敏剂研究概况

肿瘤乏氧是导致放疗失败的一个重要原因,放射增敏剂由于能提高乏氧细胞对射线的敏感性而受到广泛重视,目前,放射增敏剂的研究包括传统硝基咪唑类化合物,乏氧细胞毒性物,一氧化氮供体,血红蛋白别构效应物和金属卟啉等,它们通过不同作用机制改善组织氧合状态或选择性杀死乏氧细胞,从而提高细胞对射线敏感性,由于肿瘤微环境极其复杂,尽管已合成了大量不同类型的化合物,但尚未发现真正能适用于临床的药物。     

口面部不能手术的肿瘤使用放疗加动脉插管化疗的预后因素

使用局部—区域性动脉内的化疗药物灌注,可以减少副反应而提高药物浓度。肿瘤组织内可有30%的瘤细胞为低含氧或乏氧细胞,而正常组织中仅有0.1%的乏氧细胞,所以由此而造成肿瘤对放疗或化疗的低敏感性。辅助性化疗可能的优点有二:第一,通过动脉插管化疗使肿瘤体积缩小从而使放疗剂量局部处可提高到60～70Gy 而正常组织仍可耐受;第二,此种综合治疗不仅有直接细胞毒作用,尚可对低氧或乏氧细胞作用而起到放射增敏作用。方法为每晨一次经过颈外动脉借助电动泵于     

乏氧诱导因子1α在电离辐射诱导人乳腺癌细胞自噬性死亡中的作用

目的 探讨乏氧诱导因子1α(HIF-1α)在辐射诱导人乳腺癌MCF-7细胞自噬性死亡中的作用。方法 将人乳腺癌MCF-7细胞分为对照组(常氧组,21%氧气)、照射组(8 Gy X射线)、乏氧组 (150 μmol/L CoCl₂)、乏氧加照射组 (150 μmol/L CoCl₂+8 Gy)。150 μmol/L CoCl₂处理细胞模拟乏氧条件。Western blot法检测HIF-1α及MAPLC3蛋白表达;MDC及Hoechst染色方法分别用于检测细胞自噬和凋亡变化情况;克隆形成方法检测细胞辐射敏感性。构建携带人靶向HIF-1α-siRNA的反转录病毒载体,建立MCF-7 HIF-1α Ri沉默细胞模型,将细胞分为对照组(常氧组)、照射组(8 Gy)、乏氧组(CoCl₂处理)、乏氧加照射组(CoCl₂+8 Gy),检测细胞辐射敏感性、自噬及凋亡情况。结果 与对照组和照射组相比,HIF-1蛋白在乏氧组和乏氧加照射组表达明显增加,分别为0、0、1.00和1.89。与对照组相比,MAPLC3蛋白在照射组、乏氧组、乏氧加照射组的表达均明显上调,LC3II/LC3I比值分别为1.15、1.73、2.38和3.60。细胞辐射敏感性顺次降低,常氧+三甲基腺嘌呤(3MA)组>常氧组>乏氧+3MA组>乏氧组。成功构建HIF-1α沉默模型(pSUPER-HIF-1α Ri)与空载体对照模型(pSUPER),并检测了2种细胞的辐射敏感性。与常氧组相比,乏氧组MCF-7-pSUPER细胞存活分数显著增加(t=3.080、6.946、6.658、6.380,P<0.05),辐射敏感性降低。而MCF-7-pSUPER-HIF-1α Ri细胞,常氧与乏氧条件下细胞存活分数无明显改变。不同处理组(照射组、乏氧组和乏氧加照射组)的MCF-7-pSUPER-HIF-1α Ri细胞与MCF-7-pSUPER细胞相比较,自噬百分率分别降低21.1%、25.5%和15.5%(t=-4.635、-4.738、-6.354,P<0.05),但凋亡百分率差异无统计学意义。结论 在人乳腺癌MCF-7细胞中HIF-1α可增加辐射诱导的自噬,同时降低辐射敏感性,对细胞凋亡无影响。     

Miso对低氧细胞的DNA损伤和修复的作用

用碱性蔗糖梯度法测定单链断裂时.在氧中的断裂量是氮中的4倍。但乏氧条件下DNA修复的程度及速度仍不能确定。本文用DNA碱性洗脱测定技术来研究单链断裂的修复动力学及Miso对乏氧细胞的DNA修复的影响。     

硝基咪唑氧肟酸盐类似物(化学修饰剂)作为双功能放射增敏剂的放射增敏毒性和药代动力学特性

化合物2-硝基咪唑1-乙酰氧肟酸钾盐(KIH-802)是MISO的改造物,其中对KIH-802的药代动力学进行了研究。采用ICR小鼠,KIH-802[2’-~(14)C]100mg/kg(24.1kBq/mg)静脉给药,以液