硫酸酯化箬叶多糖的结构修饰及其抗艾滋病病毒活性

从箬叶中分离纯化得到两种箬叶多糖,采用氯磺酸 吡啶作为硫酸酯化试剂,研究反应温度、时间及反应物的摩尔比对硫酸酯化过程的影响。得到产率80%以上,硫含量最高达21.9%的硫酸酯化多糖。发现硫酸酯化会使多糖构象发生一定的改变,硫酸酯多糖在特性粘度、比旋光度、园二色谱等性质方面有不同程度的变化。体外抗艾滋病病毒(HIV)实验表明硫酸酯化箬叶多糖比箬叶多糖具有更高的抑制HIV引起的MT-4细胞病变性的作用,其最低有效浓度达5～10μg·ml^-1,细胞毒性浓度为2.5mg·ml^-1。     

箬叶多糖及其衍生物对小鼠艾滋病作用的研究

目的　研究箬叶多糖及其衍生物硫酸酯多糖和硒酸酯多糖对小鼠艾滋病的治疗作用。方法　采用 Ｌ Ｐ Ｂ Ｍ５ 鼠白血病病毒（ Ｍｕ Ｌ Ｖ） 感染 Ｃ５７ Ｂ Ｌ／６ Ｊ 小鼠的方法建立艾滋病模型。结果　硫酸酯多糖５０ ｍｇ·ｋｇ － １·ｄ － １（ｉｐ） 具有较好地抑制小鼠脾肿大、血清 Ｉｇ Ｇ 增高的作用,硒酸酯多糖在两种给药方式中有一定的保护作用。此外,还首次发现感染小鼠出现 Ｇ Ｓ Ｈ Ｐｘ 活力下降,脂质过氧化产物升高,这与 Ｈ Ｉ Ｖ感染的病人的症状是一致的,硒多糖对提高机体的抗氧化功能有较好的作用。多糖经硫酸酯化、硒酸酯化等化学修饰后,活性有不同程度的提高。结论　作为抗氧化剂和免疫增强剂的微量元素硒和多糖类可能对 Ｈ Ｉ Ｖ 感染的病人有一定的治疗作用     

硫酸酯化虎奶多糖的制备及其抗氧化作用研究

目的对虎奶多糖进行硫酸酯化修饰 ,并研究其抗氧化活性。方法用氯磺酸 吡啶法对虎奶多糖进行硫酸酯化修饰得到硫酸酯化虎奶多糖 (S HNP) ;以Fe2 + Vc为氧自由基生成系统 ,体外观察S HNP对·OH引起的大鼠肝线粒体脂质过氧化损伤的保护作用 ;用化学发光法研究化学模拟体系CuSO4 Phen Vc H2 O2 DNA中S HNP对DNA损伤的保护作用 ;连苯三酚自氧化法观察S HNP对O·- 2 的清除作用。结果S HNP能显著抑制·OH引起的线粒体脂质过氧化产物TBARS的生成、线粒体的肿胀及膜流动性的降低 ;对·OH导致的DNA损伤有一定保护作用 ;对O·-2 有直接清除作用。结论S HNP具有较强的抗氧化活性。     

多糖硫酸酯的药理作用研究进展

多糖硫酸酯（polysaccharide sulfate，Pss）或称硫酸酯化多糖（sulfated polysaccharides，SPS）是指含有硫酸基团的天然及其半合成的酸性多糖，为聚阴离子化合物。自1987年发现硫酸酯化葡聚糖具有抑制艾滋病病毒（HIV）活性以来，发现了许多具有抗多种病毒活性的多糖硫酸酯。此外，人们还发现其具有抗肿瘤、抗凝血、抗氧化、增强免疫等作用，本文就近年来多糖硫酸酯的药理作用研究作一综述。     

灰树花多糖硫酸酯的制备及其抗肿瘤活性

利用碱提酸沉淀法从灰树花(Grifola frondosa)发酵菌丝体中获得的碱提水不溶性多糖GAP,经氯磺酸-吡啶法硫酸化修饰后,即制得能溶于水的硫酸化灰树花多糖.通过DEAE-Sepharose F.F.离子交换柱色谱分离得到一种相对分子量为2.8×104、硫酸基含量为16.4%的硫酸酯化灰树花多糖(S-GAP).S-GAP红外光谱分析表明,在1230 cm-1、810 cm-1有硫酸酯键的特征吸收峰,说明多糖已形成硫酸酯.在体外S-GAP对S-180肿瘤细胞无抑制作用,但对人胃癌细胞SGC-7901有直接杀伤作用.     

牛膝多糖硫酸酯和磷酸酯衍生物对人肺癌A549细胞的影响

目的探讨牛膝多糖硫酸酯(S-AbPS)和磷酸酯(P-AbPS)衍生物对人肺癌A549细胞的影响及其作用机制。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测牛膝多糖、S-AbPS和P-AbPS对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪观察S-AbPS和P-AbPS处理A549细胞后细胞凋亡的改变。结果S-AbPS和P-AbPS对A549细胞的增殖有抑制作用,且存在时间和剂量相关性。S-AbPS和P-AbPS的48 h抑瘤活性均较同浓度的牛膝多糖强。流式细胞仪分析显示,S-AbPS和P-AbPS均可不同程度地诱导细胞凋亡。结论S-AbPS和P-AbPS较牛膝多糖能更有效地抑制人肺癌A549细胞的增殖,其机制可能是通过诱导A549细胞凋亡而实现。     

苯酚-硫酸法测定围乐颗粒中总多糖的含量

目的:建立以苯酚-硫酸法测定围乐颗粒中总多糖含量的方法。方法:样品经Sevag法脱蛋白,以苯酚-硫酸法显色(60℃水浴加热30min),以葡萄糖为对照品,测定围乐颗粒中总多糖的含量。结果:葡萄糖的检测浓度在20·47～102·36μg·mL-1范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0·9994);平均回收率为99·09%,RSD=0·92%(n=6)。围乐颗粒中总多糖的平均含量为41·63%。结论:本方法简单、准确、重现性好,可用于围乐颗粒的质量控制。     

牛膝合剂的制备与质量控制

目的　研究牛膝合剂的制备与质量控制。方法　采用生药粉碎后以水提取、过滤 ,并以薄膜浓缩法和减压干燥法提取牛膝多糖。采用蒽酮 -硫酸法测定多糖含量〔3〕,并进行稳定性实验。结果　以蒽酮 -硫酸法测定多糖含量 ,平均回收率为 94 .34% ,RSD =0 .95 %。结论　牛膝合剂性质稳定 ,应用蒽酮 -硫酸法测定含量准确、可靠。     

牛膝多糖硫酸酯体外和体内抗艾滋病病毒作用

牛膝多糖硫酸酯(Achyranthes bidentata polysaccharide sulfate，ABPS)为牛膝多糖经硫酸酯化修饰后获得的产物，其结构清楚、理化性质稳定及分子质量小，具有抗单纯疱疹病毒、柯萨奇病毒和乙型肝炎病毒等作用。本文研究其在体外和体内的抗艾滋病病毒1型(human immunodeficiency virus type 1，HIV-1)活性。体外采用 ³H掺入法和酶联免疫吸附法测定ABPS对HIV-1逆转录酶和整合酶的活性，其半数抑制浓度(50% inhibiting concentrations,IC₅₀)分别为(2.948±0.556) μmol·L^-1和(0.155±0.030) μmol·L^-1， 但25 μmol·L^-1 ABPS对HIV-1蛋白酶无效。ABPS在MT-4细胞培养内对HIV-1实验病毒株IIIB和在人外周血单核细胞培养内对AZT耐药病毒株的急性感染有较强的抑制作用， 但在HIV-1 IIIB慢性感染的H9细胞培养中则无效。血清药理学研究表明，单次腹腔注射大鼠ABPS 125 mg·kg^-1或连续腹腔注射小鼠ABPS 3 mg·kg^-1(qd×20)后鼠血清在MT-4细胞培养内对HIV-1 P24抗原都有抑制作用，但口服ABPS生物利用度低，灌胃大鼠ABPS 2 g·kg^-1或灌胃小鼠ABPS 300 mg·kg^-1无效。实验结果提示ABPS有抗HIV-1作用，有可能用于防治HIV-1感染，值得进一步研究。     

多糖硫酸酯霜对冻疮的疗效观察

目的:配制多糖硫酸酯霜剂,观察外用对皮肤冻疮的疗效.方法:选择好发性冻疮54例,每日在冻疮部位涂抹5次以上.结果:4周后痊愈39例,显效14例,无效1例,总有效率98.15%.结论:多糖硫酸酯外用对皮肤冻疮有显箸改善及收敛作用.     

磺酰化新茯苓多糖的制备及抗肿瘤作用

利用碱提取酸沉淀法从茯苓Ｐｏｒｉａｃｏｃｏｓ（Ｓｃｈｗ）Ｗｏｌｆ中提取茯苓多糖，再以茯苓多糖为原料用Ｓｍｉｔｈ降解方法制备β（１→３）结合的葡萄糖（新茯苓多糖）．以二甲基甲酰胺──三乙胺──氯磺酸为磺化剂将新茯苓多糖中葡萄糖单位的羟基磺化，即制得能溶于水的部分磺酰化新茯苓多糖。利用离子交换柱层析和分子筛柱层析从总的部分磺酰化新茯苓多糖中精制出一种分子量为２６０００，硫酸酯基含量为２８．８％的部分磺酰化新茯苓多糖（ＳＮＰＣＰ）．通过理化性质和光谱数据鉴定ＳＮＰＣＰ为直链β（１→３）结合的葡聚糖，平均每１０个葡萄糖组成糖单位中有７个的６位羟基被磺酰化。动物实验表明其具有抗肿瘤作用。     

菊粉硫酸酯的制备及其抑真菌活性研究

目的研究菊粉硫酸酯(inulin sulfate,IS)的制备及其抑制真菌活性。方法采用氯磺酸-吡啶法对菊粉(inulin)进行硫酸化修饰,得到IS;采用生长速率法对IS的抑制真菌活性进行测定。结果IS产率为菊粉投料量的128%左右,水溶性好,呈中性,硫取代度(DS)为2.22左右,硫含量为18.2%左右。结论抑菌实验表明IS具有一定抑制真菌的活性。     

螺旋藻中性多糖硫酸化及性质研究

采用氯磺酸-吡啶法对螺旋藻中性多糖进行硫酸化修饰；玫瑰酸钠法测定修饰前后的多糖SO4^2-含量分别为0．17％、20．0％；取代度Ds=0．429；利用琼脂糖凝胶电泳对多糖硫酸酯修饰物进行研究。结果表明多糖硫酸酯修饰物的琼脂糖凝胶电泳呈一均一斑点．与其他几种硫酸化多糖相比迁移率有较大差异；红外光谱法确定硫酸酯键在1270～1200cm^-1．1000～800cm^-1处存在强的特征吸收峰；HPLC显示出一个主要的单峰，说明此制备方法可行。     

Synthesis,characterization and anticoagulant activity of chitosan derivatives

Chitosan derivatives are reported as anticoagulants in the literature. This work was undertaken to develop novel chitosan derivatives as anticoagulants. The sulfonated derivatives of chitosan were formed by the reaction of chitosan derivatives with chlorosulfonic acid in N,N-dimethylformamide. The structures of these derivatives were established by FTIR and ¹H NMR spectra. The prepared derivatives were evaluated for their in vivo anticoagulant effects by the tail bleeding method in Wistar rats utilizing nicoumalone as a standard drug. The results revealed that the sulfonation of the chitosan increases its anticoagulant activity. The developed compounds exhibited faster onset of action and potency than nicoumalone after one hour of the drug administration. The sulphated N-alkyl derivatives of chitosan were more potent anticoagulants than sulfated quaternary derivatives/sulfated chitosan. It is also suggested to develop analogs of Ethyl chitosan sulfate (4b) and Benzyl chitosan sulfate (4c), which may provide some more fruitful anticoagulants having faster onset of action as well as longer duration of action and possessing a balanced hydrophilic/lipophilic character.     

卡立泊来德的合成工艺改进

以对异丙基苯甲酸为原料,经过氯磺化、还原、甲基化、胍解得到卡立泊来德,总收率为45·3%。改进后的工艺路线,降低了成本,简化了操作和反应条件。     

怀牛膝多糖的柱前衍生化-HPLC指纹图谱建立及单糖成分含量测定

目的:建立怀牛膝多糖的柱前衍生化-高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,测定其主要单糖成分的含量,为怀牛膝饮片的质量评价提供参考。方法:以10批不同生产厂家的怀牛膝饮片为样品,采用水提醇沉法提取其多糖后,以三氟乙酸进行水解,再采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化处理后,进行HPLC分析。色谱柱为Hanbon Hedera C18,柱温为30℃,流速为1.2 mL/min,流动相为乙腈-0.02 mol/L乙酸铵溶液(梯度洗脱),检测波长为250 nm,进样量为20μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012A版)建立10批怀牛膝多糖的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,通过与对照品比对进行共有峰指认,并采用SPSS 25.0软件进行聚类分析。采用HPLC法对指认的单糖成分进行含量测定。结果:10批怀牛膝多糖样品的相似度均大于0.95;共标定了9个共有峰,并指认了其中5个共有峰,分别为无水葡萄糖(峰1)、甘露糖(峰2)、鼠李糖(峰4)、半乳糖醛酸(峰5)、阿拉伯糖(峰7)。聚类分析结果显示,编号为S1的样品单独为一类,编号为S2、S5、S8和S9的样品聚为一类,编号为S3、S4、S6、S7和S10的样品聚为一类。含量测定结果显示,10批样品中无水葡萄糖的含量为6.17~17.55 mg/g、甘露糖的含量为3.31~7.66 mg/g、鼠李糖的含量为38.80~73.97 mg/g、半乳糖醛酸的含量为2.49~8.95 mg/g、阿拉伯糖的含量为11.30~28.58 mg/g。结论:本研究建立的柱前衍生化-HPLC指纹图谱及单糖组分的含量测定方法可为怀牛膝饮片质量评价提供参考。     

牛膝药材的红外指纹图谱建立及多元统计分析

目的建立不同产地牛膝药材的红外指纹图谱,并进行多元统计分析。方法采用Spectrum for Window 3.02和OMNIC 9.2软件建立61批牛膝药材样品的红外指纹图谱;以红外指纹图谱共有峰的相对峰高为变量,采用Excel 2016软件进行正态分布分析,采用SPSS 22.0软件进行聚类分析和主成分分析并计算综合得分,采用SIMCA 14.1软件进行正交偏最小二乘法-判别分析,以变量重要性投影(VIP)>1为标准,筛选影响牛膝药材成分质量的标志性波数。结果61批牛膝药材样品红外光谱图的相关系数为0.9672~0.9977;共有13个共有峰。正态分布分析结果显示,河南产与河北产牛膝药材共有峰相对峰高的正态分布曲线未有交叉,河南产与内蒙古产牛膝药材的正态分布曲线存在交叉。聚类分析结果显示,当组间距离为15时,61批牛膝药材样品可聚为3类,其中N1~N12聚为一类,N13~N45聚为一类,N46~N61聚为一类。主成分分析结果显示,前3个主成分的累计方差贡献率为91.121%;河南省焦作市驾步村产牛膝药材(编号N40)的综合评分最高(2.39),河北省安国市新安村产牛膝(编号N4)的综合评分最低(-2.89)。正交偏最小二乘法-判别分析结果显示,61批牛膝药材样品可分为3类,其中N1~N12为一类,N13~N28为一类,N29~N61为一类;共筛选出7个影响药材样品质量的标志性波数,其VIP值从大到小对应的波数依次为1059、927、2933、813、1732、1128、3367 cm^-1,其中1732 cm^-1处为皂苷类成分的特征吸收峰,1059、1128、927 cm^-1处为糖苷类成分的特征吸收峰。结论红外指纹图谱结合正态分布分析、聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析可用于鉴别不同产地牛膝药材。     

粗毛牛膝带腋芽茎段的植株再生研究

目的:研究粗毛牛膝带腋芽茎段植株的再生。方法:以粗毛牛膝带腋芽茎段为外植体诱导腋芽生长,继代诱导生根成完整小植株,考察基本培养基、萘乙酸(NAA)和6-苄基嘌呤(6-BA)浓度3个因素对茎段和腋芽生长的影响。结果:基本培养基MS、6-BA浓度对腋芽的生长有显著影响,最佳的培养基组合为MS+0.1mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA;而在1/2MS+0.5mg·L-1NAA培养基上100%生根。结论:该培养基组合可使粗毛牛膝腋芽诱导生根能力强,且幼根生长健壮,值得推广。     

马尾松花粉多糖硫酸酯化前后对小鼠脾细胞钙离子浓度的影响

研究马尾松花粉多糖硫酸酯化前后对小鼠脾细胞内游离钙离子的影响及作用机理。应用氯磺酸-吡啶法将马尾松花粉多糖进行硫酸化修饰,采用钙离子荧光探针Fura 2-am测定修饰前后的两种多糖对小鼠脾细胞内游离钙离子浓度。马尾松花粉多糖经硫酸酯化后可显著提高脾细胞内钙离子浓度,而酯化前作用不明显。特异性L型钙通道阻滞剂维拉帕米可部分抑制酯化多糖促钙离子浓度升高的作用。在外钙为零时,酯化多糖仍可小幅度提高脾细胞钙离子浓度。马尾松花粉多糖经硫酸化修饰后可通过引发外钙内流和内钙释放两条通路提高脾细胞钙离子浓度。     

土牛膝中齐墩果酸、牛膝多糖的提取与鉴定

目的从土牛膝中提取齐墩果酸和多糖并进行定性定量分析。方法土牛膝水煮液经水浴、酸水解、加碱煮沸后,乙醇回流、抽滤,60℃烘干精制得到齐墩果酸;土牛膝的乙醇热回流后再水提,经过浓缩、沉淀、除杂、抽滤、洗涤、低温干燥得到牛膝多糖。用薄层色谱法和分光光度法进行定性定量·分析。结果齐墩果酸的提取率为0．88%;牛膝多糖的提取率为7．2％。结论通过含量测定结果与提取率对比,本实验方法可行。