LYZL6在正常男性和弱精子症患者精液精子中的表达

目的:探究LYZL6在正常男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异.方法:选取我院2019-06～ 2020-06收治的36例弱精子症患者和同期接受检查健康的15例正常生育男性精液样本作为研究对象,分为弱精症组和正常组.采用荧光定量PCR法检测LYZL6 mRNA在弱精子症患者和正常生育男性精液中的表达差异,采用免疫印迹实验(Western blot)检测LYZL6蛋白在弱精子症患者和正常生育男性精液中的表达差异,分析LYZL6基因在弱精子症患者和正常生育男性精液中的表达差异.结果:正常男性和弱精子症患者精液精子中LYZL6 mRNA均未见明显表达;弱精子症组患者精液精子中LYZL6蛋白明显低于正常组差异有统计学意义(P＜0.05).结论:正常男性和弱精子症患者精液精子中的LYZL6蛋白存在差异,提示LYZL6蛋白可能其在弱精子症中扮演着非常重要的角色,可为揭示弱精子症的病因及其临床诊疗提供新思路.     

补肾生精汤配合针刺治疗少弱精子症45例

目的观察补肾生精汤配合针刺治疗男性少弱精不育症的临床疗效。方法将确诊为少弱精子症的患者90例随机分为治疗组和对照组,各45例。治疗组采用补肾生精汤配合针刺治疗;对照组单纯采用针刺治疗。以1个月为1个疗程,共3个疗程。治疗前后均做常规精液分析,观察精子参数变化。结果治疗组治愈率和总有效率均优于对照组（P〈0.01）,其液化时间、精子密度、精子活力、精子成活率及精子畸形率均显著改善,精子运动功能也得到显著改善,均明显优于对照组（P〈0.05）。结论补肾生精汤配合针刺可明显改善少弱精子症精液参数,治疗男性少弱精不育症的疗效显著。     

少弱畸精子症患者服用营养素前后精子质量、生育率及丙二醛含量的变化

目的观察少弱畸精子症患者服用营养素前后精子质量,生育率和血清及精浆中丙二醛(MDA)含量的变化。方法选择少弱畸精子症不育患者110例,按照WHO精液检验方法进行精液常规检验。采用硫代巴比妥酸比色法测定血清和精浆中MDA含量。采用B超方法对其配偶进行妊娠诊断,以确定生育率。本实验的分组为服用营养素前后自身对照。结果服用营养素前后精子活力均值精子密度、精子活力、精子畸形率、MDA水平和生育率间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论营养素可提高男性少弱畸精子症患者的精子密度,精子活力,降低精子畸形率,并使血清和清浆中MDA含量下降,生育率提高。本试验结果为少弱畸精子症患者寻找更好的治疗方法提供了依据。     

不育男性精浆叶酸、维生素B12检测及意义

目的探讨精浆FOL与维生素B12(VitB12)与男性不育的关系。方法采用酶化学发光技术对1053例不育男性患者精浆FOL与VitB12进行检测。结果①1053例患者中精液正常534例(50.7%),弱精症275例(26.1%),少精症57例(5.4%),少弱精子症162例(15.4%),无精子25例(2.4%);②5组叶酸含量均差异无统计学意义(P>0.05);③与精液正常患者相比,少精症及少弱精子症患者精浆VitB12含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),无精症患者精浆VitB12含量降低差异有统计学意义(P<0.01),而弱精症患者没有明显变化(P>0.05)。结论VitB12对精子的发生和精子质量具有重要的作用。     

弱精子症患者精子中LDH-C4表达的变化

目的测定弱精子症患者精子乳酸脱氢酶同工酶C4的含量,探讨其在对弱精子症发病机制中的意义。方法选择90例原因不明的弱精子症患者为研究对象,按弱精程度分为轻中重精三组,选择活力正常的健康人30例为对照组。精液乳酸脱氧酶C4测定采用定量检测试剂盒,用两点法测定。结果弱精子症患者精子乳酸脱氢酶同工酶C4较对照组均有明显下降,与对照组差异有显著P〈0.05）,且与精子的活力具有相关性（r=0.765,P〈0.05）。结论乳酸脱氢酶C4表达水平下降可能导致弱精子症的形成,是弱精子症发生的环节之一。     

回顾性分析丈夫精子情况与宫腔内夫精人工授精临床妊娠率的关系

目的对宫腔内夫精人工授精夫妇的丈夫精子资料进行回顾性分析,观察不同精子情况与临床妊娠率的关系。方法选择2004年²012年因不孕症在中山市博爱医院生殖医学中心进行宫腔内人工授精(IUI)治疗的夫妇1646对共3178个周期。根据丈夫精子分为畸形精子症、畸弱精子症、弱精子症、少精子症、少弱精子症、少弱畸精子症、精浆异常、正常精液8组。观察总结临床妊娠率与丈夫精子情况的关系。结果总体IUI临床妊娠率为12.4%(394/3178)。8组丈夫精子情况与临床妊娠率均无明显关系。结论 IUI临床妊娠率受多种因素影响,与丈夫精子情况无明显相关性。     

宫颈癌中H19基因的特异表达模式及印记缺失分析

目的探讨H19等位基因在宫颈癌中特异性表达的模式,H19基因的基因组印记缺失与宫颈癌两者之间的关系。方法结合PCR和限制性片段长度多态性分析（RFLP）技术以及DNA甲基化检测技术分析我院收集的宫颈癌标本H19等位基因进行杂合子筛选,并进一步研究基因组印记缺失与宫颈癌两者之间的关系。结果在36例宫颈癌中筛选出16例杂合子现象的标本,在这16例杂合子标本中,有7例发生了基因组印记缺失;H19基因发生基因组缺失现象与其启动子区域的高度去甲基化正相关。结论H19基因的基因组印记缺失可能和宫颈癌的发生有着高度的相关性。     

维力康胶囊提高男性不育患者血清睾酮的临床观察

目的研究维力康胶囊对男性生殖功能的影响。方法对106例不育症患者应用维力康胶囊3个月,观察其血清睾酮等指标的变化。结果维力康胶囊可显著提高不育症患者血清睾酮含量,改善少精子症及弱精子症患者精液的各项指标。结论维力康胶囊是治疗少弱精子症性男性不育的有效药物。     

CRISP2基因在不同类型精子发生障碍中的表达及其意义

【摘要】目的探讨不同类型精子发生障碍男性精液中CRISP2mRNA的表达水平及其意义。方法150例男性不孕患者分为正常组、弱精子组、少精子组各50例,提取精液细胞总RNA,通过实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）测定3组精子中CRISP2基因的mRNA转录水平并进行比较。结果CRISP2在正常组中的相对表达量（10.281±2.173）显著高于弱精组（2.092±0.969）,差异有统计学意义（P<0.05）,正常组与少精子组（9.420±2.794）差异无统计学意义（P>0.05）,而弱精子组的CRISP2相对表达量也显著低于少精组（P<0.05）。结论CRISP2在不同精子发生障碍男性中的表达显著不同,CRISP2表达的减少可能导致精子活力下降。     

天力Ⅰ号治疗少、弱精子症110例

目的观察天力Ⅰ号冲剂治疗少、弱精子症的临床疗效。方法选择少、弱精子症110例患者,予天力Ⅰ号冲剂治疗3个月,于治疗前及治疗后30,60,90d进行精液常规检测。结果与治疗前比较,治疗后精子密度,精子活动率均有明显提高,上述指标差异有显著性(P<0.05)。结论天力Ⅰ号冲剂可以提高少、弱精子症患者精子密度及精子活动率,改善精液质量。     

冠心病患者MMP-9基因DNA去甲基化及其异常表达的研究

目的冠心病患者中金属基质蛋白酶-9异常表达和冠心病发表机制和病情进展密切相关,但是其基因水平的调节机制还不清楚。本研究为明确表观遗传学调节机制是否参与冠心病患者中MMP-9的异常表达。方法纳入明确诊断稳定型心绞痛32例、急性心肌梗死患者20例以及冠脉造影正常对照39例,从外周血单个核细胞提取基因组DNA,亚硫酸氢钠处理DNA,采用甲基化敏感的PCR,通过设计特异性的针对甲基化和非甲基化的MMP-9启动子序列的引物,进行PCR扩增后检测PCR产物的浓度并结合基因测序以测定其甲基化程度,分组进行比较和统计学分析,同时ELISA测定血浆中MMP-9的浓度。结果和对照组相比,稳定型心绞痛患者和急性心肌梗死患者MMP-9基因启动子区域甲基化密度明显降低(6.1±2.5%vs 42.3±5.2%,P<0.05;25.6±4.7%vs42.3±5.2%,P<0.05),且在急性心肌梗死中去甲基化集中在部分位点;SCHD组以及AMI组患者和对照组相比,其血浆MMP-9的浓度都显著升高(11.4±1.7vs0.72±0.27,21.6±3.2 vs0.72±0.27,P<0.05)。结论动脉粥样硬化患者MMP-9的基因启动子区域部分CpG位点甲基化水平降低,并和患者血浆MMP-9的浓度升高一致,提示DNA甲基化可能参与动脉粥样硬化中金属基质蛋白酶的表达调节。     

克拉霉素与复方玄驹胶囊序贯治疗解脲支原体感染引起的精液异常

目的探讨解脲支原体（UU）感染引起男性不育患者精液质量异常的治疗方法。方法将891例uu阳性的男性不育患者随机平均分为三组,三组治疗前精液质量比较差异无显著性,A组克拉霉素干混悬剂治疗,转阴后三个月复查精液常规;B组复方玄驹胶囊治疗三个月复查精液常规;C组克拉霉素干混悬剂治疗转阴后复方玄驹胶囊治疗三个月复查精液常规。结果A组和C组治疗后与同组治疗前比较,患者精子浓度[A组：（45．14±4．361×10^6／mlvs（32．67±4．34）×10^6／ml;C组：（55．14±5．56）×10^6／mlvs（32．59±4．11）×10^6／ml、前向运动PR[A组：（26．24±8．45）％vs（20．53±9．52）％;C组：（30．24±9．45）％vs（20．76±9．25）％]、正常形态率陋组：（4．85±4．78）％vs（3．42±4．68）％;C组：（5．75±4．56）％vs（3．43±4．66）％],差异有统计学意义（A组P〈0．05、C组P〈0．01）;B组治疗后与治疗前比较,患者精子浓度[（33．81±4．43）X106／mlvs（31．92±4．10）×10^6／ml]、前向运动PR[（20．78±9．54）％vs（21．38±931）％]、正常形态率[（3．35±4．82）％vs（3．38±4．71）％],差异无统计学意义（P〉0．05）;C组与A组和B组治疗后精液质量比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论克拉霉素干混悬剂与复方玄驹胶囊序贯治疗能有效提高解脲支原体感染引起的男性不育患者的精子浓度、前向运动PR、正常形态率。     

脑胶质瘤中Hint1基因甲基化状态与表达的研究

目的探讨脑胶质瘤中Hint1基因启动子区的甲基化与表达情况。方法采用MSP和Western-blit法检测Hint1基因在脑胶质瘤和正常脑组织中甲基化状况及对应表达情况。实时荧光定量PCR的方法检测Hint1 mRNA的表达情况。结果经检测正常脑组织和胶质瘤Hint1基因启动子区域呈非甲基化状态,在83例胶质瘤患者脑组织中Hint1 mRNA的平均表达量为0.5190±0.0280,高于在30例正常脑组织中的平均表达量0.2236±0.0300。Hint1 mRNA的表达量与患者年龄、性别等临床特征无明显相关性而与患者的临床分期密切相关（P〈0.01）。结论脑胶质瘤中Hint1基因启动子区域呈非甲基化状态,其表达程度与患者的临床分期密切相关。     

10-羟基喜树碱对肝癌细胞HepG2 DNA甲基化水平的调节作用研究

目的:研究10-羟基喜树碱对肝癌细胞Hep G2的DNA甲基化水平的调节作用。方法:体外培养Hep G2细胞,分为给药组(10-羟基喜树碱25μg/ml)和空白对照组,每组6个小组,每小组5个平行孔,分别于给药后24、48、72 h各组取2个小组,一组用MTT法检测Hep G2细胞的生长抑制率;另一组提取Hep G2细胞的DNA,酸水解后高效液相色谱法检测其甲基化率。结果:10-羟基喜树碱作用24、48、72 h后,Hep G2细胞的生长抑制率分别为(61.6±4.9)%、(85.7±0.7)%、(97.9±0.7)%;给药组Hep G2细胞DNA甲基化率分别为(2.81±0.34)%、(6.67±0.24)%、(6.83±0.24)%,明显高于相应的空白对照组[(1.88±0.13)%、(1.91±0.11)%、(1.98±0.18)%](P<0.05),且与作用时间呈正相关。结论:10-羟基喜树碱在抑制Hep G2细胞的生长的同时提高了细胞DNA的甲基化水平。     

缺氧缺血性脑病新生儿血清神经元特异性烯醇化酶浓度动态变化的意义

目的探讨新生儿窒息后缺氧缺血性脑病（HIE）患儿血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）的动态变化及意义。方法收集2005年1月～2012年12月住院治疗的足月窒息新生儿75例（窒息组）和健康足月新生儿50例（对照组）,采用酶联免疫吸附试验法检测两组新生儿出生后1、3、7d时血清NSE浓度变化,并分析其变化与窒息后HIE的关系。结果出生后1、3、7d,窒息组新生儿血清NSE浓度均明显高于对照组[（44．50±12．08）μg/L vs（15．59±6．25）μg/L,（42．65±12．43）μg／L vs（15．38±5．84）μg/L,（37．90±9．50）μg／Lvs（13．92±5．37）μg／L],差异有统计学意义（P〈0．05）。重度窒息新生儿血清NSE浓度明显高于轻度窒息新生儿[（58．95±14．85）μg／Lvs（29．15±9．32）μg/L,（62．95±19．13）μg/Lvs（22．35±5．75）μg/L（57．35±13．75）μg／Lvs（18．45±5．25）μg／L],差异有统计学意义（P〈0．05）。出生后1、3、7d,HIE新生儿19例血清NSE浓度逐渐升高,而MRI正常新生儿56例血清NSE浓度逐渐下降,HIE新生儿血清NSE浓度均明显高于MRI正常新生儿[（59．84±15．09）μg／Lvs（32．95±12．86）μg／L,（63．95±19．21）μg/L vs（25．73±6．75）μg／L,（68．25±19．79）μg／Lvs（19．62±5．94）μg/L,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论监测血清NSE浓度动态变化有助于早期辅助判断窒息新生儿HIE。     

Toll样受体2基因小干扰RNA对高氧所致氧化应激状态下肺泡上皮细胞功能的影响

目的探讨Toll样受体2（TLR2）基因小干扰RNA（siRNA）对体外高氧暴露条件下A549细胞TLR2基因、蛋白表达及其下游信号通路功能的影响。方法肺泡上皮细胞株A549置于6孔培养板培养,完全随机分为4组：N组（正常培养组）、H组（高氧组）、T组（高氧±TLR2-siRNA转染组,转染化学合成TLR2-siRNA）和C组（高氧±阴性对照siRNA转染组,转染化学合成含对照序列的阴性对照-siRNA）。运用脂质体转染技术介导化学合成siRNA转染,其中H组、T组和C组细胞高氧培养6h后,流式细胞术检测转染后A549细胞5．羧基荧光素双醋酸盐的表达率,实时定量荧光聚合酶链反应方法检测各组A549细胞TLR2mRNA的表达水平,流式细胞术方法检测各组A549细胞TLR2蛋白表达变化,凝胶电泳迁移率实验检测各组细胞核因子KB核转录水平,酶联免疫吸附测定方法检测各组上清液中白细胞介素6（IL-6）和IL-8含量。结果转染后A549细胞5-羧基荧光素双醋酸盐的表达率为（92．3±9．6）％;经高氧处理后,H组和C组的TLR2mRNA、TLR2蛋白水平、核因子KB核转录水平较N组均明显上调[（1．68±0．02）、（1．52±0．06）比（1．26±0．02）,（9．1±0．8）、（7．8±1．4）比（5．9±2．8）,（484±64）、（378±38）比（46±3）]（P〈0．05）,各组上清液IL-6、IL-8含量较N组也明显升高（P〈0．05）;而T组TLR2mRNA表达（0．87±0．06）、TLR2蛋白表达（2．8±0．4）、核因子KB核转录水平（228±29）和上清液IL-6、IL-8含量较H组和C组均明显下调[IL-6：（48．5±6．3）ng／L比（66．7±7．8）、（59．6±6．5）ng／L,IL-8：（125±19）ng／L比（773±96）、（971±149）ng／L]（均P〈0．05）;T组与N组相比,各项检测指标表达差异也有统计学意义（P〈0．05）。结论针对TLR2mRNA的小干扰RNA可以部分抑制高氧诱导的A549细胞的炎症反应,但是并不能完全阻断核因子KB-炎症因子信号通路。     

康复期强制戒毒人员淋巴细胞基因组DNA甲基化水平的研究

目的：检测康复期强制戒毒人员淋巴细胞基因组DNA甲基化的水平。方法：抽提康复期强制戒毒人员和正常人淋巴细胞基因组DNA，采用整体甲基化定量试剂盒检测基因组DNA甲基化水平。结果：分别对80例康复期强制戒毒人员和正常健康人群进行淋巴细胞基因组DNA甲基化水平检测发现，与正常组相比，康复期强制戒毒人员淋巴细胞基因组DNA甲基化百分率为15．37％±s3．28％，显著低于正常组甲基化百分率23．18％±s7．98％，具有统计学意义（P〈0．05）。不同年龄、性别组淋巴细胞基因组DNA甲基化百分率差异不显著（P〉0．05）。不同吸毒年限组中，吸毒年限为〉10a组淋巴细胞基因组DNA甲基化百分率为10．01％，显著低于其他各组，差异具有统计学意义（P=0．028）。结论：康复期强制戒毒人员淋巴细胞基因组DNA甲基化水平显著低于正常人水平，吸毒时间越长，淋巴细胞基因组DNA甲基化水平降低更为显著。     

骨关节炎患者关节软骨TIMP-3启动子区甲基化水平的初步研究

目的探讨关节软骨中组织金属蛋白酶抑制因子-3（TIMP～3）基因启动子区甲基化与其蛋白表达的相关性,并分析TIMP一3基因CpG岛异常甲基化与骨关节炎（OA）的关联性。方法应用甲基化特异性的聚合酶链反应（MSP）技术和免疫组织化学SP法分别检测14例健康人的正常关节软骨细胞和35例骨关节炎（OA）患者软骨细胞TIMP-3基因启动子区甲基化和蛋白表达情况。结果OA患者和健康人关节软骨中TIMP-3基因启动子区均有甲基化修饰,其阳性率分别为74.3％（26／35）和35．7％（5／14）,0A组TIMP-3基因启动子区甲基化率明显高于健康组（P〈0．05）。14例健康人中,软骨细胞TIMP-3蛋白表达阳性10例（71．4％）,而35例OA患者中,软骨细胞TIMP-3蛋白表达阳性11例（31．4％）。24例OA患者软骨细胞蛋白表达阴性的标本中．TIMP-3启动子区甲基化阳性21例（87．5％）;26例TIMP-3启动子区甲基化阳性的标本中,蛋白表达阴性21例（80．8％）,TIMP-3启动子区甲基化与蛋白表达呈显著负相关（P〈0．05）。结论启动子区CpG岛高甲基化是OA患者关节软骨细胞TIMP-3表达失活的主要机制之一,其可能参与了OA的发生和发展。     

癌高甲基化1同源盒基因A9基因启动子甲基化在卵巢癌早期诊断中的意义

目的探讨癌高甲基化1(HIC1)、同源盒基因(HOX)A9基因启动子甲基化状态与卵巢肿瘤发生发展的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测33例卵巢癌、10例卵巢良性肿瘤及10例卵巢正常组织中HIC1、HOXA9基因启动子的甲基化状态。结果33例卵巢癌中HIC1和(或)HOXA9基因启动子甲基化的频率是52%(17/33),显著高于卵巢良性肿瘤及卵巢正常组织(15%,3/20,P<0.05);临床Ⅰ、Ⅱ期HIC1和(或)HOXA9基因甲基化的频率是64%(9/14),明显高于临床Ⅲ、Ⅳ期(26%,5/19,P<0.05);高分化组和中分化组HIC1和(或)HOXA9基因甲基化的发生率30%(7/23)低于低分化组(80%,8/10,P<0.05);HIC1和(或)HOXA9基因甲基化与卵巢癌组织学类型无明显相关性(P>0.05);HIC1和(或)HOXA9基因甲基化,患者患卵巢癌的风险增加5.7倍;病程早期HIC1和(或)HOXA9基因甲基化,患卵巢癌的风险增加5.0倍。结论HIC1和(或)HOXA9基因启动子甲基化与卵巢癌的发生有关,提示联合检测这2个抑癌基因的异常甲基化可用于卵巢癌的早期临床诊断。