用HPLC-MS/MS法同时测定患者血浆中吉非替尼、厄洛替尼、尼洛替尼和伊马替尼的浓度

目的 建立同时测定吉非替尼、厄洛替尼、尼洛替尼和伊马替尼血药浓度的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。方法 用乙腈沉淀蛋白法处理血浆样品,用Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 3.5μm)进行色谱分离,流动相为0.1%甲酸水(A)—0.1%甲酸乙腈(B);梯度洗脱,流速为0.7 mL·min^-1,柱温40℃,进样量3μL。以安罗替尼为内标,用电喷雾电离源,采用正电离模式,以多反应监测的方式进行扫描。考察该方法的专属性、标准曲线、定量下限、精密度、准确度、回收率、基质效应和稳定性。测定20例慢性粒细胞白血病(CML)患者伊马替尼和厄洛替尼的谷浓度及3例非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉非替尼和厄洛替尼的谷浓度。结果 4种药物的标准曲线分别为吉非替尼：y=2.536×10^-3x+9.372×10^-3(线性范围20～2 000 ng·mL^-1,R²=0.996 6),厄洛替尼：y=3.573×10^-3x+7.406×10<...     

慢性髓系白血病患者体内尼洛替尼血药浓度测定方法建立与应用

摘要：目的:采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）建立测定人血浆中尼洛替尼浓度的检测方法。方法:血样经甲醇除蛋白后,流动相分别为0.1%甲酸的甲酸铵缓冲液（A相）和0.1%甲酸的乙腈溶液（B相）梯度洗脱,Luna???C18柱（20 mm×2.0 mm, 3μm）色谱柱分离,流速为0.6 ml·min-1;柱温35℃;电喷雾离子源（ESI）,正离子模式,多反应监测,离子对为m/z 530.1→m/z 288.9 （尼洛替尼）、m/z 502.3→m/z 394.1（伊马替尼-D8）。结果:尼洛替尼的线性范围为50～10 000 ng·ml-1,定量下限为50 ng·ml-1;日内及日间RSD均小于10%,尼洛替尼低、中、高浓度的提取回收率分别为98.5%,102.4%,103.3%。结论:本检测方法操作简单、灵敏度高、检测下限低、专属性强,适用于临床慢性髓系白血病（CML）患者血浆中尼洛替尼的检测。     

高效液相色谱法测定吉非替尼PLGA微球吉非替尼的含量

目的建立吉非替尼PLGA微球中吉非替尼含量测定的方法。方法色谱柱为Cosmosil C18（250 mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-0.1 mol L-1磷酸二氢钾溶液（37：63）,流速为1.0mL min-1,检测波长为250nm,柱温为30℃。结果吉非替尼线性范围为10.04～60.24μg mL-1（r=0.999 9）;平均回收率为98.6%,RSD=1.0%（n=9）。结论该方法操作简便、灵敏度高、重复性好,可作为该剂型质量控制的方法。     

肺癌患者血浆中安罗替尼浓度与不良反应的相关性研究

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定安罗替尼血药浓度的方法,探讨安罗替尼血药浓度与不良反应的相关性。方法:血浆样品采用乙腈沉淀蛋白进行前处理,以[D5]-氘代安罗替尼为内标;色谱柱:ACQUITY UPLC BEH C₁₈(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流动相:0.01%氨水-甲醇;梯度洗脱,流速0.5 mL·min^-1;柱温40 ℃;进样量0.5 μL;电喷雾离子源,正离子方式,多反应监测模式。对UPLC-MS/MS进行方法学考察,将其用于测定肺癌患者血浆中安罗替尼浓度,收集相关病例的不良反应信息,分析两者之间的相关性。结果:血浆中安罗替尼在5~250 ng·mL^-1内线性关系良好,定量下限为5 ng·mL^-1,标准曲线为y=0.007 2x+0.004 9(r=0.999);批内和批间精密度、提取回收率及稳定性考察均符合要求。共测定了51例患者血浆中安罗替尼的稳态谷浓度,其中8 mg组27例患者的平均质量浓度为(29.08±8.35)ng·mL^-1;12 mg组24例患者的平均质量浓度为(40.79±23.91)ng·mL^-1。发生高血压、蛋白尿、手足综合征或促甲状腺激素升高的患者平均血药浓度均高于未发生相关不良反应患者的平均血药浓度(P＜0.05),相关风险的阈值浓度分别为31.22,23.13,43.15 ng·mL^-1和45.59 ng·mL^-1。结论:该方法准确简便、快速灵敏、重现性好,可用于测定肺癌患者体内安罗替尼的血药浓度。较高的安罗替尼稳态谷浓度会增加患者高血压、蛋白尿、手足综合征和促甲状腺激素升高的发生风险。     

用二维高效液相色谱法测定人血浆中奥希替尼浓度

目的 建立二维高效液相色谱测定人血浆中的奥希替尼，为其血药浓度检测提供分析方法。方法 在二维高效液相色谱法中，一维色谱柱：SX1-SCX(25.0 mm×3.5 mm, 5μm),流速：0.7 mL·min^-1;二维色谱柱：SCB-C₁₈(125.0 mm×4.6 mm, 5μm),流速：1.2 mL·min^-1。柱温：40℃;紫外检测波长：330 nm,进样量：500μL。考察该方法的专属性、标准曲线与最低定量限、精密度与回收率、稳定性。结果 血浆中奥希替尼在10.51～1 051.23 ng·mL^-1呈良好线性关系，标准曲线方程为y=725.25x-3 026.02(R²=0.999 8),最低定量限为5.25 ng·mL^-1,低、中、高3个质控样品的提取回收率在95.87%～98.12%,日内和日精密度均低于5.22%,说明该方法检测性能良好。结论 该方法具有灵敏度高、抗干扰能力强、稳定性好，适用于奥希替尼的血药浓度监测。     

HPLC法测定人血浆中吉非替尼的浓度

目的:建立一种简便、快速的高效液相色谱法测定人血浆中吉非替尼的浓度。方法:在100μL含待测药物的血浆中加入内标厄洛替尼和乙腈混匀沉淀蛋白。采用Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-10mmol.L-1醋酸铵溶液(70∶30),流速为1.0 mL.min-1,进样量为20μL,柱温为室温,分析时间为12 min。结果:吉非替尼在89.38～8938 ng.mL-1的浓度范围内线性关系良好(r>0.999),日内与日间精密度(RSD)<7.02%,准确度(RE)<±8.84%,所有稳定性考察结果均符合要求。结论:本文采用蛋白沉淀预处理方法以及高效液相色谱法测定人血浆中吉非替尼的浓度,能够满足临床试验中生物样品分析的需要。     

奥希替尼一线治疗非小细胞肺癌药物经济学评价

摘要：目的:基于卫生服务体系的角度,评价奥希替尼相对于标准表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制药（EGFR-TKI）吉非替尼或厄洛替尼一线治疗非小细胞肺癌（NSCLC）的经济性。方法:基于FLAURA临床试验数据建立Markov模型,以增量成本-效果比（ICER）为指标评价奥希替尼与标准EGFR-TKI（吉非替尼或厄洛替尼）的成本-效果。模型周期为1个月,基线分析时间跨度设为5年,折现率为5%。采用单因素敏感度分析和概率敏感度分析对结果的不确定性进行评价。结果:5年的模拟结果显示,与标准EGFR-TKI组相比,奥希替尼组多获得0.73质量调整生命年（QALYs）,成本增加了42.3万元。ICER为57.9万元/QALY,超过了3倍人均国内生产总值（GDP）;敏感度分析结果提示,贴现率和奥希替尼的费用对总成本影响最大,其他参数影响较小。结论:奥希替尼一线治疗能延长NSCLC患者的生命年,提高生命质量,但同时也增加医疗成本。根据WHO 3倍人均GDP的判断标准,使用奥希替尼不具有成本-效果优势。     

HPLC法测定人血浆中伊马替尼的浓度

目的：建立简单而灵敏的人血浆中伊马替尼浓度的HPLC测定方法。方法：采用利奈唑胺为内标,用10%高氯酸甲醇溶液沉淀蛋白,色谱柱为Xbrige C18（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-5 mmol·L-1磷酸二氢钾溶液（pH 3.0）（20：80）;流速为1.0 ml·min-1,柱温为40℃;检测波长为268 nm。结果：伊马替尼在0.120 mg·L-1范围内线性关系良好,r=0.999 6,定量下限为0.1 mg·L-1,平均绝对回收率84.60%,方法回收率在97.51%103.97%之间。高、中、低3种浓度的日内、日间RSD均小于10%。采用此法测定6名服用伊马替尼的患者,结果血药浓度范围为0.351.69 mg·L-1,均在标准曲线的定量范围内。结论：本方法简单、快捷、灵敏、准确,适用于伊马替尼临床血药浓度的监测。     

舒尼替尼用于对吉非替尼耐药的非小细胞肺癌的作用研究

目的:探讨舒尼替尼用于对吉非替尼耐药的非小细胞肺癌的效果及其作用机制。方法:选取2017年1月至2019年1月内蒙古自治区人民医院收治的非小细胞肺癌患者75例,对其肿瘤组织进行切除,提取肿瘤细胞后进行原代培养,提取细胞总RNA并测定其纯度以及浓度。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测舒尼替尼对吉非替尼耐药的非小细胞肺癌细胞的增殖抑制作用;采用Western blot法检测舒尼替尼处理后对吉非替尼耐药细胞中的多药耐药(MDR)、核因子κB(NF-κB)、血管内皮生长因子(VEGF)及血小板衍生生长因子(PDGF)蛋白表达水平。结果:1.5μmol/L的舒尼替尼对吉非替尼耐药细胞的半数抑制浓度(IC50)为(30.57±1.86)μmol/L,明显低于0μmol/L舒尼替尼对吉非替尼耐药细胞的IC50[(45.62±1.79)μmol/L];舒尼替尼可显著增加耐药细胞对吉非替尼的敏感性,可降低吉非替尼的IC50;此外,舒尼替尼还可明显降低耐药细胞中的MDR、NF-κB、VEGF及PDGF蛋白表达水平,其中PDGF蛋白表达水平降低44.38%,影响最为显著。结论:吉非替尼与舒尼替尼具有协同作用,舒尼替尼可逆转对吉非替尼耐药的非小细胞肺癌的疗效,为临床应用提供更多理论依据,其机制仍需进一步研究。     

HPLC法测定达沙替尼片中主药和有关物质的含量

目的:建立测定达沙替尼片中主药和有关物质含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Gemini C18,流动相为0.1mol·L-1醋酸铵缓冲液-甲醇(25∶75),流速为1.0mL·min-1,检测波长为248nm,进样量为20μL。结果:达沙替尼与有关物质等分离较好;达沙替尼检测浓度的线性范围为20.0～100.0μg·mL-1(r=0.9999);平均回收率为99.76%(RSD=0.68%);3批样品中有关物质含量为0.13%～0.22%。结论:本方法操作简便、快捷,结果准确、可靠,可用于达沙替尼的质量控制。     

盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌Ⅲ期临床试验

目的观察比较盐酸埃克替尼与吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效及毒副反应。方法随机双盲双模拟、阳性药物平行对照的方法,13例患者接受盐酸埃克替尼125mg,口服,3次/日,或对照药为吉非替尼250mg,口服,1次/日。结果治疗晚期非小细胞肺癌,盐酸埃克替尼的疾病进展时间（TTP）108天,吉非替尼的疾病进展时间（TTP）96天,盐酸埃克替尼总生存时间（OS）6月,吉非替尼OS4.8月。两组患者均无严重毒副反应。结论盐酸埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效与吉非替尼疗效等同,毒性反应低。     

伊布替尼血药浓度检测方法的建立及临床应用

目的 建立检测伊布替尼血药浓度的方法并应用于临床。方法 以泽布替尼为内标，血浆样本以固相萃取柱处理后，采用高效液相色谱（HPLC）法检测伊布替尼的浓度。以Agilent 5 TC-C18(2)为色谱柱，乙腈-0.5%磷酸二氢钾溶液（43∶57,V/V）为流动相，流速为1 mL/min，检测波长为260 nm，柱温为40℃，进样量为20μL，运行时间为25 min。采用上述方法测定9例非霍奇金淋巴瘤患者第30天用药后2 h时血浆中伊布替尼的浓度。结果 伊布替尼检测质量浓度的线性范围为10～500 ng/mL(R 2=0.998 9)，定量下限为10 ng/mL；批内、批间精密度试验的RSD均不高于12.77%；提取回收率分别为74.80%、97.70%,RSD均小于2.90%；稳定性试验的RSD均小于7.10%。9例患者的血药浓度为15.341～279.628 ng/mL。结论 所建立的HPLC法简单、快捷，可用于伊布替尼血药浓度的测定。     

人血浆中羟氯喹高效液相色谱测定方法的建立及其应用

摘要：目的:建立一种实用的HPLC法测定人血浆中羟氯喹的血药浓度,并将其应用于患者的治疗药物监测。方法:取人血浆样品300μl加入乙腈沉淀,取上清液加入的二氯甲烷萃取,取二氯甲烷层挥干后加入流动相复溶,进行色谱分析。采用DIKMA C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱分离,以0.02 mol·L-1磷酸二氢钾-乙腈（88∶12,v/v,pH=3.00）为流动相,检测波长:215 nm,流速:1.0 ml·min-1,进样体积:20μl,甲硝唑作为内标物质。采用建立的方法分析患者用药后血浆标本。结果:羟氯喹在0.1～3.0μg·ml-1线性关系良好（r=0.998 7）,低、中、高质控样本(0.25,1,2μg·ml-1)的批内、批间精密度RSD均小于12%,准确度介于91%～102%,提取回收率为（68.56±2.33）%,内标物质的提取回收率为64.99%,短期稳定性、长期稳定性、冻融稳定性均RSD小于6.27%。14名患者的平均血浆谷浓度为（0.99±0.38）μg·ml-1。结论:本方法操作简便、灵敏度及准确度均较高,适用于人体羟氯喹血药浓度的检测。     

RP-HPLC法测定吉非替尼分散片的含量

目的:建立测定吉非替尼分散片中主药含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18(2),流动相为乙腈-0.015%三氟乙酸(26:74,三乙胺调pH值为3.9),流速为1.0mL.min-1,检测波长为344nm,柱温为30℃。结果:吉非替尼检测浓度线性范围为0.08～6.05μg.mL-1(r=0.9998);平均回收率为100.55%,RSD=1.28%(n=9)。结论:该方法操作简便、快速、重复性好,可用于吉非替尼分散片的含量测定。     

DC-CIK联合吉非替尼对A549细胞抑制作用分析

目的探讨DC-CIK联合吉非替尼对A549细胞的抑制作用。方法实验分DC-CIK组、吉非替尼组、DC-CIK联合吉非替尼A、B组（A组吉非替尼6.9umol/L;B组吉非替尼13.8umol/L）用MTT比色法检测各组对A549增殖的抑制率,流式细胞仪检测各组A549细胞的周期变化及凋亡。结果吉非替尼组对A549细胞的抑制率最低为（37.19±1.5）%、细胞凋亡率亦最低32.4%,DC-CIK联合吉非替尼B组抑制率最高为（69.62±2.30）%、凋亡率亦最高72.86%,各组对A549细胞的抑制作用差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 DC-CIK联合吉非替尼（吉非替尼13.8umol/L）能有效的抑制A549细胞增殖,促进其凋亡。促进非小细胞肺癌的治疗。     

LC-MS/MS法测定荷瘤小鼠血浆和肿瘤组织中拉帕替尼的浓度

目的建立测定荷瘤小鼠血浆和肿瘤组织中拉帕替尼浓度的LC-MS/MS法。方法血浆和肿瘤组织样品采用甲醇沉淀蛋白后进样测定,以吉非替尼为内标。色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×2.1 mm,5 mm),流动相:甲醇-水(含2 nmol·L-1醋酸铵和0.1%甲酸)(90∶10),流速0.4 m L·min-1,柱温40℃,进样量20μL,总分析时间3 min。质谱采用电喷雾离子源,以多反应离子监测模式进行定量分析。结果拉帕替尼在血和肿瘤组织中的线性范围分别为25~25 000μg·L-1和1~2 000μg·L-1;批内RSD分别≤1.4%和8.3%,批间RSD分别≤3.7%和7.8%;提取回收率分别为99.4%~102.3%和87.7%~94.1%;基质效应均在85%~115%内。结论本方法灵敏度高,准确、快速,适于测定拉帕替尼口服后到达肿瘤组织的浓度。     

枸橼酸托法替尼片剂的含量测定

目的 建立枸橼酸托法替尼片剂含量测定的方法.方法 采用岛津Wonda Cract ODS-2(250×4.65mm,5μm)为色谱柱,柱温30℃,流动相为10mM KH2PO4溶液(用NaOH溶液调节pH值为6.8)-乙腈(75∶25),流速为1.0mL·min-1,检测波长为210nm.结果 托法替尼在0.0374~0.125mg·mL-1浓度范围内呈良好的线性相关(r=0.9998),平均回收率为99.27%,RSD为0.31%.结论 本法准确可靠,可用于枸橼酸托法替尼片剂的质量控制.     

吉非替尼的药理作用和临床应用概况

目的了解吉非替尼的药理作用与临床应用概况。方法查阅吉非替尼相关的国内外资料,并对其进行综述。结果吉非替尼单药或联合治疗晚期非小细胞肺癌疗效肯定,患者耐受性好。结论吉非替尼治疗表皮生长因子受体（EGFR）突变的非小细胞肺癌（NSCLC）患者有较好疗效。     

UPLC-MS/MS测定大鼠舌下静脉注射阿西替尼的血药浓度及其药动学研究

目的 建立UPLC-MS/MS对舌下静脉注射大鼠血浆中阿西替血药浓度的检测方法,并进行其药动学研究。方法 乙腈沉淀法处理样品,以伊马替尼为内标,Waters Acquity BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,流动相为0.1%甲酸水和乙腈。流速为0.3 mL·min^-1,柱温35℃。质谱条件为电喷雾电离源（ESI）,检测方式为正离子电离、多离子反应监测（MRM）检测。结果 阿西替尼血药浓度在0.1~100 ng·mL^-1内线性关系良好（r=0.999 6）,定量下限为0.1 ng·mL^-1。日内、日间精密度RSD<5.56%,提取回收率>87.87%。大鼠血浆中的阿西替尼在室温、4℃,-80℃,12 h后以及反复冻融3次后均有良好的稳定性,且不存在基质效应。结论 建立的测定阿西替尼血药浓度的方法准确、简单、快速,可以为阿西替尼的临床研究提供实验参考和依据。     

LC-MS/MS法同时测定伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼及伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑的血药浓度

目的:建立同时测定血浆中3种一线络氨酸激酶抑制剂(伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼)和3种一线三唑类抗真菌药物(伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑)浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,并应用于临床进行治疗药物监测。方法:血浆样品50μL加入氯氮平内标20μL,采用乙腈直接沉淀蛋白法处理样品后稀释进样分析。采用Welch XB-C₁₈(2.1 mm×50 mm, 5.0μm)色谱柱进行色谱分离,流动相A为10 mol·L^-1甲酸铵溶液,流动相B为甲醇-乙腈-异丙醇(7∶1.5∶1.5,含0.2%甲酸),梯度洗脱,流速0.72 mL·min^-1,进样量6μL,色谱分析时间3.5 min;采用电喷雾离子源,正离子扫描,多反应监测模式进行测定。结果:6种分析物线性范围均满足检测需求,线性系数均≥0.997,各浓度的批内与批间RSD≤10.3%,回收率为98.6%～111.6%,方法准确度为94.3%～109.5%。此外,收集并检测6名同时接受伊马替尼和伏立康唑治疗的白血病患者,血药浓度范围分别为0.418～2.697μg·m...