UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1（UCA1）/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1（CPEB1）轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR（RT-qPCR）检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度（IC50）;通过肿瘤基因组图谱（TCGA）数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌（AUC=0.849）,进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。     

沉默长链非编码RNA FAM83H-AS1提高肺腺癌细胞的化学治疗敏感性

目的 探讨长链非编码RNA FAM83H-AS1调控肺腺癌细胞化学治疗（简称化疗）敏感性（培美曲塞和顺铂）的作用效果及机制。方法 实时定量PCR法检测FAM83H-AS1在肺腺癌组织和细胞系中的表达。CCK8法检测并计算肺腺癌细胞对培美曲塞和顺铂的半抑制率（IC50）。基于TCGA数据库，应用生物信息学方法分析FAM83H-AS1与ATP结合盒亚家族C成员1 (ABCC1)基因表达的相关性。Western boltting检测ABCC1蛋白的表达。结果 与癌旁正常肺组织和人肺泡上皮细胞相比，FAM83H-AS1在肺腺癌组织和细胞系（PC9和A549）中高表达。FAM83H-AS1的表达与肺腺癌患者的吸烟史和化疗不敏感呈正相关。与化疗敏感的肺腺癌组织和细胞系（A549）相比，FAM83H-AS1在化疗（培美曲塞和顺铂）耐药的肺腺癌组织和细胞系（A549/CR）中高表达。沉默FAM83H-AS1能够降低A549/CR细胞对培美曲塞和顺铂的IC50，提高对化疗药物的敏感性。在肺腺癌中FAM83H-AS1与多药耐药相关基因ABCC1的表达呈正相关。沉默FAM83H-AS1能够降低A549/CR...     

吉西他滨联合卡铂治疗复发性上皮性卵巢癌48例近期疗效分析

目的：评价吉西他滨联合卡铂治疗复发性上皮性卵巢癌48例的近期疗效及不良反应。方法：选取复发性上皮性卵巢癌48例,采用吉西他滨联合卡铂化疗26例,随机采用顺铂联合环磷酰胺化疗22例作为对照组,吉西他滨为800 mg/m2第1 d和8 d,卡铂（AUC5）第1 d,顺铂70 mg/m2,环磷酰胺700 mg/m2,均静脉用药,3~4周重复1次,共6~8疗程。结果：48例均可评价疗效,吉西他滨联合卡铂组治疗有效率69.2%,顺铂联合环磷酰胺组治疗有效率40.9%,两组间疗效比较有统计学意义（P〈0.05）,吉西他滨联合卡铂组反应较轻。结论：吉西他滨联合卡铂可作为复发性上皮性卵巢癌化疗的首选药物,治疗有效率优于传统的顺铂联合环磷酰胺化疗方案,化疗反应轻,值得推广应用。     

卵巢癌脑转移8例临床分析

卵巢癌的扩散以腹、盆腔种植为主要转移途径,血行扩散、脑转移极少见。我院1982～1998年共收治卵巢癌患者818例,其中8例出现脑转移。总结报告如下。1　临床资料1.1　一般情况　初治时期2例,期4例,期1例,外院治疗后复发1例。浆液性囊腺癌5例,粘液性囊腺癌2例,透明细胞癌1例。1.2　脑转移发生时间　诊断卵巢癌至脑转移的时间9～94.8个月,中位30.2个月。1.3　治疗　发生脑转移前8例均行全子宫双附件、大网膜、阑尾切除术,术后6例行含顺铂方案化疗,1例行米尔法兰口服加盆腔放射治疗,1例行非顺铂方案化疗。发生转移后,4例行化疗或化疗 全脑放疗,4…     

妇科肿瘤

缺氧诱导因子-1α及血管生长因子与晚期卵巢浆液性癌腹膜播散和预后相关性分析；PTEN蛋白在卵巢子宫内膜异位囊肿及卵巢子宫内膜样癌组织中的表达及临床意义；1，25（OH）2D3联合顺铂对卵巢癌细胞株HO8910增殖及Skp2／P27蛋白表达的影响；紫杉醇与奥沙利铂联合化疗治疗晚期卵巢上皮性癌的临床观察；卵巢透明细胞癌70例临床分析     

VCBP方案超大剂量化疗消除卵巢癌块

根据药理学的研究 ,抗癌药一般难以渗入并溶解大于 2ｃｍ以上的卵巢癌块。但对化疗敏感的较大肿瘤 ,只要反复多次局部用药 ,死亡的细胞层被消除 ,药物仍可继续产生细胞毒作用而发挥连续效应〔1〕。我们结合卵巢癌的细胞周期规律 ,设计用对卵巢癌有显效的顺铂 ,以短期超大剂量腹腔化疗为主的ＶＣＢＰ(长春新碱、环磷酰胺、平阳霉素加顺铂 )方案治疗。治疗中发现 3例卵巢癌块消失。1　资料及方法1 1　临床资料　该 3例均为我院经病理确诊的卵巢癌患者 ,其中 2例分别为化疗后手术 ,确诊为浆液性乳头状囊腺癌和转移卵巢癌 ,1例经腹水细胞检查确…     

7例原发性腹膜癌的诊治

目的探讨原发腹膜癌的诊断及治疗。方法对7例原发腹膜癌的临床资料进行分析。结果本组年龄48～69岁,从症状出现到就诊时间3周～4个月,以腹胀、腹部增大为主诉,均有腹腔积液5,例有盆腔包块,手术后病理诊断7例均为浆液性乳头状腺癌。均行肿瘤细胞减灭手术及化疗（顺铂部分腹腔灌注）,本组患者治疗后CA125 3例接近正常,4例达到正常,疗效评价完全缓解。结论原发腹膜癌起病隐匿,发展迅速,腹胀、腹水老年女性患者有原发腹膜癌的可能,肿瘤细胞减灭术和以顺铂为主的化疗是目前治疗原发腹膜癌的有效方法,采用顺铂部分腹腔灌注化疗可降低药物毒性。     

miR-141-3p表达与卵巢癌细胞顺铂化疗敏感性的相关性研究

［摘要］ 目的 探讨miR-141-3p在卵巢癌细胞对顺铂耐药中的表达和作用。 方法 采用实时荧光定量PCR法检测A2780/DDP细胞中miR-141-3p的表达水平;下调/过表达miR-141-3p后,采用CCK-8法检测卵巢癌细胞对顺铂的增殖率并计算药物IC50;采用Western blot法检测增殖相关蛋白（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达水平。 结果 miR-141-3p在顺铂耐药的卵巢癌细胞株A2780/DDP中的表达显著高于顺铂敏感的卵巢癌细胞株A2780（P＜0.05）。与对照组比较,A2780细胞中过表达miR-141-3p后可显著增加细胞对顺铂的IC50,增殖相关蛋白PCNA表达亦增加（P＜0.05）。与对照组比较,A2780/DDP细胞中下调miR-141-3p表达后,细胞对顺铂的IC50显著下降,增殖相关蛋白PCNA表达下降（P＜0.05）。 结论 miR-141-3p在顺铂耐药卵巢癌细胞的耐药机制中表达增加,下调miR-141-3p可增加顺铂耐药的卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。     

GPC3在卵巢透明细胞腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)在卵巢透明细胞腺癌中的表达及临床意义?方法:采用免疫组织化学方法分别检测83例卵巢癌组织(透明细胞腺癌45例?浆液性癌20例?黏液性癌18例)?20例浆液性囊腺瘤及20例正常卵巢组织中GPC3蛋白的表达情况,实时荧光定量PCR法检测38例卵巢癌组织(透明细胞腺癌20例?浆液性癌10例?黏液性癌8例)?5例浆液性囊腺瘤和5例正常卵巢组织中mRNA的表达情况,并分析GPC3与卵巢透明细胞腺癌临床病理学参数及预后的相关性?结果:①卵巢透明细胞腺癌中GPC3蛋白阳性表达率和mRNA表达量(82.2%;1.326 1 ± 0.493 6)均明显高于浆液性癌(20%;0.426 5 ± 0.029 4)?黏液性癌(5%;0.265 2 ± 0.103 9)?浆液性囊腺瘤(0%;0.141 3 ± 0.011 3)?正常卵巢组织(0%;0.291 4 ± 0.048 1),差异有统计学意义(P均 < 0.01);②GPC3蛋白阳性表达率及GPC3 mRNA表达量与卵巢透明细胞腺癌的临床分期有相关性,Ⅲ~Ⅳ期患者中的表达(100%;1.808 1 ± 0.265 7)显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者(71.4%; 1.045 8 ± 0.403 6)(P值 < 0.01);③卵巢透明细胞腺癌铂类药物耐药患者GPC3蛋白阳性表达率及mRNA表达量(100%; 1.808 1 ± 0.265 7)均高于铂类药物敏感型患者(70.3%; 0.991 8 ± 0.330 3)(P < 0.05);④GPC3蛋白阳性表达率与卵巢透明细胞腺癌患者的预后相关,预后差的患者中阳性率及表达量高,差异有统计学意义(P < 0.05),Kaplan-Meier单因素生存分析亦显示GPC3蛋白为影响预后的因素(P=0.048);⑤卵巢透明细胞腺癌中GPC3蛋白阳性表达率和mRNA表达量与患者的淋巴结转移和远处器官转移无相关性(P > 0.05)?结论:GPC3在病理鉴别诊断中有重要意义,GPC3与卵巢透明细胞腺癌患者的临床分期和铂类耐药相关,提示其可能在卵巢透明细胞腺癌的发生发展起重要作用,有望成为卵巢透明细胞腺癌的预后指标和潜在治疗靶标?     

血清白蛋白水平与铂类为主联合化疗所致骨髓、肾毒性的关系(摘要)

以铂类为主的联合化疗广泛用于治疗上皮性卵巢癌,本院自1989年1月始统一采用PC方案(即顺铂或卡铂和环磷酰胺方案)治疗此类患者。由于环磷酰胺代谢物和顺铂均与血清蛋白有高结合率,因此,血清蛋白水平的降低可使药物游离部分的浓度增加,由此推测由化疗药物所引起的骨髓、肾毒性也将增加。我们通过测定卵巢癌患者化疗前的血清白蛋白水平、化疗前后的外周血白细胞数(表示骨髓毒性)和血清肌酐值(表示肾毒性),探讨化疗前低血清白蛋白水平与铂类为主的联合化疗对骨髓、肾毒性的潜在影响。     

罗勒多糖对顺铂等三种化疗药物抑瘤增效作用的实验研究

目的 :研究罗勒多糖与顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶三种化疗药物合用对不同组织来源的肿瘤细胞株的生长抑制作用,以期明确罗勒多糖对化疗药物抑瘤增效适用范围。方法:体外培养人肺腺癌A549细胞株、人喉癌Hep-2细胞株和人胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测定罗勒多糖对顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶抑制上述肿瘤细胞生长的增效作用。结果:罗勒多糖联合顺铂、盐酸吡柔比星和氟尿嘧啶共同作用48 h可明显提高三种化疗药物对A549细胞、Hep-2细胞和SGC-7901细胞的生长抑制作用,且其作用具有一定的剂量依赖性。结论:罗勒多糖对多种化疗药物抑制不同组织来源的肿瘤细胞株的生长具有增效作用,提示罗勒多糖对化疗药物抑瘤增效具有广泛适用性。罗勒多糖是一种潜在的化疗增效药物,也可以作为化疗辅助的功能食品开发应用。     

不同放化疗敏感性的食管癌细胞株中MGMT和Survivin的表达

目的 比较3株食管鳞癌细胞株对放化疗的敏感性,并检测O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)和生存蛋白(Survivin)在其中的表达情况.方法 MTT实验检测3株细胞系在不同浓度顺铂和氟尿嘧啶药物中的存活分数,并利用半数抑制浓度(IC50)值评估细胞株对化疗药物的耐受性;克隆形成实验检测3株细胞系在不同剂量照射后的存活分数, 并利用单击多靶模型拟合剂量存活曲线计算放射生物学参数D0、Dq、N、SF2以评价3株细胞系对放射线的敏感性;Western blot和qRT-PCR检测3株细胞系中MGMT和Survivin的表达.结果 TE-1在顺铂和氟尿嘧啶中的IC50值高于KYSE-70;TE-1 较KYSE-70对放射线耐受(P<0.05).Western blot和qRT-PCR显示MGMT和Survivin的表达在TE-1中均高于KYSE-70,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MGMT和Survivin在对化疗和放疗耐受的细胞株中表达水平较高,在对化疗和放疗敏感的细胞株中表达较低,这为更好地研究食管鳞癌放化疗耐受机制提供了实验依据.     

胰岛素对人食管癌及肺腺癌化疗增效作用的研究

目的：探讨用胰岛素提高癌细胞生长代谢水平对化疗敏感性的影响。方法：选用人食管癌（NEC）及人肺腺癌细胞（GLC）为靶细胞,以胰岛素为细胞生长代谢促进剂,采用MTT比色分析法,分析细胞活力及细胞代谢,用流式细胞仪做细胞周期分析。结果：MTT比色分析法发现,胰岛素（2．0－15.0mU/ml)可增强足叶乙甙（30μg/ml)的细胞毒作用;细胞周期分析表明,胰岛素可增加顺铂、足叶乙甙、5－氟尿嘧啶对GLC的S期阻滞,增效幅度约80％;可增加5－氟尿嘧啶所致的G2M期阻滞,增效幅度约90％。细胞周期阻滞的最终结果是细胞死亡。同时发现胰岛素对NEC细胞的化疗增效作用较小。结论：初步证实“提高癌细胞的生长代谢水平,继之给予化疗,可提高化疗药物细胞毒作用”,为临床化疗增效提供了新的途径,具有理论及实践意义。     

灯盏花素改善肿瘤化疗药物对小鼠lewis肺癌的治疗指数

目的:观察灯盏花素对肿瘤化疗药物治疗效果的影响。方法:MTT法检测灯盏花素体外对阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶诱导脾脏细胞凋亡的保护作用;将lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠皮下和肺,采用灯盏花素联合阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶治疗小鼠,观察肿瘤大小、外周血细胞数、骨髓细胞数、脾细胞凋亡、及小鼠存活时间。结果:灯盏花素体外对阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶诱导的脾脏细胞凋亡有保护作用。在体研究,治疗组均有比未治疗组不同比例的肿瘤生长减慢,单独化疗导致骨髓细胞和外周血细胞数减少、脾细胞凋亡增加。实验结束时,与单一药物治疗相比,灯盏花素联合化疗均能显著延长小鼠存活时间。单独化疗虽比未治疗组小鼠存活时间稍长,但无统计学差异。结论:单独化疗对伴随肿瘤转移的荷瘤小鼠生命延长无实际意义,灯盏花素能改善肿瘤化疗药物的治疗指数。     

细胞块技术在恶性浆膜腔积液组织来源及分子病理检测中的应用

目的 探讨细胞块免疫组化技术在恶性浆膜腔积液组织来源及分子病理检测中的应用价值。 方法 抽取 42 例患者 的恶性浆膜腔积液,分层离心获取肿瘤细胞并制作成细胞蜡块,应用 HE 染色、免疫组化染色、基因测序等方法对其进行检测。 结果42 例患者中,利用恶性浆膜腔积液细胞块明确组织分型及组织来源 40 例,其中肺癌 29 例（腺癌 24 例、鳞癌 3 例、小细胞癌 2 例）,恶 性淋巴瘤 2 例,胃肠道癌 4 例,乳腺癌 4 例,卵巢癌 1 例。29 例肺癌样本中 24 例进行了肺腺癌基因检测,其中 9 例表皮生长因子受体 基因突变,包括 E19（del E746-A750）缺失突变 6 例和 E21（L858R）替代突变 3 例。 结论 细胞块技术对于恶性浆膜腔积液的诊断 有重要临床意义,有助于明确诊断并查找组织来源,同时能够进行组织分型及分子病理检测,有效指导肿瘤的分子靶向治疗。     

乳源免疫调节肽通过泛素-蛋白酶体途径抑制卵巢癌耐药性及其机制研究

目的 研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)抑制卵巢癌耐药性及其机制.方法 MTT法检测PGPIPN与抗癌药顺铂(DDP)联合用药抑制人卵巢癌敏感细胞株(SKOV3)、耐药细胞株(SKOV3-DDP)和原代卵巢癌细胞的半数抑制浓度(IC50)和细胞增殖抑制率,PCR法和Western blot法检测人卵巢癌细胞株和原代卵巢癌细胞用药情况下泛素-蛋白酶体途径相关基因的表达.结果 PGPIPN和DDP联合用药细胞增殖抑制率显著高于单独DDP组或PGPIPN组,差异有统计学意义( P＜0. 05),PCR和Western blot结果表明 PG-PIPN通过调节泛素-蛋白酶体途径相关基因表达降低卵巢癌细胞的耐药性. PGPIPN促进SIAH和PSMA1 表达,降低β-catenin基因的表达(P ＜0. 05,P ＜0. 01),且有剂量依赖性.结论 PGPIPN通过泛素-蛋白酶体途径降低卵巢癌细胞对DDP的耐药性.     

化疗药物不同配伍诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡

目的通过对临床常用化疗药物５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）、丝裂霉毒（ＭＭＣ）、卡铂（ＣＢＰ）、阿霉素（ＡＤＭ）和表阿霉素（Ｅ－ＡＤＭ）相互配伍诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡的观察,探讨化疗药物抑制胰腺癌细胞生长的作用机制,为临床制定合理的化疗方案提供理论依据。方法不同配伍的化疗药物作用于胰腺癌细胞后,以倒置显微镜和荧光显微镜观察其形态变化;以流式细胞仪检测细胞ＤＮＡ含量的变化,计算出凋亡细胞的比例;提取细胞ＤＮＡ,进行凝胶电泳确定细胞凋亡的发生。结果联合化疗可以诱导胰腺癌细胞凋亡,与引起细胞坏死相比,诱导肿瘤细胞凋亡的化疗药物剂量小、作用时间短;随作用时间的延长和药物剂量的增加,凋亡细胞的比例也增加;不同配伍的化疗药物诱导不同胰腺癌细胞株细胞发生凋亡的情况是不完全相同的。结论诱导肿瘤细胞凋亡是化疗药物抑制胰腺癌细胞生长的主要机制,能否诱导胰腺癌细胞发生凋亡可作为判断不同配伍的化疗药物抑制胰腺癌细胞生长能力的重要指标之一。     

High dose cisplatin compared with high dose cyclophosphamide in the management of advanced epithelial ovarian cancer (FIGO stages III and IV): report from the North Thames Cooperative Group

A randomised study comparing cisplatin 120 mg intravenously with cyclophosphamide 2 g intravenously, each drug being given every month for six months followed by a low dose regimen for a further six months in responding patients, was carried out in 86 patients with advanced epithelial ovarian carcinoma (FIGO stages III and IV). Patients given cisplatin were found to have a longer median survival time than those given cyclophosphamide (19 months compared with 12 months) and a longer median duration of complete clinical response (18 months compared with eight months). The difference in disease free survival was statistically significant even after factors such as age, stage of disease, and the completeness of initial surgery had been taken into account. This study suggests that cisplatin is a more effective chemotherapeutic agent than cyclophosphamide for advanced ovarian cancer and should be the agent of choice in future trials comparing combination chemotherapy with a single agent.     

DAC和顺铂在前列腺癌细胞株中协同作用的实验研究

目的探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-2’-deoxycytidine（DAC）与顺铂（CDDP）在前列腺癌细胞中的协同抑制作用。方法采用WST-1法研究DAC和CDDP对4种前列腺癌细胞株的毒性作用,Isobolographic分析检验二者的协同作用。应用流式细胞仪分析联合作用在细胞凋亡诱导和细胞周期捕获中的作用,通过caspase活性和PCNA蛋白表达研究DAC和CDDP在前列腺癌中的协同作用机制。结果DAC能够明显增加前列腺癌细胞对CDDP的敏感性,在所有前列腺癌细胞株中DAC和CDDP均具有协同作用。DAC可诱导G2／M期细胞周期捕获,而CDDP通过诱导凋亡（subG1期）和G2／M期捕获两方面抑制细胞生长。DAC可增强CDDP介导的caspase活性升高和PCNA表达的下调,导致subG1期和G2／M期细胞的增加。结论DAC和CDDP在雄激素依赖和非依赖性前列腺癌细胞株中均具有协同作用,二者联合可改善前列腺癌预后,值得临床推广。     

抗肿瘤药物与维拉帕米联合对KBV200细胞P-糖蛋白表达的影响研究

目的：探讨6种常用抗肿瘤药物长春新碱、阿霉素、平阳霉素、顺铂、5-Fu、环磷酰胺与维拉帕米联合对KBV200细胞P-糖蛋白表达的影响.方法：以喉癌KBV200细胞株为研究对象,通过流式细胞术检测6种抗肿瘤药物作用KBV200细胞的P-糖蛋白表达以及联合维拉帕米对P-糖蛋白表达的影响.结果：维拉帕米分别与长春新碱、阿霉素、平阳霉素、环磷酰胺联合作用,使KBV200细胞的P-糖蛋白表达下降80.17%、89.69%、19.19%及53.48%.其中维拉帕米与长春新碱、阿霉素作用较强.结论：维拉帕米分别与长春新碱、阿霉素、平阳霉素、环磷酰胺联合作用后,P-糖蛋白的表达水平明显下降,对KBV200细胞耐药性的逆转有一定作用.