CD13抑制剂乌苯美司对A549细胞顺铂敏感性的影响及其机制

  目的   检测CD13抑制剂乌苯美司联合顺铂对A549细胞增殖、细胞凋亡的影响,并探讨其机制。   方法   应用噻唑蓝比色法检测细胞增殖;流式细胞Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡;Western blot方法检测p53、PARP-1、Bcl-2、Bcl2-xL和Caspase蛋白水平;酶活性底物法检测CD13活性;Hoechst33342染色联合流式细胞术检测侧群细胞。   结果   乌苯美司单药对A549细胞增殖无显著影响（P>0.05）,乌苯美司（100 μg/mL）联合顺铂作用A549细胞24、48、72 h后,乌苯美司可显著增强8、16 μmol/L顺铂对A549细胞的增殖抑制（P < 0.05）,并呈时间依赖性,72h时,8、16μmol/L顺铂组和顺铂联合组的细胞增殖率分别为（62.06± 7.60）% vs.（27.92±5.84）%和（19.22±1.57）% vs.（0.67±0.42）%（P < 0.05）;但对64 μmol/L顺铂的细胞增殖率无明显影响（P>0.05）。16 μmol/L顺铂联合组细胞凋亡的比例明显增加（P < 0.05）。乌苯美司对P53、PARP-1、Bcl-2、Bcl2-xL及Capsize蛋白水平无明显影响,但显著抑制A549细胞CD13活性和降低A549侧群细胞比例（P < 0.05）。   结论   CD13抑制剂乌苯美司体外条件下显著提高低剂量顺铂对A549细胞的抑制作用,可能成为CD13阳性非小细胞肺癌患者顺铂的增敏剂。      

灯盏花素对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的保护作用

目的观察灯盏花素对肺纤维化的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法观察灯盏花素对体外培养小鼠胚肺成纤维细胞L929增殖、激活及细胞外基质分泌的影响;应用博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型,观察灯盏花素对肺纤维化的保护作用。结果灯盏花素体外对小鼠胚肺成纤维细胞L929无直接细胞毒作用,但能抑制TGF-β1促进的增殖、激活及层粘连蛋白(LN)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)分泌。体内灯盏花素能抑制博来霉素诱导的小鼠血清TGF-β1升高,阻止博来霉素诱导的小鼠肺脏SOD、POD、CAT降低,并降低肺脏羟脯氨酸、胶原、MDA及TGF-β1含量。结论灯盏花素有肺纤维化保护作用,其机制可能是通过增加抗氧化防御系统和阻止TGF-β信号实现的。     

灯盏花素的肝纤维化保护作用

目的：观察灯盏花素对肝纤维化的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法：大鼠肝星型细胞HSC体外培养观察灯盏花素对成纤维细胞增殖、激活及细胞外基质分泌的影响;四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化模型检测灯盏花素对肝纤维化的保护作用。结果：灯盏花素体外对大鼠肝星型细胞HSC无直接细胞毒作用,但能抑制TGF-β1促进的HSC增殖、激活及透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、I型胶原（Col I）分泌。体内灯盏花素能抑制四氯化碳诱导的大鼠血清ALT和AST升高,阻止四氯化碳诱导的大鼠肝脏SOD、POD、CAT降低,并降低肝脏羟哺氨酸、胶原、MDA及TGF—β1含量。结论：灯盏花素有肝纤维化保护作用,其机制可能是通过增加抗氧化防御系统和阻止TGF-β信号实现的。     

灯盏花素改善肿瘤化疗药物对小鼠lewis肺癌的治疗指数

目的:观察灯盏花素对肿瘤化疗药物治疗效果的影响。方法:MTT法检测灯盏花素体外对阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶诱导脾脏细胞凋亡的保护作用;将lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠皮下和肺,采用灯盏花素联合阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶治疗小鼠,观察肿瘤大小、外周血细胞数、骨髓细胞数、脾细胞凋亡、及小鼠存活时间。结果:灯盏花素体外对阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶诱导的脾脏细胞凋亡有保护作用。在体研究,治疗组均有比未治疗组不同比例的肿瘤生长减慢,单独化疗导致骨髓细胞和外周血细胞数减少、脾细胞凋亡增加。实验结束时,与单一药物治疗相比,灯盏花素联合化疗均能显著延长小鼠存活时间。单独化疗虽比未治疗组小鼠存活时间稍长,但无统计学差异。结论:单独化疗对伴随肿瘤转移的荷瘤小鼠生命延长无实际意义,灯盏花素能改善肿瘤化疗药物的治疗指数。     

灯盏花素对小鼠lewis肺癌放射治疗致机体损害的保护作用

目的:观察灯盏花素对小鼠lewis肺癌放射治疗致机体损害的保护作用。方法:将lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠皮下和肺,成瘤后采用灯盏花素联合放疗治疗小鼠,观察肿瘤大小、外周血象、骨髓细胞数、脾细胞中细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性、及小鼠存活时间。结果:与未治疗组比较,治疗组均有不同比例的肿瘤生长减慢,但仅单独放疗组骨髓细胞和外周血细胞数减少、脾细胞中CTL活性降低。实验结束时,灯盏花素联合放疗治疗小鼠存活时间最长,单独放疗组虽比未治疗组小鼠存活时间稍长,但无统计学差异。结论:单独放疗对荷瘤小鼠生命延长无实际意义,灯盏花素能保护放疗对机体的损害,与放疗有协同治疗肿瘤作用。     

灯盏花素对小鼠乳腺癌术后转移和复发的预防作用

目的:观察灯盏花素对小鼠乳腺癌手术切除后转移和复发的影响。方法:将小鼠4 T1乳腺癌细胞植入雌性BALB/c小鼠乳房脂肪垫下。乳腺癌直径达10 mm时手术切除,次日治疗开始,包括灯盏花素治疗、阿霉素化疗及放射治疗。治疗效果通过小鼠术后转移和复发率、小鼠血清干扰素λ(IFN-λ)和白细胞介素2(IL-2)、及小鼠存活时间评价。结果:对照组、阿霉素化疗组、放射治疗和灯盏花素组乳腺癌复发率分别为50%、100%、100%和20%;肺内出现转移灶率分别为70%、100%、100%和20%。与对照组比较,阿霉素化疗组和放射治疗组小鼠有明显较低的血清IFN-λ和IL-2,而灯盏花素组小鼠血清IFN-λ和IL-2均升高。结论:乳腺癌手术切除后机体的免疫功能恢复对控制转移和复发十分重要。灯盏花素能促进机体免疫功能的恢复,因此可以用于预防乳腺癌术后转移和复发。     

二甲双胍激活Nrf2信号并诱导抗氧化基因的表达

二甲双胍是一个一线抗糖尿病药物,然而其详细作用机制仍在研究中。Nrf2信号在保护细胞免受氧化性损伤中起着重要作用,近年来也成为干预糖尿病及其相关并发症的重要药物靶标。本研究在体内外实验中检测了二甲双胍对Nrf2信号的影响,并探究了其可能的机制。首先,二甲双胍激活AMPK和Nrf2信号,并以类似的浓度-和时间-依赖方式在小鼠骨骼肌细胞C2C12中诱导抗氧化基因NQO1和γ-GCSm的表达。其次,过表达AMPK会显著提高基础的和二甲双胍诱导的ARE–萤光素酶报告基因的活性,说明AMPK参与了二甲双胍对Nrf2信号的激活。最后,二甲双胍激活小鼠肝脏和骨骼肌组织中的Nrf2信号,诱导抗氧化基因HO-1和SOD的表达,导致GSH水平的增加。总之,我们的结果说明二甲双胍可以激活Nrf2信号和增强组织的抗氧化能力,并提供了二甲双胍作用的新机制。