胃旁路术对2型糖尿病大鼠肝脏葡萄糖转运体-2及葡萄糖激酶表达的影响

目的：观察胃旁路术（GBP）对自发性2型糖尿病（T2DM）大鼠（GK大鼠）肝细胞葡萄糖转运体-2（GLUT-2）及葡萄糖激酶（GCK）表达的影响,探讨其改善胰岛素抵抗的机制。方法30只8周龄雄性GK大鼠按照随机数字法分为手术组（10只）、假手术组（10只）、饮食配对组（10只）,另8周龄雄性SD作为空白对照组（10只）。检测和比较术前及术后1、2、4周各组大鼠空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）水平,应用蛋白印迹（Western blot）及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测各组术后4周肝脏组织GLUT-2、GCK mRNA及其蛋白的表达情况。结果 GK手术组术后1、2、4周FPG （（11.06±0.52） mmol／L、（7.49±0.34）mmol／L、（5.20±0.08）mmol／L）均低于术前水平（17.53±0.57）mmol／L）（均P＜0.05）;术后4周FINS由术前（11.90±0.75）mmol／L升至（14.20±1.23）mmol／L（P＜0.05）;术后4周GLUT-2、GCK mRNA及其蛋白表达明显增加（P＜0.01）。结论 GBP能上调T2DM大鼠肝细胞胰岛素信号转导通路中GLUT-2及GCK的表达,增强胰岛素受体后的信号转导,提高胰岛素的敏感性。     

GBP术对降低T2DM大鼠微血管病变风险评估

目的：研究GBP术对2型糖尿病的治疗作用,并进一步探讨2型糖尿病的微血管病变发生机制,评估GBP术对降低T2DM大鼠微血管病变风险的作用.方法：建立2型糖尿病大鼠模型（T2DM大鼠）.对成模的T2DM大鼠进行随机分组,分为行GBP术的手术组,行不规律内科治疗（食物中加入不定量的降糖药）的内科治疗组,和未实行任何治疗的未经干预组,以及健康大鼠的正常对照组.在未施行GBP术前,及施行GBP术后的第1周,2周,4周利用全自动血细胞分析仪和生化分析仪,对HBA1 C1、血小板平均体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、血小板计数（PLT）,血小板比容（PCT）进行分析.结果：行GBP术的手术组,大鼠的血小板参数和HBA1C1在术后一周时趋于稳定,术后2～4周逐渐恢复正常,微血管病变风险随之降低,甚至消失;不规律内科治疗组大鼠HBA1C1值和血小板参数值不稳定,上下波动,提示微血管病变风险仍存在;未经干预组的HBA1 C1值和血小板参数值均改变明显,提示糖尿病情加重即提示微血管病变风险升高.结论：GBP术对于降低T2DM大鼠微血管病变风险有确切的效果,及时行GBP术或可逆转微血管病变.     

1,25-(OH)2D3在2型糖尿病大鼠发病过程中对血清脂联素及脂肪组织脂联素mRNA的影响

目的 通过观察1,25-(OH)2D3在2型糖尿病(T2DM)大鼠发病过程中对血清脂联素及脂肪组织脂联素mRNA表达的影响,探讨维生素D在T2DM发病机制中的作用.方法 选取8周龄雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、1,25-(OH)2D3干预组(VD干预组)、糖尿病组.正常对照组大鼠饲普通饲料,VD干预组和糖尿病组饲高脂高糖饲料.6周后VD干预组和糖尿病组大鼠予以链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg腹腔注射建立T2DM动物模型,测定体质量、空腹血糖、空腹胰岛素、三酰甘油、总胆固醇,用ELISA法检测血清脂联素,用RT-PCR法检测脂肪组织脂联素mRNA.结果 糖尿病组大鼠血清脂联素水平[(3.36±1.28)ng/ml]、脂肪组织脂联素mRNA的表达(0.24±0.15)均较正常对照组显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05),使用维生素D干预后得到有效改善[VD干预组血清脂联素(5.27±1.37)ng/ml,脂联素mRNA(0.50±0.29),P＜0.05];糖尿病组和VD干预组空腹胰岛素均显著高于正常对照组,VD干预组空腹胰岛素显著低于糖尿病组(P＜0.05).脂肪组织脂联素mRNA的表达与血清空腹胰岛素呈负相关(r=-0.417,P＜0.05).结论 1,25-(OH)2D3可以明显改善T2DM大鼠在发病过程中血清脂联素及脂肪组织脂联素基因表达的下降,从而从分子水平对T2DM大鼠的发病起到保护作用.     

不同体质量糖调节异常人群血清vaspin水平变化

目的研究不同糖耐量及体质量人群中血清内脏脂肪组织来源的丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)水平的变化。方法研究对象按糖调节水平分为糖调节正常组(NGR组)、糖调节受损组(IGR组)及2型糖尿病组(T2DM组)。测定各组空腹血糖(FPG)、空腹C肽(FCP)、空腹血浆胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胆固醇(CHO)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)水平。采用ELISA法测定血清vaspin水平,并分析各组血清vaspin变化及其与各种参数的相关性。结果 T2DM组和IGR组血清vaspin水平比较差异无显著性,但均显著高于NGR组(F=22.96,q=8.74、7.92,P<0.01);女性和肥胖者血清vaspin水平分别显著高于男性和非肥胖者(t=3.43~4.18,P<0.05)。vaspin水平与性别、腰围、BMI、FPG、HOMA-IR、FCP、HbA1C、腰臀比、FINS、CHO、LDL-C呈正相关(r=0.178~0.436,P<0.05),性别、BMI、FPG是影响血清vaspin水平的独立相关因素。结论血清vaspin水平升高与体质量超标或肥胖和血糖升高相关,且有性别差异。     

2型糖尿病合并冠心病患者血vaspin IL-6水平与其心功能和胰岛素抵抗的相关性

目的探讨血清内脏脂肪组织丝氨酸蛋白酶抑制因子(vaspin)、白介素-6(IL-6)与2型糖尿病(T2DM)合并冠心病患者心功能等级及胰岛素抵抗(IR)的关系。方法选择2014年2月至2017年6月河南理工大学第一附属医院收治的T2DM患者89例,按是否合并冠心病分为T2DM组(n=55)与T2DM合并冠心病组(n=34),并选择30例正常健康人为对照组,均留取外周血标本,采用酶联免疫吸附法测定血清vaspin、IL-6水平,分析上述指标与T2DM合并冠心病患者心功能等级及IR的关系。结果(1)vaspin水平对照组> T2DM组> T2DM合并冠心病组,IL-6水平T2DM合并冠心病组> T2DM组>对照组(P<0.05);(2)T2DM组与T2DM合并冠心病组空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均高于对照组(P<0.05),T2DM合并冠心病组上述指标高于T2DM组(P<0.05);(3)Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级T2DM合并冠心病患者vaspin低于Ⅰ级者,IL-6、HOMA-IR高于Ⅰ级者(P<0.05),Ⅲ级、Ⅳ级患者vaspin低于Ⅱ级者,IL-6、HOMA-IR高于Ⅱ级者,Ⅳ级患者vaspin低于Ⅲ级者,IL-6、HOMA-IR高于Ⅲ级者(P<0.05);(4)vaspin与T2DM合并冠心病患者心功能等级、HOMA-IR呈负相关,IL-6与其心功能等级、HOMA-IR均呈正相关(P<0.05)。结论 T2DM合并冠心病患者血清vaspin降低、IL-6上升,均可引起胰岛素抵抗,促进冠心病进展。     

60岁以上2型糖尿病并颈动脉硬化患者血清内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂水平的测定

采用酶联免疫吸附法对65例≥60岁合并颈动脉粥样硬化2型糖尿病患者（T2DM＋CA组）,行血清内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂（vaspin）测定,并与63例无动脉粥样硬化2型糖尿病患者（T2DM组）、55例止常对照者比较。T2DM＋CA组血清vaspin水平明显低于T2DM组：（0．23±0．13）与（0．41±0．16）μg/L,P〈0．01],均明显低于正常对照者[（0．63-4-0．11）μg/L,P〈0．01,P〈0．05]。logistic回归分析冠示,高敏感C反应蛋白、稳态模型评估胰岛素抵抗指数是影响vaspin的独讧危险因素。提示低血清vaspin水平对老年2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化的发牛有一定作用。     

高压氧对糖尿病大鼠认知功能 及NGF mRNA 表达的影响

目的 探讨高压氧疗法对2 型糖尿病（T2DM）大鼠认知功能及脑组织神经生长因子microRNA （NGF mRNA）表达的影响。方法 将48 只成年健康SD 大鼠按随机数字表法分为空白对照组（12 只）、 T2DM 模型组（36 只）。模型复制成功后,T2DM 模型组大鼠再次按随机数字表法分为非干预A 组（6 只）、 非干预B 组（12 只）,以及高压氧A 组（6 只）、高压氧B 组（12 只）。10 d 后采用Morris 水迷宫实验检测 非干预A 组、高压氧A 组认知功能,空白对照组、非干预B 组、高压氧B 组随机选取6 只大鼠脑组织检测 NGF mRNA。高压氧A、B 组于注射15 d 后开始高压氧干预,1 次/d,20 d 后各组再次分别检测认知功能 及NGF mRNA。结果 与非干预A 组比较,高压氧A 组逃避潜伏期缩短（P <0.05）,穿越虚拟平台次数增 多（P <0.05）;与非干预B 组比较,高压氧B 组脑组织NGF mRNA 表达水平升高（P <0.05）。结论 高压氧 治疗可显著改善T2DM 大鼠认知功能,提升脑组织NGF mRNA 表达水平,提示高压氧治疗可有效改善早期 T2DM 患者认知功能,其机制可能与高压氧增强脑组织NGF mRNA 表达有关。     

益化清解方对2型糖尿病大鼠炎性分子网络的影响

目的：观察益化清解方对2型糖尿病（T2DM）大鼠炎性分子网络调控的影响。方法：复制T2DM大鼠模型，治疗组用益化清解方中药灌胃，并与模型组、二甲双胍组及正常组作对照。分别在给药前和给药第15，30天检测T2DM大鼠的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素6（IL-6）、高敏C-反应蛋白（hsCRP）、脂联素（Adiponectin，Adp）、瘦素（leptin）水平，探讨其变化与空腹血糖（FBG）、血清胰岛素（FINS）及胰岛素敏感性指数（ISI）的关系；并检测各组大鼠脂肪组织脂联素及骨骼肌组织脂联素受体R1 mRNA表达水平，探讨Adp、Adp受体与这些因素之间的关系。结果：益化清解方能显著降低T2DM大鼠血糖、血脂、C反应蛋白等水平，并提高胰岛素敏感性，改善糖尿病大鼠的脂肪组织Adp mRNA表达水平。结论：益化清解方对糖、脂双调节的作用可能是通过增加胰岛素敏感性而实现的，其与改善糖尿病大鼠的脂肪组织Adp mRNA表达相关。     

Roux-en-Y胃旁路术对血管内皮细胞P-选择素表达的影响

目的 通过建立2型糖尿病（T2DM）大鼠模型,观察Roux-en-Y胃旁路术（RYGB）对血管内皮细胞P-选择素表达的影响,探讨其对血管内皮细胞的保护机制。方法 2014年10月-2015年4月,采用随机数字表法将60只SD大鼠分为正常对照组（NC组）、T2DM组和RYGB组,各20只。T2DM组和RYGB组予以高脂饮食3周,腹腔注入链脲佐菌素（STZ）30 mg/kg建立T2DM模型;NC组喂养普通饲料,腹腔注入相同浓度的柠檬酸盐缓冲液。RYGB组行RYGB,NC组及T2DM组行假手术。记录大鼠一般情况,包括术前、术后21 d体质量。采用ELISA法检测术前、术后21 d肿瘤坏死因子α（TNF-α）、脂联素水平,HE染色法测定术后21 d血管内膜厚度,免疫组化SABC法检测术后21 d P-选择素表达情况。结果 术后RYGB组2只大鼠因吻合口梗阻死亡。T2DM组、RYGB组大鼠术后体质量低于NC组（P＜0.05）;RYGB组大鼠术后体质量低于T2DM组（P＜0.05）。NC组大鼠术后体质量高于术前（P＜0.05）;RYGB组大鼠术后体质量低于术前（P＜0.05）。T2DM组术前、术后TNF-α水平均高于NC组,术前、术后脂联素水平均低于NC组（P＜0.05）;RYGB组术前TNF-α水平高于NC组,术前脂联素水平低于NC组（P＜0.05）;RYGB组术后TNF-α水平低于T2DM组,术后脂联素水平高于T2DM组（P＜0.05）。RYGB组术后TNF-α水平低于术前,术后脂联素水平高于术前（P＜0.05）。3组大鼠血管内膜厚度比较,差异无统计学意义（F=1.337,P=0.271）。NC组、RYGB组P-选择素表达阳性率低于T2DM组（P＜0.05）。结论 RYGB可能通过脂联素/TNF-α通路减少P-选择素表达,进而减轻血管内皮细胞损伤程度。     

DJB术对2型糖尿病大鼠肠神经GLP-1受体表达影响的研究

目的 研究十二指肠空肠旁路手术(duodenal jejunal bypass,DJB)对2型糖尿病(T2DM)大鼠肠神经细胞胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)表达的影响,探讨DJB手术后肠神经GLP-1R表达、血清GLP-1分泌变化与血糖的关系。方法 雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组8只：Wistar 大鼠对照组(W-C);Wistar 大鼠DJB手术组(W-DJB);T2DM模型对照组(T2DM-C);T2DM+DJB手术组(T2DM-DJB)。分别测定各组大鼠术前及术后第1、4、8周空腹血糖、空腹GLP-1,术前及术后第8周空腹胰岛素水平。术后第8周处死大鼠,免疫荧光、RT-PCR检测回肠末端肠肌间神经丛GLP-1R表达变化。结果 T2DM-DJB组大鼠肠神经丛表达GLP-1R的细胞数目为15.83±2.23,明显高于T2DM-C组大鼠表达GLP-1R的细胞数目8.50±2.67(P＜0.01); GLP-1R mRNA在T2DM-DJB组大鼠肠神经丛表达水平为0.67±0.08,明显高于T2DM-C组大鼠GLP-1R mRNA的表达水平0.42±0.03(P＜0.01); T2DM-DJB组大鼠术后空腹血糖、空腹胰岛素显著降低(P＜0.01),空腹血清GLP-1显著升高(P＜0.01)。W-DJB组大鼠术后GLP-1R表达水平、空腹血糖、空腹胰岛素和空腹血清GLP-1与W-C组大鼠相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DJB手术能显著降低T2DM大鼠血糖,对正常大鼠无明显作用。     

SFRP5在T2DM患者脂肪、肌肉中的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的 探讨正常人及初诊2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）患者脂肪、肌肉组织中分泌型卷曲相关蛋白5（secreted frizzled-related protein 5,SFRP5）的差异性表达及其与胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）的关系.方法 按照1999年WHO的关于糖尿病的诊断标准选取初诊T2DM患者12例,及年龄、性别相匹配的正常人12例.所有研究对象均来自外科腹部择期手术患者,在同样手术条件下获取腹部大网膜脂肪组织和肌肉组织.常规测量体重、身高、腰围、臀围、血压、胰岛素（Fins）、血糖、糖化血红蛋白（HbA1C）、血脂等,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛素敏感指数（HOMA-β）,用QRT-PCR方法和Western印迹方法检测SFRP5在不同人群中的差异性表达及其与IR的关系.结果 ①T2DM组与正常对照组相比,T2DM组收缩压（SBP）,甘油三酯（TG）,空腹血糖（FPG）,糖负荷后2h血糖（2h PG）,Fins,稳态模型评价HOMA-IR,HbA1C均升高.②T2DM组脂肪组织中SFRP5 mRNA和蛋白表达高于正常对照组,差异有统计学意义（2.7倍,5.5倍,均P＜0.01）,但在肌肉组织中差异无统计学意义.③脂肪组织SFRP5 mRNA和蛋白质高于肌肉组织.结论 脂肪组织SFRP5 mRNA和蛋白质表达高于肌肉组织提示脂肪组织可能是SFRP5的主要来源.T2DM组脂肪组织中SFRP5 mRNA和蛋白表达高于正常对照组提示SFRP5可能与IR严重程度相关.     

2型糖尿病患者皮下?大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达变化及意义

目的:观察2型糖尿病患者皮下及大网膜脂肪组织脂联素(adiponectin)表达水平的变化,及其与血清脂联素、体质指数(BMI)、腰围(WC),腰/臀比值(WHR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、尿酸(UA)等相关指标的关系,探讨脂联素在2型糖尿病患者发生胰岛素抵抗中的作用。方法:用半定量RT-PCR方法检测23例2型糖尿病合并肥胖患者(DM+FAT)、23例2型糖尿病患者(DM)、33例非糖尿病肥胖患者(control+FAT)、23例非糖尿病患者(control)腹部皮下及大网膜脂肪组织脂联素mRNA的表达水平,并测量身高、体重、腰围、臀围、血压、FPG、HbA1C、血脂、尿酸、血清脂联素,并计算BMI、WHR。结果:①糖尿病肥胖组SBP、DBP、FPG、HbA1c、TG、LDL-C、尿酸均高于对照肥胖组,HDL-C、皮下及大网膜脂肪组织脂联素mRNA表达量、血清脂联素均低于对照肥胖组(P<0.01)。两组的大网膜脂联素表达量低于其皮下表达量(P<0...     

内脂素基因在不同糖耐量个体脂肪组织的表达差异

目的探讨2型糖尿病、糖耐量减低者内脏和皮下脂肪组织的内脂素基因表达及与相关代谢指标的关系。方法研究对象均为汉族人群,对照组23例,无糖尿病家族史;糖耐量减低组（IGT组）18例;2型糖尿病组(T2DM组)22例。同时测量血压,计算体质量指数（BMI）及腰臀比(WHR),测定空腹血糖（FBG）、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白（HDL C）、低密度脂蛋白（LDL C）、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹胰岛素（Fins）等指标,并计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA IR）。半定量RT PCR法检测脂肪组织内脂素基因的表达水平。结果T2DM组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量高于IGT组和对照组(P均＜0.01)。IGT组与对照组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量差异无统计学意义(P＞0.05)。对照组、IGT组及T2DM组皮下脂肪组织的内脂素基因表达量无统计学差异(P＞0.05)。肥胖/超重组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量高于体质量正常组(P＜0.01)。各组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量均高于对应的皮下脂肪组织的表达(P均＜0.01)。相关分析中,网膜脂肪组织内脂素基因表达与WHR相关(P＜0.05 );与年龄、BMI、SBP、DBP、FINS、FBG、HbA1C、HOMA IR均无相关性(P＞0.05),而皮下脂肪组织内脂素基因表达则与TC相关(P＜0.05)。结论内脂素在汉族人群T2DM、肥胖者中表达增加,且主要在内脏脂肪组织中表达,在维持葡萄糖稳态平衡中发挥作用。     

2型糖尿病大鼠血管内皮功能改变及机制

目的探讨2型糖尿病大鼠胸主动脉内皮依赖血管舒张功能的改变及其机制。方法高脂高糖饮食加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,分组处理4周后,观察糖尿病（DM）组、正常（NC）组、糖基化终末产物抑制剂（AG）组血管舒张功能,eNOSmRNA表达及血清NO浓度。结果①DM组血糖、血清胰岛素、甘油三酯较NC组显著升高（P〈0．05）。②最大内皮依赖血管舒张功能（EDVRmax）,DM组低于AG组（P〈0．05）,AG组低于NC组（P〈0．05）。③eNOSmRNA表达,AG组高于DM组（P〈0．05）,DM组高于NC组（P〈0．05）。④血清NO浓度AG组高于NC组（P〈0．05）,NC组高于DM组（P〈0．05）。结论高级糖基化终末产物（AGEs）通过NO途径介导糖尿病内皮功能损伤,糖基化终末产物抑制剂（AG）可改善内皮依赖血管舒张功能。     

Association of SelS mRNA expression in omental adipose tissue with Homa-IR and serum amyloid A in patients with type 2 diabetes mellitus

Background Tanis was reported as a putative receptor for serum amyloid A （SAA） involving glucose regulated protein in insulin regulated resistance. It was found to be dysregulated in diabetic rats （Psammomys obesus, Israeli sand rat） and its homologue for humans is SelS/AD-015. The present study analyzed mRNA expression of SelS in omental adipose tissue biopsies from patients with type 2 diabetes mellitus （T2DM）, and age- and weight-matched nondiabetic patients, the relationship of SelS mRNA with Homa-IR and serum SAA level.
Methods Human omental adipose tissues from ten cases of type 2 diabetic patients and twelve cases of nondiabetic individuals were analyzed for the expression level of SelS mRNA by semiquantitative polymerase chain reaction （PCR）, Homa-IR estimated by standard formula and SAA level by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）.
Results SelS mRNA expression, Homa-IR and serum SAA were higher in T2DM sufferers than in nondiabetic control group. SelS mRNA level was positively correlated with Homa-IR and SAA level in each group.
Conclusions SelS protein may be involved in insulin resistance in Chinese with T2DM by acting as the SAA receptor, thus playing an important role in the development of T2DM and atherosclerosis.     

脂联素在代谢综合征大鼠网膜脂肪组织mRNA表达水平的研究

目的探讨脂联素(adiponectin,APN)在代谢综合征(metabolic syndrome,MS)发病机制中的可能作用及其与MS各组分的关系。方法 90只大鼠随机分成3组:MS正常盐模型组(NS组)、MS高盐模型组(HS组)、正常对照组(NC组),NS组大鼠给予高脂高糖饲料喂养,HS组大鼠给予高脂高糖高盐饲料喂养,NC组大鼠以基础饲料喂养。饲养过程中,每隔2w测量各组大鼠的体长、体质量、血脂、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FPG)等指标。通过2种不同的饲料联合链脲佐菌素(STZ)诱导,成功建立代谢综合征大鼠模型后,MS组(NS组和HS组)和NC组大鼠运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测网膜脂肪组织APN mRNA的表达水平。结果 MS组大鼠网膜脂肪组织APN mRNA的表达水平低于NC组大鼠,差异具有统计学意义(P<0.05)。在MS组大鼠中,NS组大鼠网膜脂肪组织APN mRNA的表达水平与HS组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。相关分析显示:网膜脂肪组织APN mRNA的表达水平与FPG呈负相关(r=-0.334,P<0.05),与体长呈负相关(r=-0.387,P<0.05),与体质量呈负相关(r=-0.327,P<0.05)。结论 MS大鼠网膜脂肪组织APN mR-NA的表达水平可能与MS的发病呈负相关。FPG、体质量、体长可能对MS大鼠网膜脂肪组织APN的mRNA表达水平存在负反馈作用。     

视黄醇结合蛋白4在人皮下和网膜脂肪组织的差异表达及与肥胖和胰岛素抵抗的关系

目的 探讨视黄醇结合蛋白4(RBP4)在人皮下和网膜脂肪组织的差异表达,并分析其与肥胖及胰岛素抵抗的关系.方法 2009年1至4月在中山大学附属第三医院择期行腹部手术的正常糖调节患者41例,按体质指数(BMI)分为超重组(n=12)和正常体重组(n=29),采用酶联免疫吸附试验检测两组患者血清中RBP4水平,化学发光法检测两组患者空腹胰岛素(FINS)水平,葡萄糖氧化酶法检测患者空腹血糖(FPG)水平,计算稳态模型的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);分别在术中取其皮下和网膜脂肪组织,用半定量RT-PCR和Western印迹方法 检测脂肪组织中RBP4 mRNA和蛋白表达,并对两组患者皮下和网膜脂肪组织中RBP4 mRNA和蛋白表达水平与血清中RBP4水平、BMI、HOMA-IR行相关性分析.结果 (1)超重组患者血清RBP4、FINS及HOMA-IR均高于正常体重组[RBP4:(39.61±1.57)mg/L比(33.40±1.28)mg/L,P＜0.01;FINS:(8.82±3.79)mU/L比(6.43±4.38)mU/L,P＜0.05;HOMA-IR:(1.91±0.85)比(1. 36±0.72),P＜0.05].(2)患者网膜脂肪组织RBP4 mRNA表达明显高于皮下脂肪组织[(5.88±2.37)比(2.07±1.66),P＜0.01],网膜组织RBP4蛋白表达也高于皮下脂肪(0.76±0.18比0.15±0.07,P＜0.01).超重组网膜脂肪组织RBP4 mRNA和蛋白表达明显高于正常体重组[mRNA:(7.52±0.58)比(4.37±0.45),P＜0.01;蛋白:(0.92±0.23)比(0.57±0.13),P＜0.05].皮下脂肪组织RBP4 mRNA和蛋白的表达在两组差异无统计学意义(P＞0.05).(3)血清RBP4水平与BMI、腰围/臀围、HOMA-IR、网膜脂肪组织mRNA表达呈正相关(P＜0.05).HOMA-IR与皮下脂肪组织RBP4 mRNA和蛋白表达水平呈负相关(r=-0.635,P＜0.05),与血清RBP4水平、网膜脂肪组织mRNA和蛋白表达水平呈正相关(r分别为0.391、0.473,P＜0.05).结论 RB阳在皮下和网膜脂肪组织中存在差异表达,RBP4在网膜脂肪组织的高表达及高血清水平可能参与肥胖和胰岛素抵抗的发生.     

二甲双胍对多囊卵巢综合征大鼠的排卵及对卵巢中IL-6、TNF-α表达的影响

目的：探讨二甲双胍对多囊卵巢综合征（PCOS ）大鼠的促排卵作用及其对卵巢组织 IL-6 mRNA、TNF-αmRNA表达的影响。方法将32只雌性SD大鼠随机分为3组：空白对照组（A组,n＝10）,自由摄取食物和水31 d;PCOS组（B组,n＝12）,来曲唑1 mg/kg灌胃,21 d后予以5 mL/kg生理盐水灌胃10 d;二甲双胍干预组（C组,n＝10）,来曲唑1 mg/kg灌胃,21 d后予以6％的二甲双胍5 mL/kg灌胃10 d。每日阴道涂片观察大鼠动情周期,末次灌胃24 h后测定各组大鼠血清黄体生成素（L H ）、雌二醇（E2）、睾酮（T ）、胰岛素（INS ）、空腹血糖水平,通过H-E染色观察卵巢形态,实时荧光定量PCR检测各组大鼠卵巢白细胞介素-6（IL-6）mRNA、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA的相对表达。结果 C组较B组大鼠血清 T、LH、INS明显降低（P＜0．05）,卵巢局部IL-6 mRNA、TNF-αmRNA的表达下降（P＜0．05）,卵巢形态恢复正常。C组大鼠于用药的第6 d全组恢复排卵,B组大鼠持续无排卵直至第10 d ,仅1只大鼠自发恢复排卵。结论二甲双胍能抑制卵巢局部IL-6 mRNA、TNF-αmRNA的表达,有助于恢复卵巢形态,促进排卵,改善PCOS大鼠内分泌代谢紊乱。     

颅脑创伤后海马区钾-氯协同转运蛋白-2、γ-氨基丁酸的表达变化及亚低温治疗对其影响

目的探讨脑创伤(TBI)大鼠钾-氯协同转运蛋白2(KCC2)和γ-氨基丁酸(GABA)的表达变化及亚低温治疗对其影响。方法将30只Wistar大鼠随机分为对照组(C组)、创伤组(TBI组,给予液压冲击,不做处理)和治疗组(T组,液压冲击后接受亚低温治疗,32℃),亚低温干预在创伤后即刻给予32℃低温处理持续6 h。高效液相色谱法测定GABA水平,酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清KCC2水平;反转录-聚合酶链反应、Western blotting检测各组大鼠脑组织中KCC2 mRNA和蛋白的表达。结果与C组比较,T组、TBI组大鼠血清KCC2水平、脑组织KCC2蛋白及mRNA表达均显著降低(P<0.05);T组大鼠血清KCC2水平较TBI组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);GABA变化趋势与KCC2相反。结论 KCC2在大鼠脑创伤过程中表达降低,亚低温进行干预可上调KCC2的表达、下调GABA表达。