改良法制作SD大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型探讨

目的探讨线栓法制造大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的成功经验。方法采用改良线栓法制作Sprague-Dawley(SD)大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)局灶性脑缺血/再灌注动物模型。结果30只大鼠中,经神经功能评分、核磁共振血管成像及TTC染色验证,28只造模成功,成功率超过90%。结论改良线栓法MCAO制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型值得推广。     

线栓法大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的制作

大脑中动脉闭塞(MCAO)模型被普遍认为是局灶性脑缺血的标准动物模型[1].其中线栓法MCAO模型,具有不开颅、效果肯定且可准确控制缺血及再灌注时间的优点,便于分析神经元对缺血的敏感性、耐受性,及研究再灌注损害和治疗时间窗的选择.由于对动物全身的生理功能影响较小,动物存活时间长,也适用于慢性脑损伤的研究,近几年该模型得到研究者的喜爱[1].现将我们制作模型的体会报道如下.     

线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型的研究

随着当今社会的老龄化,人类脑血管病的发病率日益增加,我国每年新发脑卒中病例超过200万,每年死于脑卒中者约150万,生存的脑卒中患者目前多达700万。其中缺血性脑血管病占80%以上[1],而大脑中脉闭塞(MCAO)占血管闭塞的43%[2],因此制备一种较理想的脑缺血再灌注动物模型是研究脑血管病的重要手段及前提条件。局灶性脑缺血动物模型有许多种,建立一种具有良好重复性并能最大程度模拟人类缺血性卒中发生的动物模型一直是实验性脑血管病研究关注的重点。1986年,日本学者Koizu-m i[3]发明了线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型,1995年,我国也出现了相关的报道[4]。此后国内外学者对它不断改进,对模型原理,栓线制备,动物选择和操作过程等各个环节和实验处理因素的认识都得到发展和改进。本研究就线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型中的一些关键问题和影响因素作一综述。1动物选择1.1鼠种和种系制作脑缺血模型选用的实验动物有:小鼠、大鼠、蒙古沙土鼠、猫、狗、猪、羊以及灵长类动物猕猴等,其中最为常用的是大鼠,使用率超过90%。选用大鼠作为脑缺血模型具有以下优点:种系内纯性好,同系大鼠间遗传差异小,保证了试验对象的一致性;神经系统...     

改良线栓法制备大鼠局灶脑缺血模型

目的:探讨改良线栓对局灶脑缺血模型制备的影响,评价该模型的稳定性和可靠性.方法:雄性Wistar大鼠40只随机分为常规线栓组和改良线栓组,每组20只.线栓法制备右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)致局灶脑缺血模型.观察改良线栓对总体手术时间、术中颈总动脉血流阻断时间、线栓误入翼腭动脉(PPA)几率(PPA误栓率)和模型成功率的影响,并通过神经行为学评分、红四氮唑(TTC)染色和磁共振检测等方法评价该模型的稳定性和可靠性.结果:改良线栓组比常规线栓组总体手术时间和术中颈总动脉血流阻断时间明显缩短,线栓误入PPA的几率降低,模型成功率高,稳定可靠.结论:改良线栓可增加模型成功率,提高局灶脑缺血模型的稳定性和可靠性.     

线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的改进与体会

目的 改进线栓法制作动物大脑中动脉缺血再灌注模型,并通过测定多个指标评价该方法的价值.方法 采用体重250～300g雌雄各半的Wistar大鼠,分成改良线栓法组、传统线栓法组与假手术组.术后评价的指标包括手术成功率和手术时间、大鼠神经功能缺损评分、大鼠体重、TTC染色、HE染色.结果 改良线栓法组手术成功率高于传统线栓法组,手术时间短于后者;前者神经功能缺损评分与后者比较,差异无显著性;TTC染色可见明显脑缺血部位;HE染色可见梗塞侧脑细胞有大片坏死和凋亡,细胞稀疏.结论 改良线栓法简便可靠,模型成功率和稳定性较好,是较理想的MCAO(middle cerebral artery occlusion)模型制作方法.     

改良线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型

目的 建立一种简便可靠、创伤较小的大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型.方法 对Zea Longa线栓法进行适当改进,制作SD大鼠右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)2 h后再灌注(R)模型(MCAO/R组,n=25).于建模前后不同时间点,评估SD大鼠的神经功能;建模后14 d处死所有大鼠,取脑组织进行病理组织学检查.设立假手术组(n=5)作为对照,进行对比分析以观察模型的可靠性.结果 MCAO/R组25只大鼠中,2例(8%)于拔栓线时突发死亡,迅速开颅取脑发现颅底脑池内有大量血块;2例于术后第2天死亡,1例于术后第7天死亡,总死亡率为20%.成功建立MCAO/R模型20例,并在为期14 d的观察过程中神经功能逐渐改善;术中栓线插入长度与大鼠体质量呈线性相关(P=3.86×10-9);组织病理学观察显示,MCAO/R组大鼠的右侧额顶叶和尾壳核区域脑组织缺血性损伤改变,神经元皱缩,呈不规则形态;胞浆嗜酸性,胞核深染或消失,细胞间质疏松.结论 本实验采用改良线栓法制备的大鼠MCAO/R模型,简便易行、创伤小且稳定性好,是用于研究局灶性脑缺血/再灌注损伤较为理想的动物模型.     

大鼠局灶性脑缺血动物模型的实验研究

目的 探讨栓线法大鼠局灶性脑缺血动物模型的使用价值。方法采用颈内动脉栓线阻塞大脑中动脉制备脑梗模型,并观察了局灶性脑缺血后组织的多种改变。结果 栓线前端经多聚赖氨酸处理后,经大鼠颈内动脉插入,栓塞大脑中动脉,成功率达９０％,模型规定的各项指标符合临床脑梗塞的病理生理过程。结论 该方法简便易行,对动物损伤小,重复性好,可为脑缺血发机制研究及临床脑中风的治疗研究提供一种有效手段。     

线栓法大鼠局灶性脑缺血模型制作要点及进展

目前认为大脑中动脉（MCA）为临床上缺血性脑损伤的易患部位,故线栓法大鼠局灶性脑缺血模型的制作以大脑中动脉的阻塞（MCAO）为主,并被认为是标准的局灶性脑缺血动物模型。虽经过多专家学者的努力使得模型制作的方法得到了更新,稳定性得到了提高,但其难度大、影响因素众多、死亡率高等不足之处仍是事实,本文就制作过程中的主要方面和一些关键问题做一综述和探讨。     

芦荟多糖对脑缺血大鼠NF-κBp65蛋白表达的影响

目的 观察芦荟多糖对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用,并探讨其作用机制.方法 采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉(MCAO),制备局灶性脑缺血模型,观察芦荟多糖对MCAO模型大鼠脑缺血后相关蛋白NF-κBp65表达的影响.结果 芦荟多糖能抑制MCAO模型大鼠大脑皮质NT-κBp65蛋白表达.结论 芦荟多糖对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其机理与芦荟多糖影响抑制炎症反应相关蛋白NT-κBp65的表达有关.     

大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型的制作规范与评价

通过对动物选择、麻醉剂选择、线栓制作、手术操作、观察指标等方面研究资料进行归纳、分析、比较,以期为建立大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型(MCAO)的基本制作规范提供理论指导。     

血管内介入技术制作兔局灶性脑缺血模型

目的 建立一种微创、可控性强的兔局灶性脑缺血再灌注模型.方法 健康成年新西兰家兔66只,随机分为模型组(n=34)和假手术组(n=32),采用血管内介入技术将微导丝由股动脉送入栓塞右侧大脑中动脉,2h后拔除微导丝建立模型,而假手术组微导丝进入右侧大脑中动脉后即退出.临床神经功能检查家兔左侧肢体对疼痛刺激的反应、蹲立时的姿势和行走时的步态;分别于术后6h、12h和2 周处死模型组和假手术组各24只家兔,取脑组织并行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,观察梗死灶情况;术后2周处死剩余家兔,取脑组织并行苏木精-伊红(HE)染色,观察脑组织病理学变化.结果 在模型组,临床神经功能检查显示家兔出现不同程度的偏瘫症状,建模成功率为94.12％;TTC染色证实术后6h存在脑梗死灶,12h后脑梗死灶趋于稳定;术后2周脑组织HE染色显示右侧额顶叶脑组织缺血性改变.假手术组家兔末出现上述症状及病变.结论 采用血管内介入技术制作兔局灶性脑缺血再灌注模型,该方法微创、可控性强,模型稳定可靠,是用于研究局灶性脑缺血较为理想的动物模型.     

Wistar大鼠插线法局灶性脑缺血/再灌注模型的实验研究

目的：局灶性脑缺血/再灌注模型是研究缺血性脑血管病的重要模型。本文介绍一种简便易行的插线法和Wistar大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的制备方法，并通过神经病学评分，TTC染色、病理形态学变化的观察，对该模型的可靠性进行评价。方法：用头端处理的尼龙钓丝，从颈外动脉向颈内动脉插入，可逆性阻断大鼠一侧大脑中动脉（MCA）。结果：大鼠MCA阻断后1.5h,同时出现Horner's征阳性、提尾悬空时梗塞对侧前肢屈曲、内收、自主运动时身体向偏瘫侧划圈的动物，TTC染色能清楚地显示梗塞范围，且相对较稳定，光镜下可见脑缺血后的病理改变。阻断后3h及再灌注3、6h时的病理改变加重，神经病学评分同前。结论：该改良法制备的模型简便易行、稳定性好、结果可靠，是用于研究局灶性脑缺血/再灌注的较为理想的实验动物模型。     

大鼠线栓法局灶性脑缺血再灌注损伤模型改进的实验研究

目的提供一种比较简易的大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的制备方法。方法40只SD大鼠线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型,选择距颈总动脉（CCA）分叉1cm处切口,不分离颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA）,且不结扎颈外动脉的手术方法,通过调整进线角度使线栓从CCA顺行进入ICA,进而入颅堵塞大脑中动脉（MCA）。造模后缝合皮肤,再灌注时拔出一定长度栓线,使栓线回至CCA分叉处即可。通过神经功能检测、2,3,5-三苯基四氮唑（TTC）染色和病理学检查等方法评价该模型的可靠性。结果大鼠手术后神经功能缺损明显,神经功能评分集中,TTC染色稳定。结论该改良方法手术简单,创伤小,缺血效果可靠,可用于脑缺血再灌注损伤的研究。     

氧化苦参碱对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的中枢机制

目的：探讨氧化苦参碱（OMT）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用及其中枢机制。方法：采用结扎大脑中动脉的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。外周给药大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、路路通组（LLT，31.25 mg•kg^-1）及OMT 35、70和105 mg•kg^-1 腹腔注射给药组；脑室给药大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、LLT 0.15 mg•kg^-1组及OMT 0.35 mg•kg^-1脑室注射给药组。以神经学评分及脑梗塞面积为指标观察OMT对大鼠局灶性脑缺血再灌注性损伤的保护作用，同时检测OMT脑室注射给药大鼠血清NO含量。结果：与脑缺血再灌注模型组比较，腹腔注射OMT 105 mg•kg^-1组神经学评分明显降低（P<0.05），OMT 70和105 mg•kg^-1组脑梗塞面积缩小（P<0.05）；与脑缺血再灌注模型组比较， OMT 0.35 mg•kg^-1脑室注射给药组大鼠脑梗塞面积缩小（P<0.05），血清NO含量明显降低（P<0.05）。结论：脑室注射OMT对局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑损伤具有明显的保护作用，中枢作用可能为其机制之一。     

Changes after dynamic observation of ultrastructural cerebral infarction in renovascular hypertensive rats

Ｉｓｃｈｅｍｉｃｄａｍａｇｅｔｏｔｈｅｂｌｏｏｄｓｕｐｐｌｙａｒｅａｉｎｄｕｃｅｄｂｙｏｃｃｌｕｓｉｏｎｏｆｏｎｅｓｉｄｅｏｆｔｈｅｍｉｄｄｌｅｃｅｒｅｂｒａｌａｒｔｅｒｙ (ＭＣＡＯ)ｕｎｄｅｒｃｒａｎｉｏｔｏｍｙｔｒａｎｓｔｅｍｐｏｒａｌｒｅｇｉｏｎｍａｙｂｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏａｎｉｎｆａｒｃｔａｒｅａｗｉｔｈｓｅｖｅｒｅｉｓｃｈｅｍｉａ ,ａｎｄｂｏｒｄｅｒａｎｄｄｉｓｔａｎｔａｒｅａｓｗｉｔｈｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｓｌｉｇｈｔｄａｍａｇｅ Ｗｅｕｓｅｄｔｈｅｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐ…     

局灶性脑缺血的实验研究进展

大脑中动脉阻断模型(MCAO)是标准的局灶性脑缺血模型.该模型的制作方式及方法不断改进,研究手段逐渐由过去简单的行为学评分、脑梗死体积测定、组织形态观察,发展到功能学、神经生化、分子生物学等领域.MCAO的研究为进一步研究人类脑缺血损伤的病变特点、发病机制及防治提供了实验依据.本文对近年来MCAO模型及脑缺血相关的实验研究进展作一综述.     

大鼠局灶脑缺血后内皮前体细胞的相关实验研究

目的探讨缺血性卒中后外周血CD34^＋细胞和脑组织AC133抗原的变化。方法本研究采用大鼠大脑中动脉缺血再灌注线栓法模型,缺血2h。将成年SD雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、动物模型组,分别取缺血再灌注1、3、6、12、24、48、72h、4、7、14d等作为观察点。取再灌注1、3、6、12、24、48、72h、4、7、14d外周血标本,采用流式细胞术检测外周血单个核CD34＋细胞平均荧光强度。采用免疫组化染色法检测2,3、4、7d脑组织AC133抗原表达。每个观察点5只大鼠,共60只大鼠,根据神经功能计分纳入实验。结果①大鼠脑缺血／再灌注3d外周血单个核CD34^＋细胞平均荧光强度明显降低,直到7d。14d恢复到基线水平。②AC133抗原在再灌注4d梗死半球半暗带区域的血管内皮细胞表达阳性,3、7d组无阳性表达。结论脑缺血再灌注后早期外周血CD34^＋干细胞明显下降,脑梗死半暗带区域部分血管内皮细胞出现AC33抗原的表达,提示内源性血管内皮干细胞可能参与脑缺血损伤的血管修复。     

A simple and sensitive method to assess ischemia occurrence in the setting of focal cerebral ischemia in rat： A comparative study

Focalcerebralischemiamodelinducedbyintralu minalthreadembolicmiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)inratismostwidelyusedinthestudyofis chemiccerebralvasculardisease[1] .Neurologicalevalu ationwasusuallyappliedtoselectischemicratsafteroperation[2 ] .Previousstudiesindicatedthatneurologi calevaluationwasnotalwayscorrelationtobrainis chemicinjury[3,4 ] .Mostmodelsofcerebralischemiaaresurgicallyin vasiveandthusrequireanestheticsduringpreparation .Sleepingtimeaftergeneralanesthesianotonlydependsonha…