放射线治疗对小鼠肾癌肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:观察放射治疗对BALB/c小鼠肾癌抑制作用及对TNF-α表达的影响.方法:用Renca肾癌细胞制作BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,放疗组小鼠在种瘤第12～16天,连续 5d 进行肿瘤局部放射,第28天处死小鼠,取肿瘤组织测量,分析治疗效果.体外培养2×106Renca肾癌细胞,经20Gy X射线单次照射培养24h后,收获细胞.提取细胞和肿瘤组织蛋白,免疫印迹法检测治疗后肿瘤组织和细胞中TNF-α蛋白的表达水平.结果:放射治疗组有效抑制肾癌细胞在BALB/c小鼠体内生长,局部放疗明显增加了肿瘤组织内TNF-α表达水平,体外培养的Renca肾癌细胞经放射线处理后TNF-α表达明显上调.结论:放射线能够促进肿瘤细胞分泌TNF-α,并且与肿瘤局部产生的TNF-α表达上调密切相关.     

瘤内注射树突状细胞联合放疗对小鼠肾癌TNF-α表达的影响

目的 研究放疗增强DC疫苗治疗小鼠肾癌的作用机理.方法 Renca肾癌细胞制作BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,分别用单纯放疗、单纯DC和Dc瘤内注射联合放疗等方法治疗,第28天牺牲小鼠.体外培养2×106Renca肾癌细胞,经20 Gy X射线单次照射培养24 h后,收获细胞.提取细胞和肿瘤组织蛋白,免疫组化和免疫印迹法检测治疗后肿瘤组织中TNF-α、CD3、CD11和F4/80蛋白的表达水平.结果 DC瘤内注射联合放疗有效抑制肾癌细胞在BALB/c小鼠体内生长,局部放疗明显增加了肿瘤组织内TNF-α表达水平,体外培养的Renca肾癌细胞经放射线处理后TNF-α表达明显上调.结论 放射线能够促进肿瘤细胞分泌TNF-α,瘤内注射DC联合放疗的增效作用与肿瘤局部产生的TNF-α表达上调密切相关.     

免疫调节肽对T淋巴细胞转化和巨噬细胞分泌的影响

目的 研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)对BALB/c鼠脾T淋巴细胞转化和骨髓巨噬细胞(BMMs)分泌的影响.方法 通过MTT法检测不同浓度PGPIPN对小鼠脾T淋巴细胞的转化作用,通过ELISA法检测在PGPIPN刺激下小鼠BMMs活化所释放的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)的含量.结果 PGPIP...     

多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠脾细胞因子变化的研究

目的:探讨多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗免疫和Em原头节攻击后小鼠脾细胞冈子的变化.方法:将疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c鼠.免疫后8周用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染,感染后18周杀鼠取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平,同时设有空载体、BCG和PBS对照.结果:疫苗接种组的IFN-γ和TNF-α水平升高,IL-4水平降低;鼻腔内接种组的TNF-α水平高于皮下注射组.结论:多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠产生一个THl型反应,从而对抗Em原头节攻击感染.     

弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的脾淋巴细胞持续性免疫应答

目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的脾淋巴细胞的免疫应答及持续时间。方法96只BALB/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组以弓形虫复合黏膜疫苗20μl/只(20μg可溶性速殖子抗原 1μg霍乱毒素)滴鼻免疫2次(间隔2周),对照组以PBS滴鼻。分别于末次滴鼻后第1,2,3,4,6,8,10,12周处死小鼠,脾淋巴细胞计数,免疫细胞化学法检测CD4 、CD8 T细胞亚群水平。结果免疫组小鼠于第1,2周脾淋巴细胞明显高于对照组(P<0.01),其中以CD4 T细胞增生为主,第1,2,3,4,6周增生显著(P<0.01),CD8 T细胞水平在第2,3周也有增生(P<0.05),CD4 /CD8 比值第6周高于对照组(P<0.01)。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导脾淋巴细胞增殖性免疫应答,且可持续较长时间。     

抗狂犬病疫苗单克隆抗体的制备和初步鉴定

用狂犬病疫苗为抗原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞株SP2/O融合,经过培养、克隆、ELISA鉴定,筛出3株分泌抗狂犬病疫苗单克隆抗体细胞株。双扩散结果证明:3株细胞均分泌IgG1。     

生蒲黄与炒蒲黄、蒲黄炭提取物对正常BALB/c小鼠非特异性免疫功能的影响

目的:比较生蒲黄与炒蒲黄、蒲黄炭提取物对正常BALB/c小鼠非特异性免疫功能的影响。方法:将正常BALB/c雄性小鼠,随机分为4组,即空白对照组、生蒲黄组、炒蒲黄组、蒲黄炭组。各药物组分别按0.15 m L/10g体重每天灌胃1次,连续15 d。空白对照组给予等体积蒸馏水。通过对正常BALB/c小鼠免疫器官指数、炭粒廓清实验、血清溶菌酶含量等非特异性免疫指标来检测上述药物对其影响。结果:生蒲黄对正常BALB/c小鼠无非特异性免疫作用;炒蒲黄、蒲黄炭组分别通过促进溶菌酶分泌、增加胸腺指数来增强免疫作用。结论:炒蒲黄、蒲黄炭对正常BALB/c小鼠具有增强非特异性免疫的作用。     

C57BL/6小鼠与BALB/c小鼠对脓毒症反应的差异

目的 探讨C57BL/6与BALB/c两种小鼠对脓毒症的反应能力.方法 C57BL/6小鼠和BALB/c小鼠各30只,分别随机分成假手术组与脓毒症组,每组15只.脓毒症组用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立小鼠脓毒症模型.术后6h,每组随机选出5只,Bio-plex悬浮蛋白芯片系统检测其外周血IL-1β、IL-2、IL-4,IL-5、IL-10、GM-CSF、IFN-γ和TNF-α的浓度.剩余小鼠用于1周存活率分析.结果 两品系小鼠假手术组1周存活率均为100%.C57BL/6小鼠脓毒症组1周存活率为10%,BALB/c小鼠脓毒症组存活率为50%.C57BL/6小鼠脓毒症组的存活率显著低于BALB/c小鼠脓毒症组(P＜0.05).与假手术组相比,C57BL/6小鼠脓毒症组分泌的IL-4、TNF-α和IL-10明显升高.而BALB/c小鼠脓毒症组分泌的8种细胞因子较假手术组均未见明显增加.结论 C57BL/6与BALB/c两种小鼠对脓毒症的反应能力有差异,C57BL/6小鼠反应更敏感.     

小鼠免疫力对接种人类肝癌细胞系9724生长的影响

目的 探讨不同免疫力小鼠的免疫细胞对人类肝癌细胞系9724生长的影响及异种特异性细胞毒杀伤能力。方法 将培养后的人类肝癌细胞系接种到不同免疫力小鼠（免疫正常的BALB／c,B缺陷的CBA／N,T缺陷的BALB/c nude及T,B缺陷的C.B－17 SICD小鼠）右后臀皮下,观察其生长;取实验和相应的正常鼠脾细胞进行细胞毒杀伤试验。结果 BALB/c和CAB／N小鼠不成瘤;BALB/c nude和C.B－17 SCID小鼠100％成瘤;SCID免疫重建组用BALB/c外周淋巴细胞重建SCID（BALB/c－PBL－SCID）的不成瘤,用CAB／N外周淋巴细胞重建的SCID（CBA／N－PBL－SCID）成瘤,接种过瘤的BALB/c和CBA／N小鼠脾细胞对癌细胞有较强的细胞毒杀作用,对照组和nude,SCID小鼠无杀伤作用;SCID免疫重建有较小的杀伤作用。结论 T细胞在异种瘤移植排斥中起主要的免疫杀伤作用,这种排斥是异种特异笥的;肿瘤免疫需要综合性免疫作用。     

黑大蒜提取物对衰老小鼠抗氧化活性及免疫功能的影响

目的 探讨黑大蒜提取物对衰老模型小鼠抗氧化活性超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）以及免疫功能的影响.方法 30只BALB/c小鼠随机分成三组,即生理盐水对照组,D-半乳糖诱导衰老组,黑大蒜提取物组,每组10只.除正常对照组外,其余两组诱导衰老模型.各组灌胃给药,正常对照组及衰老模型组灌服生理盐水,黑大蒜提取物组灌服黑大蒜提取物,6周后检测血清、肝和脑组织的SOD和MDA,并且检测NK细胞杀伤活性、脾细胞NO分泌水平、脾细胞培养上清细胞因子分泌水平.结果 黑大蒜提取物组与诱导衰老组相比,对衰老小鼠血清和肝的SOD含量有明显上调功能（P＝0.0471,P＝0.0315）,但对脑的SOD影响不明显,差异无统计学意义（P＝0.0523）;对衰老小鼠血清、脑和肝的MDA含量有明显下调功能（P＝0.0262,P＝0.0461,P＝0.0360）.黑大蒜提取物组与诱导衰老组相比,NO分泌水平和NK细胞杀伤活性明显升高（P＝0.0117,P＝0.0038）;Th1型细胞因子（IL-2、IFN-γ和TNF-α）分泌水平明显升高（P＝0.0042,P＝0.0012,P＝0.0024）;Th2型细胞因子分泌水平明显降低（P＝0.0481）.结论 黑大蒜提取物可明显提高衰老模型小鼠抗氧化活性,增强NK细胞和巨噬细胞活性,诱导Th1型免疫应答.     

桑黄粗多糖对小鼠免疫功能影响的研究

目的研究桑黄粗多糖对小鼠免疫功能的影响。方法将40只健康小鼠小鼠随机分组,①蒸馏水组②桑黄粗多糖高、中、低剂量组。观察计算腹腔巨噬细胞吞噬指数及吞噬率、外周血淋巴细胞转化率、血清溶血素水平、以及血清中细胞因子TNF-а、IL-4含量。结果桑黄粗多糖高、中、低剂量组能明显提高荷瘤小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬指数与吞噬率、外周血淋巴细胞转化率及血清溶血素水平,并能提高血清中细胞因子TNF-a含量,对血清中细胞因子IL-4含量的影响作用不显著。结论桑黄粗多糖具有增强小鼠免疫功能的作用。     

肿瘤坏死因子α在抗鼠衣原体生殖道感染过程中的作用

目的 探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）在抗衣原体感染免疫以及介导衣原体生殖道病理损伤过程中的作用。方法 以5~6周龄雌性C57BL/6J野生型小鼠及TNF-αR基因敲除小鼠为研究对象,野生型和TNF-αR基因敲除两组各15只小鼠,经生殖道感染1×104包涵体形成单位的鼠衣原体,初次感染后第56天,每组8只小鼠再次感染同等剂量的鼠衣原体。每隔3~4 d 取小鼠生殖道分泌物用于衣原体包涵体数目的检测。于初次感染后第80天处死小鼠,收集小鼠腹腔巨噬细胞,并分离生殖道和脾脏。观察输卵管和子宫角病理损伤程度,并采用盲法对管腔扩张以及炎性细胞浸润程度进行半定量分析;测定小鼠巨噬细胞培养上清中的IL-6、IL-8、IL-1α、IL-1β和TNF-α等前炎症因子水平;制备脾细胞悬液,体外经衣原体EB刺激后检测其产生的IL-4、IL-5、IL-17和 IFN-γ 等细胞因子水平。结果 TNF-αR 基因敲除组生殖道衣原体清除速度与野生型组基本一致,与初次感染或再次感染无 关;两组小鼠子宫角和输卵管的炎症程度差异没有统计学意义（P>0.05）,但TNF-αR基因敲除组输卵管水肿程度明显低于野生型组（P<0.05）。腹腔巨噬细胞细胞因子检测结果显示,TNF-αR基因敲除小鼠的TNF-α水平高于野生型小鼠（P<0.05）;脾细胞细胞因子水平显示,两组小鼠脾细胞均产生较高水平的IFN-γ,TNF-αR基因敲除小鼠产生的IL-17细胞因子水平低于野生型小鼠（P<0.05）。结论 TNF-α对小鼠生殖道清除鼠衣原体感染无影响,但可促进鼠衣原体引起的生殖道炎症病理损伤。     

实验性变态反应性脑脊髓炎T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子-α变化的意义(英文)

目的探讨实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子(TNF)α变化的意义。方法从豚鼠(GP)脊髓中分离髓鞘碱性蛋白(MBP),主动免疫Lewis大鼠诱导EAE成功后,观察EAE组临床症状,并进行临床评分;应用淋巴细胞增殖试验测定EAE大鼠淋巴结T淋巴细胞增殖程度;应用ELISA技术测定血清TNFα水平。结果EAE临床发病过程中,T淋巴细胞增殖活跃,血清TNFα水平异常升高,并与临床症状呈正相关。结论EAE时T淋巴细胞增殖旺盛和TNFα生成增多,进而导致血脑屏障(BBB)的破坏,炎细胞浸润,从而诱发EAE。     

东北鹤虱水提取物对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、分泌IL-2和TNF—α的作用

目的：观察东北鹤虱水提取物（LEG—I）对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、分泌IL-2和TNF—α的作用。方法：运用噻唑兰比色（MTT）法检测LEG—I对静止状态及刀豆蛋白A（ConA）活化的淋巴细胞增殖反应的影响;用碘化丙啶染色,流式细胞术对经LEG—I作用的淋巴细胞周期进行分析;分别用MTT法和ELISA检测LEG—I刺激后静止及活化淋巴细胞分泌TNF—OL和IL-2的水平。结果：LEG—I可刺激小鼠脾淋巴细胞以及被ConA活化的淋巴细胞增殖,在一定范围内具有剂量依赖性（P〈0．01）;相比空白对照组,LEG—I组的G0／G1期淋巴细胞比例降低,而S期和G2/M期比例增加（P〈0．01）;LEG—I对静止状态的淋巴细胞分泌TNF—α及IL-2无作用,而使ConA激活的淋巴细胞的分泌增加（P〈0．01）。结论：LEG—I在免疫激活或免疫增强方面发挥了重要作用。     

脱氢表雄酮对大鼠实验性自身免疫性神经炎的影响

目的探讨脱氢表雄酮（DHEA）对大鼠实验性自身免疫性神经炎（EAN）发病的影响及其机制。方法随机将36只Lewis大鼠分为DHEA 0.5mg治疗组、2mg治疗组和对照组。治疗组于注射牛周围神经髓磷脂（BPM）抗原乳剂后第5天开始每日皮下注射DHEA,对照组皮下注射相同体积的DHEA溶媒。观察各组发病时间及临床评分,检查疾病高峰期坐骨神经组织病理及干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）阳性反应细胞,检测引流淋巴结和脾脏单个核细胞增殖反应,检测培养上清TNF-α、IFN-γ、白介素-10（IL-10）含量。 结果两种剂量DHEA治疗组均能延迟EAN发病时间(P均<0.05),减少坐骨神经炎性细胞浸润数目(P均<0.05)和IFN-γ、TNF-α阳性反应细胞数目(P均<0.05),抑制BPM刺激T淋巴细胞增殖(P均<0.05),降低培养上清中IFN-γ、TNF-α水平(P均<0.05)。2?mg治疗组疾病高峰期临床评分明显降低于对照组(P<0.05)。各组间 IL-10水平未显示明显差异（P>0.05）。结论DHEA可能通过抑制自身反应性T淋巴细胞增殖和促炎性细胞因子过度表达减轻EAN病情,2mg治疗组具有更明显的免疫治疗效果。     

鱼王浆对免疫功能低下模型小鼠相关免疫细胞因子影响的实验研究

目的研究鱼王浆对环磷酰胺致免疫功能低下模型小鼠相关免疫细胞因子的影响及量效关系。方法通过腹腔环磷酰胺（Cy）强化注射制造免疫功能低下模型小鼠,模型小鼠随机分为鱼王浆高、中、低剂量组及模型组,另设1组为空白对照组。观察比较鱼王浆高、中、低剂量对模型小鼠相关免疫因子的影响,检测外周血CD3^＋、CD4^＋,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及干扰素-γ（IFN-γ）含量,脾脏组织TNF-α蛋白表达的变化。结果鱼王浆高、中剂量组CD3^＋、CD4^＋的含量明显高于模型组（P〈0.01）,鱼王浆低剂量组CD3^＋的含量与模型组比较有所升高（P〈0.05）;鱼王浆各剂量组TNF-α、IFN-γ的含量明显高于模型组（P〈0.01）;鱼王浆各剂量组脾组织中TNF-α蛋白的表达明显高于模型组（P〈0.01）。结论鱼王浆能明显提高免疫功能低下模型小鼠外周血中相关免疫细胞因子CD3^＋、CD4^＋及TNF-α、IFN-γ的含量,增强免疫组织器官中TNF-α的表达,并且其作用具有明显的量效关系。     

肿瘤坏死因子-α对人表皮黑素细胞增殖及黑素合成的影响研究

目的建立正常人表皮黑素细胞体外培养体系,观察不同浓度肿瘤坏死因子α对体外培养正常人黑素细胞的细胞增殖及黑素合成的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定不同浓度肿瘤坏死因子-α对黑素细胞增值的影响,NaOH裂解法测定黑素生成量,流式细胞仪检测黑素细胞的凋亡率。结果肿瘤坏死因子α对黑素细胞活力有抑制作用,能使细胞增殖能力降低,黑素合成减少,增加黑素细胞的凋亡率。结论肿瘤坏死因子-α对体外培养的黑素细胞增殖及黑素生成都有抑制作用,这为临床应用肿瘤坏死因子α治疗色素性疾病提供了实验依据。     

SOCS-1、SOCS-3、TNF-α在有机磷中毒鼠肝脾的表达

目的观察有机磷中毒（AOPP）小鼠肝脏、脾脏SOCS-1、SOCS-3及TNF-α mRNA的表达,探讨其在AOPP致多器官功能障碍综合症（MODs）中的发病机制,以期为MODS的防治提供新的策略。方法健康小鼠随机分成敌敌畏组、生理盐水对照组和正常对照组,分别于染毒后2、6、12、24h取肝脾组织,以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定SOCS-1、SOCS-3、TNF-α表达水平。结果AOPP小鼠肝脾SOCS-1、SOCS-3、TNF-α表达均升高,与对照组比较差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论AOPP可导致细胞因子TNF-α失调,可能参与了AOPP后SIRS向MODS的发病过程;若能抑制炎症反应的失控,则对中毒MODS的治疗将有新的突破。     

十全大补汤多糖成分抑瘤及免疫调节作用的初步研究

目的：研究十全大补汤总多糖抗肿瘤及对脾细胞功能的调节作用。方法：40只昆明种小鼠,以皮下接种H22细胞的方法制备荷瘤小鼠模型,24 h后随机分为5组,即阴性对照组、顺铂（1 mg/kg）化疗组、顺铂联合高（168.4 mg/m L）、中（84.2 mg/m L）、低（42.1 mg/m L）剂量十全大补汤总多糖组。十全大补汤总多糖采取灌胃给药,0.5 m L/只,1次/d,10 d后眼球放血处死小鼠,称取体质量和瘤质量,计算抑瘤率;分离血清,并分别制备肿瘤细胞和脾细胞悬液,流式细胞仪检测肿瘤细胞和脾细胞的凋亡;ELISA法检测血清中IL-2,IFN-γ和TNF-α含量。结果：顺铂联合各剂量十全大补汤总多糖组小鼠体质量均高于单纯顺铂组,而中、高剂量多糖组的瘤质量均低于单纯顺铂组;顺铂联合各剂量十全大补汤总多糖组肿瘤细胞的凋亡率明显高于单纯顺铂组,而脾细胞的凋亡率均明显又低于单纯顺铂组（P〈0.05）;顺铂联合各剂量十全大补汤总多糖组IL-2,IFN-γ和TNF-α的分泌水平均明显高于单纯顺铂组（P〈0.05）。结论：十全大补汤总多糖可促进顺铂诱导肿瘤细胞凋亡,并能保护顺铂对脾细胞的损伤作用、促进荷瘤小鼠IL-2,IFN-γ和TNF-α的分泌,与顺铂联合应用具有减毒增效作用。     

白术水提物抑瘤作用及其机制研究

目的:研究白术水提物的抑瘤作用,并从调节免疫功能角度探讨其抑瘤机制。方法:以S180荷瘤小鼠为研究对象,给予不同剂量的白术水提物10 d,称取瘤重,计算胸腺指数、脾指数,同时利用放射免疫测定法检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)的含量。结果:白术各剂量组和模型组瘤重及胸腺指数有显著性差异(P<0.01或P<0.05),白术中剂量组对TNF-α和IL-2均有显著性影响(P<0.01或P<0.05)。结论:白术可以调节S180荷瘤小鼠免疫功能,抑制肿瘤生长,并呈现出一定的剂量效应关系。