黄芩苷对转化生长因子β1 诱导的A549 细胞自噬作用的影响

目的探讨黄芩苷对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的A549 细胞自噬作用的影响。方法采用不同浓 度TGF-β1（2.5、5、10 ng·mL-1）诱导A549 细胞48 h后,检测其Collagen I基因与自噬相关基因表达水平,以 确定模型复制的最佳条件。在高、中、低剂量（200、100、50 μg·mL-1）黄芩苷对TGF-β1 诱导的A549 细胞模 型干预后,采用RT-qPCR 法检测细胞的肺纤维化标志基因CollagenⅠ及自噬相关基因（ATG3、ATG5、ATG7、 ATG12）的表达;Western Blot 法检测自噬调节标志蛋白p62、LC3B Ⅱ/Ⅰ的表达;通过转染Ad-mCherry-GFPLC3B 双荧光标记腺病毒检测细胞中自噬流的情况。结果使用10 ng·mL-1 TGF-β1 诱导A549 细胞48 h 后, CollagenⅠ基因表达显著上调,ATG3、ATG5、ATG7、ATG12 基因表达明显下调,差异均有统计学意义（P＜ 0.05,P＜0.01）。经黄芩苷干预后,与模型组相比,黄芩苷高剂量组（200 μg·mL-1）A549 细胞的CollagenⅠ基因 表达显著下调（P＜0.01）,ATG3、ATG5、ATG7、ATG12 基因表达明显上调（P＜0.05）;黄芩苷各给药组A549 细胞的p62 蛋白表达显著下调（P＜0.05,P＜0.01）,LC3B Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著上调（P＜0.05,P＜0.01）;黄芩 苷高剂量组的细胞自噬能力明显激活。结论黄芩苷可能在减少TGF-β1 诱导的A549 细胞外基质沉积的同 时,能够增强细胞的自噬水平,可能是治疗肺纤维化的有效成分。     

罗勒多糖对HLECs中VEGFR-2/3表达影响的实验研究

【摘要】目的：观察分析罗勒多糖对人淋巴管内皮细胞（HLECs）的血管内皮细胞生长因子受体-2/3(VEGFR-2/3)表达的影响，揭示罗勒多糖抗肿瘤转移的分子机制。方法：乏氧条件下体外培养HLECs细胞，实验分为3组，A组为不加罗勒多糖处理的空白对照组，B组(罗勒多糖，200μg/ml)、C组（罗勒多糖，400μg/ml），观察各组HLECs体外成管能力；实时荧光定量PCR检测罗勒多糖处理的HLECs中VEGFR-2/3 mRNA的表达变化；免疫细胞化学分析VEGFR-2/3蛋白的表达差异。结果：经不同处理的HLECs细胞体外成管数目分别为：29.6±5.47（A组）、23.6±3.68（B组）、19.2±2.00（C组），与A组相比，B、C组均能减少HLECs的体外成管数目（Ｐ<0.05）；VEGFR-2 mRNA相对表达量分别为：1±0（A组）、0.59±0.25（B组）、0.90±0.13（C组），与A组相比，B、C组VEGFR-2 mRNA相对表达量下降；VEGFR-3 mRNA相对表达量分别为：1±0（A组）、0.52±0.19（B组）、0.19±0.09（C组），与A组相比，B、C组VEGFR-2 mRNA相对表达量均下降，其中C组有统计学意义（Ｐ<0.05）。VEGFR-2蛋白表达累积光密度分别为：2.51±0.03（A组）、2.42±0.03（B组）、2.12±0.03（C组），与A组相比，B、C组VEGFR-2 mRNA相对表达量下降；VEGFR-3蛋白表达累积光密度分别为：3.72±0.28（A组）、2.91±0.26（B组）、2.82±0.20（C组），与A组相比，B、C组VEGFR-3 蛋白相对表达量均下降，差异具有显著性（Ｐ<0.05）。结论：罗勒多糖可降低HLECs体外成管能力和下调VEGFR-2/3的表达，这可能是罗勒多糖抑制淋巴管新生，抗肿瘤转移的新机制。     

肾阳虚小鼠睾丸NO、NOS、MDA、SOD变化的实验研究

目的:以"劳倦过度、房事不节"肾阳虚小鼠为模型,观察该模型小鼠睾丸NO、NOS和MDA、SOD的变化.方法:用强迫小鼠游泳法造成劳倦过度,以Colldege效应诱导雄性小鼠房事不节,建立肾阳虚小鼠模型.造模4周后,检测睾丸组织匀浆中NO和MDA含量以及NOS和SOD活力.结果:造模组睾丸中NO含量和NOS活力显著增强(P＜0.01),MDA含量上升(P＜0.05),SOD活力下降(P＜0.05);肾气丸干预组NOS活力显著降低(P＜0.01),NO和MDA含量明显减少(P＜0.05),SOD活力升高(P＜0.05).结论:肾阳虚小鼠睾丸组织内自由基生成增多,自由基清除能力下降.     

补肾中药对肾阳虚小鼠肾上腺细胞形态学的影响

目的 探讨补肾中药对肾阳虚小鼠肾上腺细胞形态学的影响.方法 以"劳倦过度,房室不节"造成肾阳虚小鼠模型.造模小鼠随机分成正常组、模型组、金匮肾气丸治疗组,造模4周后观察补肾中药金匮肾气丸对肾上腺细胞形态学的影响.结果 "劳倦过度、房室不节"肾阳虚小鼠较正常小鼠肾上腺质量显著下降(P＜0.01)、肾上腺系数明显下降(P＜...     

罗勒多糖对HLECs中VEGFR-2/3表达的影响

目的研究罗勒多糖对人淋巴管内皮细胞(HLECs)的血管内皮细胞生长因子受体-2/3(VEGFR-2/3)表达的影响,揭示罗勒多糖抗肿瘤转移的分子机制。方法乏氧条件下体外培养HLECs,实验分为3组,A组为不加罗勒多糖处理的空白对照组,B组(罗勒多糖,200μg·m L~(-1)),C组(罗勒多糖,400μg·m L~(-1)),观察各组HLECs体外成管能力;实时荧光定量PCR检测罗勒多糖处理的HLECs中VEGFR-2/3 mRNA的表达;免疫细胞化学分析VEGFR-2/3蛋白的表达差异。结果 HLECs体外成管数目分别为:29.6±5.47(A组),23.6±3.68(B组),19.2±2.00(C组);与A组比较,B、C组均能减少HLECs的体外成管数目(P0.05)。VEGFR-2 mRNA相对表达量分别为:1(A组),0.59±0.25(B组),0.90±0.13(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-2 mRNA相对表达量下降,但差异没有统计学意义。VEGFR-3 mRNA相对表达量分别为:1(A组),0.52±0.19(B组),0.19±0.09(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-3 mRNA相对表达量均下降,差异有统计学意义(P0.05)。VEGFR-2蛋白表达累积光密度分别为:2.51±0.03(A组),2.42±0.03(B组),2.12±0.03(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-2 mRNA相对表达量下降,但差异没有统计学意义。VEGFR-3蛋白表达累积光密度分别为:3.72±0.28(A组),2.91±0.26(B组),2.82±0.20(C组);与A组比较,B、C组VEGFR-3蛋白相对表达量均下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论罗勒多糖可降低HLECs体外成管能力和并显著下调VEGFR-3的表达,这可能是罗勒多糖抑制淋巴管新生,抗肿瘤转移的分子机制。     

白术水提物抑瘤作用及其机制研究

目的:研究白术水提物的抑瘤作用,并从调节免疫功能角度探讨其抑瘤机制。方法:以S180荷瘤小鼠为研究对象,给予不同剂量的白术水提物10 d,称取瘤重,计算胸腺指数、脾指数,同时利用放射免疫测定法检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)的含量。结果:白术各剂量组和模型组瘤重及胸腺指数有显著性差异(P<0.01或P<0.05),白术中剂量组对TNF-α和IL-2均有显著性影响(P<0.01或P<0.05)。结论:白术可以调节S180荷瘤小鼠免疫功能,抑制肿瘤生长,并呈现出一定的剂量效应关系。     

金匮肾气丸对“劳倦过度、房室不节”肾阳虚小鼠精子质量的影响

以“劳倦过度、房室不节”肾阳虚小鼠为模型，观察金匮肾气丸对肾阳虚小鼠精子质量的影响。结果肾阳虚模型组小鼠与正常对照组相比，精子活率和精子密度明显下降（P〈0.05）；而金匮肾气丸给药组小鼠与模型组相比，精子活率和精子密度明显升高（P〈0.05）。表明金匮肾气丸可以改善肾阳虚小鼠的精子质量。     

房劳-倦劳肾阳虚模型小鼠睾丸LDH-x基因表达的实验研究

目的:观察"房劳-倦劳"肾阳虚模型小鼠睾丸精子特异酶LDH-x mRNA表达的改变。方法:用强迫小鼠游泳法造成劳倦过度,以Colldege效应诱导雄性小鼠房事不节,建立肾阳虚小鼠模型。造模给药4周后,运用实时荧光定量RT-qPCR法检测睾丸中LDH-x mRNA的表达。结果:"房劳-倦劳"肾阳虚模型组LDH-x mRNA显著低于正常组(P<0.01),金匮肾气丸治疗组LDH-x mRNA则明显高于模型组(P<0.05)。结论:该肾阳虚小鼠精子特异酶LDH-x活性的下降以及经肾气丸治疗后LDH-x活性的升高,是LDH-x基因表达改变的结果。     

益气养阴方对子宫颈癌细胞VEGF及MMP2表达的影响

目的 探讨益气养阴方对子宫颈癌细胞血管内皮生长因子(VEGF) 和细胞基质金属蛋白酶2(MMP2)表达的影响.方法 复制小鼠子宫颈癌U14自发性转移模型,应用免疫组织化学及其组织形态学定量分析方法,检测子宫颈癌中VEGF和MMP2的表达.结果 益气养阴方组VEGF表达无强阳性者,表达阳性11例(22%);益气养阴方组MMP-2表达强阳性7例(14%),阳性4例(8%).益气养阴方组VEGF 和MMP2表达水平均明显低于对照组,有显著性差异(P＜0.01).结论 益气养阴方对肿瘤血管形成有明显抑制作用,降低VEGF和 MMP2的表达可能是其抑制肿瘤血管形成的主要机制之一.     

中药调控细胞凋亡抗动脉粥样硬化研究进展

动脉粥样硬化（AS）是一种慢性多因素血管性疾病，是心血管疾病的重要病理基础，多发于中老年，患者死亡率较高。细胞凋亡是机体一种自发性程序性死亡，病理状态下，内皮细胞（VEC）、血管平滑肌细胞（VSMCs）和巨噬细胞凋亡是AS发生和发展的关键因素，VEC凋亡可能是促进AS病变的形成和发展的早期事件，而随后的VSMCs和巨噬细胞凋亡则加速AS不稳定斑块形成，在AS疾病晚期发挥重要作用。因此细胞凋亡可能为治疗AS疾病提供新的靶点。而越来越多的证据表明，中药能够通过调节细胞凋亡因子及凋亡相关信号通路在治疗AS中发挥重要作用。但目前从细胞凋亡探讨中药治疗AS研究缺乏系统总结。因此该文通过查阅国内外相关文献，系统汇总了细胞凋亡的分子机制、重点从线粒体凋亡途径、死亡受体凋亡途径、内质网应激凋亡途径及相关细胞凋亡信号通路，探讨了细胞凋亡在AS中的作用，并对中药通过调控细胞凋亡抗AS的作用及机制进行梳理和总结，旨在为AS的治疗及新的药物研发提供一定的理论依据。