新哒嗪酮类化合物抑制血小板聚集的研究

目的 观察不同浓度的6-(4-取代苯甲酰氨基苯基)哒嗪酮类化合物对二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集的抑制作用.方法 将不同浓度的6-(4-取代苯甲酰氨基苯基)哒嗪酮类化合物分别加入人富含血小板血浆(PRP)中,用多功能血小板聚集仪测定ADP诱导的血小板聚集作用.结果 该新哒嗪酮类化合物对ADP诱导血小板聚集有剂量依赖性抑制作用,其半数抑制浓度IC50(μmol/L)分别为1.04、2.80、3.01、7.32.结论 6-(4-取代苯甲酰氨基苯基)哒嗪酮类化合物具有较强的抑制ADP诱导的血小板聚集作用.     

奎纳克林对人肾癌细胞系786-0的抑制作用研究

目的：研究奎纳克林（quanacrine,OC）对786-0细胞的抑制作用,为临床应用奎纳克林治疗肾癌提供理论依据。方法：采用细胞培养、光学显微镜及MTT法研究奎纳克林对786-0细胞的抑制作用。结果：MTT实验显示QC处理24h胚肾细胞HEK293IC50为24.836μmol/L,肾癌细胞系786-0IC50为10.421μmol/L;QC处理48h胚肾细胞HEK293IC50为21.044μmol/L,肾癌细胞系786-0IC50为6.822μmol/L;QC处理72h胚肾细胞HEK293IC50为15.643μmol/L,肾癌细胞系786-0IC50为3.859μmol/L。结论：QC对肾癌细胞系786-0有明显的增殖抑制作用,作用随时间延长和浓度提高而增强,且其抑制作用具有选择性。     

1种阿霉素新型前体药物的抗肿瘤活性作用研究

目的考察新合成目标前体药物N-苄氧羰基-丙氨酰-丙氨酰-天冬酰-阿霉素在体外对肿瘤细胞增殖的影响,建立合理的前体药物体外抗肿瘤的评价方法。方法分别采用MCF-7和Caski2种肿瘤细胞株．前药处理48h及72h后,分别通过MTr法对常氧及低氧诱导培养的细胞进行检测。结果常氧培养条件下,测得目标前药对MCF．7和Caski细胞株的半数抑制浓度IC50分别大于（137．92＋6．68）μmol／L和（25．3±4．12）μmol／L．其对2种细胞株的增殖抑制作用较原药分别降低了54倍及40倍以上。低氧诱导培养条件下,目标前药对Caski细胞株半数抑制浓度,C。为（12．6±4．30）μmol／L,其对Caski细胞株的增殖抑制作用较原药降低了49倍：而与常氧培养下相比,其对Caski细胞株的增殖抑制作用提高了2倍。结论N-苄氧羰基-丙氨酰-丙氨酰-天冬酰-阿霉素与阿霉素相比对体外培养的肿瘤细胞增殖抑制作用明显降低。初步达到了通过化学修饰降低细胞毒性的作用。     

红景天苷类似物合成及微孔板定量法评估其抗氧化能力

目的:合成红景天苷类似物,并初步分析评价其抗氧化能力。方法:以O-乙酰基溴代葡萄糖、O-乙酰基溴代半乳糖为糖基供体,芳环不同取代的苯甲醇、苯乙醇为糖基配体通过Koenigs-Knorr法制备红景天苷类似物,并采用微孔板定量法分析测定其对2,2-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH.)的清除能力。结果:合成了10个类似物糖苷,确定了其在清除DPPH.反应达到50%时的IC50(μmol/L)。结论:所合成类似物3-(3,4,5-三羟基苯基)丙基-β-D-葡萄糖苷和3-(3,4,5-三羟基苯基)丙基-β-D-半乳糖苷具有较好的抗氧化能力,其IC50分别为36.7μmol/L和39.7μmol/L,优于阳性对照维生素CIC50(54.6μmol/L)。     

替拉扎明联合磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂对人卵巢癌细胞的抑制作用

目的研究替拉扎明（TPZ）联合磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂（LY294002）对人卵巢癌细胞株的体外抑制作用。方法乏氧及空气条件下,TPZ单用及联合LY294002在不同药物浓度下分别作用于人卵巢癌细胞株H08910PM和OVCAR-3,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法评价其抑癌效果。结果在乏氧及空气条件下单独使用TPZ对H08910PM的IC50分别为40．6μmol／L和53．0μmol／L,对OVCAR-3的IC50分别为65．9μmol／L和97．4μmol／L;乏氧及空气条件下TPZ联用LY294002,对H08910PM的IC50分别为22．7μmol／L和31．5μmol／L,对OVCAR-3的IC50分别为49.1μmol／L和51．0μmol／L。结论TPZ对人卵巢癌细胞株有抑制作用,抑癌效果在乏氧条件下高于空气条件（P〈0．01）;LY294002对TPZ有协同作用,与TPZ单独用药相比,二者联用显著降低了TPZ对癌细胞的IC50（P〈0．01）。     

2-芳香酰氨基蝶啶类化合物的合成及其对NOS活性的调节作用

目的：合成新的2-芳香酰氨基蝶啶类化合物，寻找具有NOS调节功能的化合物。方法：以2-氨基-4-二乙胺基-6-芳基蝶啶为母核，对其2位氨基进行芳香酰化并测定目标化合物对iNOS活性的影响。结果与结论：合成了16个2位氨基芳香酰化的蝶啶类化合物（P-1 - P-16），所有化合物均未见文献报道，其结构经IR、UV、^1H NMR、MS和元素分析鉴定。初步药理实验表明：母核（5a-e）2位氨基芳香酰化后，对iNOS活性具有抑制或激活作用，其中P-2、P-7和P-9在-定浓度下可以替代BH4的功能，它们的最小有效浓度分别达到83．32μmol／L，81．98μmol／L和79.70μmol／L。     

灯盏花素对肝癌细胞 HepG2 和结肠癌细胞 Caco2 的体外抗肿瘤活性筛选

观察灯盏花素对人肝癌细胞（HepG2）和人结肠癌细胞（Caco2）的体外增殖抑制影响。方法以不同浓度的灯盏花素分别处理 HepG2 和 Caco2 细胞 24、48和 72 h 后采用 MTT 法检测灯盏花素对 2 种细胞活力的影响,以半数抑制浓度（IC50）及治疗指数（TI）作为评价其抗肿瘤活性及安全性指标。结果 灯盏花素对 HepG2 表现高浓度抑制作用,浓度为 20 000μmol/L 时,对 HepG2 细胞 24、48和 72 h 的抑制率分别为37%、63%和 69%;对 Caco2 细胞呈浓度依赖性,浓度为 5 000μmol/L时,对 Caco2 细胞 24、48和 72 h 的抑制率分别为72%、95%和 92%。灯盏花素对 HepG2 24h的 IC50 值为 24320.5μmol/L;48h的 IC50 值为 30 667.7μmol/L;72 h 的 IC50 值为 15 586.1μmol/L。对 Caco2 细胞 24 h 的 IC50 值为 11 417.0μmol/L;48 h 的 IC50 值为832.2μmol/L;72 h 的 IC50 值为 1 369.2μmol/L。结论 灯盏花素对 HepG2 和 Caco2 细胞均有不同程度的抑制作用,对 Caco2 的抑制效果更明显。     

1,4-二羟蒽醌是一种有效的重组人蛋白激酶CK2的抑制剂

目的观察1,4-二羟蒽醌对重组人蛋白激酶CK2全酶的作用。方法在体外等物质的量混合CK2α与＇α亚基构成重组CK2全酶。以重组人CK2全酶为分子靶点,通过测定转移到CK2底物ATP的32P放射活度,来检测不同浓度5-氯苯并三唑对CK2活性的影响,并进行动力学分析。结果 1,4-二羟蒽醌对重组人CK2全酶具有抑制作用,且该作用随浓度的增加而增强,其IC50为63.15μmol/L;它与ATP呈竞争性抑制CK2的活性,抑制常数Ki为40.49μmol/L;与酪蛋白呈非竞争性抑制CK2的活性,抑制常数Ki为44.72μmol/L。结论 1,4-二羟蒽醌是重组人蛋白激酶CK2的有效抑制剂。     

三氧化二砷对HL-60细胞生长的影响

目的：观察不同浓度的三氧化二砷（As2O3）对HL－60细胞生长的作用。方法：采用瑞氏染色油镜观察细胞形态；四甲基噻唑氮蓝（MTT）比色法观察As2O3对HL－60细胞的生长抑制作用。结果：瑞氏染色显示低浓度的As2O3（0.1μmol/L,1.0μmol/L）诱导后，细胞呈现部分分化现象，而高浓度的As2O3（5．0μmol/L）诱导后细胞呈现凋亡特征，As2O3能明显抑制HL－60细胞的生长，第1天半数抑制率（IC50）约为20．0μmol/L，第2天、第3天IC50均约为5．0μmol/L。结论：As2O3能明显抑制HL－60细胞的生长；低浓度者可诱导HL－60细胞部分分化，高浓度者可诱导其凋亡。     

5,4′-二-正辛烷氧基-7-二氟甲基金雀异黄素抑制人乳腺癌细胞生长

目的:观察金雀异黄素(genistein,GEN)衍生物即5,4′-二-正辛烷氧基-7-二氟甲基金雀异黄素(5,4′-Di-n-octox-yl-7-gem-difluoromethylene-genistein,DodFMG)抑制人乳腺癌MCF-7细胞生长作用。方法:体外培养人乳腺癌MCF-7细胞和人乳腺HBL-100细胞,MTT法测定细胞活性;集落形成法检测细胞的平皿集落形成能力。结果:DodFMG对MCF-7细胞活性有明显的抑制作用,呈剂量依赖性,IC50值为11μmol/L;对HBL-100细胞的抑制作用较弱,IC50值为65μmol/L,其对MCF-7细胞的细胞毒选择指数为5.9(65/11)。DodFMG以浓度依赖方式抑制MCF-7细胞集落形成。结论:DodFMG是一种具有相对选择性的新型抗乳腺癌活性新化学实体。     

CPUHY002对人肝微粒体CYP450酶体外抑制作用研究

目的：评价CPUHY002在体外对人肝微粒体细胞色素P450（CYP450）酶6种亚型酶活性的影响.方法：将CPUHY002与CYP450酶6种亚型的特异性探针底物非那西丁、双氯酚酸钠、奥美拉唑、右美沙芬、氯唑沙宗、丙酸睾酮与人肝微粒体进行孵育,采用LC-MS/MS法测定对应6种代谢产物对乙酰氨基酚、4-羟基双氯酚酸、5-羟基奥美拉唑、右啡烷、6-羟基氯唑沙宗、6β-羟基睾酮的浓度,求算出IC50.结果：CPUHY002对CYP2C19和CYP2E1的IC50值分别为48.02 μmol/L和47.19 μmol/L,对CYP1 A2、CYP2D6、CYP3A4和CYP2C9的IC50值＞100 μmol/L.结论：CPUHY002对于CYP2C19和CYP2E1具有弱抑制作用,对CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4和CYP2C9无抑制作用.     

大豆异黄酮对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用

[目的 ]研究大豆异黄酮类对α 葡萄糖苷酶 (EC 3.2 .1.2 0 )和α 淀粉酶 (EC 3.2 .1.1)的抑制作用 ,以期为揭示大豆异黄酮类在糖尿病中的作用及机理提供依据 .[方法 ]以C18柱层析和高效液相色谱法分离大豆异黄酮类 ,以薄层色谱法、高效液相色谱法和核磁共振检测各组分 ,并用比色法测定各单体组分对酵母α 葡萄糖苷酶和猪α 胰淀粉酶的抑制活性 .抑制酶活性 5 0 %时所需的抑制剂浓度定义为半抑制浓度 .[结果 ]大豆异黄酮具有很强的α 葡萄糖苷酶抑制作用 ,其半抑制浓度值为 2 0～ 15 0μmol/L,其中金雀异黄素的为最强 ,而大豆异黄酮葡萄糖苷形式对α 葡萄糖苷酶的抑制活性较其游离配糖体形式为弱 ,其半抑制浓度值为 2 0 0～ 6 0 0 μmol/L .大豆异黄酮及其糖苷形式均具有α 淀粉酶抑制作用 ,当抑制剂浓度为 1g/L时 ,对α 淀粉酶的抑制率为 10 %～ 2 0 % .大豆异黄酮的丙二酰葡萄糖苷形式则无α 葡萄糖苷酶和α 淀粉酶抑制作用 .[结论 ]大豆异黄酮类具有α 葡萄糖苷酶和α 淀粉酶抑制活性 ,且呈剂量依赖性 .表明 ,食用富含异黄酮类的大豆及其制品对改善非胰岛素依赖型糖尿病症状、防止血糖升高有利     

3-溴丙酮酸增强肝癌细胞对顺铂敏感性的作用

目的探讨3-溴丙酮酸（3-BP）增强肝癌细胞对顺铂敏感性的作用及其可能机制。方法MTT法检测3-BP、顺铂对HepG2、
SMMC7721细胞的增殖抑制作用。选择低于半数抑制浓度（IC50）的100 μmol/L的3-BP和8 μmol/L的顺铂单独或联合处理细
胞,PI 单染流式细胞术检测细胞凋亡,caspase 3 活性检测试剂盒测定caspase-3 的活性变化,ATP检测试剂盒测定细胞内ATP
水平,Western blot 检测XIAP、PARP蛋白的表达。结果3-BP 在50~400 μmol/L 浓度范围内对HepG2、SMMC7721 细胞具有
明显的增殖抑制作用（P<0.01）,作用48 h 的IC50分别为238.9±13.9 μmol/L、278.7±11.7 μmol/L;顺铂在2~32 μmol/L 浓度范围
内对HepG2、SMMC7721细胞具有明显的增殖抑制作用（P<0.01）,作用48 h的IC50分别为16.4±0.9 μmol/L、20.9±1.8 μmol/L。
100 μmol/L 3-BP与8 μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h 的增殖抑制率分别为（60.6±2.2）%、（56.8±2.3）%,明
显高于对照组和单独用药组（P<0.01）。100 μmol/L 3-BP与8 μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h 的凋亡率
分别为（51.1±4.3）%、（46.5±3.9）%,较单用3-BP、顺铂的凋亡率明显提高（P<0.01）。结论3-BP 能增强肝癌细胞HepG2、
SMMC7721对顺铂诱导的凋亡的敏感性,其机制可能是通过引起细胞内ATP缺乏、下调XIAP蛋白的表达以及增加caspase-3的
活性。     

基于王三虎“燥湿相混致癌说”探究半边莲治疗癌症的作用及物质基础

【目的】基于王三虎教授的"燥湿相混致癌说"探讨半边莲治疗癌症的作用及物质基础,分析中药半边莲提取物的化学成分,为进一步研究其抗癌的活性成分提供依据。【方法】运用硅胶柱层析、硅胶薄层层析、反相RP-C18柱层析、MCI柱层析、高效液相等多种色谱手段对半边莲展开系统的化学成分研究,并通过各种波谱、光谱手段鉴定各化合物的结构。对分离所得的化合物,采用人乳腺癌细胞MCF-7和人胃癌细胞MGC-803模型进行抗癌活性评价。【结果】从半边莲中分离鉴定得到6个化合物,分别为:matairesino(1)、(8S,9S,8’S)-4,4’-Dihydroxy-3,3’,9-trimetoxy-9,9’-epoxylignan(2)、3β-hydroxyhop-22(29)-ene(3)、parietin(4)、chrysophanol(5)、gaultheriadiolide(6)。木脂素类化合物1、2在20μmol/L时,细胞抑制率大于50%。【结论】木脂素类化合物1、2具有潜在的抗胃癌和乳腺癌活性,其中化合物2活性最好,对MGC-803细胞增殖活性的半数抑制浓度(IC50)为9.2μmol/L。     

一株海洋放线菌次级代谢产物的抗肿瘤活性研究

目的 对一株南海深海海洋沉积物来源放线菌SCSIO 11594分离出的5个天然次级代谢产物进行初步的抗肿瘤活性研究.方法 将5个天然次级代谢产物命名为化合物1~5,通过CCK8细胞毒性试验检测化合物作用于5株肿瘤细胞及1株正常肝脏细胞HL-7702后的效果,通过Graphad prism软件测定其IC50,并与经典抗肿瘤药物顺铂对比.结果 顺铂作用于5株肿瘤细胞的IC50值范围3.75~5.32μmol/L,化合物2作用于5株肿瘤细胞的IC50值范围0.24~0.74μmol/L,对肿瘤细胞的抑制作用是顺铂的10~20倍;化合物4作用于5株肿瘤细胞的IC50值范围0.28~6.93μmol/L,对肿瘤细胞的抑制作用是顺铂的1~10倍;化合物2和4作用于正常肝脏细胞HL-7702的IC50值分别为3.67μmol/L和12.47μmol/L,与作用于肿瘤细胞的IC50值相比,提示具有较好的抗肿瘤选择性.结论 放线菌SCSIO 11594分离出的次级代谢产物2和4具有较好的抗肿瘤活性和选择性,具有潜在的开发前景.     

羟基喜树碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨羟基喜树碱在体外对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响,为乳腺癌的临床用药提供实验依据。方法：将不同浓度（10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L）的羟基喜树碱作用于人乳腺癌MCF-7细胞48 h,并设不加羟基喜树碱溶液的MCF-7细胞作为对照组,用MTT法测定MCF-7细胞的增殖情况,用Hoechst33258染色检测MCF-7细胞的凋亡情况,以RT-PCR检测羟基喜树碱对MCF-7细胞Casepase-3 mRNA表达的影响。结果：与对照组比较,50μmol/L、100μmol/L及200μmol/L羟基喜树碱对细胞增殖均有抑制作用（P〈0.05、P〈0.01）,尤以200μmol/L的抑制作用最明显,其抑制率呈浓度依赖性增加。荧光显微镜观察显示,100μmol/L及200μmol/L羟基喜树碱处理组中可见典型的凋亡形态学改变。与对照组比较,各羟基喜树碱处理组中MCF-7细胞Caspase-3 mRNA表达水平均升高（P〈0.05、P〈0.01）,并呈浓度依赖性升高趋势。结论：羟基喜树碱可在体外抑制MCF-7细胞增殖,并通过Caspase-3途径诱导细胞凋亡,达到抑制肿瘤细胞生长的作用。     

抑制剂PI-103对786-O细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:探讨抑制剂PI-103对786-O细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。方法:本文建立PI3K抑制剂作用786-O细胞模型,CCK-8法检测PI-103的IC50值,Western blot法检测PI-103作用后细胞内pAkt蛋白表达水平。结果:786-O细胞72 h的IC50为(9.06±0.06)μmol/L,在此浓度下,细胞内p-Akt蛋白的表达水平显著降低(P<0.01)。结论:PI-103通过抑制PI3K来调控PI3K/Akt/mTOR信号通路下游分子,此信号通路在肾细胞癌发生发展中起着重要作用,为肾细胞癌的分子靶向治疗提供理论依据。     

塞来昔布抑制人胃癌细胞MGC803细胞增殖及其分子机制

目的：研究塞来昔布在体外对人胃癌细胞MGC803生长增殖及其抗肿瘤的相关分子机制。方法：体外培养人胃癌细胞MGC803,MTT法检测塞来昔布在相同浓度下,不同时间对于胃癌细胞增殖的影响,并计算IC50值;RT-PCR法检COX-2、MMP-9的mRNA的表达影响;结果：MTT结果显示：相同干预浓度塞来昔布抑制人胃癌细胞增殖,其24 h,48 h,72 h的IC50分别为：（98.67±11.755）μmol/L、（67.506±6.646）μmol/L、（57.662±15.809）μmol/L;RT-PCR结果显示：人胃癌细胞MGC803正常对照组及塞来昔布干预组COX-2mRNA灰度值分别为：0.918±0.031,0.301±0.002（t=16.037,P=0.000）;MMP-9mRNA灰度值分别为：0.928±0.041,0.360±0.012（t=10.487,P=0.003）;结论：塞来昔布抑制胃癌细胞增殖,塞来昔布抗肿瘤机制可能通过抑制COX-2及MMP-9的mRNA的表达来实现的。     

联合应用干扰素α-2b及选择性环氧化酶2抑制剂对肝癌细胞抑制作用的研究

目的观察干扰素α-2b(IFN-α-2b),选择性环氧化酶2(COX-2)抑制剂非甾体类消炎药塞来昔布单用以及两者联合应用时,对人肝癌细胞株HepG2的生长抑制作用及同时检测药物作用后COX-2和血管内皮生长因子(VEGF)及Bcl-2表达的情况,探讨药物作用的机制。方法 HepG2细胞根据所加药物不同分为不同浓度的IFN-α-2b组(1250、2500、5000、10 000、20 000、40 000 U/mL)、塞来昔布组(25、50、100、200μmol/L)、联合用药组(IFN-α-2b 5000 U/mL+塞来昔布50μmol/L、IFN-α-2b 5000 U/mL+选择性COX-2 100μmol/L)。MTT法检测不同时间(24、48 h)各组细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测用药前后COX-2、VEGF、Bcl-2蛋白在HepG2细胞中的表达变化。结果不同浓度的塞来昔布和干扰素对HepG2细胞均有抑制作用,且联合效果明显优于单用,各组与对照组差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术分析:塞来昔布50μmol/L组、塞来昔布100μmol/L组、IFN-α-2b 5000 U/mL组、IFN-α-2b 5000 U/mL+塞来昔布50μmol/L组、IFN-α-2b 5000 U/mL+塞来昔布100μmol/L组细胞凋亡率分别为(14.93±0.79)%、(25.43±0.89)%、(20.52±1.46)%、(27.12±3.34)%、(48.17±2.04)%,与阴性对照组(8.73±0.83)%比较差异均有统计学意义(P<0.05);塞来昔布单用及联合IFN-α-2b作用48 h后,各组COX-2、VEGF、Bcl-2蛋白的表达下调,呈剂量依赖性,联合用药组较单药组作用明显。结论干扰素α-2b和塞来昔布均有抑制肝癌细胞HepG2增殖的作用,同时对细胞具有凋亡诱导作用,亦能抑制细胞中COX-2、VEGF、Bcl-2的表达。上述抑制作用随药物浓度的增加、作用时间的延长而增强,联合作用更强。