97例抗人球蛋白试验阳性患者的血型结果分析

目的探讨抗人球蛋白试验阳性红细胞和（或）血清/血浆对血型鉴定的影响。方法用常规微柱凝胶法和（或）柠檬酸钠稀释红细胞和（或）血清/血浆鉴定上述患者的ABO/Rh血型。结果 84例抗人球蛋白试验阳性的患者用常规微柱凝胶法可以获得ABO/Rh正反相符的结果,10例出生2 d以内的正反定型不相符,主要是抗体没有出现。一周后复查血型均能检定出正反一致的血型。3例HiHA患者正反定型不相符,正定型为AB型,反定型为O型,改变介质溶液,可以获得正反定型一致的血型。分别为A、B、O三种血型。结论没出现自身免疫性（HiHA）急性溶血的患者（出生2日内抗体没出现的新生儿除外）用常规微柱凝胶法均可获得ABO/Rh鉴定正反定型相符的结果。HiHA急性溶血的患者用常规的方法不能检定出正确血型,ABO正反定型受干扰,但改良稀释介质溶液可获得正反定型一致的血型,在《柠檬酸钠法快速鉴定自身免疫性溶血性贫血患者疑难血型的尝试》一文中有详细叙述。     

免离心试管法批量鉴定ABO血型

目的 免离心试管法批量鉴定红细胞ABO血型方法的建立和效果评价.方法 批量鉴定ABO血型时,根据被检样本数,标记一次性试管,在标记好的试管中加样,使被检者红细胞分别与单克隆抗-A、抗-B试剂反应(正定型),血浆分别与A、B、O型试剂红细胞反应(反定型),免离心静置60min后肉眼观察结果,根据反应格局,正反定型相符者直接判定其ABO血型.结果 采用免离心试管法鉴定ABO血型71200例,结果正反定型相符者71172例,正反定型不符和(或)出现弱凝集者28例.正反定型不符和(或)出现弱凝集的28例各反应试管离心后,反应格局和凝集强度与离心前均一致,经综合分析临床资料及不规则抗体、红细胞ABH抗原、唾液血型物质、红细胞吸收放散试验检测结果,确定为ABO亚型15例(不包括A2和A2B),红细胞不规则抗体阳性影响ABO血型检测结果者7例,疾病引起抗原减弱者3例,低球蛋白血症引起ABO血型抗体减弱1例,异基因骨髓移植术后1例,OHmA 1例.13618例需输血患者离心试管法复检ABO血型结果与免离心试管法结果均一致.结论 免离心试管法鉴定ABO血型,结果准确性与试管离心法一致,批量鉴定ABO血型时,可采用免离心试管法代替离心试管法,从而省略繁杂的离心步骤,减少技术操作环节可能出现的差错.     

新生儿血型抗体产生情况分析及微柱凝胶法与盐水试管法的结合应用

目的:分析婴幼儿血型抗体的产生情况及微柱凝胶法与盐水试管法在婴幼儿血型鉴定正反定型中的结合应用?方法:应用微柱凝胶卡进行血型鉴定,结合盐水试管法进行血型反定型?结果:婴幼儿血型鉴定中,由于血型抗体未产生或效价较低而造成正反定型不一致的比例分别为:0~6个月:73%(84/115);6个月~1岁:14.5%(18/124);1岁以上:3.0%(5/169);正反定型不一致者血型构成比分别为:A型41.1%(44/107);B型19.6%(21/107);O型39.3%(42/107);23例正反定型不一致者经盐水试管法离心3次后,其反定型结果与正定型相符?结论:血型抗体6个月以后基本产生,但仍有正反定型不一致现象;婴幼儿血型不一致者A型和O型较多,B抗体(-)是造成正反定型不一致的主要因素,B抗体可能产生较晚;婴幼儿血型鉴定时,采用微柱凝胶法结合盐水试管法更有利于准确判定血型?     

ABO血型正反定型不符10年结果统计分析

目的 分析造成ABO血型正、 反定型不符的原因.方法 选择我院2005年1月—2014年12月份ABO血型正反定型不符的结果进行回顾性分析.结果10年检查的42 488例血型中共有180例ABO血型正反定型结果不符, 不符合率为0.42%;其中冷自身抗体85例,血浆成分异常22例,血型亚型23例,抗体减弱和缺失15例,AB抗原性减弱19例,因为输血或妊娠反应产生同种抗体16例. 结论 正确鉴定红细胞ABO血型,是临床输血安全质量的重要保证.     

双重滤过血浆成分分离法用于ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植

目的 观察双重滤过血浆成分分离法在ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植中的疗效。方法 采用双重滤过血浆成分分离法去除体内血型抗体,预防5例ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植并发溶血反应和纯红再障。结果 受者一次性双重滤过后,全部患者血型抗体均≦1:16,输注血型主要不合骨髓过程中仅1例发生轻度短暂急性溶血反应,无一例发生迟发性溶血反应和纯红再障,全部植入成功。结论 双重滤过血浆成分分离法可有效预防ABO血型主要不合骨髓移植并发溶血反应和纯红再障。     

双重滤过血浆成分分离法用于ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植

目的 观察双重滤过血浆成分分离法在ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植中的疗效。方法采用双重滤过血浆成分分离法去除体内血型抗体，预防5例ABO血型主要不合非亲缘骨髓移植并发溶血反应和纯红再障。结果受者一次性双重滤过后，全部患者血型抗体均≤1：16，输注血型主要不合骨髓过程中仅1例发生轻度短暂急性溶血反应，无一例发生迟发性溶血反应和纯红再障，全部植入成功。结论双重滤过血浆成分分离法可有效预防ABO血型主要不合骨髓移植并发溶血反应和纯红再障。     

37例血浆因素引起正反定型不符原因分析

目的对37例由于患者血浆因素干扰反定型结果而引起的正反定型不一致标本进行原因分析。方法对18016例标本，用微柱凝胶法进行正反定型。并对其中37例正反定型不一致标本进行红细胞不规则抗体的鉴定。抗人球蛋白实验。红细胞吸收释放实验，唾液血型物质测定。结果正确确定上述37例标本的血型，并根据临床诊断。将原因分为缗钱状凝集。自身抗体含量下降及其他原因。结论进行血型鉴定时一定要进行正反定型。一旦出现正反定型不一致，必须查明原因。结合临床及进一步的血清学试验进行综合判断，方可确定血型。以确保安全输血。     

不规则抗体对血型反定型鉴定的影响

用微柱凝胶法对8例患者ABO血型进行分析鉴定,通过血清学试验、抗体筛查、吸收放散试验、稀释血清测定反定型对ABO血型正反不符进行综合分析,探讨由于患者产生不规则抗体在用微柱凝胶法鉴定血型时对反定型结果的影响及对临床血型鉴定和安全输血的意义。微柱凝胶法ABO血型正反定型不符,正定型结果为A型3例、B型4例、AB型1例;反定型结果均为O型或待定。吸收放散试验表明,8例患者红细胞上含有A或B抗原,抗体筛查试验和谱细胞红细胞血型抗体鉴定2例产生抗-e抗体,1例产生抗-C抗体,1例产生抗-D抗体,2例产生抗-M抗体,1例产生自身抗体,1例是非特异性凝集。8例患者都产生了不同性质的蛋白质从而影响了微柱凝胶法对ABO血型反定型的鉴定。在临床输血中通过血清学试验、抗体筛查、吸收放散试验,稀释血清测定反定型综合进行血型分析,确保临床输血安全。     

速发输血反应筛检追踪的分析

目的 探讨输血后24h内受血者发热寒战或轻微血尿的因果关系,为临床诊治提供实验室依据。方法 分别采用细菌培养、ABO正反定型、RhD血型、直抗、游离Hb,对28例受血者(反应组)及127袋献血者(正常组)血液做追踪筛检。结果 反应组及正常组血液细菌培养为“无菌生长”,ABO正反定及RhD血型检定为100％相符,再追检反应组直抗试验100％无因输血后出现红细胞致敏现象,游离Hb测定出现4例结果≥42-48mg／L,有24例均≤40mg／L的正常参考值内,28例不正常率为14．29％。结论 排除了受血者及献血者血液有细菌污染而产生反应,受血者与献血者之间无出现抗原抗体及不规则抗体的ABO及RhD血型不合的反应,无因输血后受血者被红细胞致敏而产生不完全抗体反应,至于游离Hb占14．29％超出正常值的4例,经向临床了解,均因腹部外伤抢救过程使部分红细胞破坏后经尿排出属短暂性。     

ABO血型正反定型不符的原因分析及处理方法

目的:分析临床上常见的ABO血型正反定型不符的原因和处理办法。方法:应用吸收放散试验和唾液血型物质测定试验,抗人球蛋白试验和抗体鉴定试验来检测ABO血型正反定型不符标本,分析正反定型不符的原因,并进行正确的红细胞分型。结果:检查ABO血型正反定型不符48例,其中冷自身抗体20例,血浆成分异常13例,抗体减弱或缺失5例,AB抗原减弱3例,血型亚型2例,同种抗体5例。结论:只有找出ABO血型正反定型不符的原因,并用恰当的血清学试验来正确鉴定ABO血型,才能确保输血安全。     

两种方法分离小鼠脾原始T淋巴细胞效果比较

目的比较Ficoll-Paque梯度离心法与免疫磁珠法分离T淋巴细胞的效果差异,筛选有效的、优异的分选小鼠脾原始T淋巴细胞方法。方法分别采用Ficoll-Paque梯度离心法及Miltenyi Biotec免疫磁珠进行小鼠淋巴细胞分离。血小板计数器统计单核淋巴细胞数,苔盼蓝染色判断细胞存活率,流式细胞术鉴定CD4＋CD62＋T淋巴细胞纯度,并进行统计学分析。结果免疫磁珠法CD4＋CD62＋T淋巴细胞纯度较高为（66.27±3.52）%,Ficoll-Paque梯度离心法细胞纯度为（15.27±4.16）%,两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）;但Ficoll-Paque梯度离心法获取淋巴细胞数（1.47±0.35）×10^8较免疫磁珠法的（0.67±0.26）×10^8多,两者比较差异有统计学意义（t=8.199,P〈0.01）,且Ficoll-Paque梯度离心法细胞存活率（93.9±2.6）%较免疫磁珠法的（89.9±2.9）%高,两者比较差异亦有统计学意义（P〈0.05）。结论免疫磁珠法适合分离小鼠脾原始T淋巴细胞并用于细胞纯度要求高的免疫学实验,但细胞得率需进一步优化。     

免疫磁珠法及密度梯度离心法分离纯化人外周血中性粒细胞的比较

目的比较免疫磁珠法和密度梯度离心法分离纯化人外周血中性粒细胞的可靠性。方法用免疫磁珠法和密度梯度离心法分别分离中性粒细胞,使用血球计数仪结合显微镜鉴定细胞纯度、回收率,以台盼蓝检测细胞活力。结果免疫磁珠法与密度梯度离心法分离中性粒细胞纯度分别为（98．76±0．53）％,（92．34±1．57）％,回收率分别为（90．01±2．24）％和（82．20±2．17）％,两种方法分离后中性粒细胞活力分别为（95．60±2．30）％,（94．20±3．11）％。结论免疫磁珠法分离人中性粒细胞纯度及回收率均好于密度梯度离心法,但分离后细胞活性二者差异不大。     

可植入微型轴流血泵溶血实验研究

目的通过自制轴流血泵进行体外、体内溶血实验,探讨血泵的溶血特性。方法轴流血泵置于充满新鲜羊血的模拟循环通路中,在输出流量为5L／min,后负荷压力为100mmHg的条件下,检测血泵体外溶血水平。在3只健康绵羊体内植入血泵进行在体辅助实验,并稳定运转24h,测定其在体溶血水平。结果可植入微型轴流血泵的体外溶血指数（normal index of haematolysis,NIH）为（0．01644±0．00018）g／100L。在体实验中,血泵运行无机械故障,循环辅助后血浆游离血红蛋白（plasma free hemoglobin,FHb）及乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）呈现上升趋势,平均最大值分别达（7．93±0．71）g／L、（622．3±22．5）U／L。结论血泵溶血性能在可接受范围内,接近于部分国外三代血泵溶血水平,初步具备进入动物辅助实验研究水平。     

滤除白细胞后血浆成分变化的研究

目的探讨血液经过白细胞滤除后血浆成分的变化。方法留取滤除白细胞前后的血液标本,离心后分离出血浆,检测活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（Fib）含量、总蛋白（TP）、游离血红蛋白（FHb）、K＋、Na＋含量。结果过滤前后血浆中的纤维蛋白原有较显著性差异（P〈0.05）。结论经白细胞滤器滤除白细胞后血液中某些成分发生变化,但仍在参考范围之内。     

免疫磁珠法分选小鼠肝脏Kupffer细胞及其特性观察

目的:建立免疫磁珠法,分离纯化小鼠肝脏Kupffer细胞并进行功能鉴定。方法:采用原位肝脏酶灌注、制备肝非实质细胞悬液、加入PE标记的大鼠抗小鼠F4/80一抗,然后结合山羊抗大鼠IgG Dynabeads免疫磁珠分选Kupffer细胞,流式细胞仪检测其纯度并检测其吞噬功能。结果:在经过胶原酶Ⅳ型消化、免疫磁分选,获得小鼠肝Kupffer细胞产量约为(8.05±0.34)×106/鼠肝,细胞纯度为(96.6±0.7)%,细胞活力大于90%。结论:应用免疫磁珠法能有效地分离纯化小鼠肝脏Kupffer细胞,为体外进一步研究提供了高纯度和活力的Kupffer细胞群。     

新型左心辅助装置的体外溶血试验

目的：观察研究在左心辅助情况下,不同流量,驱动压力,压缩时间比等条件下,对于血液破坏情况。方法：新鲜狗血注入肝素,达到完全肝素化(ACT时间大于450s)．在装有新型左心辅助泵的体外循环测试系统中,利用自制的动力驱动系统,分析不同压力,频率,流量下的血浆游离血红蛋白(FHb),血浆纤维蛋白原(Fib)的变化。结果：在相同流量下,驱动压力越大FHb指标越高,Fih指标越低,在平均血压固定下,改变压缩时间比为0．25～0．45,发现在0．38有较低的FHb和较高的Fib结果,而在驱动压力,压缩时间比固定的条件下,流量越大,对血液的破坏越大。结论：在流量固定情况下,越小有效驱动压力以及保持左心辅助的压缩比为0．38对血液破坏较少,而增加流量将增大对血液的损伤。     

一种改进的提取人外周血和组织线粒体DNA的方法

目的：建立一种简便、快捷地从人外周血和组织中制备高质量线粒体DNA的方法。方法：以差速离心法分离线粒体,用碱性SDS法裂解线粒体膜,释放线粒体DNA后用酚／氯仿抽提,TE或ddH2O溶解。然后将所得线粒体DNA进行纯度鉴定并和其他现有方法制备的线粒体DNA用PCR进行长片段扩增,比较扩增效果。结果：用改进的方法制备的线粒体DNA中没有检测到核DNA,并能有效扩增8kb长的目的片段。结论：改进后的方法简便、快捷,制备的线粒体DNA纯度高,也有利于长片段PCR扩增。     

不同样本和方法对测定大鼠血液生化指标的影响

目的比较血清和血浆两种不同样本和不同测试方法对大鼠血液生化指标测定值、血糖测定值的影响。方法用血糖仪测定来源相同大鼠的全血血糖值,然后对其血清和血浆样本进行常规生化指标检测。结果在血清与血浆样本进行19个常规生化项目检测中,ALB、TP、ALP、CHOL、URIC、GLU、Mg、LD、Ca差异有显著性(P0.05),在其余10项血清与血浆检测值比较中,差异无显著性(P0.05)。不同样本和不同方法对血糖的检测结果分析差异有显著性(P0.05)。结论不同样本和方法对血清与血浆中部分生化项目检测时存在差异,不同方法和样本检测血糖结果也存在差异。     

联合免疫磁珠与逆转聚合酶联反应在肝细胞癌患者外周血癌细胞检测中的应用

目的 研究联合免疫磁珠分类与巢式逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）在肝细胞癌患者外周血癌细胞检测中的应用价值。方法 分别收集肝细胞癌（45例）、肝硬化（16例）、肝炎（20例）患者及健康人（18例）的外周血，以CD15和Ber-EP4免疫磁珠富集血液中的癌细胞，用巢式RT-PCR检测其外周血甲胎蛋白（AFP）mRNA水平。结果 AFPmRNA在肝细胞癌、肝硬化和肝炎患者的检出率分别为72．1％．43．8％和25．0％，肝细胞癌组与肝硬化组和肝炎组比较的差异均有显著性意义（P〈0．05和P〈0．01）。结论 联合免疫磁珠分类与巢式RT-PCR法可提高肝细胞癌患者外周血AFPmRNA的检出率。     

健康与非健康人群血浆髓过氧化物酶水平比较

目的:探讨血浆髓过氧化物酶（MPO）参考值在健康与非健康人群中的作用。方法:选取998例相关样本,按照除MPO外的心血管指标如总胆固醇、血脂、血压、血常规、心电图分为正常组（330例）与非正常组（668例）,采用酶联免疫法定量检测试剂盒测定健康成人血浆MPO的含量,分别统计MPO含量分布,评价检测方法。结果:血浆MPO水平与性别有一定相关性,和总胆固醇、血压、血脂、血常规和心电图具有一定关联。结论:血浆MPO水平参考值的建立,可以起到心血管异常状态预警作用,为临床应用提供参考依据。