竞争性逆转录-聚合酶链反应和毛细管电泳定量检测慢性髓系白血病患者bcr/abl mRNA

ｂｃｒ ａｂｌ融合基因绝大部分融合方式为ｂ3ａ2或ｂ2ａ2型。我们根据竞争性逆转录 酶合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)的原理 ,设计和构建了该基因的竞争性参照物 ,并利用毛细管电泳技术对竞争性ＲＴ ＰＣＲ的产物进行分离分析 ,建立了对该基因精确的定量分析方法。材料和方法1　细胞标本　Ｋ5 6 2细胞系 (含ｂ3ａ2型融合基因 )和ＨＬ 6 0细胞系为本室冻存。含ｂ2ａ2型融合基因的白血病细胞采自1例住院慢性髓系白血病 (ＣＭＬ)患者。ＲｉｂｏＭＡＸＴＭ 体外转录试剂盒购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司。毛细管电泳无胶筛分ＤＮＡ专用试剂盒购自中国科学…     

造血干细胞移植中氟康唑与伊曲康唑短疗程预防真菌感染的观察

目的比较异基因造血干细胞移植患者应用氟康唑和伊曲康唑预防侵袭性真菌感染的疗效及安全性。方法回顾分析192例异基因造血干细胞移植患者予短疗程（30d）氟康唑或伊曲康唑行真菌一级预防,其中应用氟康唑134例,伊曲康唑58例,比较两组患者侵袭性真菌感染的发生和转归情况。结果氟康唑组和伊曲康唑组移植30、60、90、180d侵袭性真菌感染的发生率分别为9.0%和5.2%、16.5%和6.9%、17.2%和8.7%、22.0%和16.4%,差异均无统计学意义（P值分别为0.370、0.081、0.128、0.309）,但移植后60d时P值明显较小。真菌感染发生部位均以肺部为主。患者均能很好耐受两药,但伊曲康唑副反应较大（19.0%vs2.2%,P=0.000）。结论短疗程伊曲康唑与氟康唑预防异基因造血干细胞移植后侵袭性真菌感染在移植60d时伊曲康唑较氟康唑显示了一定的优势。     

自体外周血纯化CD34+细胞移植治疗系统性红斑狼疮后并发肺结核的临床研究

[目的]为了探讨自体外周血造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮后并发肺结核的临床特点. [方法]回顾性分析了2例自体外周血造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮后并发肺结核的临床、实验室检查和辅助检查资料.[结果]自体外周血造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮后结核感染的临床表现和辅助检查多不典型,但多伴有发热.[结论]虽然发热的特点与热型等都不典型,但对移植治疗后发热的患者,特别是经过常规治疗效果不佳的患者,要高度警惕并发结核可能.     

异基因造血干细胞移植后迟发性非感染性肺部并发症的发生和危险因素分析

目的 分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后迟发性非感染性肺部并发症(LONIPC)的发生和危险因素.方法 回顾性分析我院2003年1月至2006年8月144例接受allo-HSCT并存活超过3个月的患者资料,统计LONIPC的发生率,分析其发生的危险因素.结果 144例患者中位随访时间为1149(103～2151)d,其中24例(16.7%)被诊断为LONIPC,发病中位时间为allo-HSCT后235(116～950)d.单因素分析结果显示,LONIPC的发生与巨细胞病毒(CMV)抗原血症(P＝0.000)、急性移植物抗宿主病(aGVHD)(P=0.026)、慢性移植物抗宿主病(cGVHD)(P=0.002)显著相关.多因素二分类Logistic回归分析结果显示,LONIPC发生的危险因素为cGVHD(OR=18.804,P=0.004)和CMV抗原血症(OR=14.376,P=0.000).结论 LONIPC是allo-HSCT晚期主要的并发症之一,eGVHD和CMV抗原血症是allo-HSCT后LONIPC发生的相关危险因素.     

以大环内酯类抗生素为主治疗异基因造血干细胞移植后阻塞性细支气管炎的疗效分析

阻塞性细支气管炎(BO)是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后患者最为常见的迟发性非感染性肺部并发症(LONIPC)之一,其发病率为6%～26%,死亡率高达60%,近年来逐渐受到重视~[1-3].因BO的发病机制尚不清楚,故尚无有效的治疗方法.我们观察大环内酯类抗生素(阿奇霉素)治疗BO的疗效,并通过比较治疗前后相关细胞因子水平的变化,探讨大环内酯类抗生素治疗BO的作用机制.     

第三方骨髓来源间充质干细胞治疗异基因造血干细胞移植后难治性迟发性出血性膀胱炎20例临床研究北大核心CSCD

目的观察第三方骨髓来源间充质干细胞(MSC)治疗异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后难治性迟发性出血性膀胱炎(LOHC)的疗效和安全性.方法回顾性分析2018年7月至2020年6月allo-HSCT后发生难治性LOHC 20例患者在常规治疗基础上联合第三方骨髓来源MSC治疗.MSC以每次1×10^(6)/kg、每周1次输注,直至症状改善或连用4次无效停用.在MSC治疗前及治疗后第8周应用定量PCR法检测患者尿液标本中BK病毒(BKV)、JC病毒(JCV)、巨细胞病毒(CMV).结果①20例难治性LOHC患者中,男15例、女5例,中位年龄35(15~56)岁;急性淋巴细胞白血病(ALL)5例,急性髓系白血病(AML)9例,骨髓增生异常综合征(MDS)5例,母细胞性浆细胞样树突细胞瘤(BPDCN)l例;HLA全相合移植4例,HLA不全相合移植16例.②MSC输注中位次数为3(2~8)次.17例患者获得完全缓解,1例获得部分缓解,总缓解率为90.0%.移植后中位随访397.5(39~937)d,13例存活、7例死亡,死亡原因包括急性GVHD 1例、感染5例、血栓性微血管病(TMA)1例.③MSC输注后第8周尿BKV-DNA及CMV-DNA拷贝数较治疗前显著降低(11342.1×10^(8)拷贝/L对5.2×10^(8)拷贝/L,P=0.016;3170.0×10^(4)拷贝/L对0.2×10^(4)拷贝/L,P=0.006),而JCV-DNA与治疗前相比无明显改变(P=0.106).④未发生MSC输注相关不良反应.结论第三方骨髓来源MSC对allo-HSCT后难治性LOHC具有显著疗效且安全性良好.     

SLE患者自体外周血纯化造血干细胞移植后自身抗体的变化

目的研究自体外周血纯化造血干细胞移植对系统性红斑狼疮(SLE)患者自身抗体的影响并评估治疗效果。方法16例接受自体外周血纯化造血干细胞移植的SLE患者列入研究。应用酶联免疫吸附试验动态监测移植前及移植后3,6,12个月血清中自身抗体含量,并进行定量分析。结果自体外周血造血干细胞移植治疗SLE后,ANA、抗双链DNA抗体、抗Sm抗体、抗RNP抗体的滴度均较移植前下降。其中移植后3,6,12个月的血清中ANA、抗RNP抗体的含量均明显低于移植前。结论自体外周血纯化造血干细胞移植能减少血清中的自身抗体,有效治疗SLE。     

解脲脲原体上转换发光免疫层析试纸条的制备

目的:获得抗解脲脲原体外膜多条带蛋白(MB蛋白)的多克隆抗体,制备能够用于解脲脲原体检测的上转换发光免疫层析试纸条。方法:以体外表达的解脲脲原体外膜MB蛋白N端保守性序列为抗原,免疫小鼠制备抗MB蛋白的抗体,ELISA检测免疫动物血清抗MB抗体滴度,并以小鼠抗体标记上转换发光体颗粒(UCP颗粒),制备能够检测解脲脲原体的上转换发光免疫层析试纸条。结果:解脲脲原体多条带蛋白免疫动物血清抗MB的IgG抗体滴度均超过1∶25600,以此抗体为基础建立的解脲脲原体上转换发光免疫层析试纸条能够识别1～200μg/L的解脲脲原体MB抗原。结论:初步制备的上转换发光免疫层析试纸条能够检测解脲脲原体。     

造血干细胞移植患者肠外营养支持的临床观察

目的探讨肠外营养（PN）支持对造血干细胞移植患者的重要性及各种营养素的作用。方法回顾性分析2008年1月至2009年9月106例接受造血干细胞移植患者的临床资料,根据营养支持方式不同分为PN组（n=42）和非PN组（n=64）,比较两组患者在造血重建时间、口腔黏膜炎、肝功能异常、感染及移植物抗宿主病（GVHD）发生率等方面的差异;进一步分析核黄素、谷氨酰胺、结构脂肪乳等营养素的作用。结果接受PN支持的42例患者中,包含接受核黄素的患者33例,谷氨酰胺24例,结构脂肪乳26例。PN组患者的口腔黏膜炎发生率显著低于非PN组（31．0％比51．6％,P=0．036）,而两组的感染率（42．9％比46．9％,P=0．898）、GVHD发生率（21．4％比31．3％,P=0．267）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平[（49．5±9．8）U／L比（69．9±10．9）U／L,P=0．196]、粒系重建时间[（11．6±0．3）d比（12．3±0．3）d,P=0．187]及血小板重建时间[（14．1±0．9）d比（13．3±0．4）d,P=0．386]差异均无统计学意义。核黄素组的口腔黏膜炎发生率为27．3％,有低于无核黄素组（44．4％）和非PN组（51．6％）的趋势,但差异无统计学意义（P=0．073）。谷氨酰胺组、无谷氨酰胺组和非PN组在口腔黏膜炎发生率、感染率、GVHD发生率、ALT水平及造血重建时间方面的差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结构脂肪乳组的ALT平均值为（38．7±4．9）U／L,有低于物理混合的中长链脂肪乳组[（68．5±23．0）U／L]和非PN组[（69．9±10．9）U／L]的趋势,但差异无统计学意义（P=0．243）。结论造血干细胞移植患者可从合理的PN中获益。核黄素对口腔黏膜炎的预防可能有益。结构脂肪乳与中长链脂肪乳对于肝脏功能具有同样的安全性。谷氨酰胺的作用有待进一步研究。     

自体外周血干细胞移植治疗难治性天疱疮一例

目的探讨自体外周血干细胞移植治疗天疱疮的可能性。病历资料男性患者，35岁，全身反复大疱4年余，根据临床表现、组织病理和免疫荧光检查确诊为天疱疮。经糖皮质激素和免疫抑制剂治疗效果不佳，2月前出现髋关节疼痛，经X线和CT检查诊断为股骨头无菌性坏死。采取环磷酰胺及粒细胞集落刺激因子作为动员剂，利妥昔单抗联合净化。用环磷酰胺联合抗胸腺细胞球蛋白、利妥昔单抗进行预处理，同时碱化和水化尿液，保护心、肝和肾功能。观察移植后临床表现、造血和免疫指标等的变化。结果患者移植结束即停用糖皮质激素。3周后自觉双侧髋关节疼痛减轻，复查CT示股骨头缺血性改变减轻。移植6周后直接免疫荧光和间接免疫荧光检查转阴并持续阴性。经一年复诊，临床及免疫学检查均无复发迹象。结论本研究结果提示自体外周血干细胞移植治疗天疱疮近期疗效显著。可能是治疗存在治疗抵抗的重症天疱疮潜在的“根治”方法．但其风险收益比尚需进一步评价。