p38 MAPK对嗜酸性粒细胞和支气管上皮细胞共培养时细胞因子释放的调控作用

目的 了解嗜酸性粒细胞和支气管上皮细胞相互作用诱导细胞因子释放的p38 MAPK信号转导通路.方法 用CD16磁珠抗体分离外周血中嗜酸性粒细胞,以嗜酸性粒细胞和支气管上皮细胞(BEAS-2B)接触共培养为实验模型,观察SB 203580对细胞培养上清液中细胞因子浓度的影响.细胞因子浓度采用ELISA和流式细胞微珠方法测定.结果 SB 203580能够有效抑制BEAS-2B细胞释放IL-6、IL-8(P＜0.05)和嗜酸性粒细胞释放IL-8(P＜0.01).SB 203580对嗜酸性粒细胞与BEAS-2B细胞接触共培养诱导的IL-6、IL-8和IP-10释放具有显著抑制作用(P＜0.001).结论 嗜酸性粒细胞、BEAS-2B细胞单独或相互作用时均通过p38 MAPK信号转导通路释放细胞因子.     

三种全自动粪便分析仪对粪便隐血和幽门螺杆菌抗原检测的效果比较

 目的 探讨科域KU-F20、爱威AVE-562、沃文特FA280三台不同品牌型号粪便分析仪检测粪便隐血实验(occult blood test,OB)和粪便幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)抗原,与人工法比较的一致性。方法 收集2020-06至2020-09住院患者粪便标本1851例,分别采用仪器法和人工法进行粪便OB和HP抗原检测,计算每台仪器的灵敏度、特异度、符合率,并进行差异比较及一致性分析。结果 KU-F20、AVE-562、FA280检测粪便OB与人工法比较,灵敏度分别为0.96、0.91、0.99,特异度分别是0.75、0.84、0.63,符合率分别是0.91、0.89、0.92,配对卡方检验分别是P=0.424、0.099、＜0.01,Kappa值分别是0.73、0.71、0.71。KU-F20、AVE-562、FA280检测粪便HP与人工法比较,灵敏度分别为0.88、0.85、0.90,特异度分别是0.60、0.95、0.66,符合率分别是0.80、0.88、0.83,配对χ²检验分别是P=0.689、＜0.01、0.56,Kappa值分别是0.48、0.73、0.56。结论 三台仪器检测粪便OB同人工法比较,一致性显著;AVE-562检测粪便HP抗原同人工法比较,一致性显著。     

电极法测定葡萄糖、尿素氮的应用

应用电极方法对生物样品中的离子和气体进行分析是近３０年来生化检验中发展最迅速的检测手段之一，随着新的电极技术发展，除电解质外，更多的生化指标可应用电极法进行分析。ＢＥＣＫＭＡＮ公司生产的ＣＸ３型离子分析仪，即采用酶电极技术测定生物体液中的葡萄糖和尿...     

核酸质谱技术检测常见念珠菌血症病原菌

目的联合聚合酶链反应与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术, 构建检测5种临床常见念珠菌血症病原菌的高通量检测方法。方法方法学建立。以白色念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌为目标菌株, 以内转录间隔区为靶基因, 设计特异的单碱基延伸引物, 在同一反应体系内进行单碱基延伸反应, 用MALDI-TOF MS检测各目的菌特征峰;使用模拟血流感染样本验证上述构建的检测体系敏感度、特异度;前瞻性收集2021年10月至2022年9月解放军总医院第一医学中心检验科108例疑似或确诊念珠菌血症患者血液样本并检测;将核酸质谱检测结果与金标准血培养方法进行比较。结果用所建立的核酸质谱检测体系同时检测5种临床常见念珠菌, 各菌种均可产生特异的产物峰且各菌种之间不存在相互干扰。白色念珠菌的最低检测限可达100 CFU/ml, 近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌的最低检测限可达10 CFU/ml。对108份血液样本进行检测, 核酸质谱的敏感度为94.74%(36/38), 特异度为97.14%(68/70), 阳性预测值为92.31%(36/39)...     

铜离子活化镉还原法测定血清中硝酸盐浓度

目的建立一氧化氮（ＮＯ）间接测定方法，用铜离了无与伦比 镉将血清中的硝酸法（ＮＯ３）还原为亚硝酸盐（ＮＯ２），ＮＯ２通过一Ｇｒｉｅｓｓ试剂的重氮，偶氮反应进行定量。结果ＰＨ在９．７时，活化镉 还原ＮＯ３能 强，整个反应９０分钟到达平衡，最大还原率７１％。血清ＮＯ３浓度为４１．７６μｍｏｌ／Ｌ时，批内变展览纱数（ＣＶ）为８．５３％，批间ＣＶ为１０．１５％。测定３１例健康人和３０例糖尿病病人血清中ＮＯ     

实时荧光定量PCR非特异性分析

聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)因灵敏度高、操作简便在各个领域得到了广泛的应用。然而,伴随其高灵敏度存在的非特异性问题在一定程度上限制了其应用。不同于普通检测方法,该技术的非特异性问题主要由可以指数扩增的引物二聚体(primer dimer,PD)引起。对此,引物设计时使用的中部同序引物对可以从根本上避免PD的产生,从而解决由其引起的非特异性问题。该文从PCR的发展和本质、PCR非特异性产生的原因和应对策略等方面作一总结及分析。     

细胞固定技术在两种细胞共同培养研究中的应用

目的探讨细胞固定对鉴别支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞两种细胞共同培养过程中细胞代谢产物来源的作用及其机制。方法用1％多聚甲醛固定嗜酸粒细胞和支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞；通过锥虫蓝、伊红细胞染色，观察多聚甲醛固定对细胞形态、结构、活力和与正常细胞接触培养过程中与正常细胞黏附能力的影响；用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法定量分析固定细胞与正常细胞共同培养过程中对白细胞介素（IL）-6释放的影响。结果多聚甲醛固定后支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞均变为死亡细胞，但其形态、结构及嗜酸粒细胞中颗粒着色无明显变化；多聚甲醛固定的BEAS-2B细胞与正常及固定的嗜酸粒细胞接触培养仅有极少量细胞发生黏附，而多聚甲醛固定的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞接触培养则有较大数量的细胞发生黏附，但黏附细胞数量少于两种正常细胞的共同培养；固定后的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞共同培养过程中可诱导BEAS-2B细胞释放IL-6。但与嗜酸粒细胞单独培养比较，固定后BEAS-2B细胞与正常嗜酸粒细胞共同培养对细胞培养上清液中IL-6浓度无明显影响。结论经多聚甲醛固定后，细胞死亡并丧失其代谢功能，但其表面仍保留可诱导其他细胞活化的结构成分，此技术可用于两种或多种细胞共同培养过程中代谢产物来源的鉴别。     

尿α1微球蛋白和β2微球蛋白对2-4期慢性肾病患者的诊断价值

目的：探讨尿α1、β2微球蛋白在2～4期慢性肾病患者中诊断价值。方法解放军总医院2011年12月至2013年5月肾内科的134例住院患者和50例健康体检者的尿α1、β2微球蛋白和其他肾功能指标进行检测分析,采用MDRD公式进行肾小球滤过率计算。结果慢性肾病组尿α1、β2微球蛋白水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义（P＜0．01）。2～4期慢性肾病患者中尿α1、β2微球蛋白结果呈明显升高趋势,其差异有统计学意义（P＜0．05）。尿α1、β2微球蛋白在3a和3b期中结果有明显差异,3a期尿α1微球蛋白（20．00±18．9）mg/L、3b期（40．5±28．5）mg/L ;3a期β2微球蛋白（4．1±4．0）mg/L、3b期（10．0±8．7）mg/L。相关分析显示,尿α1、β2微球蛋白与肌酐呈显著正相关,与eGFR呈显著负相关。结论尿α1、β2微球蛋白是用于评价慢性肾脏疾病肾功能较好的实验室指标。     

流式细胞术检测血小板相关抗体在免疫性血小板减少症中的应用

目的：探讨流式细胞术检测血小板相关抗体在免疫性血小板减少症（ITP）的临床应用价值。方法60例健康体检者、51例 ITP 患者（23例新诊断 ITP 患者、28例持续性 ITP 患者）和21例非 ITP 继发性血小板减少症患者的血小板相关抗体, PAIg 的表达率及荧光强度,与血小板、巨核细胞数量进行相关性分析;分析持续性 ITP 经过治疗后与治疗前的 PAIg 表达率。结果ITP 患者组 IgG、IgA 和 IgM 的荧光阳性百分率和平均荧光强度均明显高于健康对照组,差异有统计学意义（P ＜0．01）。与非免疫性血小板减少组比较,差异有统计学意义（P ＜0．05）。与自身免疫病比较,差异无统计学意义（P ＞0．05）。非免疫性血小板减少组与健康对照组比较,差异无统计学意义（P ＞0．05）;自身免疫病组与健康对照组比较,差异有统计学意义 P ＜0．01;在持续性 ITP 治疗患者中,完全反应（complete response,CR）组的 PAIg 与治疗前进行组间比较,差异有统计学意义（P ＜0．01）。有效（response,R）组的 PAIg 与治疗前组间比较,差异具有统计学意义（P ＜0．05）。结论流式细胞术检测 PAIg 可以用于 ITP 诊断、鉴别诊断和病情监测。