正常人和非胰岛素依赖型糖尿病人红细胞胰岛素受体的观察

本文报道26例正常男子和12例非胰岛素依赖型糖尿病人(NIDDM)红细胞胰岛素受体测定结果,并进行比较分析。结果表明:正常男子红细胞胰岛素特异性结合率为 7.08±2.38％,红细胞受体数为2139±245,平均亲合常数为0.81±0.31(×10~8M~(-1);肥胖与非肥胖NIDDM病人组特异性结合率均明显下降,分别为4.54±2.99及4.48±3.51％,红细胞受体数亦均明显下降。Scatchard曲线表明特异性结合率的下降系红细胞受体数减少与血胰岛素浓度增加所致,此时平均亲合常数保持不变(血胰岛素浓度与红细胞受体数呈显著负性相     

红细胞胰岛素受体分析法——若干影响因素的探讨

作者研究了国产碘源制备的A14-[~(125)I]-单碘原子碘化胰岛素及实验条件对红细胞胰岛素受体分析法的影响。结果显示,用新鲜分离之免红细胞(4.4×10~9/毫升),A14-[~(125)I]-单碘原子碘化胰岛素100微微克及未标记胰岛素(0～0.5×10~5微克)在pH8.0缓冲G液中,30℃振荡保温60分钟,可获重复性良好之结合抑制曲线。     

结合胰岛素受体的胰岛素位点研究

目的　用肽库筛选技术寻找与胰岛素受体结合的胰岛素位点。方法　用噬菌体随机环七肽库 ,与亲和于脂质体表面的鼠肝胰岛素受体亲和筛选 ,测定阳性噬菌体与胰岛素受体的亲和力 ,测定高亲和力克隆插入DNA序列 ,推断出融合于gⅢ蛋白末端环七肽的氨基酸残基序列。固相法选择性人工合成多肽配基YS ,测定多肽YS与胰岛素受体的亲和力。比较高亲和力短肽与胰岛素的结构特征 ,寻找胰岛素肽链的类似结构 ,推断与胰岛素受体结合的胰岛素位点。结果　经过三轮亲和筛选 ,选择 12个阳性克隆测序 ,三种短肽YS(CYIRSLRLC)、RL(CRPLLRDRC)、MN(CNFLYGILC)出现频率高 ,都含有较多Leu和Arg。合成肽YS与胰岛素受体有较高亲和力 ,Kd值为 4 3 1× 10 8L/M。结论　研究提示 ,胰岛素B链B11(Leu)、B15 (Leu)是与胰岛素受体的直接结合位点。     

氟红锂对Ⅱ型糖尿病患者离体红细胞胰岛素受体磷酸化的作用

目的从受体水平探讨锂盐改善胰岛素敏感性的作用机制。方法红细胞经RPMI-1640孵育30min;用对甲苯磺酰氟(PMSF)及超速低温离心等方法制备红细胞胰岛素受体标本;按Haruhiko酶联免疫吸附法(ELISA)分析红细胞磷酸化胰岛素受体数。结果胰岛素预处理Ⅱ型糖尿病患者红细胞后的磷酸化胰岛素受体数较对照组减少;用氯化锂预处理Ⅱ型糖尿病患者及对照组红细胞吸光度分别为(1mM氯化锂)0.439±0.121、0.399±0.098;(10mM氯化锂)0.514±0.130、0.384±0.102,表明1～10mM氯化锂能引起二者红细胞胰岛素受体磷酸化(P＜0.01),前者的反应显著高于后者;经10-7M胰岛素加1mM氯化锂联合处理的Ⅱ型糖尿病患者的红细胞,其磷酸化胰岛素受体数高于单独用10-7M胰岛素者。结论肥胖的Ⅱ型糖尿病患者存在胰岛素受体水平(酪氨酸激酶活性降低)抵抗;氯化锂能导致Ⅱ型糖尿病患者及健康人红细胞胰岛素受体磷酸化,推测锂能激活酪氨酸激酶而发挥胰岛素样作用;在胰岛素存在的情况下加用锂盐对改善Ⅱ型糖尿患者胰岛素受体水平敏感性有协同作用。     

胰岛素放射免疫药盒的研制

胰岛素放射免疫分析药盒研制方法及其结果。用氯胺T氧化法制备125I胰岛素,放化纯度>95％,过量抗体结合率>80％,比放>4.95×10~6Bq/μg。用猪胰岛素(按20IU/只)免疫豚鼠制得抗体,其结合率>80％,滴度为1:400000,亲和常数K>8.0×10~9/(LM)。采用平衡分析法(PEG分离)建立放免分析方法,经方法学鉴定,样品批内CV<4.2％,批间CV<7.9％,回收率为96.6％±4.8％,灵敏度为0.5～1.3mU/L。     

硝苯地平对肝细胞膜胰岛素受体的影响

目的：观察钙拮抗剂硝苯地平（NF）对正常大鼠肝细胞膜胰岛素受体的作用,探讨NF对胰岛素生物学效应的影响。方法：不同浓度（0．5μmol/L、1.0μmol/L和10．0μmol/L）NF灌注大鼠肝脏,或在胰岛素与大鼠肝细胞受体结合的反应体系中加入上述浓度NF,用放免法测定受体的结合能力。结果：NF灌注后大鼠肝细胞膜高亲和力胰岛素受体亲和常数（K1）及结合位点浓度（Q1）无显著变化;NF作用于反应体系,高亲和力胰岛素受体亲和常数（K1）及结合位点浓度（Q1）下降。结论：NF直接作用于反应体系,对大鼠肝细胞膜胰岛素受体的结合能力产生一定程度影响。     

口服补镁对实验性老年2型糖尿病大鼠胰岛素受体亲和力的影响

目的观察口服补镁对老年2型糖尿病大鼠胰岛素受体亲和力的影响。方法采用给老年2型糖尿病大鼠模型口服补镁的方法,测定肝细胞胰岛素受体亲和力,并应用高胰岛素、正葡萄糖钳夹技术测定稳态下葡萄糖输注率、空腹血糖、空腹胰岛素及血浆镁离子浓度等指标。结果高剂量补镁组（2g／kg）高、低亲和力胰岛素受体结合常数分别为（4．83±0．09）×10^8／mol和（1．12±0．17）×10^6／mol,高、低亲和力胰岛素受体结合容量分别为（4．46±0．16）×10^10／mgPr、（8．32±0．27）×10^13／mgPr,与糖尿病对照组相比各组数据均显著升高（P〈0．05）;同时,高剂量补镁组空腹血糖、空腹胰岛素及胰岛素敏感指数HOMA-IR明显下降,稳态下葡萄糖输注率显著升高。结论镁补充可提高2型糖尿病大鼠胰岛素受体亲和力,降低胰岛素抵抗。     

正常人空腹及糖餐后30分钟红细胞胰岛素受体之比较

作者对正常人空腹及糖餐后30分钟红细胞胰岛素受体作了对比研究。研究证明,5例正常人空腹及5例正常人糖餐后30分钟,红细胞受体最大结合率及对A14-胰岛素之抑制率均无显著差异,红细胞胰岛素受体数为1838±574个/每个细胞及1823±898个/每个细胞,说明糖餐后30分钟受体数及亲和力均无明显改变。     

TNF-α对红细胞胰岛素受体磷酸化的影响

目的 :用TNF -α培养离体红细胞 ,观察其对胰岛素诱导的 β亚基自身磷酸化的影响 ,探讨TNF -α致胰岛素抵抗的分子机理。方法 :红细胞加或不加TNF -α(5ng/ml)培养 2 0h ,收集培养的红细胞 ,制备膜蛋白 ,并测定胰岛素诱导的受体自身磷酸化程度。结果 :红细胞TNF -α(- )培养 2 0h后 ,正常人红细胞胰岛素受体自身磷酸化程度为 80 .85± 4 3.92△A/mg蛋白 ,Ⅱ型糖尿病患者胰岛素受体的自身磷酸化程度为 2 4 .2 4± 8.0 5△A/m9蛋白 ,二者有显著性差异 (P <0 .0 5 )。 5ng/mlTNF -d培养 2 0h后 ,正常人红细胞胰岛素受体的磷酸化程度下降至 2 2 .95± 14 .93△A/mg蛋白 ,糖尿病组的胰岛素受体磷酸化程度下降至 8.81± 8.31△A/mg蛋白 ,与TNF -α(- )组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。正常人红细胞TNF -α(+)培养 2 0h后 ,其受体磷酸化程度与糖尿病组TNF -α(- )培养 2 0h后的受体磷酸化程度相比 ,二者差异无显著性。结论 :小剂量TNF-α(5ng/ml)培养红细胞 2 0h后 ,可抑制细胞膜上胰岛素受体的自身磷酸化 ,且正常人红细胞经TNF -α处理后 ,膜上胰岛素受体自身磷酸化程度可降至患者水平 ,这可能是TNF -α引起糖尿病病人对胰岛素抵抗的机制。     

四种不同动物红细胞胰岛素受体测定

本文介绍用少量血样品以Normal缓冲溶液为介质在4℃过夜保温条件下红细胞胰岛素受体测定方法。红细胞胰岛素受体与~(125)I-胰岛素结合的竞争抑制曲线和Scatchard作图性质与文献报导结果相同。对人、家兔、狗和大鼠四种不同种属的红细胞胰岛素受体测定最大结合率(B/T％)在10—15％范围。非专一性结合平均为3.5％左右。用Normal缓冲溶液代替BufferG作保温介质同样能得到较好结果。四种不同种属红细胞胰岛素受体数目有差异,依次是狗>兔>大鼠>人。低温(4℃)条件下结合试验可减少胰岛素-受体复合物的降解速度。本方法适合于临床胰岛素受体测定。     

Ⅱ型糖尿病游离胰岛素改变及与胰岛素,C肽关系探讨

目的：探讨Ⅱ型糖尿病游离胰岛素改变及与胰岛素、Ｃ肽关系。方法：样品预处理后用放免法测定３４例Ⅱ型糖尿病游离胰鸟素，同时测胰岛素抗体，与胰岛素、Ｃ肽作比较。结果：该组糖尿病游离胰岛素各时相水平明显低于胰岛素（Ｐ〈０．０５），去除胰岛素抗体阳性者后，二者再比较，游离胰岛素仍低于胰岛素（Ｐ〈０．０５），游离胰岛素与胰岛素比较，峰值一致，游离胰岛素２ｈ与Ｃ肽相应时相近相关（ｒ＝０．３３，Ｐ＝０．０６）。结     

Chronic Hyperinsulinism Induced Down—regulation of Insulin Post—Receptor Signaling Transduction in Hep G2 Cells

Insulin initiates its biological effects first bybinding to its cellular receptor,thereby activatingthe tyrosine kinase in theβ- subunit of the insulinreceptor ( IRβ) .This leads to tyrosine phosphory-lation of several insulin receptor protein substrates( IRS) ,especially IRS- 1 [1,2 ] .Phosphorylated IRS-1 plays a critical role in divergence of the insulinsignal.Phosphorylated IRS- 1 associates with SH2domain proteins,such as the p85 subunit of phos-phatidylinositol 3- kinase ( PI 3-…     

Chronic Hyperinsulinism Induced Down-regulation of Insulin Post-Recentor Signaling Transduction in Hep G2 Cells

Summary: To study the regulatory effect of acute and chronic insulin treatment on insulin post-re-ceptor signaling transduction pathway in a human hepatoma cell line (Hep G2), Hep G2 cells wereincubated in the presence or absence of insulin with different concentrations in serum free mediafor 16 h and then stimulated with 100 nmol/L insulin for 1 min. Protein levels of insulin receptorβ-subunit (IRβ), insulin receptor substrate-1 (IRS-1) and p85 subunit of phosphatidylinositol 3-kinase (PI 3-kinase) were determined in total cell lysates by Western-immunoblot. Phosphorylat-ed proteins IRβ, IRS-1 and interaction of PI 3-kinase with IRS-1 were determined by immunopre-cipitation. Results showed that 1-min insulin stimulation rapidly induced tyrosine phosphorylationof IRβ and IRS-l, which in turn, resulting in association of PI 3-kinase with IRS-1. 1-100 nmol/L chronic insulin treatment induced a dose-dependent decrease in the protein level of IRβ and aslight decrease in the protein level of IRS-1. There wass more marked reduction in the phospho-rylation of IRβ, IRS-1, reaching a nadir of 22 % (P＜0. 01) and 15 % (P＜0. 01) of control lev-els, respectively, after 16 h treatment with 100 nmol/L insulin. The association between IRS-1and PI 3-kinase was decreased by 66 % (P＜0. 01). There was no significant change in PI 3-ki-nase protein levels. These data suggest that chronic insulin treatment can induce alterations ofIRβ, IRS-1 and PI 3-kinase three early steps in insulin action, which contributes significantly toinsulin resistance, and may account for desensitization of insulin action.     

Alternative routes of insulin delivery

Parenteral route of insulin administration has been the mode of treatment for all Type 1 diabetics and Type 2 diabetics with complications. Patient compliance has really been a major concern for this route of administration. Several alternative routes of administration are under consideration for effective glycemic control, including oral, inhaled, buccal, nasal, and patch routes. One of the approaches involving inhaled insulin has now reached the market. Several other candidates may reach the market in the near future, the promising one being oral insulin.     

胰岛素对VEC增殖过程中FKBP12基因表达的影响

目的　通过不同浓度胰岛素对血管内皮细胞 (vascularendothelialcell ,VEC)增殖过程中胰岛素受体 (insulinre ceptor ,InsR)和FK5 0 6结合蛋白 12 (FK5 0 6bindingprotein 12 ,FKBP12 )及其基因表达等的影响 ,初步探讨VEC的胰岛素抵抗。方法　在内皮细胞生长因子 (endothelialcellgrowthfactor ,ECGF)作用下 ,培养大鼠VEC并传代。检测VEC在增殖过程中不同浓度胰岛素对VEC的InsR和FKBP12及其基因表达、生长曲线和细胞上清液一氧化氮 (nitrogenmonoxide ,NO)含量等的影响。结果　与对照组相比 ,1U/ml胰岛素组VEC的InsR和FKBP12mRNA表达降低 ;生长曲线向右下偏移且对数生长期延迟 ;细胞上清液NO含量下降。结论　VEC是胰岛素敏感细胞 ;当培养液中胰岛素浓度为 1U/ml时 ,经 16h的培养后 ,可使VEC对生理浓度胰岛素的反应性降低 ,该胰岛素抵抗状态至少维持 2 4h。FKBP12可能是与VEC胰岛素抵抗相关的重要信息分子。     

冠心病患者胰岛素抵抗与血脂关系的研究

目的 :了解冠心病患者胰岛素抵抗和血脂水平的关系 ,研究胰岛素抵抗对冠心病的发生发展的意义。方法 :测定了 6 0例符合WHO冠心病诊断标准的患者以及正常对照组的空腹血脂、血糖、胰岛素水平以及服糖后血糖和胰岛素水平 ,并对胰岛素抵抗各项指标同血脂各项指标进行了相关性分析。结果 :同对照组相比 ,冠心病组空腹胰岛素、以及反映胰岛素抵抗的指标均明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,而且在相关性分析中发现血脂水平同胰岛素抵抗有明显的相关性 (P <0 .0 5 )。结论 :胰岛素抵抗可能是血脂代谢、高胰岛素血症的共同发病基础 ,是冠心病发生发展的危险因素。对胰岛素抵抗的预防和治疗将对治疗冠心病、改善患者生活质量具有重要意义     

胰岛素泵换用甘精胰岛素联合口服降糖药的临床研究

目的:探讨应用胰岛素泵(CSⅡ)强化治疗后转换为甘精胰岛素联合口服降糖药(OAD)时胰岛素用量之间关系,总结甘精胰岛素临床应用经验。方法:129例2型糖尿病患者开始应用CSⅡ治疗2周后,改为甘精胰岛素联合OAD,比较其疗效及甘精胰岛素与CSⅡ所用胰岛素剂量,分析其相关关系。结果:应用甘精胰岛素联合OAD与应用CSⅡ时血糖无明显变化,两者均能有效控制血糖,应用CSⅡ时每天胰岛素总量的39.0%,为基础量的87.6%,与两者呈正相关系。结论:甘精胰岛素与CSⅡ均能有效控制血糖,其治疗剂量为应用CSⅡ时每天胰岛素总量的39.0%、基础量的87.6%,与两者呈正相关系。     

免疫反应性胰岛素、真胰岛素与心血管危险因素的比较研究

目的：研究免疫反应性胰岛素（IRI）、真胰岛素（TI）在不同的人群中与心血管危险因素的关系。方法：在江苏省邳州市农村共调查1196名35－59岁的常住居民，其中男性533名，女性663名。Spearman相关分析被用来比较在全人群，“正常人群”、高空腹血糖、高血压、超重，高胆固醇血症人群中群中两种胰岛素与心血管危险因素的关系。结果：全人群中，两种胰岛素浓度与各变量的关系除高密度脂蛋白胆固醇外基本相同，分层分析显示结果不尽相国，超重患者的舒张压与IRI呈正相关，而与TI的相关未达显著性水平，女性超重患者，男性高血糖患者，女性高血压患者，男性高胆固醇血症的胆固醇水平与IRI正相关，而与TI无此相关关系，女性高血压患者的空腹血糖与IRI的相关未达显著性水平，而与TI呈正相关。高胆因醇患者，男性高血压患者的高密度脂蛋白胆固醇水平与TI呈负相关关系，而与IRI的相关关系未达显著性水平。结论：传统方法所检测的IRI并不能够代表TI的水平，以特异的TI的检测来代替IRI的检测，已经成为胰岛素抵抗研究的当务之急。     

速效胰岛素类似物与人胰岛素在胰岛素泵中的应用研究

目的:探索速效胰岛素类似物-门冬胰岛素(诺和锐)与人胰岛素(优泌林R)治疗2型糖尿病的疗效特点、安全性.方法:选取2型糖尿病患者60例,随机分成A组和B组,每组30例患者,A组用诺和锐、B组用优泌林R作为泵用胰岛素进行CSⅡ强化治疗.结果:经过治疗,两组空腹血糖、餐后2h血糖均有显著降低,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05);A和B组血糖达标时间分别为(4.20土1.86)d和(6.28±1.89)d,门冬胰岛素组达标时间较短(P＜0.05);控制血糖达标时,胰岛素用量显著低于优泌林R组(P＜0.05);诺和锐的用量较优泌林R的用量少,低血糖发生率较优泌林R组低.结论:门冬胰岛素是一种有效的抗糖尿病药物.     

2型糖尿病治疗药物研究进展

简要介绍了2型糖尿病病理机制及治疗药物发展史,重点就当前2型糖尿病的(1)胰岛素治疗;(2)新型降糖药物;(3)胰岛素增敏剂;(4)联合用药等方面的研究新进展进行综述。