温度敏感性脂质体磁性阿霉素纳米粒的制备

目的 制备能够携带化疗药物阿霉素的温度敏感性脂质体磁性纳米粒,并对纳米粒的粒径大小、药物包裹率、稳定性等物理性质进行检测.方法 以化学共沉淀法制备四氧化三铁纳米粒,以逆相蒸发法制备空白温度敏感性磁性脂质体纳米粒,梯度反向装载法包封阿霉素,激光粒度分析仪检测粒径大小分布范围,透射电镜观察粒子形态;酸性乙醇荧光分光光度法测量阿霉素包裹率和泄漏率.结果 制备的温度敏感性脂质体磁性纳米粒平均粒径为(76±18)nm,粒径较均匀,平均包裹率为(42.6±0.7)%,室温下贮存稳定.结论 本实验制备的温度敏感性脂质体磁性纳米粒基本符合要求,可为进一步研究提供了基础.     

包载替莫唑胺和索拉非尼PLGA纳米粒的制备及评价

目的 制备替莫唑胺和索拉非尼PLGA纳米粒,并对其粒径、形貌、稳定性及体外释放进行考察,探讨其是否可用于抗脑胶质瘤的体内体外研究。方法 纳米沉淀法制备替莫唑胺索拉和索拉非尼PLGA纳米粒,测定粒径、电位、形貌、包封率和载药量以及稳定性。结果 所得纳米粒的平均粒径为(106.71±0.21)nm、多分散系数为(0.24±0.05),电位(-27.30±1.20)mV,纳米粒呈规则的球状均匀分布,大小均一,表面光滑;PLGA纳米粒中替莫唑胺的包封率及载药量分别为(75.89±3.12)%、(3.61±0.78)%;索拉非尼的包封率及载药率分别为(48.61±1.20)%、(1.50±0.98)%。结论 采用纳米沉淀法制备的PLGA纳米粒,呈球形形貌、粒径分布均匀、有良好的稳定性,可用于抗脑胶质瘤的体内体外研究。     

组织因子小干扰RNA壳聚糖纳米粒的制备及其特征

目的 探讨壳聚糖-组织因子小干扰RNA(TFsiRNA)纳米粒制备方法并研究其特性.方法 采用三聚磷酸钠(TPP)离子胶凝法分别制备包封型和吸附型壳聚糖-TPP-TFsiRNA纳米粒.检测纳米粒平均粒径和Zeta电位、载药率,并分析血清稳定性、体外生物活性及其细胞毒性.结果 两种纳米粒粒径均小于550 nm,粒径大小主要取决于壳聚糖类型、分子量及其浓度.酸碱度、壳聚糖TPP质量比也影响粒径大小.包封型纳米粒siRNA载药率为100%.壳聚糖-TPP-TFsiRNA纳米粒中的siRNA在5%血清中孵育24 h开始降解,60 h完全降解;50%血清孵育6 h保持完整,48 h完全降解.结论 壳聚糖纳米粒可能成为有效的siRNA转运载体.     

界面聚合法制备反义核酸氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的研究及稳定性考察

目的 优化制备包裹反义寡核苷酸a-氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(ASODN in NP)并考察稳定性.方法 以氰基丙烯酸正丁酯(butyleyanoacrylate,BCA)为载药材料,采用界面聚合法制备ASODN in NP;在单因素考察的基础上,采用正交设计优化处方和制备工艺;用透射电镜观察其形态;马尔文激光粒度分析仪测定粒径;高效液相色谱法测定载药量和包封率;用含7 mol/L尿素的20%聚丙烯酰胺凝胶电泳考察载药纳米粒在体外血清中的稳定性.结果 按优化工艺条件,制得的载药纳米粒,其形态规整、无黏连、大小均匀,平均粒径为94.9 nm,包封率和载药量分别为 96.7%、10.1%,在体外血清中稳定性好并优于传统的吸附法制备的纳米粒.结论 本实验制备的ASODN in NP具有较好的稳定性,较高包封率和载药量.     

VEGF纳米粒的制备及药剂学性质研究

目的:将VEGF制备为纳米粒,以提高VEGF在体内的稳定性,解决VEGF半衰期短等问题,并对所制备的VEGF纳米粒进行药`剂学性质研究。方法:以无毒、可生物降解的聚氰基丙烯酸酯为材料,采用乳化聚合法制备VEGF纳米粒,对其外观形态、粒径分布、包封率和载药量以及体外释放进行考察。结果:制备了纳米粒胶体溶液及其冻干品:电子透射显微镜下观察纳米粒形态,外形为粒径比较均匀的球状或近球状的纳米粒,平均粒径为90 nm,粒径范围为50~150 nm;包封率大于85%,载药量约为42%,冻干品的再分散性良好。结论:本研究制备的VEGF纳米粒,包封率和载药量相对较高,质量稳定,重现性好。     

水飞蓟宾纳米粒的制备及其理化性质研究

目的 制备水飞蓟宾纳米粒并对其进行质量评价。方法 采用乳化-蒸发-固化法制备水飞蓟宾纳米粒,以包封率、多分散指数、载药量等为评价指标优化制备工艺。考察体外释药规律,考察3~5 ℃、15~25 ℃、37 ℃(相对湿度为75%)条件下纳米粒的稳定性。结果 以硬脂酸和表面活性剂为载体材料,优化工艺制备的水飞蓟宾纳米粒包封率为96.88%,多分散指数为0.168,载药量为7.55%。差示量热分析确证形成了纳米粒,水蓟宾以无定形态分散在纳米粒内。纳米粒体外释放缓慢,可用Higuchi方程拟合。纳米粒静置观察具有良好的稳定性。结论 采用乳化-蒸发-固化法可制备得到水飞蓟宾纳米粒,工艺简便,粒径和分散度小,包封率和载药量高,体外释药缓慢,稳定性好。     

紫杉醇甘草次酸修饰透明质酸纳米粒的制备及性能研究

优化紫杉醇甘草次酸修饰透明质酸（PTX/GA-HA）纳米粒的载药工艺,并系统评价其体内外特性。以载药量、包封率为评价指标,通过单因素考察优化甘草次酸修饰透明质酸纳米粒的载药工艺。制得的纳米粒粒径为（321.2±8.2）nm,荷负电;载药量和包封率分别为（31.2±0.8）%和（90.3±1.6）%。体外释放动力学研究显示,在偏酸性介质中,PTX/GA-HA纳米粒下具有更快的释药速度。同时,MTT实验显示其对多种肿瘤细胞具有杀伤作用,尤其对HepG2细胞的生长抑制作用最强。此外,细胞摄取实验表明,GA-HA纳米粒易被肿瘤细胞摄取。因此,PTX/GA-HA纳米粒具有优良的体内外特性,其成功制备将有助于提高抗肿瘤药物的肿瘤靶向治疗效果。     

VEGF纳米粒的制备及药剂学性质研究

目的：将VEGF制备为纳米粒，以提高VEGF在体内的稳定性，解决VEGF半衰期短等问题，并对所制备的VEGF纳米粒进行药剂学性质研究。方法：以无毒、可生物降解的聚氰基丙烯酸酯为材料，采用乳化聚合法制备VEGF纳米粒，对其外观形态、粒径分布、包封率和载药量以及体外释放进行考察。结果：制备了纳米粒胶体溶液及其冻干品：电子透射显微镜下观察纳米粒形态，外形为粒径比较均匀的球状或近球状的纳米粒，平均粒径为90nm，粒径范围为50～150nm；包封率大于85％，载药量约为42％，冻干品的再分散性良好。结论：本研究制备的VEGF纳米粒，包封率和载药量相对较高，质量稳定，重现性好。     

脑源性神经营养因子缓释注射纳米粒的制备及其释药特性评价

目的:制备稳定性高、粒径小的脑源性神经营养因子(BDNF)缓释注射纳米粒,并评价其释药过程.方法:采用乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体材料,复乳化溶剂挥干法制备载有BDNF的PLGA纳米粒.优化纳米粒处方和制备工艺,观察纳米粒的形态、大小和粒径分布,评价其回收率、精密度、重复性、包封率以及体外释药特性.结果:优选处方选择理论载药量1%、聚合物浓度3.3 mg/ml、超声时间为40 s,甘露醇为支架剂.BDNF纳米粒呈圆形,大小均匀,平均粒径为156.7 nm.制备的纳米粒回收率、精密度、重复性和包封率较高,缓慢溶蚀释放为其主释药过程,时间达30 d.结论:成功制备的BDNF缓释注射纳米粒具有稳定性好、包封率高的特点.     

荆芥内酯聚乳酸乙醇酸纳米粒的制备及其稳定性研究

目的制备荆芥内酯聚乳酸乙醇酸纳米粒,并优化其制备工艺。方法以粒径、分散度、包封率和载药量为指标,对溶剂挥发法、溶剂扩散法和溶剂-非溶剂法制备荆芥内酯纳米粒进行比较。在单因素考察基础上,采用正交设计法对纳米粒的处方和溶剂-非溶剂法制备工艺进行优化,并考察了4℃和25℃条件下纳米粒溶液的稳定性。结果溶剂-非溶剂法制备的荆芥内酯纳米粒形态圆整,大小均匀,平均粒径(80.3±1.75)nm,分散度0.0144±0.00625,包封率可达52.53%±0.97%,载药量27.56%±0.91%,显著优于溶剂挥发法和溶剂扩散法,且具有良好的稳定性。结论溶剂-非溶剂法制备荆芥内酯纳米粒具有工艺简便,粒径和分散度小,包封率和载药量高,重复性好,质量稳定的优点。     

~(99)Tc~m-HL91探测存活心肌的应用研究

目的:研究~(99)Tc~m-HL91在缺血心肌中的显像表现,探讨~(99)Tc~m-HL91探测缺氧但存活心肌的价值。方法:18例已确诊为心肌缺血或心肌梗塞的患者均行99Tcm-MIBI与~(99)Tc~m-HL91心肌灌注SPECT显像。在心脏短轴图像上通过ROI技术,获取缺血靶区(targetarea,T)与正常非靶区(non-targetarea,NT)心肌组织的平均放射性计数,计算T/NT比值,获得99Tcm-MIBI与99Tcm-HL91在局部缺血区与正常心肌组织的放射性比值。结果:99Tcm-HL91SPECT有10例患者在99Tcm-MIBI显像的放射性稀疏或缺损区可见到明显的放射性充填,其余8例患者~(99)Tc~m-HL91显像心肌摄取不高。结论:~(99)Tc~m-HL91可选择性地被存活/乏氧心肌摄取,和99Tcm-MIBISPECT联合应用,可有效提高检测存活心肌的效能。     

GLP-1受体激动剂exendin-4的放射性标记及生物分布实验研究

目的 确立131I标记胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂exendin-4多肽的最佳标记条件,并研究131I-exendin-4在正常小鼠体内的生物分布。 方法 131I标记exendin-4多肽采取氯胺-T方法标记,利用纸层析法计算标记产物的标记率及放化纯度,测定131I-exendin-4的体外稳定性及脂水分配系数,研究131I-exendin-4在注射后的1、3、6、12和24 h时在正常小鼠体内的分布特征,对经尾静脉注入131I-exendin-4的小鼠进行SPECT多时相显像,并观察小鼠体内放射性分布变化。 结果 exendin-4的131I标记率在85%以上,放化纯度大于97%,131I-exendin-4在人血清和生理盐水中仍保持较好的体外稳定性,131I-exendin-4的脂水分配系数为-1.002。正常小鼠静脉注入131I-exendin-4后,双肾的放射性分布明显较其他组织器官的放射性增高,1 h和12 h肾脏的每克组织百分注射剂量率(%ID/g)分别为(51.54±13.51)%ID/g和(11.61±0.94)%ID/g,胃、肺的摄取相对较高,3 h后除肾脏外的其他各脏器器官的放射性均较快下降。正常小鼠静注131I-exendin-4后的SPECT多时相显像示随着时间的延长,双肾及膀胱的放射性浓聚影增加,而其他器官未见明显放射性浓聚影分布。 结论 131I标记exendin-4的标记率较高(大于85%),体外稳定性良好,131I-exendin-4为水溶性物质,可通过泌尿系统排泄,体外分布特性比较理想。      

99mTc标记的新型肺癌多肽分子探针及其生物学分布

目的探讨99mTc标记特异性靶向肺癌小分子多肽的标记方法,观察99mTc-多肽在正常动物体内的动力学特性及体内生物学
分布特点。方法采用NHS-MAG3双功能螯合法进行99mTc标记小分子多肽（cNGQGEQc）,纸层析法测定标记率,通过体外稳定
性实验、半胱氨酸置换实验及血清蛋白结合实验评价99mTc-多肽的放化特性,测定标记物静脉注射后在新西兰大白兔不同时相
血液放射性清除曲线;分别测定经尾静脉注射7.4 MBq标记物后的小鼠体内各脏器质量数和放射性计数,计算各脏器每克组织
百分注射剂量率（%ID/g）;经耳缘静脉注射37 MBq标记物,应用SPECT显像法观察标记物在大白兔体内的放射性动态分布
变化。结果99mTc 标记多肽的标记率>90%,室温下和血清中37 ℃下放置12 h 放化纯度分别为91%和85%;半胱氨酸置换率
<7%;血清蛋白结合率<5%。99mTc标记多肽在兔体内血放射性清除迅速;在小鼠体内清除较快,主要通过肾脏排泄,其余脏器内
放射性均较低（P<0.05）。结论99mTc标记基于肺癌特异性靶向多肽的标记方法简单,标记率高,具有良好的体内外稳定性,具有
比较理想的体内分布动力学特性。
     

99Tcm-annexinV在肺癌化疗评估中的应用

目的制备放射性药物99Tcm-annexinV,评估其在早期预测肺癌化疗效果中的作用。方法通过毕赤酵母重组表达、硫酸铵沉淀和分子筛层析纯化得到annexinV,采用氯化亚锡还原法在annexinV的氨基端标记放射性核素99Tcm,经脱盐柱纯化获得标记产物。采用薄层层析测定99Tcm-annexinV的标记率和放射性化学纯度,外露磷脂酰丝氨酸的红细胞测定99Tcm-annexinV的生物活性。通过在615小鼠腋部皮下接种LA795细胞和组织插块法获得荷肺癌小鼠模型,经腹腔注射环磷酰胺治疗肺癌后6、12、24和48h测定99Tcm-annexinV在小鼠体内的分布情况。结果毕赤酵母工程菌株分泌表达annexinV,经硫酸铵分级沉淀和分子筛层析纯化后annexinV得以有效回收。室温下30min完成anne-xinV的99Tcm标记,标记率为50.2%。99Tcm-annexinV放射性化学纯度为93.9%,其生物活性保存良好。生物分布实验表明,99Tcm-annexinV通过肾脏排泄。615荷肺癌小鼠模型经过环磷酰胺化疗后48h,99Tcm-annexinV在肿瘤组织的摄取达到最高,肿瘤/肌肉放射性摄取率之比为6.34,肿瘤/血液放射性摄取率之比为4.09。结论制备了毕赤酵母来源的99Tcm-annexinV,有可能应用于早期预测肺癌化疗效果。     

99Tcm-MIBI融合显像辅助肺癌放疗靶区定位及对化疗疗效的预测

目的探讨99Tcm-MIBI SPECT/CT同机融合显像辅助肺癌放疗靶区定位的价值,分析肿瘤组织摄取99Tcm-MIBI与化疗疗效之间的关系。方法回顾性分析经病理确诊的19例非小细胞肺癌患者,放、化疗前均行99Tcm-MIBISPECT/CT显像,通过感兴趣区技术勾画肿瘤靶区并确定计划靶区;获取感兴趣区放射性计数,计算肿瘤早期摄取比(T/NTe)、延迟摄取比(T/NTd)及肿瘤组织滞留率(RI%),分析T/NTe、T/NTd、RI%与患者临床分期及病理类型的关系。结果 19例患者中99Tcm-MIBI显像阳性18例,修改CT计划靶区15例,占78.9%;明确区分肺不张与肿瘤病灶11例,占57.9%。化疗有效患者T/NTe、T/NTd比值分别为(2.47±0.23)、(2.35±0.19),无效患者分别为(1.72±0.10)、(1.63±0.12),两者差异统计学有意义(P<0.01),两者RI%比较差异无统计学有意义(P>0.05),T/NTe、T/NTd、RI%在不同临床分期、病理类型中差异均无统计学有意义(P>0.05)。结论99Tcm-MIBI SPECT/CT融合显像有助于优化肺癌立体放疗靶区,选取T/NTe=2.0作为预测化疗有效的阈值有较高的准确性,且不受患者临床分期及病理类型的影响。     

99Tcm标记多肽VEGF125-136及其生物学分布

目的 探讨一种理想的99Tcm标记小分子多肽VEGF125-136的方法,并研究标记物的生物学分布.方法 在合成多肽的过程中直接完成多肽VEGF125-136与双功能螯合剂MAG3的偶联,然后采用正交设计探讨99Tcm的最佳标记条件,并研究标记物稳定性和小鼠体内分布.结果 ①简化了偶联步骤,提高了偶联产率;②最佳标记条件下标记率约78%,经HPLC纯化后放化纯度＞95%,且在室温条件下稳定性好;③ 99mTc-VEGF125-136-MAG3在正常小鼠的血液中清除较快,在肾、肝中摄取较高.结论 以MAG3为螯合剂用99Tcm标记VEGF125-136有良好的标记率.     

99Tcm-MIBI显像在骨单发灶鉴别诊断中的应用价值

目的探讨99 Tcm-MIBI显像在骨单发灶鉴别诊断中的应用价值并与99 Tcm-MDP骨显像进行比较。方法 105例骨单发灶患者,经金标准(病理或其它综合影像诊断)证实的恶性肿瘤70例,良性病变35例,均分别行99 Tcm-MDP并SPECT/CT融合及99 Tcm-MIBI检查,进行视觉读片和半定量分析,结果与金标准诊断结果进行对照并行统计学处理,用ROC曲线评价99 Tcm-MDP平面并融合显像及99 Tcm-MIBI显像对骨单发灶的诊断效能。结果 99 Tcm-MDP及99 Tcm-MIBI显像灵敏度分别为94.29%和87.14%(P<0.05),特异度分别为80.00%和82.86%(P<0.05)。99 Tcm-MDP骨显像中良恶性病灶的T/N值差异无统计学意义(P>0.05)。99 Tcm-MIBI早、晚期显像中恶性病灶的T/N值分别为(2.45±0.79)、(2.96±0.89),均明显高于良性病灶的早、晚期显像的T/N值[(1.30±0.34)、(1.39±0.38)],差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线下面积依次是:99 Tcm-MIBI晚期>99 Tcm-MIBI早期相>99 Tcm-MIBI滞留指数(RI)>99 Tcm-MDP。结论 99 Tcm-MIBI显像较99 Tcm-MDP平面并融合显像灵敏度低、特异性高,在骨单发灶的诊断中有较好的诊断效能。     

~（99）Tc~m-REG的制备及其在正常小鼠体内分布和药代动力学研究

目的研究99Tc^m-精氨酸-符氨酸-片氨酸（99Tc^m-REG）与肺癌细胞结合及其在正常小鼠体内分布和约代动力学。方法采用99Tc^m直接法标记REG,行99Tc^m-REG与非小细胞肺癌细胞A549和H1299的结合实验。正常小鼠尾静脉注射99Tc^m-REG后不同时间处死,取主要脏器或组织,测定其每克组织百分注射剂照牢（％ID／g）。另取尾静脉注射99Tc^m-REG后不同时间小鼠血液,测量放射性计数并计算药代动力学参数。尾静脉注射99Tc^m-REG后,测定不同时间荷H1299细胞肿瘤裸鼠肿瘤％ID／g及肿瘤／肌肉比值。结果 99Tc^m直接标记REG的标记率为（92．90±2．86）％。99Tc^m-REG与非小细胞肺癌细胞A549和H1299的最高结合率分别为（1．29±0．16）％和（2．324-0．31）％。体内分布提示99Tc^m-REG在小鼠血液中清除迅速,2h时放射性仪为注射5min时的20．26％,肝脏内放射性浓聚较多,且旱缓慢下降．肾脏、心、肺放射性摄取随时间逐渐下降,其余组织放射性警低水平。2h肿瘤％ID／g为2．02±0．67,肿瘤／肌肉比值为3．50±1．27。结论99Tc^m-REG具有亲肺癌细胞的特性,有可能成为一种亲肺癌肿瘤显像剂。     

99Tcm-MIBI双时相显像定位诊断原发性甲状旁腺机能亢进症的价值

目的:评价99Tcm-甲氧基异丁基异腈(MIBI)双时相显像对原发性甲状旁腺机能亢进症(PHPT)定位诊断的价值.方法:对15例正常对照者和51例临床表现及生化检查提示原发性甲状旁腺机能亢进的患者,行99Tcm-MIBI双时相甲状旁腺平面显像(患组于术前1周内安排检查),部分患者安排SPECT断层显像,同时采用ROI技术计算摄取比值.结果:①与手术结果对比,99Tcm-MIBI双时相甲状旁腺显像在早期相和延迟相对腺瘤的诊断灵敏度分别为78.3%(36/46)和91.3%(42/46),对增生灶的诊断灵敏度分别23.8%(5/21)和47.6%(10/21).有6个病灶通过SPECT断层显像得以确诊(包括1个异位腺瘤病灶).②术后证实甲状旁腺病灶重量大于1500 mg者99Tcm-MIBI双时相显像均为阳性,小于500 mg者均为阴性,重量在500～1500 mg者阳性率为82.4%.③阳性腺瘤组摄取比值,延迟相明显高于早期相(P＜0.01),两个时相均明显高于正常对照组(P＜0.01).结论:99Tcm-MIBI双时相显像对于定位诊断PHPT具有较高的临床价值,摄取比值测定和断层显像有利于提高阳性诊断率.     

99Tcm-MIBI双时相显像在甲状旁腺素增高患者中的应用

目的 探讨99Tcm-甲氧基异丁基异腈(MIBI)双时相显像在高甲状旁腺素(PTH)患者中的应用。 方法 对73例手术确诊的甲状旁腺功能亢进症患者行99Tcm-MIBI双时相平面显像,必要时行全身显像、CT、SPECT/CT断层融合显像。检测患者术前PTH、血清钙、磷离子浓度以及术后血清钙、磷离子浓度,其中60例患者检测术后1周内PTH水平。 结果 原发性甲状旁腺功能亢进症(PHPT)患者29例,其中27例病理证实甲状旁腺瘤28处,99Tcm-MIBI显像阳性病灶27处(诊断敏感性为96.4%,27/28);另2例患者病理证实甲状旁腺增生病灶共3处,99Tcm-MIBI显像阳性病灶1处(诊断敏感性为33.3%,1/3);99Tcm-MIBI显像对PHPT总的诊断敏感性为90.3%(28/31)。继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)患者44例,病理确诊甲状旁腺组织增生154处,99Tcm-MIBI发现118处浓聚病灶,诊断敏感性为76.6%(118/154)。大部分甲状旁腺瘤放射性浓聚程度高于甲状旁腺增生组织。PHPT以高钙低磷血症为主,SHPT往往血钙升高不明显,但血磷升高明显。患者术后1周内可见PTH不同程度降低。 结论 99Tcm-MIBI双时相显像对甲状旁腺瘤的诊断敏感性高于甲状旁腺增生组织;该检查方法能够对功能异常的甲状旁腺组织进行术前定位,有利于提高手术成功率。