小型猪胰腺节段移植术的实验研究

目的：探讨胰液淀粉酶(PJA),血清C-肽、胰周渗液中淋巴细胞占白细胞总数的比例与急性排斥反应的关系。方法：(1)30～50kg健康小型猪18头,雌雄各半，随机分成A、B、C3组，3组均作带十二指肠袢的节段性胰腺移植，A、B两组为同种异体移植，c组为自体移植，仅B组予以环孢素,甲基强的松龙、硫唑嘌呤三联免疫抑制治疗。(2)测定各组术后不同天数的胰液淀粉酶小时分泌量平均值、血清C-肽水平;(3)术后胰周渗液涂片计数大淋巴细胞比例，计算各组的阳性率及其诊断急性排斥反应的敏感度及特异度。(4)所有移植物术后均定期作病理活检，以此结果作为确诊急性排斥反应的标准。结果；(1)18头猪除1例死于麻醉意外，2例(13．3％)移植胰因术后早期血栓形成致功能丧失而切除外，其余均存活2周以上。(2)A组术后第5天始血清C-肽缓慢下降、PJA分泌急剧减少，均发生严重排斥反应;B、C组术后C-肽、PJA分泌量无明显下降。(3)胰周渗液细胞学检查诊断急性排斥反应的敏感度为100．0％,特异度为71．4％，是一良好指标。结论：(1)PJA，血清C-肽的下降可预示急性排斥反应的发生。(2)胰周渗液细胞学检查是监测急性排斥反应的安全、简易、敏感的指标。     

体静脉回流和门静脉回流对自体胰腺移植术后移植物内分泌功能的影响

目的:探讨体静脉回流和门静脉回流对自体胰腺移植术后移植物内分泌功能的影响.方法:组1采用15只猪门静脉回流(PVD),组2为15只猪下腔静脉回流(SVD).移植物包括胰体和胰尾.猪的胰腺被全部切除.通过注射氯丁橡胶将胰管堵塞.在移植前1 wk及术后1 mo进行静脉糖耐量试验(IVGTT).监测血糖、胰岛素、C肽、胰高血糖素及胰腺多肽(PP)的变化.结果:术后1 mo的空腹血糖水平皆正常.PVD组术后检测空腹胰岛素水平较术前变化不明显,SVD组胰岛素水平出现显著的升高 (P＜0.05).PVD组C肽水平显著高于SVD组(P＜0.05).两组动物术后PP水平保持稳定并显著低于术前,且术后1 mo显示SVD组胰高血糖素水平在IVGTT中显著高于PVD组(P＜0.05).结论:胰腺的内分泌回流由门静脉改为体循环将导致胰腺内分泌功能的紊乱,不利于发挥维持血糖稳定的作用.     

大鼠胰十二指肠移植模型制作的手术技巧

目的：探索建立大鼠胰腺移植模型的手术技巧。方法：采用经肠道引流全胰十二指肠移植术式；带腹腔动脉和肠系膜上动脉的供者腹主动脉与受者腹主动脉端侧吻合，供者门静脉与受者左肾静脉袖套法吻合，供者十二指肠与受者十二指肠端侧吻合。结果：9例次手术中51例次手术成功，术后移植胰腺具有内分泌功能。结论：这种胰腺移植模型制作切实可行，其成功的关键在于预防和治疗血管并发症。     

猪胰肾联合移植动物模型的建立

目的:建立胰肾联合移植(SPKT)大动物模型.方法:选用杂种猪作SPKT的供受体,经猪腹主动脉原位灌注,多器官联合整块切取,胰、节段十二指肠、双肾、脾脏.切除受体胰腺,制作1型糖尿病模型, 切除受体双肾,供体门静脉远端与左肾静脉吻合, 门静脉近端及带有腹腔干、肠系膜上动脉和左肾动脉的腹主动脉段分别与受体下腔静脉及肾以下腹主动脉端侧吻合,供体十二指肠侧壁与受体上段空肠行侧侧吻合, 输尿管置管外引流,未作预防及抗排斥处理.结果:10头动物移植后,2头受体因术后内环境紊乱死亡,8头受体顺利完成胰肾联合移植术,术后移植肾、胰均迅速恢复功能, 存活期胰肾功能基本正常.术后3～5 d因排斥反应及体内代谢紊乱8头受体死亡.结论:建立猪SPKT模型是可行的,良好的外科技术是胰肾联合移植成功的基础.     

血管移植三种术式修复四肢血管损伤的疗效观察

目的:探讨血管移植三种术式修复四肢血管损伤的疗效。方法:选取59例四肢血管损伤患者为研究对象,根据血管移植术式不同分为三组,A组选用吻合器自体大隐静脉移植术,共23例,B组选用显微缝合自体大隐静脉移植术,共20例,C组选用缝合人工血管移植术,共16例,对比三组治疗情况。结果:A组所得手术时间、输血量低于B、C两组,B组高于C组,A组所得静脉吻合时间、动脉吻合时间、缺血时间低于B、C两组,B组所得缺血时间高于C组,静脉吻合时间、动脉吻合时间低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:三种术式均有一定效果,血管直径超过4 mm时,优先选用显微缝合术式,直径在1～4 mm时,优先选用吻合器,依据实际情况,进行合理选用术式。     

大鼠胰十二指肠移植模型的建立

目的 建立大鼠胰腺移植模型。方法 采用经肠道引流全胰十二指肠移植术式；带腹腔动脉和肠系膜上动脉的腹主动脉管与受体腹主动脉端侧吻合，供体门静脉与受体左肾静脉袖套法吻合，供体十二指肠与受体十二指肠端侧吻合。结果 89只大鼠手术中51例手术成功，术后移植胰腺具有内分泌功能。结论 这种胰腺移植模型制作方法切实可行。     

大鼠胰十二指肠移植模型的建立

目的建立大鼠胰腺移植模型。方法采用经肠道引流全胰十二指肠移植术式；带腹腔动脉和肠系膜上动脉的腹主动脉管与受体腹主动脉端侧吻合，供体门静脉与受体左肾静脉袖套法吻合，供体十二指肠与受体十二指肠端侧吻合。结果89只大鼠手术中51例手术成功，术后移植胰腺具有内分泌功能。结论这种胰腺移植模型制作方法切实可行。     

小型猪胰腺移植急性排斥反应模型的实验研究

目的　建立小型猪胰腺移植动物模型 ,探索早期诊断急性排斥反应的方法。方法　 4 0只猪随机配对行胰腺移植 2 0次 ,将供胰所带的血管与受体髂血管吻合 ,所带小段十二指肠与空肠吻合 ,术中监测平均动脉压、中心静脉压及血气。术后测定受体的血淀粉酶、血糖 ,监测外周血免疫指标 ,彩色多普勒检测供胰血流及超声引导下活检、组织病理检查。结果　移植手术成功率为 90 % ,受体平均动脉压在吻合血管开放后有明显下降 ,与血流开放前差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,输血有助于手术成功 ,受体术后平均存活 (12 6± 2 3)d。外周血免疫学监测指标早于供胰的组织病理改变 ,两者的改变均早于急性排斥反应的临床表现。结论　小型猪适用于胰腺移植模型的建立 ,加强术中循环功能的管理、及时输血有利于受体成活 ;超声引导下穿刺活检供胰的组织病理学检查与监测外周血免疫指标均适于早期诊断急性排斥反应     

胰腺移植术术式的实验研究

本实验在不进行胰腺移植的情况下,对犬胰管进厅了栓塞、肠吻合和膀恍吻合等三种不同方法的处理,探讨胰腺移植时供胰外分泌部分的最佳处理方法。材料与方法:实验用杂种犬43只,随机分为四组.A组为对照组,10只;B组为胰管栓塞组,13只;C组为胰管空肠吻合组, 10只;D组为胰管膀胱吻合组10只。A、B、C三组动物分别切除胰腺左、右叶尾段,D组动物切除胰左叶及右叶头侧4～5cm,使四组动物保留胰量均为总胰量的1/2。A组胰管不做任何处理,另三组将主胰管于进入     

尿淀粉酶测定监测猫移植胰腺的排斥反应

25只猫接受全胰十二指肠移植手术。A组8只猫，胰腺引流方式采用肠肠吻合，术后5只猫未接受任何抗免疫治疗，另外3只地塞米松肌肉注射，该组平均生存12d，死亡与胰腺坏死有关。B组17只猫，行十二指肠膀胱吻合。5只地塞米松肌肉注射。其余口服环孢霉素A。平均生存17d。9只猫有程度不等的胰腺坏死，其余8只胰腺组织学结构大致正常。术后所有实验猫血、尿淀粉酶均升高。尿淀粉酶升高的幅度差异很大，A组升高16倍，B组升高80倍。其差额可以反应移植胰腺的功能状态。胰腺发生坏死后，尿淀粉酶含量明显降低。胰腺没有坏死，尿淀粉酶仍居高不下。实验结果表明通过胰腺引流膀胱的术式，尿淀粉酶的降低与移植胰腺的坏死及功能丧失有明显关系。胰腺坏死及功能丧失是排斥反应损伤的结果。因此尿淀粉酶的测定可以作为监测移植胰腺排斥反应的发生与强度的重要手段。     

奥曲肽作用大鼠急性胰腺炎胰腺病理改变及对淀粉酶分泌影响

目的：观察奥曲肽作用于大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)胰腺组织的病理改变及对血液、腹腔液、尿液淀粉酶的影响。方法：实验研究分A、B、C三组，每组8只，共24只，采用随机分配原则分组。A组：空白对照组；B组：ANP模型组：C组：奥曲肽治疗组。通过光镜及透射电镜观察各组胰腺组织的病理改变，同时测定各组血液、腹腔液及尿液中淀粉酶含量。结果：实验性大鼠急性坏死性胰腺炎时胰腺组织充血、水肿、坏死明显，线粒体明显肿胀，嵴消失，间质中可见酶原颗粒，使用奥曲肽治疗时上述变化明显减轻，间质中未见到酶原颗粒积聚。大鼠急性坏死性胰腺炎时血液、尿液淀粉酶水平有下降趋势，但尚无显著差异；腹腔液淀粉酶则有显著下降。结论：奥曲肽作用于大鼠急性坏死性胰腺炎时可减轻胰腺组织充血、水肿及坏死的程度，同时可减少胰腺组织腺泡细胞淀粉酶向腹腔内分泌。     

大鼠胰腺癌和非癌胰腺组织的KiSS-1 mRNA表达

目的:建立Sprague-Dawely大鼠胰腺癌模型,研究模型中胰腺导管癌和非癌胰腺组织中KiSS-1mRNA的表达情况.方法:将二甲基苯并蒽(dimethylbenzanthracene,DMBA)直接置入胰腺被膜下实质内建立胰腺癌模型组(A组),另一组同样注入DMBA并每周腹腔注射曲古霉素(trichostatin,TSA)设立干预组(B组),A组和B组于3～5个月内处死,对照组(C组)于第5个月处死,肉眼检查大组织及HE染色观察胰腺癌发生情况;采用原位杂交方法检测KiSS-1 mRNA.结果:(1)实验组(A组)3～5个月癌发生率为48.7%(18/37),17例为胰腺导管癌,1例为纤维肉瘤;B组3～5个月癌发生率为33.3%(12/36),11例为胰腺导管癌,1例为纤维肉瘤,A组胰腺癌最大径均值大于B组(P＜0.05);C组胰腺及A组、B组胰腺非主要脏器均无明显病理改变.(2)A组和B组胰腺癌组织中KiSS-1mRNA阳性率明显低于非癌胰腺组织(P＜0.01),A组和B组胰腺癌KiSS-1mRNA阳性率分别低于相应A组和B组非癌组织(P＜0.01),非癌胰腺组织中KiSS-1 mRNA阴性表达者导管上皮均呈中至重度不典型增生,C组胰腺组织KiSS-1mRNA均阳性表达.结论:较大剂量DMBA置入胰实质内,可在短期内获得较高胰腺癌发生率;TSA能干预胰腺癌的生长;KiSS-1失表达在胰腺癌发生发展中可能具有重要的作用.     

一氧化氮在大鼠胰腺缺血/再灌注中的变化及作用

目的:探讨一氧化氮(NO)在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的变化及作用.方法:雄性Wistar大鼠随机分成3组:A、B组胰腺缺血30 min后,再灌注2,4,6,12,24h.B组再灌注前使用诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂,A组仅给与生理盐水.C组仅行假手术.进行大鼠血清中NO水平和淀粉酶活性检测,胰腺组织形态学观察和免疫组化分析.结果:再灌注4 h后,A组iNOS表达于胰腺组织,B组无表达.此时A组NO水平达到高峰,淀粉酶活性开始升高,均高于B组(P＜0.01).再灌注6 h后,A组显微镜下观察到胰腺损伤的表现,B组未见.C组无iNOS表达,血清NO水平和淀粉酶活性均在正常范围.结论:随着再灌注时间的延长,iNOS表达于胰腺组织,NO在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的有害作用占主导地位.     

高强度聚焦超声辐照正常猪胰腺的实验研究

目的应用高强度聚焦超声（high intensity focused ultrasound,HIFU）辐照正常猪胰腺,观察辐照后生化指标及胰腺组织的病理变化,评价其有效性和安全性,探讨HIFU治疗胰腺疾病的理论依据。方法 6只杂种猪随机等分为2组。常规麻醉后,应用FEP-BY02型HIFU治疗机辐照正常猪胰腺。A、B两组动物分别于术后当天和第5天杀死取胰腺行病理学检查。B组动物术后监测血、尿淀粉酶等指标。结果所有动物的HIFU治疗过程顺利,治疗中生命体征平稳,耐受性良好,未发生皮肤烧伤。剖腹探查均未发现胃肠脏器损伤及胰腺炎等。B组治疗后恢复良好,全部存活至5天,辐照后血、尿淀粉酶等最初几天升高后降为正常。病理学检查A、B两组所有标本在HI-FU辐照区均发现凝固性坏死灶,与周围组织分界清楚。B组见细胞坏死更彻底,交界处见炎性细胞浸润及纤维结缔组织增生。结论超声引导HIFU消融在体猪胰腺,效果肯定、安全可行。     

Influence of an intravenous infusion of amino acids and glucose on the pancreatic exocrine in rats

Background A number of reports based on both animal experiments and clinical investigations have pointed out that total parenteral nutrition (TPN) suppresses the function of the exocrine pancreas.Even though pancreatic hypotrophy and dysfunction resulting from TPN may be explained by several mechanisms, the clinically most important cause is that nutrients in circulation affect pancreatic secretion. The effect of nutrients on the exocrine pancreas is still controversial. The aim of the present study was, therefore, to clarify the influence of intravenous amino acids and hypertonic glucose in TPN solution on the exocrine pancreas.Methods Three mixed TPN solutions, consisting of 30% or 50% glucose or of 14% amino acids,were employed. Twenty-four male Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups, six rats in each group, including a control group and one group receiving each of the three TPN solutions.All animals were kilted after 10 days of TPN. Body weight, pancreatic content, and enzyme levels in the pancreas were measured.Results Compared with the control group, pancreatic wet weight was lower in all TPN groups.Glucose significantly decreased the content and concentration of pancreatic protein, but amino acids did not alter the concentration of protein. The level of amylase was lower in all parenterally fed groups,with a greater decrease in the groups treated with amino acids and 30% glucose than with 50% glucose. Trypsin levels in all groups receiving TPN were markedly higher than in the control group.Conclusion TPN results in atrophy of the pancreas, but trypsin levels increase with TPN treatment.Glucose elevates the amylase level in the pancreas, while amino acids suppress pancreatic amylase.Amino acids used as a source of protein maintain normal pancreatic protein levels.     

经皮经锁骨下动脉植入药盒系统治疗胰头癌的临床疗效

目的 :探讨药盒系统在手术不能切除胰头癌治疗中的临床价值。方法 :手术无法切除的胰头癌 12 6例 ,分为两组。A组 :88例采用经皮经左锁骨下动脉植入药盒系统 ,术后经药盒化疗。B组直接静脉给药全身化疗。化疗方案 :采用FMA方案 ,7d为一周期 ,间隔 1～ 2m重复下一周期。结果 :A组共行局部药盒系统化疗 2～ 10次 ,平均 7 6次。完全缓解 (CR) 4例 ,部分缓解 (PR) 49例 ,有效率 (CR +PR) 60 2 % ;生存期 3～ 3 4m ,中位生存时间 13 5m。B组完成化疗 1～ 7次 ,平均 3 8次。无CR病例 ,PR10例 ,有效率 2 7 3 %。生存期 1～ 13m。B组完成化疗 1～ 7次 ,平均 3 8次。无CR病例 ,PR10例 ,有效率 2 7 3 %。生存期 1～ 13m中位生存期 6 2m ,两组对比在有效率和生存期方面均有显著性差异 (P <0 0 5 )。在临床症状方面 ,A组中 5 6例病人表现为顽固性疼痛 ,化疗 2～ 3w后 2 7例疼痛完全消失 ,2 2例不同程度缓解 ,占 87 5 %。B组疼痛 3 2例 ,化疗后疼痛完全消失 4例 ,缓解 6例 ,占 3 1 2 %。化疗的毒副作用。A组无严重的肝肾、心脏和骨髓损害。 2 5例在化疗中出现轻微的胃肠反庆和白细胞降低 ,占 2 8 3 % ,均不影响继续化疗。B组 3例出现严重骨髓抑制 ,1例死亡 ,肝肾功能也有不同程度的损害 ,发生胃肠道反应和白细胞     

胆汁引流对胆源性胰腺炎大鼠血浆脑肠肽水平和胰腺病理变化的影响

分别观察了胆胰管结扎大鼠(A组)、胆胰管结扎后30分钟加胆汁外引流(B组)、胆胰管结扎后30分钟加胆汁内引流(C组)及对照大鼠(D组),在不同时期检测大鼠血浆胆囊收缩素八肽(CCK-OP)、生长抑素(SS)及血清淀粉酶水平和胰腺重量及组织学记分.结果:术后3小时,A、B、C组血浆CCK—OP、SS及血淀汾酶含量均明显高于D组(P<0.05);B组高于A、C组(P<0.05);C组低于A组(P<0.05);A、B、C组在术后3小时,血浆CCK-OP及SS含量均达高峰,A、C组血浆CCK-OP、SS在术后6小时及24小时均下降至正常,B组仍高于D组;A、B、C组胰腺均呈急性炎症改变;A、B组胰腺组织学记分及重量均明显高于C组(P<0.05);B组又高于A组(P<0.05).     

改良胰肠吻合术中“悬吊式”胰管-空肠端侧连续缝合吻合在胰十二指肠切除术中的应用

目的：通过与其他吻合术式比较,探讨“悬吊式”胰管－空肠端侧,连续缝合吻合在胰十二指肠切除术中的应用价值。方法：回顾性分析2012年9月－2013年5月本院78例因恶性肿瘤进行胰十二指肠切除术患者的术式、相关临床信息与预后。将78例患者按胰肠吻合术式分为A组（20例）：吊式胰管－空肠端侧连续缝合吻合组;B组（42例）：胰管空肠端侧黏膜－黏膜吻合组;C组（16例）：其他胰肠吻合法三组,比较不同方式的胰肠吻合手术术后胰瘘等并发症发生情况。结果：A组术后胰瘘发生率明显低于B组及C组,差异有统计学意义（P=0．01）,同时术后吻合口出血的发生率也明显低于B、C两组,差异有统计学意义（P=0．003）。结论：“悬吊式”胰管一空肠端侧连续缝合吻合术明显降低十二指肠切除术后并发症的发生,其在胰十二指肠切除术的应用也越来越受到推广。     

一氧化氮在急性出血坏死性胰腺炎肠道损伤中保护作用的研究

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）在急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）时肠损伤的作用。方法：用去氧胆酸钠逆行注射法复制ＡＨＮＰ模型。将ＳＤ大鼠随机分为三组：假手术组（ＳＯＧ）;急性出血坏死性胰腺炎组（ＡＰＧ）;Ｌ－ＮＡＭＥ治疗组（ＬＴＧ）。分别测定术后１、４、８、１２ｈ各组血清淀粉酶和肠组织ＮＯ含量,对胰腺和小肠组织作病理检查,并进行病理组织评分。结果：ＳＯＧ术后血清淀粉酶无明显变化,ＡＰＧ和ＬＴＧ血清淀粉     

CaMK Ⅱ在小鼠重症急性胰腺炎胰腺损伤中的作用

目的 观察钙调素依赖蛋白激酶（CaMK Ⅱ）在重症急性胰腺炎（SAP）小鼠胰腺组织中的表达情况,并探讨其抑制剂KN93对SAP胰腺损伤的保护作用和机制。方法 36只健康雄性C57小鼠随机分为假手术组、SAP组、KN93组、SAP组+KN93组,9只/组。于造模后24 h收集血清和胰腺组织;采用HE染色观察胰腺组织病理改变;Elisa检测血清脂肪酶、淀粉酶活性以及炎性因子变化情况;免疫印迹法检测CaMK Ⅱ、p-CaMK Ⅱ、p-NF-κB、MAPK、p-MAPK在小鼠胰腺组织中的表达变化。 结果 与假手术组比较,SAP组p-CaMK Ⅱ、p-NF-κB、p-MAPK表达水平升高（P<0.05）。KN93干预后,SAP小鼠胰腺组织病理损伤减轻,血清脂肪酶、淀粉酶以及炎性因子（TNF-α、IL-6）水平降低（P<0.05）,同时NF-κB、ERK和MAPK蛋白磷酸化也降低（P<0.05）。结论 CaMK Ⅱ蛋白在SAP疾病胰腺组织活性升高,CaMK Ⅱ抑制剂KN93能有效减轻SAP小鼠胰腺损伤和炎症程度,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关。