基质金属蛋白酶-9在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达

目的：动态观察基质金属蛋白酶-9（matrix metallo proteinase-9,MMP-9）在阿霉素肾病大鼠肾小球内的表达,探讨其变化在肾小球疾病中的作用。方法：采用大鼠尾静脉单剂量注射阿霉素（浓度2mg/ml,剂量7.5mg/kg）建立阿霉素肾病模型,生化检测白蛋白变化,尿液检测24h尿蛋白定量,光镜下观察肾小球形态学改变,免疫组化检测肾组织MMP-9和纤维连接蛋白（FN）的表达。结果：阿霉素肾病组大鼠第4周时出现出现大量蛋白尿、低蛋白血症,与对照组相比,差异具有显著性（P〈0.01）;电镜下可见肾小球足突广泛融合;第8周部分肾小球发生局灶性硬化;MMP-9在肾小球足细胞的表达随着肾小球病变的加重先增加后减少;FN在肾小球内的表达随着肾小球病变的加重而逐渐增加。24h尿蛋白定量与MMP-9表达呈负相关,与FN表达成正相关,肾小球MMP-9与FN表达呈负相关。结论：阿霉素肾病组大鼠肾小球MMP-9和FN在不同阶段表达的变化可能参与了肾小球硬化的发生发展过程。     

辛伐他汀对阿霉素肾病大鼠的治疗作用及白细胞介素-1β表达的影响

目的观察炎症因子自细胞介素-1β（interleukin-1beta，IL-1β）在阿霉素肾病大鼠发生肾小球硬化过程中的表达，探讨辛伐他汀保护阿霉素肾病大鼠肾脏的机制。方法雄性SD大鼠分为正常对照组、阿霉素肾病组（模型组）和阿霉素肾病辛伐他汀治疗组（治疗组），分别灌胃给药11周。免疫组化法观测。肾组织中IL-1β的定位表达，半定量RT—PCR技术检测肾组织IL—1βmRNA的表达，酶联免疫吸附法检测血清和肾组织中IL-1β的水平，光镜观察肾小球硬化的情况。结果模型组肾组织IL-1β的表达明显增强（P〈0．01），伴有明显的肾小球硬化及肾功能损害（P〈0．01）；与模型组比较，治疗组肾组织IL—1β的表达、肾小球硬化及肾功能损害均减轻（分别P〈0．05、P〈0．01、P〈0．05）。结论辛伐他汀可能通过降低肾组织内IL-1β的表达，对肾脏起保护作用。     

大鼠阿霉素肾病超微结构转变过程实验研究

目的探讨单侧肾切除加重复注射阿霉素制作的大鼠局灶节段性肾小球硬化动物模型肾脏超微结构的变化过程,为采用阿霉素肾病模型提供实验基础。方法2个月龄雌性SD大鼠38只,随机分为对照组(18只)和阿霉素肾病组(ADR组,20只)。ADR组大鼠先行右肾切除,其后第1周和第2周分别给予阿霉素5mg/kg和3mg/kg尾静脉注射,对照组行假手术和等量生理盐水静脉注射。在切肾后第4、8、16周收集血标本测定血肌酐(Scr)和尿液测定24h尿蛋白定量,各时间点处死6只大鼠取其残肾行光镜组织病理学观察及电镜超微结构观察。结果ADR组Scr和尿蛋白在各时间点均较对照组显著升高(P<0.05);ADR组大鼠肾脏组织病理损害进行性发展,在第16周时形成FSGS改变;电镜下早期以肾小球足细胞广泛融合为主,在第8周时有少部分修复,16周时出现肾小球硬化;肾小管上皮细胞主要表现为大量线粒体肿胀和空泡变损伤。结论单侧肾切除加重复注射阿霉素可成功诱导局灶节段性肾小球硬化大鼠动物模型,其超微结构变化包括肾小球和肾小管双重损伤,若干预需早期进行。     

吡格列酮对糖尿病大鼠足细胞的保护作用

目的观察糖尿病（DM）大鼠肾小球上皮细胞蛋白-1（GLEPPl）表达及尿液足细胞（UPC）排泄的改变，吡格列酮对DM大鼠肾小球足细胞分布及UPC排泄的影响。方法大鼠分为3组，对照组；DM组；吡格列酮治疗组。腹腔注射链脲菌素诱导DM大鼠模型。实验10周末测24h尿蛋白定量（TP）、血清总胆固醇（TC）、血糖（BG）。间接免疫荧光法检测尿沉渣足细胞特异性标志蛋白podocalyxin以观察UPC排泄水平，检测GLEPPl以观察肾小球足细胞分布。结果DM组及吡格列酮治疗组UPC、TP、TC、BG较对照组明显升高（P〈O．01）。与DM组相比，吡格列酮治疗组TP、BG显著降低（P〈O．01），UPC及TC亦降低（P〈O．05）。病理组织肾小球荧光染色示GLEPPl在对照组正常，DM组明显缺失，吡格列酮治疗组呈节段性缺失。UPC与TP呈正相关（rs=0．41，P〈0，05），而与TC、BG无显著相关性（rs=0．19，0．23，P〉O．05）。结论肾小球足细胞缺失参与糖尿病肾病（DN）的发病，UPC检测可作为判断DN病情活动性的标志之一。吡格列酮可减轻DN大鼠尿蛋白，降低TC、血糖，减少足细胞脱落及尿液足细胞的排泄。     

细胞凋亡对慢性肾衰大鼠肾结构与肾功能影响的研究

目的探讨肾小球细胞凋亡对肾结构与肾功能的影响研究。方法建立阿霉素肾硬化大鼠模型,光镜和电镜观察肾小球结构变化,并检测其有核细胞记数。用原位检测肾小球细胞凋亡指数。结果疾病组各时间点调亡指数明显升高（P〈0．01）,于12周达高峰。疾病组肾小球中有核细胞数与肾小球细胞凋亡指数之间存在明显负相关。肾小球内凋亡细胞数与肾功能恶化程度呈密切正相关,凋亡指数与BUN和Scr的相关系数分别为0．8543和0．9006。结论随病情进展,实验性肾硬化大鼠中肾小球细胞发生过度调亡,导致细胞数目减少,加重肾小球硬化进展。     

实验性加速肾硬化大鼠动物模型的制备

目的:探讨单侧肾切除加重复注射阿霉素制作加速肾硬化大鼠动物模型的可行性。方法:3月龄雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组(18)和实验组(22)。实验组大鼠先行左肾摘除,其后第7天和第28天分别给予阿霉素5mg/Kg和3mg/Kg尾静脉注射,对照组则以假手术和生理盐水静脉注射代替。在第一次静脉注射阿霉素后第4周、8周和12周收集血标本和24小时尿液测定血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和24小时尿蛋白定量(TP/24h),并于第12周测定大鼠平均动脉压(MAP)。同时在各时间点处死6只大鼠取其残肾以行光镜及电镜组织病理学检查,测定第12周大鼠平均肾小球截面积(A_G)和肾小球体积(V_G)。结果:BUN、Scr和TP/24h在各时间点均较同期对照组明显升高(P<0.05或P<0.01),随着实验的进展这种升高愈发明显且组内各时间点之间也有显著性差异。与对照组相比,实验组大鼠平均动脉压显著升高(106.5±9.75)mmHg vs(150.75±12.00)mmHg,P<0.01)。实验组大鼠肾脏组织病理损害进行性发展,4周时表现微小病变肾病,8周部分肾小球出现节段硬化,12周肾小球平均截面积和平均体积显著增大,大部分出现球性硬化。结论:单侧肾切除加重复注射阿霉素可成功诱导加速肾硬化大鼠动物模型,其病理学特点类似于人类局灶节段性肾小球硬化。     

中药降氮汤对5/6肾切除大鼠肾小球结缔组织生长因子表达的影响

目的：研究中药降氯汤对5／6肾切除肾小球硬化大鼠肾小球结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响，探讨其防治肾小球硬化的作用机制。方法：采用5／6肾切除肾小球硬化大鼠模型，设立假手术组、模型组、氯沙坦组和中药降氮汤组。检测各组大鼠术后12周末血清尿素氯、肌酐及胆固醇水平。光镜及电镜观察第12周肾组织病理变化，并应用免疫组化法检测肾小球内CTGF的表达水平。结果：中药降氯汤组和氯沙坦组较模型组血清尿素氮、肌酐、胆固醇水平明显下降（P〈0．01）．两治疗组间比较无显著性差异（P〉0．05）。肾脏病理学检查显示，两治疗组肾小球增生硬化程度明显减轻。免疫组化显示两治疗组肾小球内CTGF表达较模型组明显减少（P〈0．01），两治疗组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：中药降氮汤可显著抑制5／6肾切除肾小球硬化大鼠肾小球CTGF的过度表达，其防治肾小球硬化的作用机制与抑制CTGF的过度表达有关。     

肾小球疾病尿液足细胞排泄的特征

目的探讨在各种肾小球疾病中尿液足细胞排泄的特征。方法将96例因肾小球疾病行肾穿刺病理活检的患者作为病例组,根据肾脏病理改变,分为肾小球活动性病变组和肾小球非细胞增生性病变组,40例健康志愿者作为对照组,采用免疫酶细胞化学方法,应用小鼠抗人podoealyxin（PCX）单克隆抗体进行标记,计数足细胞,比较分析各组尿液足细胞阳性率及尿液足细胞的平均排泄水平。结果1）96例肾脏疾病患者中,65例尿液足细胞阳性,占67．71％;而40例健康志愿者中尿液足细胞均为阴性,差异均具有非常显著性意义（P〈0．01）。2）96例肾脏疾病患者中,肾小球活动性病变组,尿液足细胞检测的阳性率为75．81％,足细胞平均排泄水平为（6．48±8．03）个／20HP;而肾小球非细胞增生性病变组,尿液足细胞检测的阳性率为52．94％,足细胞平均排泄水平为（2．65±3．92）个／20HP,两组比较差异具有显著性意义（P〈0．05）。结论在多种类型的原发性或继发性肾小球疾病中均有足细胞的损伤脱落,尿液足细胞的排泄水平与肾小球疾病肾脏病理活动性密切相关。     

肾小球硬化大鼠血、尿液生化及肾脏病理学改变

摘要： 目的 观察肾小球硬化（GS）大鼠血、尿液生化及肾脏病理学改变。方法 40只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组和模型组，每组均为20只。采用单侧肾切除加1周后尾静脉注射阿霉素(5mg/kg)的方案建立大鼠GS模型，造模后12周末处死。检测血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)及24小时尿蛋白（24hUPr）。苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏病理改变，计算GS指数。免疫组织化学方法检测肾组织Ⅳ型-胶原（Col-Ⅳ）和纤维连接蛋白（FN）的表达水平。结果 （1）模型组24hUPr和血清SCr、BUN显著高于假手术组，而血清TP、Alb则明显降低。（2）GS大鼠肾小球肥大，球囊粘连，囊壁增厚，局灶节段性肾小球硬化，GS指数显著高于假手术组；肾小管萎缩或坏死，可见大量蛋白管型；肾间质增宽，可见大量炎症细胞浸润。（3）GS大鼠肾组织Col-Ⅳ和FN阳性面积比显著高于假手术组，以肾小球表达增高为主。结论 采用单侧肾切除加1周后尾静脉注射阿霉素(5mg/kg)在术后12周可以成功建立GS模型，具体表现为大量蛋白尿、低蛋白血症和明显的肾功能损害，肾脏病理显示GS合并Col-Ⅳ、FN表达普遍增高。     

肾病综合征患者尿足细胞与临床病理关系的分析

目的通过观察肾病综合征（NS）患者尿足细胞与临床病理关系,探讨尿足细胞检测代替肾活检的可能性。方法选取80例NS患者被肾穿前1d的晨尿和20例正常对照的晨尿各100ml,离心涂片。用抗人足细胞标记蛋白Podocalyxin（PCX）单克隆抗体分别对尿沉渣涂片和肾组织切片进行免疫组化及免疫荧光检测,并于光学显微镜下计数尿足细胞数目及肾小球足细胞密度,比较NS各种类型尿足细胞排泄情况与。肾脏临床病理的相关性;同时收集患者的临床一般资料和实验室资料,并分析其与尿足细胞和肾组织足细胞的关系。结果各组间年龄、性别构成及临床生化指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。正常对照组免疫组化及免疫荧光检测尿未见足细胞,免疫组化及免疫荧光检测肾组织PCX,可见大量足细胞;NS不同类型组与正常对照组尿足细胞及肾小球足细胞密度相比有统计学差异（P〉0．05）;各类型组中,以局灶节段性。肾小球硬化（FSGS）组患者尿中检出的足细胞数最多,其次是系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）组,再次是膜性肾病（MN）、微小病变性肾病（MCD）。各组患者尿足细胞数与24h尿蛋白量及肾小球病理积分呈正相关（P〈0．05）,与血浆白蛋白、肾小球肾足细胞密度呈负相关（P〈0．05）,与血肌酐无相关性（P〉0．05）;各组患者肾小球足细胞密度与24h尿蛋白量及尿足细胞呈负相关（P〈0．05）,与血浆白蛋白及肾小球病理积分呈正相关（P〈0．05）,与血肌酐无相关（P〉0．05）。结论尿足细胞的检测是一项可反映肾病综合征不同病理类型病情轻重的无创性指标;尿足细胞数有可能作为反应肾脏病变进展的重要指标。     

通络益肾温阳方对糖尿病肾病大鼠疗效的实验研究

目的:观察通络益肾温阳方对糖尿病肾病(DN)模型大鼠的疗效。方法:随机抽取9只大鼠作为正常对照组,行假手术;其余51只采用左侧单肾切除术合链脲佐菌素腹腔注射复制DN大鼠模型。将造模成功的47只大鼠分为病理对照组(16只)、中药治疗组(16只)、洛汀新+糖适平西药治疗组(15只),给药10 w。观察各组大鼠治疗前后一般情况,检测24 h尿蛋白定量、尿β2微球蛋白、空腹血糖、血清尿素氮、血肌酐;计算肾脏肥大指数,并行HE染色观察肾脏的病理组织学变化。结果:与对照组比较,中药治疗组大鼠一般状况明显改善,体重显著增加(P<0.01);检测24 h尿蛋白定量、尿β2微球蛋白、空腹血糖、血清尿素氮、血肌酐、肾脏肥大指数显著降低(P<0.01);肾病理组织学变化明显减轻。结论:通络益肾温阳方对DN模型大鼠具有一定的治疗效果。     

黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠足细胞的影响及其机制研究

目的：探讨黄芪甲苷（AS- IV）对糖尿病肾病（DN）大鼠足细胞的保护作用及其机制,为DN早期防治开辟一条新途径。方法体重180~200g健康雄性SD大鼠45只按配伍法分为正常对照组（NC组）、DN组和AS- IV治疗组（DN＋AS- IV组）,链脲佐菌素腹腔注射建立大鼠早期DN模型。DN＋AS- IV组大鼠在造模前2周予AS- IV 10mg/（kg＆#183;d）灌胃预处理至实验结束,共14周。造模后第6、12周末收集并测定24h尿量及尿蛋白;同时各组按抽签法选取5只大鼠测体重,处死大鼠后测血生化指标,取肾组织,光镜观察肾脏病理病理变化,电镜观察足细胞形态变化,肾母细胞瘤抑制基因1（WT1）免疫组织化学染色观察肾小球足细胞密度变化,Western blot法测定大鼠肾皮质α3β1整合素蛋白水平的变化。结果与NC组相比,DN组大鼠血糖和24h尿蛋白增高,肾脏肾小球系膜区增生,足细胞足突融合,肾小球足细胞数量减少,α3β1整合素蛋白水平下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。AS- IV可显著改善DN大鼠蛋白尿,抑制肾小球系膜区增生,抑制足细胞足突融合和数目减少,上调α3β1整合素表达。结论 AS- IV对早期DN大鼠足细胞具有保护作用,可能与其上调足细胞α3β1整合素表达相关。     

肾炎灵对阿霉素肾病大鼠肾脏的保护作用

目的观察中药复方肾炎灵对阿霉素肾病大鼠的肾损伤是否具有保护作用。方法采用尾静脉注射阿霉素制作肾病大鼠模型。肾炎灵组大鼠在注射阿霉素前预先给药1周,给药7周后检测各组大鼠24 h尿蛋白含量、血肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）等肾功能指标,并观察各组大鼠肾组织的病理学变化。结果肾炎灵组大鼠24 h尿蛋白在第2~4周明显下降,与模型组相比,差异具有统计学意义（P〈0.05）,但在给药后期仅有下降趋势,差异无统计学意义（P〉0.05）;肾炎灵对肾病大鼠的肾系数和血Cr也仅有下降趋势,但对BUN有明显的降低作用,差差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;显微镜下可见肾炎灵组大鼠的肾组织病理改变有一定程度的减轻。结论肾炎灵对阿霉素肾病大鼠肾脏具有一定的保护作用。     

福辛普利和缬沙坦对自发性高血压模型鼠肾损害中的作用

目的探讨福辛普利（FDsinopril）和缬沙坦（Valsartan）对自发性高血压模型鼠肾损害中的作用。方法20只22周龄雄性SHR,随机分为高血压组（SHR组）、福辛普利组（Fos组）、缬沙坦组（val组）和福辛普利＋缬沙坦组（Fos＋Val组）,22周龄雄性Wistar-Kyoto大鼠（WKY组）5只为对照组。检测各组大鼠体重,尾动脉血压,24h尿蛋白定量,尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG酶）,左肾,体重比值和血肌酐。HE及Masson染色,显微镜下观察肾脏病理改变。结果实验第8周（30周龄）,SHR组收缩压明显高于WKY组,Fos组,Val组及Fos＋Val组（P均〈0．05）,而Fos组,Val组及Fos＋Val组收缩压与WKY组比较无统计学差异（P〉0．05）;Fos组,Val组及Fos＋Val组大鼠血肌酐和尿NAG酶明显低于SHR组（P均〈0．05）,而实验前与实验第8周大鼠蛋白尿排泄量差值（△Upro）均高于SHR组（P〈0．05）。SHR组大鼠肾脏出现高血压肾脏损害的病理特征,胶原沉积增多,经Fos和,或Val干预后,高血压引起的肾脏改变明显改善。结论福辛普利和缬沙坦均有保护肾功能、延缓高血压导致肾间质纤维化的作用,但两者联合应用较单一用药在自发性高血压模型鼠中并不产生更大的降低尿蛋白和肾脏保护作用。     

化痰散结方对荷瘤鼠一般情况、免疫器官及局部肿瘤的影响

目的探讨化痰散结方的抑瘤作用。方法实验建立含人乳腺癌细胞系MCF-7／ADR细胞的动物荷瘤模型。分组：空白组：不接种肿瘤，亦不给任何干预。对照组：灌服生理盐水0．4ml／只，1次／d。阿霉素（ADM）组：ADM（4m/kg）尾静脉注射，每4d注射1次，共7次。方药组：灌服中药混悬液0．4ml／只，1次／d.ADM＋方药组：中药灌服方法同方药组，ADM给药方法同ADM组。结果通过观察各组小鼠的一般情况及瘤重，表明化痰散结方对乳腺癌细胞系MCF-7／ADR细胞有明显的抑制作用。各治疗组瘤重均显著低于对照组。ADM组、方药组,ADM＋方药组与对照组比较，差异均有显著性（P〈0．01）.与ADM组比较，ADM＋方药组效果更好（P〈0．05）。结论化痰散结方有明显的抑瘤作用。     

葱白制剂对5／6肾切除大鼠PPAR-γ表达的影响

目的观察葱白制剂对慢性肾衰大鼠肾组织过氧化脂质体增殖激活受体-γ（PPAR-γ）表达的影响。方法SD大鼠80只，制备5／6肾大部切除慢性肾衰大鼠模型。分为葱白制剂组、苯那普利组、模型对照组和假手术组。各组大鼠分别于第1、4、8、12周杀检，分别留取血、尿及肾组织标本，检测血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN），24h尿蛋白定量，肾组织免疫组化检测Ⅰ型胶原（COL—Ⅰ）、Ⅲ型胶原（COL-Ⅲ）及PPAR-γ表达，RT—PCR法检测肾组织PPAR-γ mRNA表达。结果自第8周起，葱自制剂组及苯那普利组BUN及Scr下降，较模型组明显差异（P〈0．05）；用葱自制荆及苯那普利均可明显减少尿蛋白排泄（P〈0．05）；免疫组化模型组仅在肾小球有少量PPAR-γ表达，葱白制剂组肾小球及肾小管均有PPAR-γ表达，苯那普利组仅肾小球有少量表达，而假手术组主要在肾小球表达，肾小管有少量表达；葱白制剂与苯那普利均可明显抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。RT—PCR结果示5／6肾大部切除大鼠肾组织PPAR-γ mRNA表达下降，葱白制剂可上调其表达。结论葱白制剂可改善肾纤维化，保护肾功能。其机制可能与慢性肾衰的早期调节PPAR-γ mRNA的表达有关。     

茶多酚和黄芩苷对百草枯中毒大鼠血清及肺组织TGF-β1和 HIF-1α表达的影响

目的：观察茶多酚（TP）、黄芩苷（baicalin）对急性百草枯中毒大鼠血清及肺组织TGF-β1、HIF-1α表达的影响。方法90只健康SD大鼠随机分为空白对照组（N组）、急性百草枯中毒组（P组）、茶多酚干预组（T组）、黄芩苷干预组（S组）及茶多酚加黄芩苷干预组（L组）,每组18只,各组再按随机原则分为1、7和14天三个亚组,每个亚组6只。P、T、S、L各组大鼠均予50mg/kg一次性腹腔注射染毒;大鼠染毒6h后T组给予茶多酚250mg/（kg·d）、S组予黄芩苷80mg/（kg·d）L组给予茶多酚加黄芩苷混悬液灌胃干预,N组和P组均给予用等量生理盐水灌胃。在第1、7和14天随机处死大鼠,腹主动脉采血,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清TGF-β1、HIF-1α水平,免疫组化染色检测大鼠肺组织TGF-β1、HIF-1α表达量。结果经百草枯染毒后,P组大鼠血清及肺组织各时点TGF-β1、HIF-1α含量均高于N组（P均〈0.05）。经药物干预后,T、S、L组大鼠血清TGF-β1、HIF-1α水平在第7天和第14天时较P组显著降低（P均〈0.05）;S组在第14天时,T组与L组第7天和第14天时大鼠肺组织TGF-β1、HIF-1α表达均较P组显著降低（P〈0.05）。各药物干预组各时点TGF-β1、HIF-1α表达量比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论茶多酚、黄芩苷对急性PQ中毒大鼠血清及肺组织TGF-β1、HIF-1α表达有下调作用。