食管鳞癌的肿瘤干细胞标志

目的:探讨食管鳞癌组织和其细胞系的肿瘤干细胞(CSC)标志.方法:应用免疫酶或免疫荧光技术检测20例食管鳞癌组织和细胞(Eca-109和EC9706)中CD133、CD44以及多药耐药基因1(MDR1)的表达和定位.结果:食管鳞癌细胞中CD133和MDR1一致强阳性的细胞占30%-43%,CD133和CD44一致强阳性的细胞约占40%.CD133强阳性小细胞占癌细胞的8%,癌组织中约为4%.CD133强阳性小细胞位于鳞癌上皮的基底层、癌珠周缘或癌灶内;CD44强阳性细胞约占40%,其中包含2个亚群:少数较小CD44阳性的细胞亚群定位于鳞癌上皮的基底层、癌珠周缘或癌灶内;较大CD44强阳性细胞的亚群主要定位于鳞癌上皮棘细胞层及癌灶中.结论:CD133强阳性小细胞和CD44强阳性细胞可能是CSC的标志.     

结直肠癌CD133+细胞定量评估的意义

目的研究CD133+结直肠癌干细胞与肿瘤增殖、转移的相关性。方法取得术后新鲜的结直肠癌组织后,立刻进行清洗、消化、培养等过程,得到了具有活性的原代结直肠癌单细胞。特异性抗体CD133标记后运用流式细胞技术检测癌干细胞分布比例。癌组织同时进行免疫组化和分子生物学研究,确定增殖蛋白Ki-67、抑制肿瘤转移相关蛋白e-cadherin和细胞凋亡相关蛋白caspase-3的表达。结果结直肠癌原代细胞分离、纯化和检测技术简明可行,所得数据客观准确。研究病例按照CD133+癌干细胞比例≥3%和<3%分成两组。结果显示CD133+癌干细胞≥3%组在肿瘤大小和淋巴转移有增大和增多趋势;肿瘤增殖特异性蛋白Ki-67增高具有显著性差异;抑制肿瘤转移相关蛋白e-cadherin的表达降低;凋亡相关蛋白caspase-3的表达降低。结论本研究成功建立了一套可行性高的结直肠癌CD133+干细胞准确定量评估系统。结直肠癌干细胞的准确定量检测可以作为评估患者预后和化疗敏感度的一项重要指标。本技术也为进一步提纯结直肠癌干细胞,并且最终研究对此靶点的攻击提供了平台。     

MsrA在结直肠癌干细胞中的表达及意义

目的探讨MsrA 在结直肠癌干细胞中的表达及与结直肠癌发生、发展的关系。方法免疫磁珠分选结直肠癌细胞株
SW480细胞中CD133+/CD44+/ESA+亚群细胞,RT-PCR检测癌细胞、癌干细胞和正常大肠粘膜细胞中MsrA的表达以及MsrA过
表达对VEGF、MMP-13和CXCR4表达的影响,MTT检测过表达MsrA对结直肠癌干细胞增殖的影响。结果癌干细胞中MsrA
的表达水平明显高于癌细胞,癌细胞中MsrA的表达水平明显高于正常大肠粘膜细胞。MsrA过表达会抑制结直肠癌干细胞的
增殖以及下调VEGF、MMP-13和CXCR4的表达。结论MsrA可能通过下调VEGF、MMP-13和CXCR4的表达和抑制细胞增
殖来抑制结直肠癌的发生、发展。
     

WWOX和CD133在结直肠癌中的表达及临床意义

目的检测结直肠癌（CRC）组织中WWOX和CD133蛋白的表达情况及其相互之间的关系,并探讨它们与CRC患者临床
病理参数之间的关系。方法采用免疫组织化学ElivisionTM plus 法检测174 例CRC 组织和80 例正常结直肠黏膜组织中
WWOX和CD133蛋白的表达情况。结果在CRC组织中WWOX和CD133蛋白表达的阳性率分别为41.4%和53.4%;对照组
中WWOX和CD133 蛋白表达的阳性率分别为87.5%和5.0%,其表达差异在两组之间有统计学意义（P<0.05）。WWOX和
CD133蛋白表达与CRC患者肿瘤组织的不同分化程度、浸润深度、淋巴结是否转移以及不同Duke分期等之间差异均有统计学
意义（P<0.05）,且WWOX蛋白表达的阳性率与CD133蛋白的阳性率之间呈负相关关系（P<0.05）。Kaplan-Meier法生存分析结
果显示在CRC组织中WWOX蛋白阳性表达组患者术后总的存活时间明显高于其阴性组患者,而CD133蛋白阳性组患者术后
总的存活时间明显低于其阴性组患者,log-rank单因素分析差异有统计学意义。Cox多因素分析显示WWOX和CD133蛋白的
阳性表达及Duke分期是影响CRC患者术后生存的独立预后因子。结论反常表达的WWOX和CD133参与了CRC的发生、发
展、侵袭以及转移;在CRC患者中联合检测WWOX和CD133蛋白的表达对预测其进展和预后均有重要意义。
     

CD133+结直肠肿瘤干细胞中ABC转运蛋白的表达

目的 探讨CD133+结直肠肿瘤干细胞表面ABC转运蛋白的表达.方法 运用流式细胞仪(FACS)分析结直肠肿瘤细胞中CD133的表达,通过实时荧光定量PCR分析9种常见ABC转运蛋白在结直肠肿瘤细胞及正常组织细胞中的表达情况,并筛选出在肿瘤组织中高表达的ABC转运蛋白做免疫荧光分析,观察CD133+细胞中ABC转运蛋白的表达.结果 有(2.59±1.26)%的结直肠肿瘤细胞表达CD133表面标记,在9种ABC转运蛋白中,MRP1在结直肠肿瘤细胞中表达显著高于正常组织细胞,共聚焦显微分析后证明CD133+细胞为主要MRP1表达细胞.结论 MRP1为结直肠肿瘤中主要表达的ABC转运蛋白,并且这一转运蛋白集中表达在CD133+肿瘤细胞中.     

肿瘤干细胞标志物CD133、ABCG2、p75~（NTR）在非小细胞肺癌组织的表达及其生物学意义

目的探讨肿瘤干细胞标志物CD133、ABCG2及p75NTR在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学方法,检测44例NSCLC组织、17例癌旁组织、17例非肿瘤组织中的CD133、ABCG2及p75NTR蛋白的表达并对结果进行分析。结果 （1）CD133、ABCG2及p75NTR蛋白在44例NSCLC组织中的阳性表达率分别为68.2%（30/44）、31.8%（14/44）、47.7%（21/44）,在17例癌旁组织中分别为5.9%（1/17）、0（0/17）、11.8%（2/17）,在17例非肿瘤组织中分别为47.1%（8/17）、11.8%（2/17）、17.6%（3/17）,差异均有统计学意义（P〈0.05）;其中NSCLC组织中p75NTR蛋白的阳性表达与肿瘤的远处转移密切相关（P〈0.05）;（2）随肿瘤恶性度的增加,CD133蛋白的阳性表达率也明显增加,差异接近统计学意义（P=0.07）。结论 NSCLC组织中CD133、ABCG2及p75NTR的表达明显高于癌旁及非肿瘤组织,或许这三者与NSCLC恶性演进有关;肿瘤干细胞标记物CD133的表达与NSCLC的分化密切相关,CD133蛋白或许能成为NSCLC的肿瘤干细胞标记物。     

脑肿瘤干细胞的分布与肿瘤微血管的相关性

目的 探讨脑肿瘤干细胞(BTSC)标记物CD133、Nestin和血管内皮细胞标记物CD31在脑胶质瘤中的表达.方法 (1)按照世界卫生组织(WHO)2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级18例,Ⅲ级23例,Ⅳ级24例,采用免疫组织化学SP法检测CD133和Nestin在65例胶质瘤组织中的表达.(2)采用免疫荧光双染法检测CD133/CD31、Nestin/CD31和CD133/Nestin共表达情况.计算CD133~+肿瘤干细胞、CD133~+血管、Nestin~+肿瘤干细胞和Nestin~+血管所占的百分率,并进行统计学分析.结果 CD133~+肿瘤干细胞或Nestin~+肿瘤干细胞在各级别胶质瘤中均有表达,并且均可表达于血管内皮细胞.低级别组中,在CD133~+肿瘤干细胞或Nestin~+肿瘤干细胞分布的区域可见CD133~+血管或Nestin~+血管分布较少.在高级别组中,该区域则有丰富的CD133~+血管或Nestin~+血管分布,同时可见肿瘤干细胞包绕着血管生长.并且,CD133~+细胞或Nestin~+细胞的百分比与CD133~+血管(r=0.945,P<0.01)或Nestin~+血管(r=0.727,P<0.01)的表达呈正相关.免疫荧光双染可见,CD133~+细胞或Nestin~+细胞均聚集于CD31~+血管周围,并且,CD133~+/CD31~+、Nestin~+/CD31~+细胞共表达于血管内皮细胞.结论 在脑胶质瘤组织中,血管内皮细胞可表达肿瘤干细胞的标记物,因此认为,肿瘤内微血管可能来源于肿瘤干细胞的分化,并且肿瘤干细胞聚集于微血管周围生长呈巢状分布.随着肿瘤病理级别的升高,CD133~+肿瘤干细胞或Nestin~+肿瘤干细胞的百分比与CD133~+血管或Nestin~+血管的表达呈正相关.     

Notch3、DLL1、CD133在结直肠腺癌中的表达及意义

目的 探讨Notch3、DLL1、CD133在结直肠腺癌中的表达及其临床病理意义.方法 运用免疫组织化学法检测12份正常结直肠黏膜标本、30份结直肠腺瘤组织标本、50份结直肠腺癌组织标本,了解Notch3、DLL1、CD133在不同结直肠组织中的表达情况,分析其与临床病理特征间的关系.结果 Notch3、DLL1、CD133在结直肠腺癌中的阳性表达率分别为64.0％(32/50)、68.0％(34/50)和54.0％(27/50),均明显高于在结直肠腺瘤中的阳性表达率(26.7％、33.3％、36.7％)和正常结直肠组织中的阳性表达率(8.3％、16.7％、8.3％)(P＜0.05).腺瘤组与正常组相比,差异均无统计学意义(P＞0.05).以上指标在结直肠腺癌中的表达与患者年龄、性别、肿瘤发生部位、分化程度、肿瘤大小无关(P＞0.05),均与是否伴淋巴结转移相关,且Notch3和DLL1的表达与Dukes分期相关,此外DLL1的表达与肿瘤浸润深度也相关(P＜0.05).Notch3与CD133的表达呈正相关(r=0.478,P=0.000).结论 在结直肠腺癌组织中Notch3、DLL1、CD133的表达明显高于正常结直肠组织及结直肠腺瘤组织;Notch3可能通过对肿瘤干细胞的调控,影响结直肠癌的发生、发展.     

手术切除的结直肠癌组织中的肿瘤干细胞的培养及鉴定

目的获得结直肠癌患者手术切除癌组织的肿瘤干细胞（CSC）,培养并鉴定其干细胞特性。方法通过原代培养手术切除 结直肠癌组织获得结直肠癌细胞,再通过有限稀释法和无血清培养法筛选结直肠癌CSC,软琼脂集落实验检测CSC和对照组人 结直肠癌细胞株SW480 的增殖能力;用低数量级细胞裸鼠皮下成瘤实验,检测结直肠癌CSC和SW480 的成瘤能力;并运用 Western blot及免疫荧光方法,检测CSC和SW480的免疫表型。结果临床结直肠癌标本原代培养的CSC,加入血清培养可使 CSC分化。软琼脂集落形成实验结果显示,原代培养的CSC克隆形成率为56.64%和54.45%,对照组人结直肠癌细胞株SW480 的克隆形成率为4.41%,CSC与SW480集落形成率的差异具有统计学意义（P<0.01）。裸鼠皮下成瘤实验中,原代培养的CSC 皮下注射500 个细胞可形成皮下瘤,而SW480 皮下注射500 个细胞不形成皮下瘤。CSC 表达CD133、CD44,不表达CK7; SW480细胞不表达CD133、CD44,表达CK7。结论原代培养的手术切除结直肠癌组织标本获得的肿瘤细胞,再行无血清培养 可形成CSC,鉴定具有CSC的自我更新及分化能力。     

CD133、TROP-2在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究初探

目的:探讨肿瘤干细胞标志物CD133?人滋养层细胞表面抗原-2(trophoblast cell-surface antigens 2,TROP-2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及意义?方法:用免疫组化?免疫荧光法检测CD133?TROP-2在NSCLC中的表达,激光共聚焦显微镜观察其定位和共定位?结果:①CD133?TROP-2在NSCLC组织中的阳性表达率分别为30.00% 和41.25%,均明显高于癌周正常肺组织及肺良性病变组织(P < 0.01);②细胞分化程度越低,CD133表达阳性率越高(P = 0.024);③CD133?TROP-2在有淋巴结转移组的阳性表达率高于无淋巴结转移组(P < 0.05),TROP-2的阳性表达率随着TNM分期的升高而升高(P < 0.05);④CD133?TROP-2在NSCLC中的表达具有密切相关性(P < 0.001),且两种蛋白有共定位现象?结论:CD133?TROP-2的阳性表达均与NSCLC的侵袭?转移密切相关,初步证实二者在NSCLC组织中存在共定位关系,CD133联合TROP-2或许能成为 NSCLC 的肿瘤干细胞筛选标记物?     

肿瘤干细胞标志物CD133在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨肿瘤干细胞标志物CD133在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测109例乳腺癌组织和60例乳腺良性肿瘤组织中CD133的表达,分析其与乳腺癌亚型及临床病理参数间的关系.结果 109例乳腺癌组织中,CD133表达的阳性率为46.8%(51/109),60例乳腺良性肿瘤的阳性率为0.33%(2/60),两者差异具有高度统计学意义(P<0.01);109例乳腺癌组织中,CD133蛋白的表达随病理级别的增加而升高(P<0.05),随临床分期升高及肿瘤直径增大呈下降趋势(P>0.05);乳腺癌4种亚群中,Basal-like亚群中CD133蛋白的阳性率最高,为69.2%,显著高于其他亚群,差异有统计学意义(P<0.05).结论 早期低分化或未分化癌更富于干细胞,可能与肿瘤细胞恶性演进有关;CD133蛋白的表达具有区分不同乳腺癌亚型作用以及在乳腺癌的预后预测具有重要作用.     

无血清培养CD133~+Colo205大肠癌细胞可高表达ALDH1

目的通过观察含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)培养的Colo205细胞,研究其对CD133与ALDH1表达的影响。方法用含生长因子的无血清培养基对Colo205细胞进行培养,以含血清培养基(serum-supplimented medium,SSM)组作为对照,流式细胞术检测两组细胞表面标志物CD133表达的阳性率;流式分选SFM组CD133+细胞和CD133-细胞,倒置显微镜观察CD133+细胞和CD133-细胞在无血清培养基中的生长特性;利用细胞免疫荧光检测CD133+细胞和CD133-细胞CD133和ALDH1的表达;分别将CD133+细胞和CD133-细胞在NOD/SCID小鼠皮下进行成瘤实验,采用免疫组织化学方法对肿瘤组织检测ALDH1表达。结果 SFM组CD133+细胞比例明显高于SSM组(P<0.05);CD133+细胞在SFM中可以形成肿瘤干细胞球,而CD133-则不能形成;CD133+细胞高表达CD133和ALDH1,且两者共表达,而CD133-细胞则是阴性表达;CD133+细胞和CD133-细胞成瘤后,CD133+细胞组肿瘤组织ALDH1阳性表达,而CD133-细胞组阴性表达。结论含生长因子的无血清培养基培养CD133+Colo205大肠癌细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达ALDH1,ALDH1可能是大肠癌干细胞候选的标志物之一。     

结直肠癌肿瘤干细胞研究进展

在我国结直肠癌发病率呈上升趋势,结直肠癌肿瘤干细胞(TSC)耐药性成为治疗的难题,有研究显示,CD133可作为结直肠癌肿瘤干细胞的标志之一,在分离和鉴定中有重大意义,并有望成为其未来治疗的新靶点;检测外周血CD133 mRNA水平可能成为结肠癌复发新的监测指标;大肠癌组织中ABCG2的高表达,可能预示肿瘤对目前临床常规化疗的耐药,需选择新的治疗方法.     

VEGFR2促进脑胶质瘤干细胞增殖和生长的机制研究

[目的]探讨VEGFR2促进脑胶质瘤干细胞增殖和生长的机制。[方法]通过19例新鲜分离的人脑胶质细胞瘤(Glioblastoma multiforme, GBM)标本进行组织分离、细胞培养,然后对培养的细胞进行慢病毒转染后进行BALB/c(nu/nu)小鼠成瘤实验,并获得神经胶质细胞瘤样本(T556, T1966, T4121, T3691)。分别对分离的人GBM细胞和异种移植神经胶质细胞瘤样本细胞进行流式细胞术CD133干细胞分选及VEGFR2、免疫组化、免疫荧光检测等分析、检测。[结果]CD133~+细胞表面VEGFR2的表达与CD133~-对照组相比富集(CD133~+阳性率19.6%而CD133~-对照的阳性率为4.7%;P<0.001 7);表面VEGFR2阳性的肿瘤细胞比例不同,从1.4%到25.9%(平均13.8±8.3%)不等。对石蜡包埋标本进行免疫组化分析发现GBM细胞表面及细胞浆均有分布VEGFR2,而胞浆VEGFR2则较为显著。对人GBM活检冰冻切片进行的免疫荧光染色证实VEGFR2细胞群聚集靠近血管结构;进一步对标本进行免疫荧光定位、免疫共沉淀和细胞表面蛋白生物素化实验发现VEGFE、VEGFR2和NRP1及磷酸化p-VEGFR2和增值标记蛋白Neuropilin-1在恶性脑胶质瘤病灶和周围正常组织及脑小血管周围的差异表达。[结论]VEGFR2优先表达于CD133人胶质瘤干细胞(GSC)的细胞表面及恶性脑胶质瘤病灶小血管周围,其增殖、生长能力和致瘤性,可能部分依赖于通过VEGFR2-Neuropilin-1 (NRP1)的信号传递,可能在GBM的增殖和生长过程中发挥一定作用。     

乳腺癌中Nestin与CD133的表达与上皮间质转化的关系

目的 探讨乳腺癌中巢蛋白(Nestin)与CD133的表达与上皮间质转化(EMT)的关系.方法 收集复旦大学附属中山医院青浦分院2010年1月至2013年6月67例乳腺癌病理标本,使用免疫组织化学染色,观察Nestin、CD133与E-cadherin在乳腺癌中的表达.结果 Nestin的总体阳性率为73.13%(49/67),CD133的总体阳性率为40.30%(27/67).Nestin在三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌中的阳性率分别为90.48%(19/21)和65.22%(30/46),差异无统计学意义(P>0.05),而CD133的分别为71.43%(15/21)和26.09%(12/46),差异有统计学意义(P<0.01).Nestin和CD133在E-cadherin阴性组中的阳性率为95.83%(23/24)和58.33%(14/24),高于在E-cadherin阳性组中的60.47%(26/43)和30.23%(13/43),差异均有显著统计学意义(P<0.01).结论 Nestin能够用以特异性检测乳腺癌干细胞的表达,CD133能够用以特异性检测三阴性乳腺癌中干细胞的表达,乳腺癌组织表达干细胞标记可能与肿瘤细胞发生EMT有关.     

无血清培养CD133+Colo205大肠癌细胞可高表达ALDH1

目的通过观察含生长因子的无血清培养基（serum-free medium, SFM）培养的Colo205细胞,研究其对CD133与ALDH1
表达的影响。方法用含生长因子的无血清培养基对Colo205 细胞进行培养,以含血清培养基（serum-supplimented medium,
SSM）组作为对照,流式细胞术检测两组细胞表面标志物CD133表达的阳性率;流式分选SFM组CD133+细胞和CD133-细胞,倒
置显微镜观察CD133+细胞和CD133-细胞在无血清培养基中的生长特性;利用细胞免疫荧光检测CD133+细胞和CD133-细胞
CD133和ALDH1的表达;分别将CD133+细胞和CD133-细胞在NOD/SCID小鼠皮下进行成瘤实验,采用免疫组织化学方法对
肿瘤组织检测ALDH1表达。结果SFM组CD133+细胞比例明显高于SSM组（P<0.05）;CD133+细胞在SFM中可以形成肿瘤干
细胞球,而CD133-则不能形成;CD133+细胞高表达CD133和ALDH1,且两者共表达,而CD133-细胞则是阴性表达;CD133+细胞
和CD133-细胞成瘤后,CD133+细胞组肿瘤组织ALDH1阳性表达,而CD133-细胞组阴性表达。结论含生长因子的无血清培养
基培养CD133+Colo205大肠癌细胞能够形成肿瘤干细胞球及高表达ALDH1,ALDH1可能是大肠癌干细胞候选的标志物之一。
     

胰腺炎相关蛋白与结直肠癌DNA倍体性的关系

为探讨结直肠癌组织中胰腺炎相关蛋白 (PAP)mRNA表达与肿瘤DNA倍体性的关系 ,收集结直肠癌外科手术标本 2 7例 (病理均证实为腺癌 ) ,同时取距肿瘤边缘 3cm和 8cm的黏膜组织作为对照。采用逆转录聚合酶链技术 ,测定样本中有无胰腺炎相关蛋白的表达 ,并用流式细胞仪对各样本行细胞DNA倍体性分析。发现 :PAPmRNA在结直肠癌中的表达阳性率为 2 9.6% ( 8/2 7)。在 8例PAPmRNA阳性表达的肿瘤组织样本中 ,S期细胞比率 (SPF)为 1 8.91± 8.43 ,并有 7例为非整倍体肿瘤 ;而另外 1 9例PAPmRNA阴性肿瘤组织的SPF为 1 2 .1 1± 7.0 2 ,有 4例为非整倍体肿瘤。在B、C 2个对照组的黏膜组织中未能检测出PAPmRNA阳性表达及非整倍体组织。经统计学处理PAPmRNA阳性样本的非整倍体例数和SPF ,与阴性样本相比差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;而肿瘤细胞的分化程度和扩散范围与PAPmRNA的阳性表达无明显相关。提示 :PAPmRNA阳性肿瘤样本有较高增生活性 ,PAPmRNA的表达与肿瘤分化、浸润深度及淋巴结转移情况无关。     

桑辛素对喉癌干细胞干性表型调控的作用研究

  目的  探索桑辛素对喉癌干细胞干性表型调控的影响。  方法  流式细胞仪分选并检测CD133+喉癌干细胞比例;肿瘤球形成实验检测CD133+喉癌干细胞的自我更新能力;Transwell实验检测CD133+喉癌干细胞的迁移能力;改良MTT实验检测化疗药物对CD133+喉癌干细胞的细胞毒性作用;免疫荧光染色、实时荧光定量PCR（RT-qPCR）及Western blot检测CD133+喉癌干细胞的干细胞标志物表达;在不同浓度的桑辛素处理CD133+喉癌干细胞后（以桑辛素0 μmol/L为对照）,通过肿瘤球形成实验、Transwell实验、改良MTT实验及Western blot,分别检测CD133+喉癌干细胞的自我更新能力、迁移能力、化疗药物的细胞毒性作用及干细胞标志物表达变化。  结果  流式细胞仪分选结果显示,CD133+喉癌干细胞占喉癌细胞的比例为（3.50±0.34）%;经过培养富集后,其比例可达（93.20±5.23）%。肿瘤球形成实验结果显示,与喉癌细胞相比,CD133+喉癌干细胞具有增强的自我更新能力 (P<0.001);Transwell实验显示,与喉癌细胞相比,CD133+喉癌干细胞的迁移能力增强（P<0.05）;改良MTT实验结果显示,与喉癌细胞相比,CD133+喉癌干细胞抵抗化疗药物（5-氟尿嘧啶及顺铂）的细胞毒性作用（P<0.05）;免疫荧光染色、RT-qPCR及Western blot结果显示,干细胞标志物（CD133、ALDH1、Sox2、ABCG2及N-cadherin）在CD133+喉癌干细胞中呈高表达水平。通过不同浓度的桑辛素处理CD133+喉癌干细胞,其自我更新能力降低（P<0.05）;迁移能力亦下降（P<0.05）;此外,桑辛素处理的CD133+喉癌干细胞对化疗药物的细胞毒性作用更加敏感（P<0.05）;Western blot结果显示,不同浓度的桑辛素处理的CD133+喉癌干细胞,其上述的干细胞标志物表达水平下调（P<0.05）。  结论  CD133+喉癌干细胞具有干性表型特征;桑辛素可减弱喉癌干细胞的干性表型,可能与下调其干细胞标志物表达相关。     

CD133在人NSCLC组织和细胞系中表达的初步研究

目的观察经典的肿瘤干细胞标记分子CD133在人NCSLC组织和肺癌细胞系中的表达情况。方法用CD133多抗经免疫组化染色观察12例不同类型NSCLC组织中CD133的表达,经免疫荧光染色观察CD133在H446、SPC-A1肺癌细胞中的表达。用AC133单抗经流式和激光共聚焦观察人NSCLC组织、肺癌细胞系中糖基化CD133抗原(AC133抗原)的免疫活性。结果CD133多抗染色发现CD133在NSCLC组织、正常肺组织、H446细胞和SPC-A1细胞中普遍表达。AC133单抗染色发现不同类型NSCLC组织均有少量AC133( )细胞,而在H446、SPC-A1肺癌细胞及正常肺组织中未检测到AC133( )细胞。结论不同类型NSCLC组织中有少量的AC133( )细胞,为深入研究肺癌发生、发展的分子机制提供了新的靶点。     

CD133多克隆抗体制备及肿瘤干细胞鉴定

目的 制备肿瘤干细胞标志性蛋白CD133的多克隆抗体,为进一步研究肿瘤组织中肿瘤干细胞的生物学特性以及筛选肿瘤干细胞、制备肿瘤干细胞的小鼠模型奠定基础.方法 以人CD133蛋白细胞外膜表面肽段为抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,进而用其对肿瘤组织进行Western blot以及免疫组化染色.结果 Western blot证实该抗体可以识别过表达的myc-CD133以及内源性CD133,进一步免疫组化结果显示该抗体可以识别恶性胶质瘤中的肿瘤干细胞.结论 成功制备高效、特异的CD133多克隆抗体,该抗体可以用于肿瘤组织的免疫染色及肿瘤干细胞的筛选.