红细胞免疫印迹法检测抗SSA抗体

本文以人红细胞（ＲＢＣ）胞浆提取物为ＳＳＡ抗原来源，探讨了免疫印迹法（ＩＢＴ）检测抗ＳＳＡ抗体的可能性及特点。结果显示，在ＲＢＣ－ＩＢＴ中有两条抗ＳＳＡ（干燥综合征抗原）抗体特异性酶染色带，分子量分别为５２ＫＤ和６０ＫＤ。非特异性染色带极少或无。也未见其它几种常见自身抗体（抗ＳＭ、ＲＮＰ、ＳＳＢ等）的显色带。这说明ＲＢＣ－ＩＢＴ对抗ＳＳＡ抗体的检测有高度的专一性和特异性，值得推荐。文中还就ＲＢＣ－     

红细胞免疫印迹法检测抗SSA抗体

本文以人红细胞（ＲＢＣ）胞浆提取物为ＳＳＡ抗原来源，探讨了免疫印迹法（ＩＢＴ）检测抗ＳＳＡ抗体的可能性及特点。结果显示，在ＲＢＣ－ＩＢＴ中有两条抗ＳＳＡ（干燥综合征抗原）抗体特异性酶染色带，分子量分别为５２ＫＤ和６０ＫＤ。非特异性染色带极少或无。也未见其它几种常一自身抗体（抗ＳＭ、ＲＮＰ、ＳＳＢ等）的显色带。这说明ＲＢＣ－ＩＢＴ对抗ＳＳＡ抗体的检测有高度的专一性和特异性，值得推荐。文中还就ＲＢＣ－ＩＢＴ法中主要的实验影响因素进行了探讨。     

共刺激分子CD28和B7在关节炎发病中的作用

目的：探讨Ｂ７;ＣＤ２８共刺激信号在关节炎发病机制中的作用。方法：经牛Ⅱ型的（ＢⅡＣ）诱导ＳＤ大鼠建立关节炎动物模型,分析抗Ｂ７－１和抗Ｂ７－２抗体对关节炎大鼠临床症状和特异性免疫反应的影响。结果：抗Ｂ７－１抗体可阻止ＳＤ大鼠发生胶原诱地性关节炎,降低大鼠对ＢⅡＣ的体液免疫反应。结论：Ｂ７;ＣＤ２８共刺激信号在诱发Ｔ细胞介导的自身免疫疾病中起作用,抗Ｂ７－１抗体具有潜在的治疗作用。     

雷公藤单体TZ93对人外周血单个核细胞表型的影响

研究雷公藤治疗系统性红斑狼疮的作用机制，以激活的正常外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）为细胞模型，应用 荧光激活细胞分类 仪（ＦＡＣＳ）分析以藤单体ＴＺ９３对ＰＢＭＣ细胞表型的影响。１０名正常女性的ＰＢＭＣ分成３组：Ｉ组ＰＢＭＣ，Ⅱ组ＰＢＭＣ＋ＰＨＡ，Ⅲ且ＰＢＭ＋ＰＨＡ＋ＴＺ９３，分别加入鼠抗入ＣＤ８、ＣＤ４、ＣＤ２５、ＮＫ抗体。结果：ＦＡＣＳ显示ＴＺ９３能显著抑制激活的ＰＢＭＣ中ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２     

两种方法检测抗Jo-1抗体、抗Sm抗体对肌炎、系统性红斑狼疮诊断价值的比较

比较免疫双扩散法 (Ｉｍｍｕｎｏｄｉｆｆｕｓｉｏｎ ,ＩＤ)和免疫印迹法(Ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇｔｅｓｔ,ＩＢＴ)检测抗Ｊｏ - 1抗体、抗Ｓｍ抗体 ,对多发性肌炎 /皮肌炎 (ＰＭ/ＤＭ )、系统性红斑狼疮 (ＳＬＥ)的诊断价值。1　方法将抗Ｊｏ - 1抗体阳性的 2 8份病例 ,抗Ｓｍ抗体阳性的2 2 8份病例分为三组 :ＩＤ法阳性组 ;ＩＢＴ法阳性组 ;两种方法均阳性组。分别比较它们与ＰＭ /ＤＭ、ＳＬＥ临床诊断的符合率。2　结果抗Ｊｏ - 1抗体组 :ＩＤ检测阳性 17例 ,15例 (88% )为ＰＭ /ＤＭ ,2例为其他结缔组织病 (ＣＴＤｓ) ;ＩＢＴ检…     

抗中性粒细胞胞浆抗体的临床检测

抗中性粒细胞胞浆抗体 (ＡＮＣＡ)是一种以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体。近 2 0年来 ,国内外对ＡＮＣＡ及其靶抗原的性质、疾病相关性和检测方法等方面进行了深入研究。目前ＡＮＣＡ检测技术已经成熟 ,国内很多医院已开展临床常规检测。现将ＡＮＣＡ临床意义、检测方法及其注意事项简述如下。1　ＡＮＣＡ自身抗体谱1 1　ＡＮＣＡ自身抗体谱　近 1 0余年随着对ＡＮＣＡ的深入研究 ,ＡＮＣＡ的特异性靶抗原逐一被发现并得到纯化。到目前为止 ,已有 1 0余种中性粒细胞胞浆成分被证实为ＡＮＣＡ的靶抗原 (见表 1 )。表 1　…     

抗中性粒细胞胞浆抗体及其与溃疡性结肠炎的关系

抗中性粒细胞胞浆体抗体（ａｎｔｉｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＡＮＣＡ），是指血清中一类直接作用于中性粒细胞胞浆成份的自身抗体。于１９８２年，Ｄａｖｉｓ等〔１〕首先在肾小球肾炎和系统性血管炎病人的血清中用间接免疫荧...     

自身免疫性内耳病患者血清Ig、C_3与抗内耳组织抗体的关系

为了对自身免疫性内耳病（ＡＩＥＤ）进行深入的研究，按照Ｍｃｃａｂｅ诊断标准筛选出ＡＩＥＤ患者３２例，男１２例，女２０例，其中Ｍｅｎｉｅｒｅ病５例，突聋１２例，神经性聋（ＳＮＨＬ）６例，耳鸣９例，进行血清免疫学检查，同时采用豚鼠内耳组织切片，用免疫细胞化学方法（ＡＢＣ法）检测患者血清抗内耳组织相关抗体。结果显示：４种内耳病的部分患者血清Ｉｇ、Ｃ３有不同程度的升高或降低，３２例ＡＩＥＤ患者血清抗内耳组织相关抗体经ＡＢＣ染色显示２１例有明显的阳性反应，阳性率达７０％。ＡＢＣ呈色反应在耳蜗分布部位不同，…     

急性脑梗塞患者脑脊液的高水平髓鞘素抗体分泌细胞

为确定急性脑梗塞是否在对髓鞘素碱性蛋白,髓鞘素结合糖蛋白和含脂质蛋白的Ｂ细胞免疫应答,采用酶联免疫斑点技术检测了发病后４周内的ＡＣＩ和其它神经疾病的对照组患者外周血和脑脊液的ＭＢＰ,ＭＡＧ和ＰＬＰ抗体分泌细胞,发现ＡＣＩ和ＯＮＤ外周血检出的ＩｇＧ,ＩｇＡ,ＩｇＭ三种表型ＭＢＰ,ＭＡＧ和ＰＬＰ抗体分泌细胞数无显著差异,但ＡＣＩ患者ＣＳＦ的ＩｇＦ型ＭＢＰ,ＭＡＧ和ＰＬＰ抗体分泌细胞数呈显著性增高。     

免疫印迹法检测SLE病人血清抗Sm抗体阳性判断及检出率探讨

抗史密斯抗体是ＳＬＥ的标记抗是性用于诊断ＳＬＥ。免疫印迹法（ＩＢＴ）抗Ｓｍ的抗体，根据ＮＣ膜上三个印迹区带（２９ＫＤ／Ｂ、２８．５ＫＤ／Ｂ、１３．５ＫＤ／Ｄ） 以与否判断抗Ｓｍ抗体最性或生。对１２３例临床仍ＳＬＥ病人表同时测定ＡＮＡ－ＩＦ、抗ＥＮＡ－ＩＢＴ（包括抗Ｓｍ），结果ＡＮＡ阳性率９５．１２％，抗Ｓｍ＝ＣＩＥ阳性率４２．３％，抗Ｓｍ－ＩＢＴ以三区带同时显色判断阳性率３５．７７％，以一区带任一     

结核性胸膜炎病人局部T淋巴细胞对B淋巴细胞产生抗PPD抗？…

目的：观察结核性胸膜炎病人胸水中Ｔ淋巴细胞及正常人血清中Ｔ淋巴细胞对Ｂ淋巴细胞抗ＰＰＤ抗体产生的影响。方法：应用体外细胞培养的方法，常规ＥＬＩＳＡ间接法检测Ｂ、Ｂ＋Ｐ、Ｂ＋Ｔ和Ｂ＋Ｐ＋Ｔ四组培养上清中抗ＰＰＤＩｇＧ水平。结果：健康人ＴＩ林巴细胞对Ｂ细胞及含ＰＰＤ的Ｂ细胞产生抗ＰＰＤ抗体无明显影响；而结核性胸膜炎病人病变局部Ｔ细胞在无ＰＰＤ存在的情况下对Ｂ细胞产生抗ＰＰＤ抗体无抑制作用，反而能辅助其     

抗乳腺癌单抗CDI 315B可变区基因的序列分析

目的：克隆抗乳腺癌ＣＤＩ３１５Ｂ单抗可变区基因,并对其进行序列分析。方法：利用前导肽序列设计引物,采用ＲＴ－ＰＣＲ技术从分泌抗人乳腺癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株ＣＤＩ３１５Ｂ分离克隆了抗体轻重链可变区基因,用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧末端终止法测定扩增的ＣＤＩ３１５Ｂ单抗的ＶＫ和ＶＨ基因的序列,对其进行序列分析。结果：和国际标准的小鼠Ｋａｂａｔ分类体系进行对比分析,ＣＤＩ３１５Ｂ单抗的ＶＫ属于第４或第５组的     

ENA多肽抗体谱的测定及临床应用

应用免疫印迹技术（ＩＢＴ），检测血清盐水可提了以抗原（ＥＮＡ）７种抗体。通过对１４例各种风湿病中自身抗体谱的检测，进一步证实了应用ＩＢＴｍ、Ｕ１ＲＮＰ、ＳＳＡＳＳＢ、ＳｅＬ－７０、抗Ｊ０－１和ＲＩｂ等７种抗体用于系统的红斑狼疮（ＳＬＥ）、混合性结缔组织病（ＭＣＴＤ）、硬皮病（ＰＳＳ）、干燥综合征（ＳＳ）和多发心肌／皮肌炎（ＭＰ／ＤＭ）等５种风湿性疾病的诊断和鉴别诊断。     

免疫金银染色法检测抗细胞浆抗体

抗细胞浆抗体为一类自身抗体，它针对中性粒细胞的细胞浆和其他单核细胞的细胞浆，抗细胞浆抗体原Wegener氏肉牙肿及血管炎的特有抗体，对以上两种疾病有诊断价值。近年来有报道认为，此抗体也存在于单纯性感染（尤以严重细菌感染（患者的循环之中，为此建立了免疫金银染色法检测细胞浆抗体，并与间接免疫荧光法进行了比较，现报告如下。     

IVIG抑制脐血细胞免疫球蛋白的机制

为阐明静脉免疫球蛋白（ＩＶＩＧ）抑制新生儿Ｂ细胞免疫球蛋白释放的机制，采用间接免疫荣光标记法及ＲＴ－ＰＣＲ法分别检测了ＩＶＩＧ（５０ｍｇ／ｍｌ）作用后的脐血淋巴细胞ＣＤ４０与ＣＤ４０配体表达及其分泌的ＩＬ－２．ＩＬ－４ｍＲＮＡ表达。结果：１．ＩＶＩＧ不改变脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）中ＣＤ４０＾＋染色阳性细胞的百分比：ＩＶＩＧ促进了ＣＢＭＣ的ＣＤ４０Ｌ表达２．ＩＶＩＧ抑制ＣＢＭＣ ＩＬ－２．ＩＬ－４     

异基因外周血干细胞的动员,检测及临床移植的应用研究

目的：探讨异基因外周血干细胞移植（ａｌｌｏ－ＰＢＳＣＴ）供者经Ｇ－ＣＳＦ或Ｇ－ＣＳＦ＋ＧＭ－ＣＳＦ动员后,采集的外周血干细胞（ＰＢＳＣ）移植物中的幼稚粒细胞与单个核细胞（ＭＮＣ）、ＣＤ３４＾＋细胞及ＣＦＵ－ＧＭ之间的相关性和移植的剂量标准及临床应用效果。方法：对１１例ａｌｌｏ－ＰＢＳＣＴ供者用Ｇ－ＣＳＦ（９例）或Ｇ－ＣＳＦ＋ＧＭ－ＣＳＦ（２例）进行动员,于动员前及动员后,分别对外周血及ＭＮＣ惧物中的幼稚粒细胞、ＣＤ３４＾＋细胞及ＣＦＵ－ＧＭ进行检测计数,预处理方法主要用大剂量环磷酰胺（ＣＴＸ）＋全身照射（ＴＢＩ）。结果：动员后外周血中的幼稚粒细胞与ＣＤ３４＾＋细胞及ＣＦＵ－ＧＭ同步增加,外周血ＭＮＣ中的幼稚粒细胞数与ＣＤ３４＾＋细胞数及ＣＦＵ－ＧＭ有较好的相关性。１１例患者全部植活和恢复造血功能,并为染色体核型     

原代小鼠骨骼肌细胞和C 2C 12细胞转人凝血因子IX基因后高效表达及分泌功能

目的：研究骨骼肌细胞作为基因治疗靶细胞,其合成、加工和分泌外源性蛋白质的功能。方法：应用骨骼肌细胞特异性和非特异性表达载体（ｐｄ Ｌ Ｍｅ４ｂ ＡｈⅨｍ 和 ＬⅨ Ｓ Ｎ）转染联合免疫缺陷（ Ｓ Ｃ Ｉ Ｄ）小鼠原代成肌细胞（ Ｓ Ｃ Ｉ Ｄ Ｍ Ｂ）和 Ｃ２ Ｃ１２ 成肌细胞系,观察这两种细胞在合成、加工和分泌人凝血因子Ⅸ（ ＦⅨ）蛋白质方面的异同。结果：在 Ｓ Ｃ Ｉ Ｄ Ｍ Ｂ中,ｐｄ Ｌ Ｍｅ４ｂ ＡｈⅨｍ可表达的 ＦⅨ 达２ ０００ ｎｇ·１０－ ６ ·（２４ ｈ）－ １ ,凝血活性达 ９５％ ～１０３％ 。比较细胞内和培养上清液中的 ＦⅨ蛋白及细胞内 ＦⅨｍ Ｒ Ｎ Ａ 丰度变化表明, Ｃ２ Ｃ１２ 细胞分泌 ＦⅨ的功能不如 Ｓ Ｃ Ｉ Ｄ Ｍ Ｂ,而合成、加工 ＦⅨ的能力与 Ｓ Ｃ Ｉ Ｄ Ｍ Ｂ相似。结论：原代小鼠骨骼肌细胞可高效表达、加工和分泌外源性基因产物;在以骨骼肌细胞作为靶细胞进行基因治疗研究时,应尽量应用原代细胞。本研究为临床应用骨骼肌细胞作为基因治疗靶细胞奠定了实验基础。     

炎症性肠病血清相关抗体检测的临床价值

[目的]研究核周型抗中性粒细胞胞浆抗体 (pANCA)、抗小肠杯状细胞抗体(GAB)、抗胰外分泌腺抗体(PAB)和抗酿酒酵母菌抗体(ASCA)在炎症性肠病(IBD)诊断与鉴别诊断中的临床价值. [方法] 采用间接免疫荧光薄片法检测54例溃疡性结肠炎组(UC)、17例克罗恩病组(CD)、26例肠道疾病对照组及5例正常对照组血清中4种抗体的表达. [结果] pANCA在UC组阳性率为44.4%,明显高于其他各组(P<0.01).GAB在UC组阳性率为35.2%,与疾病对照组及正常对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),在CD组阳性率为23.5%,与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05);两者的表达均与UC严重程度无关.ASCA在CD组阳性率为17.6%,略高于UC组(1.9%),但两组比较差异无显著性意义(P>0.05),与疾病对照组及正常对照组比较差异亦无显著性意义(P>0.05).PAB在实验中无一例阳性表达.联合检测4种抗体诊断IBD的敏感性、特异性和阳性阴性预测值分别为54.9%、90.3%、92.9%和46.7%.pANCA+/ASCA-诊断UC的敏感性和特异性为42.6%和94.1%,pANCA-/ASCA+诊断CD的敏感性和特异性为17.6%和100%.[结论] 炎症性肠病相关抗体检测的特异性较高,但敏感性低,联合检测能明显提高敏感性.pANCA和GAB对于诊断和鉴别诊断UC较有价值,而ASCA和PAB对于诊断IBD意义不大.pANCA联合ASCA、GAB检测,对于UC和CD的鉴别诊断有一定价值.     

免疫点印迹法检测抗人心肌线粒体抗体的临床研究

目的：为研究病毒性心肌炎（ＶＭＣ）和扩张性心肌病（ＤＣＭ）患者血清中是否存在抗人心肌线粒体抗体,以及对其简便有效的检测方法。方法：以人心肌线粒体作为抗原,应用免疫点印迹方法对２９例ＶＭＣ,２４例ＤＣＭ,３３例其它心脏病（ＯＣＤ）及２０例健康人（ＨＢＤ）进行抗人心肌线粒体抗体检测,用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法检测其抗原分子量。结果：ＶＭＣ和ＤＣＭ患者中该抗体的阳性率分别为４１．４％和４１．７％,明     

结核性胸膜炎病人局部T淋巴细胞对B淋巴细胞产生抗PPD抗体水平调节作用的观察

目的：观察结核性胸膜炎病人胸水中Ｔ淋巴细胞及正常人血清中Ｔ淋巴细胞对Ｂ淋巴细胞抗ＰＰＤ抗体产生的影响。方法：应用体外细胞培养的方法，常规ＥＬＩＳＡ间接法检测Ｂ、Ｂ＋Ｐ、Ｂ＋Ｔ和Ｂ＋Ｐ＋Ｔ四组培养上清中抗ＰＰＤＩｇＧ水平。结果：健康人Ｔ淋巴细胞对Ｂ细胞及含ＰＰＤ的Ｂ细胞产生抗ＰＰＤ抗体无明显影响；而结核性胸膜炎病人病变局部Ｔ细胞在无ＰＰＤ存在的情况下对Ｂ细胞产生抗ＰＰＤ抗体无抑制作用，反而能辅助其抗体的产生，而在ＰＰＤ存在的情况下，Ｔ细胞明显抑制Ｂ细胞产生抗ＰＰＤＩｇＧ。结论：结核性胸膜炎病人Ｔ淋巴细胞使Ｂ＋Ｐ组产生抗ＰＰＤＩｇＧ水平下降的原因不是Ｂ细胞本身分泌免疫球蛋白功能受损，而是功能上受抑制。抑制的因素不是来自于Ｔ淋巴细胞本身，而是ＰＰＤ抗原的间接作用