针刺对帕金森病模型大鼠黑质神经细胞凋亡的影响

目的 研究针刺对帕金森病(Parkinson‘s disease,PD)模型大鼠黑质神经细胞凋亡的影响。方法 采用末端标记法检测针刺治疗前后PD模型大鼠黑质神经细胞凋亡的情况。结果 针刺治疗能明显抑制PD模型大鼠黑质神经细胞凋亡，其作用和美多巴近似。结论 针刺治疗PD可能是通过抑制中脑黑质神经细胞凋亡起作用的。     

针灸对震颤麻痹大鼠行为学和细胞的凋亡的影响

目的研究电针配艾灸对帕金森病(PD)模型大鼠黑质神经细胞凋亡和行为学的影响。方法利用大鼠PD模型,观察行为学和采用末端标记法检测电针配艾灸治疗前后PD模型大鼠黑质细胞凋亡的情况。结果电针配艾灸治疗能明显抑制PD模型大鼠旋转次数和黑质神经细胞凋亡,其作用优于左旋多巴药物组,两组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论电针配艾灸治疗PD可通过抑制中脑黑质神经细胞凋亡而减少旋转次数。     

新生鼠下丘脑结节乳头核组胺能神经细胞的原代培养

目的 探讨新生鼠下丘脑结节乳头核(TM)组胺能神经细胞的体外培养方法。方法 从新生鼠(24h内)下丘脑后部分离出TM神经细胞，采用含有B27的Neurobasal Medium培养液进行体外原代培养。应用免疫细胞化学染色对培养的细胞进行鉴定。结果 从新生鼠下丘脑中分离的TM神经细胞，在本实验条件下生长良好。原代培养7～9d的神经细胞在形态上趋向成熟。免疫细胞化学染色结果表明培养的神经细胞呈组胺免疫反应阳性。为组胺能神经细胞。结论 新生鼠下丘脑TM神经细胞可进行体外原代培养，它可作为研究中枢组胺神经系统的体外细胞模型。     

大鼠黑质内注射谷氨酸钠的心血管效应

目的 确定中脑黑质内神经细胞兴奋的心血管效应。方法 给乌拉坦麻醉的大鼠黑质内微量注射Ｌ－谷氨酸钠，观察其动脉压和心率的变化。结果 注射后使动脉压升高和心率加速，结论 提示兴奋黑质内细胞可产生明显的心血管效应。     

大鼠胚胎脊髓神经细胞的原代培养及其神经营养素受体表达的初步研究

目的：建立哺乳动物胚胎脊髓神经细胞体外培养的细胞模型，提高培养用脊髓神经细胞的产率以及活性，使实验的细胞模型有良好的一致性和可比性。方法：18d的大鼠胚胎的脊髓经取材、分离、消化后作原代细胞培养，从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长与分化过程。应用免疫细胞化学技术，观察了神经营养素受体TrKA、TrKB、TrKC在脊髓神经细胞的表达。结果：大鼠胚胎的脊髓神经细胞在体外条件下，可良好存活并有正常的表型分化，TrKA、TrKB、TrKC在细胞膜上呈阳性反应。其细胞数量(集落数)与形态以及存活周期可满足体外实验的基本要求。结论：这种分离培养方法简便、成功率高、稳定性强、细胞产量高且质量好，有助于离体研究的开展。     

大脑中动脉闭塞后同侧黑质变化的研究

目的　研究大鼠大离中动脉闭塞 (MCAO)后同侧黑质的变化。方法　 35只SD大鼠 ,用Tamura法作脑缺血模型 ,分别对缺血后 2周、1个月、3个月、6个月的鼠脑切片用微管相关蛋白 - 2作免疫组化和甲紫醇染色。用计算机测定黑质长度与面积 ,用计数器计算神经细胞数。结果　用 10 0 %表示对侧黑质的长度。同侧黑质长度 ,MCAO 2周时为 84% ,1个月 81% ,3个月 77% ,6个月 6 4%。用 1表示对侧黑质的面积 ,MCAO侧黑质的面积 2周时为 0 .83,1个月 0 .6 6 ,3个月 0 .5 2 ,6个月 0 .48。MCAO侧黑质神经细胞与对侧黑质神经细胞数的比 ,MCAO2周时下降到 80 % ,1个月 6 8% ,3个月 5 3% ,6个月 46 %。结论　MCAO后黑质的长度缩短 (P <0 .0 1)、面积缩小(P <0 .0 0 1) ,同时神经细胞数也减少 (P <0 .0 0 1)。     

自发性高血压大鼠黑质内注射谷氨酸钠的心血管效应

目的：观察自发性高血压大鼠中脑黑质神经细胞体兴奋的心血管效应。方法：给乌拉坦麻醉的自发性高血压大鼠黑质内微量注射L－谷氨酸钠、观察尾核内多巴胺水平和动脉血压、心率的变化。结果：黑质内注射谷氨酸钠后，引起自发性高血压大鼠尾核内多巴胺水平升高，动脉血压升高，心率加速。结论：自发性高血压大鼠黑质内细胞兴奋可产生明显心血管效应。     

阿魏酸钠诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的初步研究

目的 探讨阿魏酸钠诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的可能作用。方法 分离培养大鼠骨髓间充质干细胞，采用阿魏酸钠对其进行诱导培养，倒置显微镜下观察诱导培养不同时间后细胞的形态变化，并应用免疫细胞化学方法鉴定诱导培养后细胞表面神经细胞特异性标志物神经丝蛋白(NF)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果 阿魏酸钠诱导培养6h后即可见细胞形态发生明显变化，24h后表现为典型的神经细胞样形态，NF和NSE神经细胞特异性标志物呈阳性表达。结论 初步证实阿魏酸钠具有诱导体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。     

大脑中动脉闭塞后同侧黑质变化的研究

目的 研究大鼠大脑中动脉闭塞（ＭＣＡＯ）后同侧黑质的变化。方法 ３５只ＳＤ大鼠，用Ｔａｍｕｒａ法作脑缺血模型，分别对缺血后２周、１个月、３个月、６个月的鼠脑切片用微管相关蛋白－２作免疫组化和甲紫醇染色。用计算机测定黑质长度与面积，用计数器计算神经细胞数。结果 用１００％表示对侧黑质的长度。同侧黑质长度，ＭＣＡＯ２周时为８４％，１个月８１％，３个月７７％，６个月６４％。用１表示对侧黑质的面积，ＭＣＡ     

钙结合蛋白-D28K对脑内多巴胺能神经细胞的保护作用

目的研究钙结合蛋白-D28K(CaBP)对脑内多巴胺(DA)能神经细胞的保护作用。方法测定CalbindinD-28k转基因小鼠黑质致密部、腹侧被盖区、海马的CaBP和黑质致密部CaBP阳性细胞数,注射1-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP),建立帕金森病(PD)模型,通过模型鼠游泳、悬挂、移动能力等行为学指标以及黑质致密部酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数来测定过表达CaBP抗MPTP对DA能神经细胞的损伤能力。结果转基因鼠黑质致密部、腹侧被盖区CaBP量显著高于正常鼠,海马、大脑皮层中CaBP量与正常组相比无明显差异。黑质致密部CaBP阳性细胞数显著高于正常小鼠[(140±9.89)个vs(101±7.82)个]。MPTP造模后,转基因鼠黑质致密部TH阳性细胞数和4项行为学变化差异不显著,而正常鼠造模后鼠黑质致密部TH阳性细胞数和4项行为学变化差异显著。结论过表达的CaBP对脑内DA神经细胞具有保护作用。     

3 种不同脑区定点注射 6-OHDA 单侧损伤大鼠帕金森病模型的比较研究

[摘要] 目 的 从 神 经 行 为 学、组 织 病 理 和 生 化 方 面 对 3 种 不 同 脑 区 单 侧 定 点 注 射 6- 羟 基 多 巴 胺 ( 6- hydroxydopamine , 6-OHDA )损伤大鼠帕金森病( Parkinsondisease , PD )模型进行比较研究。方法 健康雄性 SD 大 鼠随机分为 3 组( n =10 ):纹状体组、黑质组、黑质 + 中脑腹侧被盖区组。根据脑立体定位图谱,将微量 6-OHDA 单点定位注入大鼠中脑黑质区、纹状体区和双点定位注入黑质区与中脑腹侧被盖区。观察阿朴吗啡诱发大鼠旋转 行为,免疫组织化学检测大鼠黑质区酪氨酸( tyrosinehydroxy-lase , TH + )阳性神经元数目,电化学高效液相色谱法 检测纹状体中多巴胺( dopamine , DA )及其代谢产物 3 , 4- 二羟苯乙酸( dihydroxy-phenylaceticacid , DOPAC )和高香 草酸( homovanillicacid , HVA )含量。结果 纹状体组 3 周后模型稳定,黑质组与黑质 + 中脑腹侧被盖区组大鼠 2 周后稳定, 3 组 30min 内向健侧转圈数均呈升高趋势,黑质 + 中脑腹侧被盖区组高于纹状体组和黑质组,组间· 时点间交互作用差异有统计学意义( P <0.05 )。纹状体组和黑质 + 中脑腹侧被盖区组造模成功率高于黑质组 ( P <0.05 )。 3 组大鼠注射 6-OHDA 损伤侧纹状体中 DA 、 DOPAC 、 HVA 含量和 TH + 神经元数目均明显低于非 损伤侧( P <0.05 )。结论 纹状体单点注射 6-OHDA 损伤建立 PD 模型成功率高,可作为研究 PD 的一种稳定可靠 的动物模型。     

鱼油制剂中DHA对小鼠红核、黑质区NOS阳性细胞表达的影响

目的：富含DHA的鱼油制剂对小鼠中脑红核，黑质区NOS阳性神经元表达的影响，方法：实验小鼠分为两组，鱼油组和对照组，应用NADPH－d组化法显示小鼠红核及黑质NOS阳性神经元的数量，突起及透光率。结果：鱼油组NOS阳性神经元数量及透光率均大于对照组，鱼油组NOS阳性神经元胞体大而深染，透光率低，树突棘增多，对照组NOS阳性神经元胞体数量少，透光率高。结论：鱼油制剂中DHA对从胎鼠到幼鼠期神经系统的生长，发育有促进作用。     

Calbindin-D-28k对MPTP致小鼠黑质凋亡相关蛋白Bax表达的影响

目的探讨在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）致小鼠黑质多巴胺（DA）能细胞发生凋亡时,calb ind in-D-28k（CB）抗细胞凋亡的作用机制。方法MPTP连续5天腹腔注射构建中脑黑质DA能细胞损伤的小鼠模型,模型鼠脑黑质致密部立体定位注射携带CB基因的高滴度慢病毒颗粒（CB-H IV-Ⅰ）,W estern b lotting方法检测CB的在体过表达以及鼠脑黑质部位凋亡相关蛋白Bax的表达变化。结果与空白对照组（control）和黑质定位注射空病毒颗粒组（H IV-Ⅰ）相比,注射CB-H IV-Ⅰ的实验组的黑质中CB的表达量显著升高（P〈0.05）,而Bax的表达量明显降低（P〈0.05）。结论病毒颗粒CB-H IV-Ⅰ携带的CB基因在黑质细胞中获得了高效的表达;凋亡相关蛋白Bax可能参与了CB对黑质DA能神经细胞的保护作用。     

雌激素对帕金森病大鼠中脑黑质多巴胺能神经元保护作用的研究

目的:观察雌激素对去卵巢大鼠中脑黑质多巴胺能神经元的作用,探讨雌激素对帕金森病防治的可能性.方法:对成年雌性大鼠行卵巢切除术,应用立体定向技术注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)于大鼠中脑黑质,采用免疫组织化学的方法对黑质TH(酷氨羟化酶)阳性神经元进行标记、记数;同时,对大鼠的行为学进行观测.结果:在没有给予雌激素的卵巢大鼠组,阿朴吗啡(APO) 诱导的旋转次数与其他对照组相比有显著性差异(P＜0.05),大鼠中脑黑质TH阳性神经元的数目与其他对照组比较也有显著性差异(P＜0.05).结论:雌激素对雌性大鼠中脑黑质多巴胺能神经元具有保护作用,除了经过雌激素受体途径以外,还有其他的作用机制.     

表没食儿茶素没食子酸酯对帕金森病大鼠的神经保护作用及其机制探讨

目的观察表没食儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate,EGCG）对鱼藤酮致帕金森（Parkinson disease,PD）大鼠模型黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法健康成年雄性Wistar大鼠60只,随机分为对照组、实验组和药物干预组（每组20只）。实验组和药物干预组背部皮下注射鱼藤酮制备PD大鼠模型,药物干预组同时给予大鼠腹腔注射EGCG。采用分光光度法检测大鼠脑内丙二醛（malondialdehyde,MDA）和还原型谷胱甘肽（dutathione,GSH）,免疫组织化学和Western blot检测大鼠中脑黑质及纹状体中酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）的表达变化。结果实验组大鼠纹状体中MDA明显增高（P〈0．05）,GSH含量明显降低（P〈0．05）,中脑TH免疫反应阳性神经元数明显少于对照组（P〈0．05）,TH蛋自在黑质和纹状体与对照组比较明显降低（P〈0．05）;EGCG干预后与实验组相比MDA明显降低及GSH明显增高（P〈0．05）,TH免疫反应阳性神经元数明显增加（P〈0．05）,TH蛋白明显增加（P〈0．05）。结论化应激在PD发病中起着非常重要的作用,抗氧化治疗能有效减轻大鼠脑内多巴胺能神经元损伤情况,同时改善PD样症状,为PD的治疗提供了新的靶点。     

大鼠黑质多巴胺能神经元的形态学发育

目的探讨大鼠黑质多巴胺(DA)能神经元的形态学发育和分布特征。方法行大鼠出生前后不同时期的脑黑质区段连续冠状石蜡切片，以酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色方法显示DA能神经元，焦油紫染色确定黑质区域，进行光镜观察以及细胞形态学指标的测量。结果胚胎(embryonicclay，E)第13天龄(E13)时，开始于中脑腹侧出现TH阳性(TH^ )细胞。至E16时，中脑腹侧这些细胞的数量和密度达到最大值，此后又逐渐下降，且于出生后早期这些TH^ 细胞的减少最为显著。至生后第14天龄(P14)时，中脑腹侧黑质区域TH^ 细胞的分布和密度不再明显改变，与成年期状态接近。胚胎期，TH^ 细胞多为圆形或椭圆形，随着胚胎发育，其突起逐渐伸长，分支也逐渐增多。出生后，TH^ 细胞逐渐表现为成熟神经元的形态特征。结论大鼠脑黑质DA能神经元的发育发生在个体出生前后，呈现先大量形成后又逐渐减少的过程，与此同时，其形态趋向成熟。至P14时，DA能神经元的分布和形态学发育基本成熟。     

Experimental study of serum substantia nigra neuron autoantibody and its effect in Parkinson disease patients

Parkinson disease(PD) is a neurodegenerativedisorder characterized by the loss of melanin-containing neurons in the substantia nigra parscompacta (SNpc ) and a reduction in striataldopamine.The cause of PD remains unknown,but itis related to genetic,environmentalfactors,etc.Someevidence[1] indicated that multiple mechanisms wereinvolved in the pathogenic procedure of PD,such asoxidative stress,susceptibility to neurotoxin,excitingamine acid toxicity,immune factorand apoptosis,etc.In immune …     

蛋白酶体抑制剂对中脑脑片的毒性作用及其机制研究

目的:观察蛋白酶体抑制剂对体外培养的大鼠中脑脑片黑质多巴胺(DA)能神经元的早期毒性作用,利用这种新型的组织模型探讨蛋白酶体功能异常在帕金森(PD)发病中的作用。方法:制备Wistar大鼠体外中脑黑质脑片的长期培养体系,加入蛋白酶体抑制剂lactacystin(0.1,0.5,1.0,5.0μmol/L)作用24 h后,测定培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活力水平观察脑片活力。TH免疫组化观察黑质细胞变性缺失,α-synuclein免疫组化观察α-synuclein的表达,TUNEL法检测多巴胺能神经元凋亡。结果:经0.1,0.5,1.0和5.0μmol/L浓度的lactacystin作用24 h后,脑片黑质部位TH阳性神经元数量减少,α-synu-clein表达率增加,凋亡检测显示,5.0μmol/L的lactacystin组部分黑质细胞出现TUNEL染色阳性。结论:蛋白酶体抑制剂lactacystin对脑片中DA能神经元具有毒性作用,能诱导黑质细胞凋亡,其作用具有浓度依赖性。蛋白酶体功能缺陷在帕金森病发病机制中可能发挥重要作用。     

COX-2对帕金森病小鼠黑质内多巴胺能神经元的毒性作用

目的:观察环氧合酶-2(COX-2)对帕金森病(PD)模型小鼠黑质内多巴胺(DA)能神经元的损害作用.方法:采用Lau法制作PD小鼠模型,通过行为学观察,免疫组织化学和免疫蛋白印记法,观察PD小鼠模型的行为学表现,黑质致密部COX-2免疫反应阳性细胞,DA能神经元数量和腹侧中脑(包括VTA和SN)COX-2,酪氨酸羟化酶(TH)表达水平的变化,并观察给予COX-2抑制剂后对上述变化的影响.结果:与对照组小鼠相比,PD组小鼠出现PD典型的行为学表现,黑质致密部DA能神经元和腹侧中脑TH含量分别下降约63%和77%.同时,黑质致密部COX-2阳性细胞和腹侧中脑COX-2含量有大幅升高.经COX-2抑制剂处理的PD小鼠行为表现较轻,黑质致密部DA能神经元和腹侧中脑TH含量仅下降约37%和41%.与单纯PD小鼠比较,黑质致密部COX-2阳性细胞和腹侧中脑COX-2含量明显下降.结论:COX-2对PD模型小鼠黑质内DA能神经元有毒性作用.     

大鼠黑质内一氧化氮合酶阳性神经元向杏仁中央核的投射

目的　观察大鼠黑质内一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元向杏仁中央核 (CeA)的投射 ,为进一步阐明一氧化氮 (NO)在黑质与CeA的纤维联系中的作用提供有价值的形态学依据。方法　用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH d)法结合辣根过氧化物酶 (HRP)逆行追踪技术 ,观察大鼠黑质内NOS阳性神经元向CeA的投射。结果　同侧黑质内有NOS/HRP双标记阳性神经元 ,主要分布在黑质致密部。结论　黑质内有NOS阳性神经元向CeA投射