HPLC同时测定双丹胶囊中7种主要成分

目的:建立同时测定双丹胶囊中丹参素、原儿茶醛、芍药苷、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹皮酚7种有效成分的高效液相色谱分析方法。方法:采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,检测波长235 nm,流速1.0 m L·min~(-1),柱温30℃。结果:7种成分的线性范围分别为54.43~544.3,0.96~9.6,2.68~26.8,0.92~9.2,2.16~21.6,9.36~93.6,9.16~91.6 mg·L~(-1),r分别为0.999 7,0.999 6,0.999 5,0.999 3,0.999 2,0.999 7,0.9995。平均加样回收率分别为98.6%(RSD 1.8%),100.2%(RSD 1.9%),100.4%(RSD 2.0%),99.1%(RSD 2.5%),98.8%(RSD 2.3%),100.6%(RSD 1.9%),99.1%(RSD 1.8%)。结论:该分析方法准确可靠,重复性好,能更好地控制双丹胶囊的质量提供科学依据。     

外源性5-氨基乙酰丙酸对盐胁迫下决明子萌发及幼苗生理特性的影响

目的 通过对决明子萌发及幼苗生理特性的研究,寻找提高决明子及幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径。方法 测定盐胁迫下决明子在经过不同质量浓度的外源性5-氨基乙酰丙酸（ALA）处理后,种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,并对决明幼苗叶片叶绿素量、叶绿素荧光参数、原生质膜透性、叶片丙二醛（MDA）量、可溶性糖量、可溶性蛋白量及脯氨酸量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性进行测定。结果 100 mmol/L盐胁迫下的决明子萌发受到显著抑制,但是经过不同质量浓度的ALA处理后,萌发指标均有升高。结果表明,外源性ALA处理显著提高了决明子发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,提高了叶片叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素量,显著提高了最大光化学效率（Fv/Fm）,PSII有效光化学效率（Fv′/Fm′）,PSII实际光化学效率（ΦPSII）,光化学淬灭系数（qP）,降低了原生质膜透性、叶片的MDA量及非光化学淬灭系数（NPQ）,提高了盐胁迫下幼苗叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸量,显著提高了叶片SOD、POD、CAT活性。结论 外源性ALA通过提高决明子的萌发指数,提高幼苗光合效率、渗透调节物质量及抗氧化酶活性,有效地减缓盐胁迫对决明子及幼苗产生的伤害,提高种子及幼苗的抗盐能力。     

银杏内酯A对缺血/再灌注损伤的大鼠心功能的影响

目的探讨银杏内酯A(Ginkgolide A,GA)对离体大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的心功能的影响。方法 Langendorff灌注离体大鼠心脏,用停灌复灌的方式制备心肌缺血/再灌注损伤模型,记录左心室收缩峰压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、收缩压和舒张压最大变化速率(±LVdp/dtmax)和心率(HR)的变化,并测定复灌后冠状动脉流出液中LDH和SOD的含量及心肌梗死面积。分离单个细胞进行GA预处理,模拟缺血/再灌注培养后检测心肌细胞存活率和单个心肌细胞的收缩幅度。结果 GA预处理以后,LVSP、-dp/dtmax和HR在复灌10 min时较缺血/再灌注组具有明显的改善(P<0.05),并增加心率,减少LDH的生成,增加SOD的活性,降低心肌梗死面积。经GA预处理的心肌细胞存活率明显提高,10μmol.L-1GA能够明显提高缺血后单个心肌细胞的收缩幅度。结论 GA对缺血/再灌注损伤的心肌具有一定的改善作用。     

药用峨眉野连种子形态及萌发条件的研究

目的 通过对峨眉野连种子形态和萌发生理的研究,找到打破种子休眠、提高种子萌发率的最佳条件。 方法 观察种子外观形态,对峨眉野连种子长宽、千粒质量、含水量、吸水率、生活力和萌发等多项生理指标进行测定,考察不同温度、不同激素质量浓度对种子萌发率的影响。 结果 TTC(四氮唑)染色法测得的种子的生活力低,仅为56%。空粒和无生活力的种子占44%,表明峨眉野连发育完全的种子较少。种子的吸水实验表明种皮透水性较好,完全吸水时间仅为6 h,从而可以判断,种皮不可能是萌发率过低的制约因素。萌发实验显示,4 ℃是种子较为适宜的萌发温度,发芽率可达到54.43%。50 mg/L的GA-3(赤霉素)处理后的萌发率提高最为显著,可达73.48%,但是过高质量浓度(7.5 mg/L)的GA-3则对种子萌发有一定的抑制效应。 结论 种子生活力较低,且种子休眠,这可能是导致其萌发率低的重要原因。峨眉野连种子在不同温度和不同质量浓度的激素处理下存在着很大的差异,为其人工栽培生产提供了理论依据。     

外源5-氨基乙酰丙酸对干旱胁迫下草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响

目的探讨干旱胁迫对草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响,找到延缓干旱胁迫的方法,为抗旱栽培提供理论依据。方法考察15%PEG-6000模拟干旱胁迫条件下,经过不同浓度5-氨基乙酰丙酸(ALA)和不同时间处理后草珊瑚植株光合色素量、叶绿素荧光参数及能量参数等生理指标的变化。结果外源ALA显著提高了叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素的量,提高了最大荧光(Fm)、最大光化学效率(Fv/Fm)、光系统PSII潜在活性(Fv/Fo)、PSII有效光化学效率(Fv′/Fm′)、PSII实际光化学效率(ΦPSII)、光化学淬灭系数(qP)、电子传递率(ETR)和光化学速率(PCR)的水平,有效地降低了初始荧光(Fo),非光化学淬灭系数(NPQ)和热耗散速率(HDR),经过ALA处理后的光化学反应能量(P)所占比例显著升高,天线色素热耗散能量(D)和非光化学耗散能量(E)则表现出相反的趋势,并且P成为能量利用的主要途径,ALA促进了能量合理的再分配。结论 100 mg/L的外源ALA能够通过减少过剩激发能的耗散,提高光合电子传递效率,有效地缓解干旱胁迫对草珊瑚叶片PSII的伤害,提高植株的抗旱能力。     

外源CO供体高铁血红蛋白对盐胁迫下决明种子萌发及幼苗生理特性的影响

目的:通过对决明种子萌发及幼苗生理特性的研究,寻找提高决明种子及幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径。方法:测定在外源CO供体高铁血红蛋白(hematin)处理后,NaCl胁迫下决明种子的发芽势(Gv)、发芽率(Gr)、发芽指数(Gi)和活力指数(Vi),并对决明幼苗叶片相对含水量、叶绿素含量、叶绿素荧光参数、可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸及丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性进行测定。结果:120 mmol.L-1的NaCl胁迫下的决明种子萌发受到显著抑制,但是经过不同浓度的hematin处理后,萌发指标均有升高。试验结果表明,外源hematin处理显著提高了决明种子发芽势、发芽率、萌发指数和活力指数,提高了叶片叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的含量,显著提高了最大光化学效率(Fv/Fm),PSⅡ有效光化学效率(Fv’/Fm’),PSⅡ实际光化学效率(ΦPSⅡ),光化学淬灭系数(qP),降低了非光化学淬灭系数(NPQ)及叶片丙二醛(MDA)含量,提高了盐胁迫下决明幼苗叶片相对含水量、可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量,不同程度的提高了叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性,而CO清除剂血红蛋白(Hb)则逆转了CO供体对盐胁迫下决明幼苗氧化损伤的缓解效应。结论:外源CO供体高铁血红蛋白(hematin)通过提高决明种子的萌发指数,提高幼苗光合效率、渗透调节物质含量及抗氧化酶活性,有效地减缓NaCl胁迫对决明种子及幼苗产生的伤害,提高种子及幼苗的抗盐能力。     

妊娠糖尿病患者脂联素、炎性因子水平与胰岛素抵抗的关系

目的探讨妊娠糖尿病(GDM)患者脂联素、炎性因子水平与胰岛素抵抗的关系。方法选取53例GDM患者和50例健康孕妇,抽取空腹静脉血,检测脂联素、瘦素、FBG、FINS、IL-6、TNF-α水平,计算HOMA-IR和ISI,并分析脂联素、炎性因子水平与胰岛素抵抗的相关性。结果 GDM组脂联素水平低于NGT组(P<0.05),瘦素、FBG、IL-6、TNF-α水平高于NGT组(均P<0.05),两组FINS水平差异无统计学意义(P>0.05);GDM组HOMA-IR高于NGT组,ISI指数低于NGT组,差异有统计学意义(均P<0.05);HOMA-IR指数与瘦素、IL-6、TNF-α水平呈正相关,与脂联素水平呈负相关(均P<0.05)。ISI指数与脂联素水平呈正相关,与瘦素、IL-6、TNF-α水平呈负相关(均P<0.05)。结论脂联素、瘦素、IL-6和TNF-α水平与胰岛素抵抗间存在密切联系,临床可通过检测上述指标评价GDM患者胰岛素抵抗程度。     

脑缺血再灌注中nNOS介导的ASK1巯基亚硝基化促进其激活

目的本文主要研究在脑缺血再灌注早期,神经性一氧化氮合酶（nNOS）来源的NO是否能够引起凋亡信号调节激酶蛋白1（ASK1）巯基亚硝基化,以及ASK1的巯基亚硝基化与其激活的关系。方法 SD大鼠分为正常对照组,缺血复灌6 h组,7NI给药组,AMT给药组,生理盐水对照组。采用四动脉结扎去结扎法构建大鼠全脑缺血再灌注模型。运用SDS-PAGE、免疫印迹、免疫沉淀和免疫组织化学方法对蛋白质的磷酸化以及蛋白质之间的相互作用进行研究;蛋白质的S-亚硝基化的检测主要是通过＂生物素转化法＂（Biotin-Swich method）。结果 nNOS的抑制剂7NI能够降低ASK1的亚硝基化水平,进而降低了ASK1的磷酸化水平（P〈0.05）即ASK1的活性。结论 7NI通过降低nNOS介导的ASK1巯基亚硝基化,对SD大鼠海马区脑缺血再灌注损伤的神经元起到保护作用。     

冬眠合剂对小鼠缺氧耐受力的影响

目的探索不同剂量的冬眠合剂对小鼠缺氧耐受力的影响。方法将小鼠分为先用药和后用药两批,又分别分为生理盐水对照组,肾上腺素组和冬眠合剂低、中、高剂量组5个组,先给药的和后给药的分别是给药5分钟后进行缺氧和缺氧5分钟后再给药,分别测定小鼠常压缺氧存活时间和亚硝酸盐中毒缺氧存活时间。结果与生理盐水对照组相比较,中剂量的冬眠合剂能够有效地延长常压缺氧和亚硝酸钠中毒后的存活时间,并能够延长已缺氧后继续缺氧的存活时间（P〈0.05）。与中剂量组相比较,而高剂量的冬眠合剂却缩短了小鼠缺氧的存活时间。结论中剂量的冬眠合剂对小鼠具有提高缺氧耐受力的功效。     

外源5-氨基乙酰丙酸对干旱胁迫下草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响

目的 探讨干旱胁迫对草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响,找到延缓干旱胁迫的方法,为抗旱栽培提供理论依据。方法 考察15% PEG-6000模拟干旱胁迫条件下,经过不同浓度5-氨基乙酰丙酸（ALA）和不同时间处理后草珊瑚植株光合色素量、叶绿素荧光参数及能量参数等生理指标的变化。结果 外源ALA显著提高了叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素的量,提高了最大荧光（Fm）、最大光化学效率（Fv/Fm）、光系统PSII潜在活性（Fv/Fo）、PSII有效光化学效率（Fv′/Fm′）、PSII实际光化学效率（ΦPSII）、光化学淬灭系数（qP）、电子传递率（ETR）和光化学速率（PCR）的水平,有效地降低了初始荧光（Fo）,非光化学淬灭系数（NPQ）和热耗散速率（HDR）,经过ALA处理后的光化学反应能量（P）所占比例显著升高,天线色素热耗散能量（D）和非光化学耗散能量（E）则表现出相反的趋势,并且P成为能量利用的主要途径,ALA促进了能量合理的再分配。结论 100 mg/L的外源ALA能够通过减少过剩激发能的耗散,提高光合电子传递效率,有效地缓解干旱胁迫对草珊瑚叶片PSII的伤害,提高植株的抗旱能力。