人精液中一氧化氮和γ-谷氨酰基移换酶活性的关系

目的 :探讨人精液中一氧化氮 (NO)与γ 谷氨酰基移换酶 (γ glutamyltransferase,GGT)活性的关系 .方法 :参照WHO标准 ,进行精液常规分析 ,按精子密度 (× 1 0 9/L)、活动率 (% )不同分为 (正常 ,<2 0 ,<2 0～ 4 0 ,>4 0 ) 4个组 .采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐 (NO-3 ) .用以Glucana为底物动力学方法测定精液GGT活性 .结果 :89例不育者NO含量为 (78.5± 1 .5 ) μmol/L ,与精子密度 (33.3±1 4 .3)× 1 0 9/L ,活动率 (33.3± 1 4 .3) %及GGT活性 (2 0 3.1 9±35 .89)× 1 0 3 nkat/L呈显著的负相关 (r分别为 - 0 .5 6 ,- 0 .6 3,- 0 .71 ,P <0 .0 1 ) .结论 :精液GGT活性测定是评价附睾头部功能的重要指标 ,提示NO对精液GGT活性有抑制 ,从而灭活影响精子的成熟和运动能力     

少弱精子症患者睾丸组织中NOSTRIN的表达及其与eNOS的相关性研究

目的 通过测定少弱精子症患者睾丸组织中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial nitric oxide syn-thase traffic inducer,NOSTRIN)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的表达,探讨其与少弱精子症发病的相关性.方法 采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测11例严重少弱精子症患者(病例组)和7例正常男性(正常组)睾丸组织中NOSTRIN mRNA的表达;分光光度法测定睾丸组织中eNOS的活性;应用硝酸还原酶法测定睾丸组织上清液中NO代谢产物NO2-/NO3-水平.结果 病例组患者睾丸组织中NOSTRIN mRNA呈弱表达(0.312±0.076),明显低于正常组(0.793±0.082,P<0.01);病例组患者睾丸组织eNOS活性[(33.73±3.58)U/mg]与正常组[(17.69±3.84)U/mg]比较显著增强(P<0.01);病例组患者睾丸中NO2-/NO3-水平为(48.56±8.49)μmol/L,较正常组(25.37±9.61)μmol/L显著升高(P<0.01)f病例组睾丸组织中NOSTRIN表达水平与eNOS活性呈负相关(r=-0.57,P<0.01),与NO代谢产物NO2-/NO3-同样呈负相关(r=-0.61,P<0.01).结论 少弱精子症患者睾丸组织中NOSTRIN表达水平降低,eNOS活性增强,NO2-/NO3-水平升高,可能与少弱精子症的发生有着相关性.     

人精子顶体内透明质酸酶与男性不育关系的研究

目的:研究人精子顶体内透明酸酶(HYD)对男性生育力的影响。方法:收集不育男性精液44例,根据精液常规检查结果分为不育A、B、C、D四组;正常生育男性精液26例为正常生育组。采用改良透明质酸钠-明胶(NaHY-Gelatin)底物膜法检测精子顶体内HYD活性强度、阳性率及反应时间,研究精子形态与HYD活性强弱的关系。同时采用固定明胶底膜法检测精子顶体内蛋白酶(Acrosin),并对两种酶检测结果作直线相关分析,精液分析仪进行精液质量分析。结果:正常生育组HYD反应平均阳性率为(70.84±19.20)%,HYD活性亮区平均直径为(38.17±16.41)μm;不育组总体HYD分别为(37.01±35.13)%、(23.05±17.32)μm;不育A组分别为(60.02±29.10)%、(26.92±17.21)μm;不育B组分别为(16.11±4.64)%、(6.90±2.00)μm;不育C组分别为(29.11±11.85)%、(8.22±3.37)μm;不育D组分别为(53.04±28.60)%、(31.40±18.60)μm。正常生育组HYD反应阳性率和HYD活性强度与不育B、C组比较差异均有统计学意义(P0.01);与A、D组比较差异均无统计学意义(P0.05)。Acrosin活性检测的相应数据证明人精子HYD活性与Acrosin活性呈显著正相关(r=0.810)。结论:精子内HYD活性低下是导致男性不育的重要原因之一;检测精子顶体内HYD可作为临床评价精子功能的有效指标。     

外源性一氧化氮对精子运动能力的影响

目的 :探讨一氧化氮 (NO)对精子运动能力影响的机制 .方法 :采用NO供体硝普钠 (sodiumnitroprusside,SNP)与上游法获得优质精子共同体外孵育 ,在超高倍显微镜下观察不同时间和不同浓度对精子运动能力的影响 .用MTT法测定NO对精子细胞呼吸链的作用 .结果 :NO在低浓度下(SNP 5 0～ 1 0 0nmol·L -1 )明显促进精子运动 ,在中浓度下(SNP 1 5 0～ 2 0 0nmol·L -1 )对精子运动能力影响极微 ,高浓度下 (SNP >2 0 0nmol·L -1 )则对精子运动有显著的抑制作用 ,随孵育时间的延长 ,精子活率呈进行性下降趋势 .随SNP浓度的升高 ,精子细胞呼吸链活性进行性下降 .结论 :NO对精子运动能力的影响具有双重性和浓度依赖效应 ,对避孕及男性不育症的治疗有重要的参考价值     

内源性高甘油三酯血症患者凝血及纤溶活性的改变及其与血脂、载脂蛋白的相关分析

目的　研究内源性高甘油三酯血症患者凝血及纤溶活性的改变及其与血脂及载脂蛋白的相关性。方法　测定内源性高甘油三酯血症 ( HTG)患者及正常对照者凝血酶原时间 ( PT)、活化部分凝血酶原时间 ( APTT)、组织型纤溶酶原活化物活性 ( t- PA)以及纤溶酶原活化物抑制物 - 1活性 ( PAI- 1)、血浆纤维蛋白原 ( Fg)含量和血清脂质及载脂蛋白含量。结果　 HTG患者 PT和 APTT较对照组显著缩短 ( P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,Fg含量及 PAI-1活性显著增强 ( P<0 .0 1) ,t- PA活性无明显差异。 PT与 HDL - C水平呈显著正相关 ( r=0 .44 5 ,P<0 .0 1) ,与TG、apo C 、BG含量及 BMI呈负相关 ( r=- 0 .2 94,- 0 .3 2 0 ,- 0 .2 82 ,- 0 .2 72 ,P<0 .0 5 ) ,APTT与 TG及apo C 含量呈负相关 ( r=- 0 .3 45 ,- 0 .3 2 0 ,P<0 .0 5 )。 t- PA活性与 BG浓度呈显著负相关 ( r=- 0 .3 3 6,P<0 .0 1)。 PAI- 1活性及 Fg含量与 TG、apo C 、C 及 E含量呈正相关 ( r=0 .40 0 ,0 .40 8,0 .497,0 .45 4,P<0 .0 1及 r=0 .64 2 ,0 .5 81,0 .673 ,0 .3 0 4,P<0 .0 1) ,与 HDL - C水平呈负相关 ( r=- 0 .3 66,- 0 .5 2 4,P<0 .0 1)。结论　内源性高甘油三酯血症患者血浆凝血活性增加及纤溶活性降低与血脂异常有关     

精子顶体酶活性与精液常规参数的相关性

目的 :测定人精子顶体酶活性并了解该酶与精液常规分析有关参数之间的关系 ,寻求一种可靠的衡量精子生育力的参数。方法 :分光光度比色法测定精子顶体酶活性。结果 :顶体酶活性与精子密度、a及 b级活动力精子百分率、精子活动率之间存在明显正相关 ( P<0 .0 0 1 ) ,而与畸形精子率呈显著负相关 ( P<0 .0 0 5 )。以精液常规分析各主要参数正常与否分成的两组间其顶体酶活性差异也均有显著性 ( P<0 .0 0 1 )。结论 :精子顶体酶可作为了解精子生育力的一项可靠指标     

肺心病患者血液NO和ET-1的改变及其意义

目的 :研究肺心病患者血液中一氧化氮 (nitricoxide ,NO)、内皮素 1(endothelin 1,ET 1)演变 ,进一步阐明肺心病发病机制 ,为临床观察病情、评估预后及探讨新治疗手段提供依据。方法 :采用分光光度测定法、放射免疫法测定肺心病急性加重期患者 4 5例、缓解期 2 0例、正常对照者 18例血液中NO和ET 1。结果 :①肺心病急性加重期ET 1/NO较缓解期及正常对照组均显著增高 (P <0 .0 5 ) ,肺心病缓解期ET 1/NO较正常对照组高 ,差异显著(P <0 .0 5 ) ;②肺心病急性加重期及缓解期血浆NO与PO2 呈正相关 (r =0 .85 ,r =0 .72 ,均P <0 .0 5 ) ,与PCO2 呈负相关 (r =- 0 .5 4 ,r =- 0 .5 2 ,均P <0 .0 5 ) ;肺心病急性加重期及缓解期血浆ET 1与PO2 呈负相关 (r =- 0 .72 ,r =- 0 .5 3,均P <0 .0 5 ) ,与PCO2 呈正相关 (r =0 .5 5 ,r =0 .5 3,均P <0 .0 5 ) ;③血浆NO变化分别与PO2 变化、PCO2 变化呈正、负相关 (r =0 .5 5 ,r =- 0 .5 1,均P <0 .0 5 ) ,血浆ET 1变化分别与PCO2 变化、PO2 变化呈正、负相关 (r =0 .5 2 ,r =- 0 .5 6 ,均P <0 .0 5 ) ;④肺心病急性加重期经治疗后 ,随着病情好转 ,NO增高 ,ET 1降低 ,ET 1/NO降低 (均P <0 .0 5 ) ;病情无好转及死亡者 ,NO ,ET 1,ET 1/NO水平无明显变化 (P >0 .0 5 )。     

温石棉对兔肺泡巨噬细胞合成一氧化氮及抗氧化酶活性的影响

为探讨一氧化氮及抗氧化酶在石棉致病中的作用 ,用改良 Myrvik法收集兔肺泡巨噬细胞 (AM)进行体外培养 ,采用硝酸还原酶法测定 U ICC温石棉处理后兔 AM培养液中亚硝酸根 (NO2 - )的含量 (NO的静态氧化形式 ) ,同时利用黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统测定 AM的细胞裂解液中 SOD的活性 ,和酶 -底物反应形成有色物质来测定 AM的细胞裂解液中 NOS和 GSH - Px的酶活性。结果显示 :随 UICC温石棉剂量的增加出现以下情况 :1 AM死亡率升高 ,细胞活性下降 ;2 AM培养液中的 NO- 2 含量增加 ,AM细胞裂解液中 SOD和 GSH - Px的活性降低 ,且以上均有剂量 -效应关系 (r1 =0 .6 1 1 4 ,P<0 .0 5 ;r2 =- 0 .5 1 2 6 ,P<0 .0 1 ;r3=- 0 .91 37,P<0 .0 1 ) ;3NOS在较低剂量组间呈剂量 -反应性增加 ,而在较高剂量组间呈剂量 -反应性降低 ,出现一个单峰曲线 ;4测得的NO的含量分别与 SOD和 GSH- Px活性呈负相关关系 (r1 =- 0 .71 2 5 ,P<0 .0 5 ;r2 =- 0 .8496 ,P<0 .0 5 ) ;5 NO和NOS在较低剂量组间呈正相关关系 ,在较高剂量组间呈负相关关系。以上提示 NO及其抗氧化酶在温石棉致病中具有一定作用     

精液一氧化氮含量与精子三磷酸腺苷水平及其活力的关系

目的　揭示精子活力低下所致男性不育的可能机制 ,为寻找相应的治疗途径提供新的线索。方法　选择不育患者和正常生育能力者的精液为标本 ,采用分光光度法检测精液一氧化氮 (NO)含量和三磷酸腺苷 (ATP)含量 ,计算机辅助的精子分析法检测精子活力。结果　不育组精液NO含量显著高于正常生育能力组 (P <0 .0 0 1) ,ATP含量显著低于正常组(P <0 .0 1) ,不育组精子总活率和快速前向运动精子百分率均低于正常组 (分别为P <0 .0 0 1,P <0 .0 1)。且精液中NO含量与ATP含量呈负相关关系。结论　不育患者精液NO含量显著增高并抑制ATP水平 ,导致精子活力降低     

急性脑梗死患者红细胞免疫功能与脂质过氧化作用的关系

目的　探讨急性脑梗死 (ACI)红细胞免疫功能与自由基的关系。方法　测定 4 0例ACI患者和 35例健康对照者的红细胞C3b受体花环率 (RBC -C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(RBC -ICR)、过氧化脂质 (LPO)水平、超氧化物歧化酶 (SOD)活性等指标进行对比研究。结果　与健康对照组比较 ,ACI患者RBC -C3bRR和SOD活性显著降低 (P <0 .0 1) ,RBC -ICR和LPO水平显著升高 (P <0 .0 1)。红细胞LPO与RBC -C3bRR呈显著负相关 (r =- 0 .4 75 7,P <0 .0 1)而与RBC -ICR呈显著正相关 (r=0 .4 385 ,P <0 .0 1)。结论　ACI患者红细胞免疫功能降低而脂质过氧化反应增强 ,红细胞膜脂质过氧化损害对红细胞C3b受体有不利影响     

杜仲叶提取物对人精子膜功能损伤的保护作用

目的 探讨杜仲叶提取物对人精子膜功能氧化损伤的保护作用。方法 应用梯度离心法,分离出正常精子作为模型,在采用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生活性氧(reactive oxygen species, ROS)环境下,使用维生素C(0.15mg/ml)及小、中、大剂量杜仲叶提取物(150、300、600mg/L)共同孵育精子悬液,检测精子膜中的丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力,通过精子尾部低渗膨胀试验、精子顶体完整率评估精子膜功能。结果 与模型组相比,维生素C和小、中、大剂量杜仲叶提取物在相同的条件下,均可提高精子悬液SOD活力,降低MDA含量(P<0.01)。与维生素C比较,小、中剂量的杜仲叶提取物对ROS所致精子膜的氧化损伤的保护作用差异无统计学意义(P>0.05),大剂量的杜仲叶提取物明显优于维生素C(P<0.01)。与模型组比较,小、中、大剂量杜仲叶提取物组的精子顶体完整率和精子尾部低渗膨胀试验结果均有统计学意义(P<0.01),大剂量杜仲叶提取物对精子的保护作用最显著(P<0.01)。结论 杜仲叶提取物对人精子膜结构和功能损伤具有显著的保护作用。     

精子形态正常率与体外受精妊娠结局的关系

目的：探索精子形态对卵子受精率、卵裂率及临床妊娠率的影响,为不孕症患者行辅助生殖技术治疗前助孕方式的选择提供理论依据也为辅助生殖技术方法的改善,积累理论和实践经验。方法：回顾性分析2008年1月至12月接受辅助生殖治疗的1 369例患者的精液分析资料,根据患者精子形态分为4组（≤5.0%,5.1%～10.0%,10.1%～15.0%,＞15.0%）,分别采用体外受精（IVF;n=490)或卵胞浆精子注射(ICSI; n=261）的受精方式。供精者（618例）精子也分为4组（14.0%～17.0%, 17.1%～19.0%,19.1%～23.0%及＞23.0%）,采用IVF受精方式。比较各组精子形态与受精率、卵裂率及临床妊娠率的关系。结果： IVF（病人或供精者）受精方式下,各形态精子组的临床妊娠率、受精率差异有统计学意义（P＜0.05),但卵裂率差异无统计学意义（P＞0.05);ICSI受精方式下,各形态精子组的临床妊娠率、受精率、卵裂率间差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：精子形态异常影响IVF成功率;精子形态对ICSI治疗结局无显著影响,对精子形态异常患者采用ICSI技术为最佳。     

人工合成的人精子抗原多肽抗体与人精子结合的生物学特性研究

目的　对人工合成的精子多肽 ( 3 5肽 )抗原抗体与人精子的结合情况进行评价。方法　获得抗 3 5肽抗体后 ,用荧光素直接进行标记 ,通过流式细胞仪检测抗体与精子的结合率 ,并在荧光显微镜下观察抗体与人精子的结合部位。结果　人精子抗 3 5肽抗体阳性率为 97 7% ,荧光显微镜下见精子头颈部着色 ,部分见赤道板及头部顶端着色增强。结论　 3 5肽在人精子头表面有高度表达 ,抗 3 5肽抗体可与人精子表面高度特异结合。     

TCM treatment of male infertility due to seminal abnormality--a clinical observation of 82 cases

82 male patients of infertility due to seminal abnormality were treated by Ju Jing Powder with a total effective rate of 85.4%. The sperm density in seminal fluid, the total sperm number in a single ejaculation and the activity rate of sperms markedly improved as compared with those before treatment (P less than 0.01), especially the grading of sperm motility.     

人类精子中段形态对胚胎发育的影响

目的在高倍镜下观察精子中段的形态,从而评估精子中心体功能,从而探讨精子中段形态与中心体功能的关系以及中段
形态不同的精子对胚胎发育的影响。方法针对57例在成都市锦江区妇幼保健院生殖医学中心行ICSI（卵胞浆内单精子注射）
技术治疗的患者,将首先在低倍镜（×200~×400）下挑选过的精子再次利用MSOME（精子细胞器官形态学检查）系统,在6 000倍
放大镜下对精子进行精子中心体形态分组（A组：1≤a/b≤1.2;B组：a/b≥1.5;C组：其他不规则形态）,然后分别将这3组精子注射
入卵后,分组进行胚胎培养,最终观察每组胚胎发育和着床情况。结果A,B,C 3组比较发现D3移植优胚率（79.7% vs 55.6% vs
33.3%）和胚胎着床率（43.2% vs 11.1% vs 0%）在3组之间均有显著性差异（P<0.05）;而正常受精率（73.3% vs 80.4% vs 63.5%）、
囊胚利用率（23.2% vs 22.2% vs 9.09%）、胚胎冷冻率（29.2% vs 25.0 % vs 13.0%）、D3优胚率（35.3% vs 37.8% vs 18.8%）上均无显著
性差异（P>0.05）。结论中心体形态较好的精子注射入卵后,可获得较高正常受精的胚胎,能显著提高第3天可移植优胚的几率,
同时能显著改善胚胎的着床率,但由于样本量较少,仍然需要较大的样本量来进一步证实,为精子中心体的相关研究提供参考。
     

抗精子多肽抗体体外抗受精作用的初步研究

目的评价一种抗人工合成的精子多肽(35肽)抗体对人精子受精功能的影响情况.方法将含抗35肽抗体的兔血清与人精子共同孵育,用计算机辅助精液分析系统(computer aimed sperm assay, CASA)检测精子活动力,以及检测顶体反应率和穿卵率.结果抗35肽抗体兔血清可显著抑制精子的速度(包括直线速度、曲线速度和平均路径速度)、活动精子百分比、顶体反应率及穿卵率.结论抗35肽抗体可抑制人精子受精功能,35肽作为一种避孕疫苗有一定开发前景.     

精子顶体酶活性与体外受精受精率的相关性研究

目的探讨精子顶体酶活性的变化与体外受精（IVF）受精率的关系。方法46例不育夫妇男方精液,测定其密度、活力、前向运动精子及精子顶体酶活性,探讨与IVF受精率的相关性。结果精子顶体酶活性与精子的密度无相关性,与精子的活率和前向运动精子有正相关,精子顶体酶活性与IVF受精率有直线正相关性。结论精子顶体酶活性与IVF受精率有相关性,通过测定精子顶体酶活性可能预测IVF受精率。     

单次上游单次离心高活力精子分离与宫腔内授精

介绍了一种用于宫腔内授精（ＩＵＩ）的高活力精子分离方法一单次上游单次离心法，活性精子提取率为（１９．９±６．３）％，其中，ａ精子提取率为（３２．０±１３．８）％。提取的精子悬液中，ａ精子率为（８３．８±５．５）％。精子活动率约９５％，畸形精子率下降了６个百分点。应用上述方法进行精子分离对２７对男性少、弱、畸精子症致不育夫妇进行了４０个周期的ＩＵＩ治疗，妊娠率（ＰＧＲ）２０％。ＩＵＩ中精子数量超过６×１０＿６，ＰＧＲ为３２％，而不足６×１０＿６者无一例妊娠（Ｐ＜０．０５）。     

子宫内膜异位症患者腹腔液一氧化氮对人精子活力的影响

目的了解子宫内膜异位症(EMS)患者腹腔液一氧化氮(NO)对人精子活力的影响,探讨NO与EMS妇女低妊娠率之间的关系。方法通过腹腔镜抽取EMS组、EMS合并不孕组及对照组腹腔液,分离、培养腹腔液中的巨噬细胞,检测细胞培养液中NO代谢物(硝酸盐和亚硝酸盐)浓度,将细胞培养液与精液共同孵育后检测精子的活力。结果EMS组和EMS合并不孕组细胞培养液NO代谢物水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);EMS合并不孕组患者细胞培养液与精液孵育后精子运动指标低于对照组与EMS组(P<0.05),对照组与EMS组之间精子运动指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论EMS合并不孕患者腹腔液巨噬细胞培养液对精子活力有抑制作用,但未能证实与腹腔液中NO水平有关。     

苯和甲醛对雄性小鼠睾丸生殖细胞的联合毒性

目的:探讨苯和甲醛对雄性小鼠睾丸生殖细胞的毒性作用。 方法:选用纯系雄性小鼠为研究对象,苯加甲醛的联合染毒剂量（mg·kg^-1）分别为10+10、50+50、100+100（作为3个实验组）,同时设对照组(0 mg·kg^-1组)和植物油组(n=10)。连续经口染毒8周后处死小鼠,进行睾丸称重、精子计数、精子畸形百分率计算和睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)活力测定。 结果:各染毒组小鼠的精子数随苯和甲醛联合染毒剂量的增加而逐渐减少,精子畸形率明显增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01);各染毒组小鼠睾丸组织SOD活力随苯和甲醛联合染毒剂量的增加而逐渐降低,当联合染毒剂量为（50+50）和（100+100） mg·kg^-1时,与对照组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01);睾丸重量有随染毒剂量的增加而降低的趋势(P>0.05)。 结论:苯和甲醛能对小鼠的生殖细胞产生明显联合毒性作用。