DJ-1基因的研究进展

广泛存在于真核及原核生物的DJ-1基因,或称Park7基因,最常见于常染色体隐性遗传性帕金森病（PD）,其致病机制还不完全清楚。研究发现DJ-1在很多癌组织细胞中表达上调,是一个癌基因。DJ-1基因中的半胱氨酸残基106参与DJ-1很多重要功能的调节,例如氧化应激修饰。本文从OJ-1的组织分布、结构生物学、功能与机制、与肿瘤的关系等几个方面进行了阐述。     

蛋白质组阵列技术的现状与展望

蛋白质组就是展示一个细胞或组织或机体的全部蛋白质。目前双向凝胶电泳特别是固相 p H梯度等电聚焦的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,是分离阵列蛋白质组成分的核心技术 ,但仍存在诸多不足 ,通过改善蛋白溶解、阵列策略和蛋白斑点的探测技术 ,使蛋白质组阵列技术取得了进展     

中老年职工肺功能与工作能力关系的研究

为探索中老年职工肺功能与工作能力的关系，采且现场调查法对成都地区２８５名不同职业的中老年职工进行肺功能〔用力肺活量（ＦＶＣ）、一种钟用力呼气容积（ＦＥＶ１）、一秒率（ＦＥＶ１％、用力握中段平均流量（ＭＭＥＦ），将前三项指标等级化值之和得肺功能指数（ＰＦＩ）〕和工作能力九（ＷＡＩ）测量。结果显示，ＦＶＣ、ＦＥＶ１％在劳动类型间均具显著性差异（ｐ〈０．０５），ＦＶＣ在性别间也有显著性差异（ｐ〈０．０５     

蛋白激酶在青石棉处理的肺泡巨噬细胞培养上清液致肺成纤维细胞增殖中的作用

为探讨蛋白激酶在青石棉诱导的肺成纤维细胞增殖中的作用 ,本研究采用体外细胞培养技术 ,用兔肺泡巨噬细胞 (AM)和人胚肺成纤维细胞 (HEPF)组成体外模型 ,用 MTT法测定 HEPF的增殖活力 ,检测了蛋白激酶 (PKA、PKC和 TPK)的抑制剂和激活剂对青石棉诱导的 HEPF增殖的影响 ,以二氧化钛为阴性对照 ,标准石英为阳性对照。结果发现 ,PKA、PKC和 TPK的抑制剂和激活剂均能使青石棉诱导的 HEPF增殖受到抑制和激活 ,并随剂量的变化而变化 ,呈显著的剂量 -效应关系 (P<0 .0 1) ,且青石棉组被抑制和激活的程度强于各对照组。从 3种蛋白激酶的作用强度分析 ,发现 TPK信号通路在青石棉诱导的 HEPF增殖中的作用最强 ,其次是 PKC信号通路 ,PKA信号通路的作用最弱。提示 PKA、PKC和 TPK信号通路均参与了青石棉处理 AM上清液致 HEPF增殖过程 ,TPK信号通路可能起着主导作用 ,这为寻找石棉致纤维化因子的研究方向提供了参考。     

温石棉对兔肺泡巨噬细胞合成一氧化氮及抗氧化酶活性的影响

为探讨一氧化氮及抗氧化酶在石棉致病中的作用 ,用改良 Myrvik法收集兔肺泡巨噬细胞 (AM)进行体外培养 ,采用硝酸还原酶法测定 U ICC温石棉处理后兔 AM培养液中亚硝酸根 (NO2 - )的含量 (NO的静态氧化形式 ) ,同时利用黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统测定 AM的细胞裂解液中 SOD的活性 ,和酶 -底物反应形成有色物质来测定 AM的细胞裂解液中 NOS和 GSH - Px的酶活性。结果显示 :随 UICC温石棉剂量的增加出现以下情况 :1 AM死亡率升高 ,细胞活性下降 ;2 AM培养液中的 NO- 2 含量增加 ,AM细胞裂解液中 SOD和 GSH - Px的活性降低 ,且以上均有剂量 -效应关系 (r1 =0 .6 1 1 4 ,P<0 .0 5 ;r2 =- 0 .5 1 2 6 ,P<0 .0 1 ;r3=- 0 .91 37,P<0 .0 1 ) ;3NOS在较低剂量组间呈剂量 -反应性增加 ,而在较高剂量组间呈剂量 -反应性降低 ,出现一个单峰曲线 ;4测得的NO的含量分别与 SOD和 GSH- Px活性呈负相关关系 (r1 =- 0 .71 2 5 ,P<0 .0 5 ;r2 =- 0 .8496 ,P<0 .0 5 ) ;5 NO和NOS在较低剂量组间呈正相关关系 ,在较高剂量组间呈负相关关系。以上提示 NO及其抗氧化酶在温石棉致病中具有一定作用     

青石棉处理的肺泡巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞的作用

为了探讨青石棉对肺损伤的机理,用兔肺泡巨噬细胞(AM)和人胚肺成纤维细胞(HEPF)组成体外模型,采用MTT颜色反映法测定青石棉处理兔AM24h后的培养上清液刺激HEPF细胞增殖情况,同时用标准石英作为阳性对照,二氧化钛作为阴性对照,以不用粉尘处理的AM培养上清液作为正常对照.结果发现青石棉能明显刺激HEPF增殖,呈剂量-效应关系(P＜0.01).青石棉浓度在100μg/ml时,青石棉组HEPF的净增殖率达60.91%,是正常对照组的3.48倍,高于阳性对照和阴性对照100μg/ml青石棉处理兔AM的培养上清液的不同稀释度对HEPF增殖的影响不同,随稀释度的加大,其促细胞增殖的能力越弱,以12稀释度作用最强,明显高于阳性对照和阴性对照(P＜0.01).提示青石棉处理肺泡巨噬细胞的培养上清液中存在有促进肺成纤维细胞增殖的生物活性物质,若能阻止这些生物活性物质的合成和分泌将对石棉相关疾病的预防和治疗具有重要意义.     

蛋白激酶C信号通路在温石棉致肺成纤维细胞的细胞周期和凋亡改变中的作用

目的 探讨蛋白激酶C（PKC）信号通路与温石棉致人胚肺成纤维细胞（HEPF）的细胞周期及细胞凋亡改变的联系。方法 流式细胞技术测定PKC的抑制剂或激活剂对温石棉处理兔肺泡巨噬细胞（AM）的培养上清液致HEPF的细胞周期和凋亡改变的影响。同时设立空白对照、正常对照（不加粉尘的AM）、阴性对照（标准TiO2)和阳性对照（标准SiO2）。结果 温石棉处理AM的上清液刺激HEPF增殖时,HEPF的G／M期细胞百分比为7．2％,高于各对照组,而细胞凋亡百分率为3．5％,低于各对照组,差异均有显著性（P＜0．01）。PRKC抑制剂C25H24N4O2使温石棉所致HEPF增殖时的S期细胞百分比由37．8％减少到27．3％,凋亡百分率由3．5％增加到22．7％,差异均有显著性（P＜0．01）,而PKC激活剂PMA能使此S期细胞百分比增加。结论 温石棉所致HEPF增殖时的细胞周期变化与其上游PKC信号通路有关,PKC抑制剂和激活剂主要是作用 于S期DNA的合成和诱导细胞凋亡。     

3种粉尘对兔肺泡巨噬细胞合成NO及NOS活性的影响

为探讨一氧化氮（ＮＯ）和一氧化氮合酶（ＮＯＳ）在粉尘致病中的作用，利用改良Ｍｙｖｉｒｋ法收集兔肺泡巨噬细胞（ＡＭ）进行体外培养，采用硝酸还原酶法测定二氧化钛、石英尘和新康温石棉处理ＡＭ后培养上清液中亚硝酸根／硝酸根／硝酸根（ＮＯ２＾－／ＮＯ３３＾－）的含量（ＮＯ的静成氧化形式），同时得用酶－底物反应形成有色物质测定ＡＭ的细胞裂解液中ＮＯＳ的酶活性。结果显示，随粉尘浓度的增加：（１）温石棉组和石英组     

蛋白质组中蛋白质鉴定技术的研究近况

蛋白质组学的核心内容之一就是蛋白质的鉴定 ,基于双向凝胶电泳的图象分析技术可以对组织细胞蛋白质表达的量、表观分子量和等电点等特性进行初步的鉴定 ,但是对于蛋白质的结构和功能必须借助其它技术手段。目前逐渐形成了以生物质谱为核心的鉴定技术 ,蛋白质微测序和氨基酸组成分析在表达模式分析中也有应用。关于蛋白质组功能模式研究目前可用的方法有酵母双杂交、噬菌体展示、生物传感芯片质谱、蛋白质工程中的定点突变技术等。这些技术对推动蛋白质组学的发展起了一定作用 ,但是单一技术通常不能确切的鉴定某一蛋白质 ,常需联合应用几种技术才能准确的鉴定蛋白质     

蛋白激酶C抑制剂对温石棉诱导肺成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＣＫ）信号通路在温石棉诱导的肺泡巨噬细胞因子致人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）增殖中的作用。方法 采用体外细胞培养技术,用四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）颜色反应法检测温石棉处理兔肺泡巨噬细胞（ＡＭ）的上清液刺激ＨＥＰＦ增殖和ＰＫＣ抑制剂对其产生的影响,同时设空白对照、正常对照（未加粉尘处理的ＡＭ培养上清液）、阴性对照（标准ＴｉＯ２）和阳性对照（标准ＳｉＯ２）。结果 温石棉处理ＡＭ２４ｈ后的培养上清液再处理ＨＥＰＦ４８ｈ,ＨＥＰＦ增殖,且与粉尘浓度存在显著的剂量－效应关系（ｒ＝０．６７１８,Ｐ〈０．０１）;１００ｕｇ／ｍｌ温石棉染尘组ＨＥＰＦ的净增殖率达４０．５６％,是正常对照组的２．６５倍,高于标准ＳｉＯ２组和标准ＴｉＯ２组。１００ｕｇ／ｍｌ粉尘处理ＡＭ的培养上清液的稀释程度与其促使ＨＥＰＦ增殖的