整合素αvβ3拮抗剂SB-273005对C6胶质瘤细胞talin、survivin蛋白表达及磷酸化的影响

目的检测整合素αvβ3拮抗剂SB-273005对C6神经胶质瘤细胞talin、survivin蛋白表达量及其磷酸化的影响。方法将C6细胞常规培养后,分对照组（0 mg/L）、SB-273005低浓度组（25 mg/L）和SB-273005高浓度组（50 mg/L）3组,采用western法检测不同浓度的SB-273005对C6细胞踝蛋白（talin）、生存素蛋白（survivin）表达量以及其磷酸化的变化,并检测各组蛋白条带光密度变化。结果不同浓度的SB-273005均能明显降低C6细胞talin、survivin蛋白的表达,对二者的磷酸化有明显的抑制作用。测得对照组、SB-273005低浓度组和SB-273005高浓度组蛋白条带光密度,得出talin/β-actin比值分别为0.76、0.43、0.26（＊P〈0.05）;磷酸化的talin/β-actin比值分别为0.82、0.33、0.15（＊P〈0.05）。survivin/β-actin比值分别为0.84、0.21、0.09.（＊P〈0.05）,磷酸化的survivin/β-actin比值分别为0.19、0.04、0.01（＊P〈0.05）。3组相比,差异有统计学意义。结论SB-273005对大鼠C6神经胶质瘤细胞talin、survivin蛋白表达量及其磷酸化起负性调节作用。     

nm23-H1和Cerb—B-2蛋白在骨肉瘤和良性骨肿瘤中的表达及意义

目的探讨nm23-H1和Cerb—B-2蛋白在骨肉瘤和良性骨肿瘤中的表达。方法采用免疫组化SABC法检测48例骨肉瘤和20例良性骨肿瘤nm23-H1和Cerb—B-2蛋白表达。结果48例骨肉瘤nm23-H1和Cerb—B-2蛋白阳性表达率分别为31．3％和64．6％；20例良性骨肿瘤中nm23-H1和Cerb—B-2蛋白阳性表达率分别为80．0％和15．0％，骨肉瘤组织和良性骨肿瘤组织nm23-H1和Cerb—B-2蛋白表达差异均有统计学意义（P〈0．05），二者呈负相关。结论在骨肉瘤中nm23-H1蛋白的低表达和Cerb—B-2蛋白的高表达可能共同参与骨肉瘟的发生。     

基于Wnt/β-catenin通路探究骨痹通方对软骨基质的保护作用及其机制

背景　骨痹通方对骨关节炎（OA）具有较好的临床治疗效果,对OA模型大鼠软骨具有良好的保护作用,但其具体作用机制尚不明确。目的　基于Wnt/β-catenin通路探究骨痹通方对软骨基质的保护作用及其机制。方法　本研究于2020年6-9月完成。采用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTS）法检测SW1353软骨肉瘤细胞活力。通过白介素1β（IL-1β）介导的SW1353软骨肉瘤细胞建立OA细胞模型,设置A组、B组、C组、D组、E组,其中A组为空白对照,B组为阳性对照（加入10 μg/L的IL-1β）,C组、D组、E组加入10 μg/L的IL-1β后分别加入低剂量（625 mg/L）、中剂量（1 250 mg/L）、高剂量（2 500 mg/L）骨痹通方溶液。采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测基质金属蛋白酶1（MMP-1）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）、基质金属蛋白酶13（MMP-13）mRNA表达情况,采用Western-blotting检测MMP-1、MMP-3、MMP-13、β-catenin蛋白表达情况,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测MMP-1、MMP-3、MMP-13分泌情况。结果　浓度为3 000 mg/L的骨痹通方溶液对SW1353软骨肉瘤细胞活力有一定抑制作用（P<0.05）。B组、C组、D组、E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA相对表达量高于A组,但C组细胞MMP-1、MMP-3 mRNA相对表达量低于B组,D组、E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA相对表达量低于B组、C组,E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA相对表达量低于D组（P<0.05）。B组、C组、D组、E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白相对表达量高于A组,但C组细胞MMP-1、MMP-3蛋白相对表达量及D组、E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白相对表达量低于B组,D组细胞MMP-1、MMP-13及E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白相对表达量低于C组,E组细胞MMP-1、MMP-3、MMP-13蛋白相对表达量低于D组（P<0.05）。B组、C组、D组、E组细胞上清液MMP-1、MMP-3、MMP-13含量高于A组,但C组、D组、E组细胞上清液MMP-1、MMP-3、MMP-13含量低于B组,D组、E组细胞上清液MMP-1、MMP-3、MMP-13含量低于C组,E组细胞上清液MMP-1、MMP-3、MMP-13含量低于D组（P<0.05）。分别在B组基础上加入5 μmol/L Wnt/β-catenin通路激活剂WAY-262611溶液（F组）、10 μmol/L地塞米松溶液（G组）。B组、C组、D组、E组、F组、G组细胞MMP-13、β-catenin蛋白相对表达量高于A组,F组细胞MMP-13、β-catenin蛋白相对表达量高于B组、C组、D组、E组、G组,但D组、E组、G组细胞MMP-13蛋白相对表达量及E组、G组细胞β-catenin蛋白相对表达量低于B组、C组,G组细胞MMP-13蛋白相对表达量及E组、G组细胞β-catenin蛋白相对表达量低于D组,G组细胞MMP-13、β-catenin蛋白相对表达量低于E组（P<0.05）。结论　骨痹通方对软骨基质具有一定保护作用且存在一定剂量依赖效应,抑制基质金属蛋白酶（MMPs）的过度表达及Wnt/β-catenin通路异常激活可能是其发挥软骨基质保护作用的重要机制。     

MMP-9、ERK2及nm23与乳腺癌发生发展的关系

目的探讨MMP-9、ERK2及nm23与乳腺癌发生发展的联系。方法采用免疫组化法检测乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌组织MMP-9、ERK2及nm23基因蛋白的表达。结果 MMP-9和ERK2表达在乳腺癌组织明显高于乳腺纤维腺瘤和乳腺腺病组织,且三组比较有统计学意义（P〈0.05）,MMP-9、nm23表达与乳腺癌患者TNM分期、肿瘤直径、术后生存时间、淋巴结转移个数均呈显著正相关（P〈0.05）,ERK2表达与TNM分期成正相关（P〈0.05）。乳腺癌组织nm23基因蛋白的表达明显低于乳腺纤维腺瘤和乳腺腺病组织,且三组比较有统计学意义（P〈0.05）;乳腺癌组织中,ERK2与MMP-9表达呈显著正相关,nm23与MMP-9、ERK2表达呈显著负相关。结论 MMP-9可能通过降解细胞外基质促进乳腺癌的浸润转移,影响患者临床分期;nm23参与抑制乳腺癌的浸润转移,通过抑制ERK信号转导系统的活性减少乳腺癌细胞增殖能力,可能是抑制乳腺癌转移的机制之一。     

nm23—H1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义研究

为探讨转移抑制基因nm23-H1蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。应用SABC免疫组化染色方法,检测了38例食管鳞状细胞癌患者中nm23-H1蛋白的表达。发现17例（44.7%)nm23-H1蛋白染色阳性,21例(55.3%)nm23-H1蛋白染色阴性。nm23-H1蛋白表达与淋巴结转移呈负相关,而与其它临床指标无相关。nm23-H1蛋白染色性患者（P＜0.05）,而且在有淋巴结转移的患者中,nm23-H1蛋白的低表达与短的生存时间相关（P＜0.05）。结果表明：nm23-H1蛋白的表达可成为判断食管鳞状细胞癌患者有无淋巴结转移及其预后的指标。     

消痔灵体外诱导肝癌细胞HepG2凋亡的实验研究

目的观察消痔灵注射液(XZL)体外诱导肝癌细胞HepG2的凋亡情况,并初步探讨其作用机制。方法分别用含0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0g/L XZL的培养液体外培养HepG2细胞,采用MTT法检测HepG2细胞抑制率。用Western blotting检测各组相关凋亡蛋白Bcl-2和nm23-H1表达变化。结果 XZL能明显抑制HepG2细胞生长,且呈时间和浓度依赖性。XZL组与空白对照组、氟尿嘧啶组相比,Bcl-2蛋白表达显著下降;与共同作用组相比,Bcl-2蛋白表达显著增高(F=43.64,q=4.13～15.49,P<0.05)。但nm23-H1蛋白表达各组均无显著差异(P>0.05)。结论 XZL可抑制HepG2细胞增殖,并通过降低Bcl-2蛋白表达诱导HepG2细胞凋亡。     

胆囊癌组织中MMP-9和nm23-H1的表达与浸润转移的关系

目的探讨胆囊癌组织中MMP-9和nm23-H1的表达水平,了解胆囊癌组织中MMP-9和nm23-H1表达的相关性及其与胆囊癌浸润转移的关系。方法采用免疫组织化学法（PV-9000）检测60便胆囊癌（44例浸润转移组,16例无浸润转移组）MMP-9和nm23-H1的表达。结果有浸润转移的44例胆囊癌标本中,MMP-9和nm23-H1表达的阳性率分别为72．7％（32／44）和27．3％（12／44）;无浸润转移的16例胆囊癌标本中,MMP-9和nm23-H1表达的阳性率分别为37．5％（6／16）,和68．8％（11／16）。MMP-9的表达与胆囊癌浸润转移倾向呈正相关性（P〈0．05）,rim23-H1的表达与胆囊癌的浸润转移倾向呈负相关性（P〈0．01）,由此提示MMP-9与nm23-H1的表达呈负相关性（P〈0．01）。结论MMP-9及nm23-H1的表达可能作为胆囊癌预后及转移潜能判断的指标。     

C—myc、P53、bcl-2、CD44V6、nm23-H1基因在食管鳞癌中表达及其与预后的关系

目的探讨C—myc、P53、bcl-2、CD44V6、nm23-H1基因在食管鳞癌的表达及其临床病理及预后的关系。方法采用免疫组化S—P法检测C—myc、P53、bcl-2、CD44V6、nm23-H1基因在56例食管鳞癌及21例癌旁正常黏膜中的表达。对所有病例进行3年随访。结果（1）C—myc、P53、bcl-2、CD44V6在食管鳞癌中的阳性表达率均显著高于癌旁正常食管黏膜;nm23-H1在食管鳞癌中的阳性表达率显著低于正常食管黏膜。（2）C—myc表达与肿瘤浸润深度、TNM分期相关;P53表达与肿瘤浸润深度、病理分级及TNM分期相关;bcl-2表达与肿瘤病理分级、TNM分期、淋巴结转移与否相关;CD44V6与nm23-H1表达与肿瘤浸润深度、病理分级、TNM分期、淋巴结转移与否相关。（3）单因素生存分析显示肿瘤浸润深度、病理分级、临床分期及淋巴结转移情况以及C—myc、P53、bcl-2、CD44V6、nm23-H1基因表达均与食管癌患者预后相关。Cox回归多因素分析显示食管癌中病理分级、TNM分期、bcl-2、CD44V6、nm23-H1表达是独立预后因素。结论（1）C—myc、P53、bcl-2、CD44V6的高表达及nm23-H1的低表达与食管鳞癌的发生相关。（2）C—myc、P53、bcl-2、CD44V6、nm23-H1与食管鳞癌浸润转移相关。（3）肿瘤的病理分级、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及bcl-2、CD44V6、nm23-H1表达是影响食管癌患者预后的因素。     

奥美拉唑对HepG2细胞中CYP2C19酶表达及活性的影响

目的：研究奥美拉唑（omeprazole）对HepG2细胞CYP2C19酶表达及活性的影响,间接反映奥美拉唑和氯吡格雷联合用药是否存在药物的相互作用。方法通过MTT实验筛选出奥美拉唑对HepG2细胞的无毒浓度。采用实时定量PCR （Q-PCR）及Western印迹法检测奥美拉唑（浓度分别为0、0.1、1和10 mg/L）对HepG2细胞中CYP2C19在mRNA和蛋白水平上表达的影响。奥美拉唑（0、0.1、1、10和100 mg/L）与表达人CYP450同工酶和人CYP450还原酶的昆虫细胞的微粒体共同孵育,在体外水平上通过荧光强度的变化分析对CYP2C19酶活性的影响。结果奥美拉唑对HepG2细胞无毒性的浓度范围为0～10 mg/L。在mRNA及蛋白表达水平上,奥美拉唑各浓度组均抑制CYP2C19酶的表达,且具有浓度依赖性。酶活性检测表明,当奥美拉唑的浓度达到10、100 mg/L时,荧光强度明显减弱,表明高浓度奥美拉唑抑制CYP2C19酶的表达。结论奥美拉唑能降低HepG2细胞色素氧化酶CYP2C19的表达,并抑制其活性,提示奥美拉唑与其他需经过CYP2C19酶代谢才能转化为活性代谢产物的药物（氯吡格雷）联用时,有可能会出现药效抵抗现象。     

VEGF-C、nm23-H1在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨血管内皮生长因子-C（VEGF—C）和nm23-H1基因蛋白在大肠癌中的表达及其与肿瘤侵袭和淋巴结转移的关系。方法应用免疫组化S—P法对121例大肠癌手术根治标本进行VEGF—C和nm23-H1基因蛋白测定。结果VEGF—C和nm23-H1阳性表达率分别为62％和48％。VEGF—C高表达与大肠癌侵袭和淋巴结转移关系密切（P〈0．05）。nm23-H1基因蛋白的低表达与大肠癌分化程度和淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。大肠癌中VEGF—c和nm23-H1蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论VEGF—C和nm23-H1蛋白的表达与大肠癌侵袭和转移有显著相关性，同时检测VEGF—C和nm23-H1蛋白表达状况，可作为预测大肠癌淋巴结转移及预后的-个有用指标。     

乳腺癌nm23-H1表达的临床意义

目的：研究nm23-H1蛋白在乳腺癌中表达的临床意义及其与C-erbB-2蛋白表达的关系。方法：应用免疫组化法对87例乳腺癌患者标本中nm23-H1、C-erbB-2蛋白的表达进行检测。结果：nm23-H1蛋白阳性表达率为51．72％（45／87），与淋巴结状态、组织学分级、临床分期及术后生存期有关；与年龄、肿瘤大小无明显关系。与C-erbB-2蛋白的表达呈负相关。结论：nm23-H1的表达可能与乳腺癌的发展及预后有关；nm23-H1与C-erbB-2蛋白的表达呈负相关。nm23-H1蛋白的表达对判断乳腺癌进展及预后有一定的参考价值。     

银杏叶提取物通过JAK2/STAT3信号通路调控食管癌细胞EC9706增殖、凋亡、侵袭、迁移的研究

目的 探讨银杏叶提取物对食管癌细胞EC9706增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及机制。方法 食管癌细胞EC9706分为对照组（不做任何处理）、不同浓度银杏叶提取物组（100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L银杏叶提取物）、银杏叶提取物+白细胞介素-6（IL-6）组（20 ng/ml IL-6和400 mg/L银杏叶提取物）。采用CCK-8法检测各组细胞的光密度（OD）值;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭;Western blotting检测细胞增殖核抗原Ki-67、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved-caspase-3）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、磷酸化酪氨酸激酶2（p-JAK2）、磷酸化信号转导和转录激活因子3（p-STAT3）蛋白相对表达量。结果 对照组,100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L银杏叶提取物组,银杏叶提取物+IL-6组细胞OD值比较,差异有统计学意义（P <0.05）;与对照组相比,不同浓度银杏叶提取物组EC9706细胞OD值均降低（P <0.05）,细胞活性降低,且呈浓度依赖性;银杏叶提取物+IL-6组较400 mg/L银杏叶提取物组EC9706细胞活性升高（P <0.05）。5组的细胞凋亡率比较,差异有统计学意义（P <0.05）;与对照组相比,不同浓度银杏叶提取物组EC9706细胞凋亡率升高（P <0.05）,且呈浓度依赖性;银杏叶提取物+IL-6组EC9706细胞凋亡率较400 mg/L银杏叶提取物组降低（P <0.05）。5组细胞的Ki-67、Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）;不同浓度银杏叶提取物组Ki-67蛋白相对表达量较对照组均降低（P <0.05）,银杏叶提取物+IL-6组Ki-67蛋白相对表达量较400 mg/L银杏叶提取物组升高（P <0.05）;不同浓度银杏叶提取物组Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量较对照组均升高（P <0.05）,银杏叶提取物+IL-6组Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量较400 mg/L银杏叶提取物组降低（P <0.05）。对照组、400 mg/L银杏叶提取物组、银杏叶提取物+IL-6组细胞的MMP-2、MMP-9、p-JAK2、p-STAT3蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）;400 mg/L银杏叶提取物组较对照组均降低（P <0.05）,银杏叶提取物+IL-6组较400 mg/L银杏叶提取物组均升高（P <0.05）。对照组、400 mg/L银杏叶提取物组及银杏叶提取物+IL-6组EC9706细胞迁移数、细胞侵袭数比较,差异有统计学意义（P <0.05）;400 mg/L银杏叶提取物组EC9706细胞迁移数、细胞侵袭数较对照组减少（P <0.05）,银杏叶提取物+IL-6组EC9706细胞迁移数、细胞侵袭数较400 mg/L银杏叶提取物组增多（P <0.05）。结论 银杏叶提取物可能通过阻断JAK2/STAT3信号通路抑制食管癌细胞EC9706增殖、侵袭、迁移,促进细胞凋亡。     

双氢青蒿素对人宫颈癌细胞Hela生物学特性的影响

目的 探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人宫颈癌细胞Hela细胞周期、增殖、凋亡和侵袭的影响及机制。方法以Hela细胞为研究对象,根据DHA的不同浓度,分组：空白对照组（等体积生理盐水）、低浓度DHA组 （50 μmol/L）及高浓度DHA 组（400 μmol/L）。RT-PCR、Western blot检测各组细胞Caspase-3、Bax基因和蛋白的表达变化;流式细胞仪对细胞周期及凋亡检测;平板克隆实验检测细胞增殖;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭力。结果Caspase-3、Bax蛋白表达空白对照组、低浓度DHA组分别为0.48±0.07、0.51±0.08,0.95±0.11、1.03±0.12,高浓度DHA 组为2.28±0.21、2.35±0.23,明显高于上述两组（P<0.05）;细胞周期结果显示G0/G1期与S 期细胞空白对照组、低浓度DHA组分别为53.52±3.98、32.84±3.18,61.64±3.92、22.47±2.31,高浓度DHA 组为76.48±5.26、13.25±1.22,细胞周期阻止于G0/G1期（P<0.05),S期细胞数减少（P<0.05）;高浓度DHA 组凋亡率为（20.41±0.92）%,明显高于空白对照组和低浓度DHA组［（2.84± 0.61）%、（10.36±0.63）%］（P<0.05）;平板克隆实验显示高浓度DHA 组细胞克隆形成数为（62.54±12.46）个,明显低于空白对照组和低浓度DHA组［（188.56±14.84）个,（119.56±14.62）个］（P<0.05）;穿膜细胞数高浓度DHA 组为（92.75±13.54）个,明显低于空白对照组和低浓度DHA组［（232.58±26.42）个,（128.75±22.16）个］（P<0.05）。结论DHA干预调高Bax及Caspase-3蛋白表达,抑制Hela细胞的增殖,促进细胞凋亡,减少S期细胞,降低细胞侵袭能力,高浓度时效果更显著。     

银杏提取物对糖尿病大鼠肾组织MMP-2和MMP-9表达的影响

目的：观察银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响。方法：取成年SD级大鼠50只,随机分成3组：正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组）、EGB治疗组（EGM组,8mg.kg-1.d-1）。腹腔注射链脲佐菌素（STZ,30mg/kg）诱导大鼠造成糖尿病模型,EGB组用银杏叶提取物进行腹腔注射8周后,用免疫组化法检测各组大鼠肾皮质MMP-2、MMP-9的蛋白表达。结果：免疫组织化学：DM组大鼠肾小球MMP-2和MMP-9蛋白表达较正常对照组明显减少（P〈0.01）;EGB组MMP-2和MMP-9较DM组表达升高（P〈0.01）。结论：EGB可通过上调MMP-2和MMP-9蛋白表达,减少细胞外基质积聚而对糖尿病大鼠肾组织损伤起到一定的治疗作用。     

苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质MMP-2、TIMP-2和C-IV表达的影响

目的探讨苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制因子．2（TIMP-2）和IV型胶原（C—IV）表达水平的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为3组：正常对照组（c组）,糖尿病未治疗组（DM组）,糖尿病苯那普利（10mg／kg）治疗组（DB组）。8周后,用免疫组化方法（SP法）和RT—PCR方法检测各组大鼠肾皮质MMP-2、TIMP-2及C—IV的表达。结果DM组大鼠肾小球MMP-2蛋白、mRNA的表达较C组明显降低,TIMp-2及C—IV蛋白、mRNA明显升高,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,出现糖尿病。肾病（DN）典型的病理改变。DB组MMP-2蛋白、mRNA较DM组表达明显升高（P〈0．01）、TIMP-2和C—IV表达较DM组明显降低（P〈0．01）,病理改变好转。结论苯那普利可能通过逆转糖尿病大鼠肾皮质MMP-2、TIMP-2的表达,降低C—IV的堆积,对糖尿病肾病（DN）起保护作用。     

过表达TPX2对人宫颈癌HeLa细胞侵袭和凋亡的影响

目的 通过TPX2过表达慢病毒载体在人宫颈癌HeLa细胞过表达TPX2基因,在体外研究TPX2对人宫颈癌HeLa细胞侵袭和凋亡的作用及其相关机制.方法 构建TPX2过表达慢病毒载体(LV11-TPX2)及阴性对照(LV11-NC),选取稳定感染过表达慢病毒载体(LV11-TPX2)的HeLa细胞作为过表达组,将稳定感染(LV11-NC)的HeLa细胞作为阴性对照组,未感染病毒的人宫颈癌HeLa细胞作为空白对照组(CON).采用Transwell基底膜侵袭实验测定各组细胞的侵袭能力,流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞凋亡及侵袭相关蛋白质Bcl-2、Bax、Caspase-3、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)及nm23-H1的表达.结果 成功构建TPX2过表达慢病毒载体(LV 11-TPX2),可有效过表达TPX2 mRNA及蛋白质.与对照组比较,TPX2过表达组的HeLa细胞凋亡率明显减少(P＜0.05),穿过Transwell小室基底膜细胞明显增加(P＜0.01).LV11-TPX2感染组HeLa细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2的表达明显上调(P＜0.05),Caspase-3及Bax的表达明显下调(P＜0.05);侵袭相关蛋白质nm23-H1及TIMP-1水平明显下调(P＜0.05),MMP-9水平明显上调(P＜0.05).结论 在宫颈癌细胞过表达TPX2基因后,能抑制细胞凋亡,增强其侵袭能力,可能的机制为在宫颈癌细胞过表达TPX2能诱导凋亡和侵袭相关蛋白Caspase-3、Bax、nm23-H1及TIMP-1水平下调,Bcl-2及MMP-9水平上调.     

来曲唑通过cAMP-PKA信号通路影响子宫肌瘤细胞中MMP-2和TIMP-2的表达

目的 探讨cAMP-PKA信号通路在来曲唑影响子宫肌瘤细胞中MMP-2和TIMP-2表达中的作用.方法 cAMP-PKA信号通路抑制剂H-89（10 μmol/L）处理原代培养的人子宫肌瘤细胞30 min后,来曲唑（10-8、10-7、10-6和10-5 mol/L）处理24、48和72 h.采用实时定量PCR和Western blot分别检测MMP-2和TIMP-2 mRNA和蛋白的表达.结果 来曲唑以浓度和时间依赖的方式下调了人子宫肌瘤细胞中MMP-2 mRNA和蛋白的表达,上调了TIMP-2 mRNA和蛋白的表达（P均＜ 0.05）.H-89部分取消了来曲唑诱导的人子宫肌瘤细胞中MMP-2表达的下调和TIMP-2表达的上调（P均＜ 0.05）.结论 来曲唑通过cAMP-PKA信号通路影响子宫肌瘤细胞中MMP-2和TIMP-2的表达.     

nm23-H1蛋白在鼻咽癌中的表达研究

目的研究nm23-H1蛋白在鼻咽癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法对30例鼻咽癌患者和22例慢性鼻咽炎患者的鼻咽部组织nm23-H1蛋白表达进行分析。结果nm23-H1蛋白在鼻咽癌组中的阳性率为（53．30％）低于慢性鼻咽炎组（90．91％，P〈0．05）；在鼻咽癌患者中，转移组的阳性率为（40．91％）低于非转移组（87．50％，P〈0．05）；nm23-H1蛋白表达未显示与患者年龄、性别相关。结论nm23-H1蛋白表达可能与鼻咽癌的发生、转移有关；nm23-H1蛋白的表达在鼻咽癌的早期诊断和预后观察有一定的参考价值。     

苯丙氨酸对C2C12细胞葡萄糖摄取能力的影响及与mTOR-p70S6K通路的关系探讨

目的 观察苯丙氨酸对小鼠成肌细胞系C2C12葡萄糖摄取能力的影响,以及刺激后细胞内哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）-p70S6K信号通路分子的变化。方法 体外培养C2C12细胞,分化诱导为多核的肌管细胞后进行饥饿处理,然后分别用不同浓度苯丙氨酸（1.25、2.5、5、10、20 mmol/L）处理细胞,以KRB平衡液作为对照。通过检测2-NBDG评价细胞葡萄糖摄取能力。用Western blot方法检测细胞内mTOR、p70S6K、胰岛素受体底物（IRS）-1、蛋白激酶B(Akt)的表达情况。结果 与KRB平衡液对照相比,5 mmol/L亮氨酸使C2C12细胞的葡萄糖摄取能力下降了约30%（P=0.001）,5 mmol/L苯丙氨酸使C2C12细胞摄取葡萄糖的能力上升了约40%（P＜0.01）,且苯丙氨酸的这种促进作用随浓度增大有逐渐增强的趋势。苯丙氨酸对细胞内mTOR Ser2448磷酸化水平无明显影响。除1.25 mmol/L外,其它浓度苯丙氨酸均能抑制p70S6K Thr389的表达。亮氨酸使IRS-1 Ser636/639磷酸化水平表达增高（P＜0.01）,除1.25 mmol/L外,其它浓度的苯丙氨酸均有抑制IRS-1 Ser636/639表达的趋势,但与对照相比差异无统计学意义（P=0.381）。高浓度短时间的苯丙氨酸刺激对C2C12细胞内的Akt Ser473表达无明显影响。结论 苯丙氨酸可能通过减少p70S6K的磷酸化,继而减少p70S6K对IRS-1的刺激作用而使细胞葡萄糖摄取能力增强。但苯丙氨酸对mTOR-p70S6K通路的抑制作用不通过Akt的激活。     

AMPK/STAT1通路参与土木香内酯改善H2O2引起的神经细胞PC12凋亡

目的：研究土木香内酯（ALA）对H2O2诱导神经细胞PC12凋亡的影响。方法：用不同浓度（1、5、10、20、50和100 μmol/L）的ALA处理细胞后进行MTT检测细胞增殖;用不同浓度（1和5 μmol/L）的ALA预先处理细胞后加入H2O2刺激细胞,进行流式和MTT检测细胞增殖情况;设立对照组、H2O2（100 μmol/L）组、ALA（1和5 μmol/L）组,ALA干预H2O2处理的细胞进行细胞流式检测细胞凋亡情况,MTT检测细胞增殖情况,Western blot检测AMPK和STAT1的磷酸化;利用siRNA沉默AMPK表达后再用ALA处理,Western blot检测STAT1的磷酸化的表达。结果：高浓度ALA抑制PC12细胞增殖;与对照组比,经H2O2刺激后PC12细胞凋亡增高;与H2O2组比较,ALA组细胞凋亡明显降低,并呈剂量依赖性;沉默AMPK表达不影响H2O2诱导PC12细胞STAT1的磷酸化表达;在沉默AMPK后再用ALA处理,与单沉默AMPK比较,STAT1的磷酸化的表达差异无统计学意义。结论：ALA可通过AMPK的激活调控H2O2诱导PC12细胞的STAT1的磷酸化表达,从而影响细胞凋亡。