昆明山海棠对CIA HIF-1α的影响

目的:探讨昆明山海棠(THH)对胶原诱导性大鼠关节炎(CIA)大鼠模型中对于低氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响。方法:建立胶原诱导性关节炎(CIA)模型,动态观察关节炎指数(AI)与HE染色关节的病理改变,免疫组化法检测HIF-1α表达。结果:THH的高中低治疗组以及地塞米松治疗组与CIA模型组和正常对照组中的HIF-1α表达有统计学意义(P<0.05)。结论:THH治疗CIA具有明显疗效,提示其作用机制与调节滑膜组织内的HIF-1α的表达有关。     

HIF-1α、VEGF在CIA大鼠模型中的表达与意义

目的制备牛Ⅱ型胶原诱导性大鼠关节炎(collagen Ⅱ-induced arthritis,CIA)模型,探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在类风湿关节炎发病中的作用。方法50只SD大鼠,随机分为对照组与模型组。建立CIA模型,动态观察各项关节炎活动指标,于造模第21、28、35、42天取踝关节行HE染色及HIF-1α、VEGF免疫组化染色,分析两者在CIA中的相关性及与关节炎活动指标、滑膜病理学评分之间的关系。结果CIA大鼠关节滑膜层和滑膜下层均表达HIF-1α、VEGF二者呈明显正相关,r为0.75(P<0.01),第21天阳性表达量最高,随病程进展,表达逐渐下降,与滑膜病理学评分、滑膜增生评分及血管生成评分呈显著正相关,r分别为0.4、0.48、0.50(P<0.05),与炎症浸润评分无明显相关r为0.30(P<0.05)。结论HIF-1α可能通过调控一系列下游靶基因,如VEGF等,促进滑膜增生及血管生成,影响类风湿性关节炎(rheumatoi...     

胶原性关节炎大鼠滑膜病理特征及TNF-α、TGF-β表达的变化

目的观察II型胶原诱导的胶原性关节炎(CIA)大鼠模型滑膜组织病理学特征及相关细胞因子表达水平的变化。方法60只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(n=50),模型组以牛源性II型胶原皮下注射诱导建立CIA模型,造模成功后随机选取10只大鼠进行病理观察并做免疫组化指标TNF-α、TGF-β检测,并与对照组进行比较。结果与对照组比较,模型组大鼠滑膜组织大量炎性细胞浸润、增生。对照组滑膜组织中TNF-α阳性滑膜细胞数呈低表达,且染色浅,模型组呈高阳性表达,深染色,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);对照组滑膜组织中TGF-β表达较活跃,模型组则表达少而染色浅,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论细胞因子网络失衡与CIA大鼠的发病相关。     

龙须藤提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠的影响

目的研究龙须藤乙酸乙酯提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠滑膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的影响,探讨其作用机理。方法建立胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,观察大鼠足趾肿胀度的变化,用免疫组化法检测大鼠踝关节滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果龙须藤乙酸乙酯提取物能抑制大鼠足趾肿胀及滑膜组织中TNF-α、IL-6及IL-8的表达。结论龙须藤乙酸乙酯提取物对类风湿性关节炎有一定的治疗作用,其作用机理是降低滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的表达水平。     

犀角地黄汤对胶原诱导性关节炎大鼠模型滑膜组织中磷脂酶C-γ1表达的影响

目的 探讨大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型形成及应用犀角地黄汤治疗过程中大鼠关节滑膜组织中磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)的表达情况,进一步探讨犀角地黄汤治疗类风湿关节炎的作用机制.方法 SD大鼠构建CIA模型,运用实时荧光定量反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法检测空白对照组、模型组和实验组大鼠在第42天关节滑膜组织中PLC-γ1的表达情况.结果 模型组大鼠关节滑膜组织中PLC-γ1的相对表达量(0.125±0.001)明显高于空白对照组(0.031±0.001)(P＜ 0.01),犀角地黄汤实验组PLC-γ1的相对表达量(0.072±0.001)低于模型组(P＜0.05).结论 犀角地黄汤可降低大鼠关节滑膜组织中PLC-γ1的表达,对类风湿关节炎急性期有一定的治疗作用.     

痹痛康丸对胶原性关节炎大鼠IL-1β的影响

【目的】观察痹痛康丸对胶原性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)大鼠踝关节滑膜白细胞介素1β(IL-1β)的影响,探讨其治疗作用机制。【方法】建立II型胶原加完全弗氏佐剂诱导的大鼠CIA模型,70只Wistar大鼠随机分为7组,分别为痹痛康丸低、中、高剂量组[0.3、3、30 g.(kg.d)-1],尪痹冲剂组3.g(kg.d)-1,甲氨蝶呤片组1.2 mg.(kg.w)-1,以上各组药物溶解于2 ml生理盐水中,1次/d,连续灌胃给药4周。空白对照组及模型组灌服生理盐水2 ml/只。8周后处死大鼠,观察右踝关节滑膜病理改变情况及关节滑膜中IL-1β蛋白表达量的变化。【结果】各用药组除痹痛康丸低剂量组外滑膜组织的病理改变均有不同程度的减轻,IL-1β蛋白的表达量较模型组降低(P<0.05)。【结论】痹痛康丸能有效降低CIA大鼠滑膜炎程度,防止骨破坏或关节重构,有免疫调节作用。     

THH对胶原诱导性关节炎大鼠模型病理评分的影响

目的:探讨昆明山海棠(tripterygium hypoglaucum hutch,THH)对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠模型关节病理评分的影响。方法:60只Wistar大鼠(雌雄各30只),将其随机分为6组:空白组、模型组、地塞米松治疗组以及THH高、中、低剂量治疗组,连续给药30 d,观察大鼠关节病理的改变。结果:给药30 d后,HE染色显示模型组产生多层滑膜细胞,大量炎症细胞和血管翳生成;在3个THH治疗组中中剂量的治疗效果最好,镜下只见2~3层滑膜细胞,少见炎症细胞。结论:HE染色结果显示THH对CIA模型有积极的治疗作用。     

臭氧通过调节HIF-1α-VEGF信号通路治疗类风湿关节炎的实验研究

目的探索臭氧通过调节低氧诱导因子-1α（HIF-1α）-血管内皮生长因子（VEGF）通路对类风湿关节炎（RA）的治疗机制。方法将30只Wistar大鼠随机分为对照组（Con组）、类风湿关节炎组（RA组）、O3治疗组（O3组）,采用弗氏完全佐剂乳化的牛Ⅱ型胶原诱导建立RA大鼠模型。O3组大鼠右膝关节腔注射O3,Con组和RA组局部注射0.9%氯化钠溶液,治疗结束后测量各组大鼠膝关节肿胀率,并检测各组血清、关节液及滑膜组织HIF-1α和VEGF蛋白表达水平,及滑膜组织HIF-1α和VEGFmRNA表达水平。结果与Con组比较,RA组和O3组大鼠膝关节肿胀率明显增高,血清、关节液及滑膜组织HIF-1α和VEGF蛋白表达明显升高（P＜0.05）,滑膜组织HIF-1α和VEGFmRNA表达水平也显著升高（P＜0.05）。与RA组比较,O3组右膝关节肿胀率明显减小（P＜0.05）,关节液及滑膜组织中表达水平明显下降（P＜0.05）,滑膜组织上述因子mRNA表达水平也显著下降（P＜0.05）,但血清中上述细胞因子表达水平无统计学差异（P＞0.05）。结论臭氧可以通过抑制关节内HIF-1α、VEGF的表达水平,调控HIF-1α-VEGF信号通路来治疗类风湿关节炎。     

羟氯喹对佐剂关节炎大鼠滑膜肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨羟氯喹(HCQ)对佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法建立AA大鼠模型,并给予HCQ等治疗5个月,动态观测AA大鼠踝关节病理改变,并以免疫组化法检测滑膜组织中TNF-α的表达.结果治疗8周后泼尼松组及HCQ组关节病理积分均比AA组明显减低(P＜0.01),TNF-α表达水平明显降低,与AA组及萘普生组相比差异有显著性意义(P＜0.01).结论HCQ可明显抑制滑膜组织中TNF-α的表达,减轻关节的炎性反应.     

HIF-1α在类风湿性关节炎组织中的表达及其相关性研究

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在类风湿性关节炎(RA)组织中的表达及其相关性作用。方法 通过组织形态学和免疫学等手段检测,观察Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠模型的关节组织中HIF-1α蛋白的表达情况。结果 Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠的关节滑膜层和滑膜下层均表达HIF-1α,第21天阳性表达量最高,随病程进展,表达逐渐下降,与滑膜病理学评分、滑膜增生评分及血管生成评分呈显著正相关。结论H1F-1α在RA组织中的表达,与炎症严重程度呈正相关,提示HIF-1α对RA的发生发展密切相关,为RA的临床治疗提供了新的思路。     

基于NF-κB、RANK探讨七味通痹口服液对类风湿关节炎大鼠的影响

目的研究七味通痹口服液(QWTB)对胶原诱导关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型的治疗作用及其机制。方法大鼠右侧足趾和尾根部皮下多点注射弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原混合物复制大鼠CIA模型,成模后随机分为模型组,QWTB 12.20、6.10、3.05g/kg 3个剂量组和醋酸地塞米松(0.893mg/kg)组(地米组),另设空白对照组。21d后,在尾根部皮下注射进行激发免疫,14d后处死。观察QWTB对大鼠足趾容积,继发病变,血清中TNF-α、IL-1α、IL-17水平及关节滑膜NF-κB、RANK、RANKL蛋白表达的影响。结果 QWTB 3个剂量均可不同程度地抑制关节炎大鼠足趾肿胀度,减轻继发病变,降低炎性细胞因子和滑膜NF-κB、RANK、RANKL蛋白表达,其中12.20、6.10g/kg剂量组与模型组比较均有显著性差异(P0.05~0.01)。结论 QWTB可以通过下调炎性细胞因子水平,抑制骨损伤,减轻CIA大鼠关节病变。     

青藤碱对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管新生的影响

目的观察青藤碱对Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型大鼠（CIA）低氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）及基质金属蛋白9（MMP-9）的影响,探讨青藤碱对类风湿关节炎（RA）滑膜血管新生的作用机制。方法40 只远交群大鼠,随机选取10 只作为对照组,余30 只大鼠采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂的方法复制关节炎模型。15 d 后造模大鼠随机分为模型组、雷公藤组、青藤碱组,每组10 只。雷公藤组：雷公藤多甙片9.68 mg/（kg·d）灌胃给药;青藤碱组：青藤碱片100 mg/（kg·d）灌胃给药;模型组灌服等体积0.9%氯化钠注射液。1 次/d,共28 d。期间测量大鼠踝关节肿胀度。灌药28 d 后处死大鼠,免疫组织化学法检测关节滑膜组织HIF-1α水平,酶联免疫吸附试验测定血清中VEGF、MMP-9 水平。结果与模型组比较,青藤碱组和雷公藤组大鼠关节肿胀度减轻（p <0.05）;青藤碱组和雷公藤组滑膜组织中HIF-1α 表达降低（p <0.05）;青藤碱组和雷公藤组血清中VEGF、MMP-9 表达降低（p <0.05）。结论青藤碱可降低CIA 踝关节肿胀,疗效与雷公藤多甙相当。其机制可能是通过下调HIF-1α的表达及VEGF、MMP-9水平,从而减少滑膜新生血管生成。     

冬虫夏草对糖尿病肾病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达的影响

目的：观察缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在大鼠糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾组织中的表达及冬虫夏草(Cordyceps sinensis,CS)干预后对其的影响,探讨冬虫夏草的抗缺氧损伤的肾保护机制。方法：健康雄性Wistar大鼠通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制作成糖尿病模型,4周时测定24 h尿蛋白>30 mg/d为DN模型大鼠(n=30),随机分为糖尿病肾病组(DN组,n=15)和冬虫夏草组(CS组,n=15),另取15只正常大鼠作为对照组(NC,n=15)。CS组予CS提取原液5.0 g/(kg?d)灌胃,NC和DN组均予以等量饮用水灌胃,分别于灌胃2,4,6周时随机处死三组大鼠各5只,检测24 h尿蛋白定量、尿β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetyl glucosaminidase,NAG酶)、血清肌酐水平;HE及MASSON染色观察肾脏组织形态学变化;反转录PCR方法检测HIF-1α和VEGF mRNA表达;免疫组织化学方法检测肾组织中HIF-1α及VEGF蛋白的表达。结果：与NC组相比较,DN组肾小管空泡变性明显,肾小球系膜区基质增多,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐显著升高,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均显著增加(均P<0.05),两者的表达均随着病程延长而逐渐增强,且两组HIF-1α与VEGF表达呈正相关(r=0.850,r=0.887,均P<0.05);与DN组相比较,CS组大鼠肾小管病变程度减轻,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐降低,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均下调(均P<0.05),但仍明显高于NC组(P<0.05),但CS治疗第4周、第6周HIF-1α的mRNA及蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论：DN病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达上调,两者呈正相关,提示DN肾组织存在慢性缺氧。CS可通过下调DN肾组织HIF-1α及VEGF的表达起到抗慢性缺氧损伤的肾保护作用。     

洛伐他汀对胶原诱导性关节炎大鼠的抗炎机制探讨

目的：观察洛伐他汀对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的抗炎作用,并探讨可能的作用机制。方法：利用牛II型胶原建立Wistar大鼠CIA模型。结果：洛伐他汀组大鼠踝关节肿胀程度与CIA模型组相比有显著差异,关节炎评分与CIA模型组相比显著降低。洛伐他汀组血清中炎性细胞因子TNF-α的含量、踝关节滑膜组织中RANTES阳性细胞均显著低于CIA模型组。结论：洛伐他汀对CIA大鼠具有抗炎作用,其作用机制可能与抑制踝关节滑膜组织中RANTES的表达有关。     

药用爬山虎对CIA大鼠血清IL-17和关节滑膜细胞NF-κB表达的影响

目的:探讨药用爬山虎对牛II型胶原诱导性关节炎大鼠(CIA)关节滑膜细胞核周因子-κB(NF-κB)表达及血清IL-17水平的影响。方法:将40只6周龄雌性wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、雷公藤多苷对照组和爬山虎治疗组各10只。除空白对照组外,其余各组建立CIA模型,造模第7天开始予爬山虎汤剂和雷公藤水溶液灌胃治疗,连续用药4周,空白对照组和模型对照组灌服等量生理盐水,于末次给药2h后采集血清,处死大鼠,摘取双后肢膝关节分离滑膜,采用ELISA检测血清IL-17的表达,Western-blot检测关节滑膜NF-κB/P65的蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血清IL-17表达增加,爬山虎和雷公藤能够明显降低IL-17的表达(P0.05);模型对照组大鼠关节滑膜细胞NF-κB/P65蛋白水平明显高于空白对照组(P0.05),爬山虎与雷公藤多苷治疗组均能降低CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κB/P65的表达,两组无显著性差异(P0.05)。结论:药用爬山虎能够降低CIA模型大鼠血清IL-17的表达,下调关节滑膜细胞NF-κB的蛋白水平。     

清热化瘀凝胶对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠炎症细胞因子表达的影响

目的通过观察清热化瘀凝胶对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜及血清细胞因子表达的影响,探讨清热化瘀凝胶外敷治疗类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的相关作用机制。方法 50只SD雌性大鼠随机分为清热化瘀凝胶外敷组、雷公藤多苷片口服组、扶他林外敷组、模型组和正常组,每组10只。观察大鼠关节肿胀度,关节病理切片,肝脏、肾脏组织病理切片,采用ELISA法检测血清及滑膜组织中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素1(Ang-1)和白介素1β(IL-1β)表达差异。结果清热化瘀凝胶外敷组CIA大鼠关节肿胀程度明显减轻;与模型组比较,清热化瘀凝胶组显著降低CIA大鼠血清中IL-1β(P 0. 01)、TNF-α(P 0. 001)和Ang-1(P 0. 01)的水平;滑膜组织中IL-1β(P 0. 001)、TNF-α(P 0. 01)、VEGF(P 0. 01)及Ang-1(P 0. 001)较模型组显著下降;关节病理切片显示清热化瘀凝胶可减少炎症细胞浸润、抑制滑膜组织增殖、延缓骨质破坏;肝脏、肾脏病理切片与正常组比较无异常变化。结论清热化瘀凝胶通过降低RA炎症细胞因子水平,抑制滑膜组织增殖,减少滑膜中血管新生和血管翳形成,进而控制RA病情,且安全性良好。     

穴位埋线对CIA大鼠IL-1β、TGF-α及MVD表达的影响

目的通过观察穴位埋线对大鼠胶元诱导型关节炎(CIA)模型血清IL-1β、TNF-α表达及其滑膜新生血管的影响,探讨其对类风湿关节炎(RA)的作用机理。方法建立Ⅱ型胶原诱导大鼠胶原性关节炎模型,造模成功的大鼠随机分为模型组、来氟米特组、穴位埋线治疗组、来氟米特+穴位埋线治疗组。ELISA法血清中IL-1β、TNF-α表达含量变化和SP免疫组织化学染色法滑膜组织MVD计数。结果与模型组比较,各治疗组血清中IL-1β、TNF-α及滑膜组织MVD均明显下降(P0.01),且各治疗组之间比较无统计学差异(P0.05)。结论穴位埋线可能通过降低大鼠血清IL-1β、TNF-α表达而发挥抑制关节滑膜血管新生作用,这可能是姜黄素治疗类风湿关节炎的作用机制之一。     

姜黄素对佐剂性关节炎模型大鼠HIF-1α、VEGF及VEGFR表达的影响

目的 :探讨姜黄素(CUR)对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)表达的影响和CUR治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:40只健康SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、甲氨蝶呤组和姜黄素组。造模9 d后甲氨蝶呤组和姜黄素组分别给予腹腔注射甲氨蝶呤0.5 mg/kg,3 d 1次,连续5次;姜黄素50 mg/kg-1,1 d 1次,连续14 d。第23天引颈处死大鼠,取膝关节滑膜组织,分别采用免疫组织化学染色及PCR技术检测HIF-1α、VEGF及VEGFR的表达。结果 :与正常对照组比较,模型组HIF-1α、VEGF、VEGFR表达明显增加(P0.0l,P0.05);与模型组比较,姜黄素组HIF-1α及VEGFR表达明显减少(P0.01,P0.05)。且佐剂性关节炎大鼠滑膜中HIF-1α与VEGF呈明显正相关关系(r=0.910,P0.01)。结论:姜黄素能够抑制AA大鼠滑膜血管新生,其机制可能与其降低HIF-1α表达而下调靶基因VEGF、VEGFR的表达有关,这可能是其治疗类风湿关节炎的作用机制之一。     

RANKL和M-CSF在CIA大鼠关节滑膜的表达及药物的干预作用

目的初步探讨RANKL和M-CSF在CIA大鼠关节滑膜的表达及T-614、MTX的干预作用。方法通过鸡Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂混合的胶原乳剂免疫大鼠,建立CIA大鼠模型,将CIA大鼠随机分为模型对照组、T-614组、MTX组和T-614+MTX组。药物干预组大鼠分别用T-614、MTX及T-614联合MTX干预3周。关节炎指数(arthritis index,AI)评分评价关节炎程度,HE染色观察踝关节组织形态学变化,X线片观察骨侵蚀情况,高频超声观察踝关节并测量滑膜厚度,Western blot法检测滑膜RANKL和M-CSF表达。结果与正常对照组相比,模型对照组AI评分、病理评分、X线评分、超声下滑膜厚度、关节滑膜RANKL,M-CSF表达均增加(P<0.05);与模型对照组相比,T-614组、MTX组、T-614联合MTX组上述观察指标均降低(P<0.05);与T-614组、MTX组相比,T-614联合MTX组上述观察指标均降低(P<0.05);T-614组和MTX组之间上述观察指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RANKL和M-CSF参与了CIA大鼠关节滑膜病变的发生、发展,T-614、MTX可能通过减少细胞因子RANKL,M-CSF的生成来延缓关节滑膜病变的进展,T-614与MTX具有一定的协同效应。     

电针对佐剂性关节炎大鼠关节滑膜细胞内TAK1表达的影响

目的：观察电针足三里、关元穴对佐剂性关节炎（AIA）大鼠踝关节滑膜细胞内转化生长因子β激活激酶1（TAK1）表达的影响,探索电针对类风湿性关节炎（RA）可能的干预机制。方法40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤（MTX）组、电针组,每组10只。采用Fueund 氏完全佐剂(FCA)法造模。电针组予以电针大鼠关元穴、双侧足三里穴,MTX组予以0.35 mg/kg剂量的MTX灌胃治疗,空白组与模型组每日予以特制大鼠固定器固定后松绑放回笼内饲养。实验期间每3天1次测量大鼠体质量、足爪容积,并对关节炎指数进行评分;采用放射免疫法检测TNF-α、用Western Blot 检测TAK1、NF-κB蛋白表达。实验结束后比较各组大鼠踝关节滑膜滑膜组织中TNF-α,滑膜细胞内TAK1,胞核内NF-κB表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量增长明显缓慢、足趾肿胀明显、关节炎指数明显升高（P<0.01）,滑膜组织内TNF-α显著升高、滑膜细胞内TAK1含量显著升高、胞核内NF-κB表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,电针组大鼠体质量增长较快、足趾肿胀较轻、关节炎指数较低（P<0.05）,滑膜组织中 TNF-α低于模型组、滑膜细胞内 TAK1、NF-κB 表达较低(P<0.05)。结论电针AIA大鼠足三里、关元等穴能够有效抗炎,其干预机制可能与抑制关节滑膜细胞内TAK1的表达,良性调控NF-κB这一炎症信号通路有关。