ADAM28基因原核表达载体的构建和在大肠杆菌中的融合表达

目的:利用消减杂交技术克隆出牙齿发育相关基因ADAM28。方法:本研究为构建ADAM28基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导其表达并纯化出ADAM28蛋白;采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增出ADAM28基因的蛋白编码序列,克隆到中间载体pMD18-TVector中产生pMD18-T-ADAM28,再经双酶切得到ADAM28片段定向克隆到pGEX-4T-1载体中,构建融合表达载体pGEX-4T-ADAM28;在大肠杆菌中利用IPTG进行诱导表达,得到GST-ADAM28融合蛋白,并经SDS-PAGE电泳初步纯化。结果:①成功构建融合表达载体pGEX-4T-ADAM28,并经酶切鉴定、PCR鉴定和测序验证显示插入的ADAM28序列正确,阅读框架完整,未发现突变。②得到初步纯化的GST-ADAM28融合蛋白。经IPTG诱导后出现一条约35.3×103的新蛋白带。结论:ADAM28基因编码蛋白质能够在原核细胞中表达并纯化,为进一步研究该蛋白质的功能打下基础。     

牙齿发育相关基因adam28多克隆抗体的制备及鉴定

目的制备及鉴定抗ADAM28的多克隆抗体。方法采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增出adam28基因的蛋白编码区序列,克隆到中间载体pMD18-T Vector中,再经双酶切得到adam28片段定向克隆到pGEX-4T-1载体中,构建融合表达载体pGEX-4T-adam28,在大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达,得到GST-ADAM28融合蛋白,经过初步纯化及SDS-PAGE电泳,在35300的新蛋白带处直接割胶,作为抗原免疫新西兰大白兔后获取抗体。结果成功构建融合表达载体pGEX-4T-adam28,得到初步纯化的GST-ADAM28融合蛋白,免疫兔子1个月后,获得免疫血清,盐析法纯化得到多克隆抗体。Western印迹结果显示所得到的抗体具有较高的特异性,ELISA分析证实其效价可达1∶16000。结论成功制备出高效价的抗ADAM28多克隆抗体,为进一步研究ADAM28在牙齿发育中的作用和表达分布奠定基础。     

ADAM28基因在牙源性细胞中的表达分布

目的：探讨ADAM28在牙源性上皮和间充质细胞中的表达差异,明确其亚细胞定位情况.方法：采用免疫细胞化学、免疫荧光和RT-PCR技术,从蛋白和基因水平检测ADAM28在人牙乳头细胞（HDPC）、牙囊细胞（HDFC）、牙髓干细胞（HDPSC）、牙周膜细胞（HPDLC）和颈环上皮细胞（HDCLEC）的表达分布.结果：ADAM28在上述五种细胞的胞浆和胞膜上均有强弱不等的阳性表达.结论：ADAM28可能作为一种胞浆蛋白调控着牙源性细胞的增殖与分化,在牙胚发育中起重要作用.     

小鼠牙胚发育过程中collagenⅠ/Ⅲ的表达分布

目的:探讨collagenⅠ、Ⅲ在Balb/c小鼠牙胚发育各期的时间和空间分布特点,及两者在牙齿发育矿化中的作用。方法:用免疫组化方法检测小鼠牙胚发育各期collagenⅠ、Ⅲ的表达、分布。结果:collagenⅢ:出生前E13d小鼠牙胚蕾状期:口腔上皮细胞阳性表达( );E14~17d帽状期:口腔上皮细胞、成釉器星网层细胞表达弱阳性;E18~19d和出生后P1d钟状期与分化期:口腔上皮细胞、成釉器星网层细胞、牙乳头细胞、牙囊细胞表达阳性( );出生后P2~10d牙冠发育成熟期:成釉细胞、釉基质、成牙本质细胞、前期牙本质、牙乳头细胞、牙囊细胞、牙髓组织等均表达阳性( );P10~30d牙根发育成熟期:除上述细胞成分外,上皮根鞘、根周及根尖牙槽骨、牙骨质和牙周膜表达强阳性( )。collagenⅠ:在蕾状期无表达;帽状期:口腔上皮细胞、成釉器星网层细胞表达阳性;钟状期与分化期:口腔上皮细胞、成釉器星网层细胞、牙乳头细胞、牙囊细胞表达阳性;牙冠和牙根发育期:其分布和表达类似于collagenⅢ。结论:鉴于collagenⅠ、Ⅲ的表达和分布,表明它们均参与了牙胚和牙体硬组织的发育形成,但似乎cllagenⅢ的作用比collagenⅠ更为广泛。     

小脑顶核电刺激联合鼠神经生长因子穴位注射对痉挛型脑瘫患儿GMFM评分及认知功能的影响

目的探究小脑顶核电刺激联合鼠神经生长因子穴位注射对痉挛型脑瘫患儿粗大运动功能评分(GMFM)及认知功能的影响。方法选取2016年5月~2017年8月我院98例痉挛性脑瘫患儿,抽签法分组,各49例。对照组予以鼠神经生长因子穴位注射治疗,观察组予以小脑顶核电刺激联合鼠神经生长因子穴位注射治疗,均治疗4周。对比两组临床效果,并采用粗大运动功能测试量表(GMFM)与韦氏儿童智力量表(C-WISC)评估比较两组治疗前、治疗2周后的运动功能及认知功能变化情况。结果治疗4周后观察组总有效率89.80%(44/49)高于对照组71.43%(35/49),差异有统计学意义(P0.05);治疗前两组GMFM、C-WISC评分对比,差异无统计学意义(P0.05),治疗4周后两组GMFM、C-WISC评分均较治疗前提高,且观察组增高幅度大于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论痉挛型脑瘫患儿予以小脑顶核电刺激联合鼠神经生长因子穴位注射治疗疗效确切,可有效提高患儿GMFM与C-WISC评分,改善其运动及认知功能。     

微创穿刺术治疗高血压性脑出血的疗效与护理观察

随着微创技术的进步,微创穿刺术在高血压性脑出血患者的血肿及淤血清除中被越来越多地应用,为探讨该术式的具体临床疗效及护理干预在治疗过程中的作用,作者回顾性分析了105例采取微创穿刺术治疗的高血压性脑出血患者的临床及护理资料,现将分析结果总结如下。     

品管圈活动在提高特诊患者满意率中的应用

目的　探讨品管圈活动前后特诊患者满意率的变化.方法　我科从２０１３年９月开始建立品管圈,确立主题为提高特诊患者满意率.应用科室自制的患者 满意度调查表,随机对２１０名就诊患者进行现况调查,分析影响患者满意度的因素,采取有效措施进行持续改进.结果　经过为期８个月的品管圈活动后,特诊患 者就诊满意率得到明显提高.结论　品管圈活动是提高特诊患者满意率的有效方法.     

~(125)Ⅰ植入治疗源的剂量学参数的Monte Carlo模拟

放射性粒子源125I已被广泛用于前列腺和眼睛的植入治疗中。本文采用EGS5蒙特卡罗代码计算了美国医用物理学协会（AAPM）TG-43U1报告中推荐的型号为6711125I近距治疗源（活性区长取0.28cm）的剂量学参数,如剂量率常数、径向剂量函数和各向异性函数。剂量率常数为0.959cGy/h/U,与TG-43U1推荐值和Dolan等已发表的值相差在2.0%以内 径向剂量函数数值与二者均符合较好 随着角度和距离的增加,各向异性函数值数值与二者的复合程度趋佳。并给出了实用性较强的径向剂量函数的拟合公式。     

吲达帕胺致心电图T波改变误诊为冠心病

1病例资料 男,53岁。因体检诊断为冠心病2月余入院。患者2个月前单位体检行心电图检查示：窦性心律,心率84／min;I、Ⅱ、aVL、V4-V6导联T波低平,T波顶部微凹或呈双峰;Ⅲ、aVF导联T波双相,aVR导联T波平坦;V1～V3导联T波直立,但V3导联T波的振幅较V1、V2明显偏低;Q-T间期为0．36s。     

心脏磁共振在系统性硬化症亚临床心脏受累中的应用

目的通过心血管磁共振来描述和识别亚临床系统性硬化症原发性心脏受累(SSc-PHI), 明确疾病严重程度及血清生物标志物与亚临床SSc-PHI是否存在相关性。方法回顾性分析2022年1月至12月在解放军总医院住院的系统性硬化症(SSc)患者。共有26例无心血管疾病或肺动脉高压病史的SSc患者进行了3 T增强心血管磁共振检查, 测量包括native T1、细胞外容积(ECV)、晚期钆增强(LGE)、T2 mapping和左室容积功能, 以及肌钙蛋白T和N端脑钠肽前体。结果在26例患者中有13例(50.0%)患者观察到LGE, 提示局灶性纤维化, 弥漫型SSc组的T2 mapping显著高于局限型SSc(P=0.009)。所有患者的左室容积和功能均在正常范围内, 但弥漫型SSc组的左室收缩末期容积显著高于局限型SSc组(P=0.021)。有LGE局灶性纤维化患者的改良Rodnan皮肤评分(mRSS)显著升高(P=0.019)。logistic回归分析证实了mRSS和LGE之间的关联(OR=1.224, P=0.037)。多因素分析中, T2 mapping与病程呈负相关, 与弥漫型SSc及指...