丹参对肾间质纤维化大鼠肾组织CTGF及p27的影响

目的 探讨丹参对肾间质纤维化(RIF)大鼠肾结缔组织生长因子(CTGF)及细胞周期素依赖性激酶抑制剂(p27)的影响.方法 将48只清洁级Wistar雄性大鼠随机分为四组:正常组,假手术组,模型组,丹参治疗组,建立大鼠RIF模型后,给予丹参治疗.取出四组大鼠的左肾组织,用免疫组化法检测CTGF和p27在肾组织的表达.结果 丹参能减少CTGF和p27的表达,抑制肾脏细胞异常的肥大,减少细胞外基质(ECM)合成;丹参治疗组与假手术组和正常组大鼠CTGF和p27肾小管阳性细胞数比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CTGF和p27在梗阻性RIF发生、发展中起着重要的作用.     

双环醇对肾间质纤维化大鼠肾组织中Caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨双环醇对肾间质纤维化(RIF)大鼠肾组织中Caspase-3蛋白表达的影响及其对肾脏保护作用的可能机制。方法选择13周龄健康雄性Sprague-Dawley大鼠90只,体质量200~250 g,随机分成假手术组、模型组和双环醇组,每组30只。模型组和双环醇组大鼠采用单侧输尿管梗阻法制作RIF模型,假手术组大鼠仅分离左侧输尿管。造模后,双环醇组大鼠立即给予双环醇灌胃(200 mg·kg-1),假手术组和模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,每日1次,连续21 d。光学显微镜观察大鼠肾脏外观及形态;苏木精-伊红染色和Masson染色观察肾间质病理学改变,并对肾小管间质损伤及RIF相对面积进行评价;免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中Caspase-3蛋白表达。结果假手术组大鼠术后左肾形态无明显改变;模型组和双环醇组大鼠左肾肿胀,肾实质变薄,皮髓质界限模糊不清,肾盂及肾盏明显扩张。假手术组大鼠造模后第7、14、21天肾小管间质损伤程度、RIF相对面积及肾组织中Caspase-3蛋白表达水平两两比较差异无统计学意义(P>0.05);模型组和双环醇组大鼠造模后第14、21天肾小管间质损伤程度、RIF相对面积、肾组织中Caspase-3蛋白表达高于造模后第7天(P<0.05),造模后第21天肾小管间质损伤程度、RIF相对面积、肾组织中Caspase-3蛋白表达高于造模后第14天(P<0.05)。模型组和双环醇组大鼠造模后第7、14、21天肾小管间质损伤程度、RIF相对面积、肾组织中Caspase-3蛋白表达水平均高于假手术组(P<0.05);双环醇组大鼠术后第7、14、21天肾小管间质损伤程度、RIF相对面积、肾组织中Caspase-3蛋白表达水平均低于模型组(P<0.05)。大鼠肾组织中Caspase-3蛋白表达与肾小管间质损伤程度、RIF相对面积呈显著正相关(r=0.915、0.889,P<0.01)。结论双环醇可能通过抑制RIF大鼠肾组织中Caspase-3蛋白表达而对肾组织起保护作用。     

丹参对糖尿病大鼠肾组织VEGF表达的影响及其保护作用

目的探讨丹参对糖尿病大鼠肾组织血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响及其保护作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丹参治疗组。给药8周后,观察各组大鼠血糖（BG）、体质量（BW）、肾质量/体质量（KW/BW）、血尿素氮（BUN）、胆固醇（CHO）、内生肌酐清除率（Ccr）、尿白蛋白排泄率（UAER）,行肾组织HE染色,观察肾组织病理形态学改变,采用免疫组化方法分析肾组织VEGF蛋白的表达情况。结果糖尿病模型组各生化指标与正常对照组存在明显差异（P〈0.01）;丹参治疗组较模型组KW/BW降低（P〈0.05）,Ccr明显升高（P〈0.01）,BUN、CHO、UAER明显降低（P〈0.01）。糖尿病模型组较正常对照组肾组织VEGF蛋白表达明显升高（P〈0.01）;丹参治疗组较模型组肾组织VEGF蛋白表达降低（P〈0.05）。结论丹参对糖尿病大鼠肾功能具有保护作用,其机制可能是调节肾组织VEGF的表达,从而减轻肾脏病理损害,发挥其保护作用。     

MiR-132在大鼠肾间质纤维化模型中的表达及意义

目的分析miR-132在大鼠肾间质纤维化（RIF）模型中的表达情况,探讨其在RIF发生、发展中的可能机制。方法将24只大鼠随机分为假手术对照（sham）组和模型组,每组12只。模型组采用单侧输尿管结扎法建立大鼠RIF模型,sham组仅游离左侧输尿管而不结扎、切断输尿管。两组大鼠于术后第1、3天采用颈椎脱臼法分批处死,获取肾脏组织行Masson染色评估RIF。采用高通量测序检测模型组大鼠术后1、3d手术侧与非手术侧中miR-132的表达情况,采用实时荧光定量PCR检测术后1、3d模型组与sham组miR-132的相对表达量。应用Targetsan5.1数据库预测miR-132的靶基因,对其进行GeneOntology和Pathway分析,获得有显著意义的靶基因。结果sham组肾脏病理未见异常,模型组术后第1天肾间质基本正常,术后第3天肾间质轻度水肿,肾小球正常,提示早期RIF。模型组大鼠术后第1、3天手术侧肾组织miR-132表达上调。相对于sham组,模型组术后1、3d均miR-132表达上调。GeneOntology和Pathway分析后获得9个显著意义靶基因,其中2个与上皮间质细胞转分化相关,2个参与细胞凋亡,1个与细胞外基质降解相关。结论在肾间质纤维化早期miR-132表达上调,miR-132可能通过激活上皮间质细胞转分化过程、参与细胞凋亡,减少细胞外基质蛋白降解等参与RIF的发生、发展。     

丹参注射液对梗阻性肾病大鼠肾功能及TGF-β1表达的影响

[目的]观察丹参注射液对梗阻性肾病大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）表达、肾功能及肾病理组织学的影响。[方法]采用半结扎法建立尿路梗阻性肾病大鼠模型,观察丹参注射液治疗性给药对尿路梗阻性肾病大鼠肾组织TGF-β1表达（RT-PCR法）、血清肌酐（碱性苦味酸法）、尿素氮（尿素酶法）及肾病理组织学（常规He染色）的影响。[结果]1、大鼠尿路梗阻3d,模型对照组血清肌酐、尿素氮均升高,其中尿素氮升高明显,有显著性差异,但血肌酐升高不明显;丹参治疗组结果类似。术后3d模型对照组和丹参治疗组血清肌酐、尿素氮比较,均P〉0.05。大鼠尿路梗阻14d血清肌酐、尿素氮持续升高。丹参治疗组血清肌酐、尿素氮均降低,其中尿素氮降低明显,但仍高于假手术组。大鼠尿路梗阻56d,模型对照组血清尿素氮在高位水平,而血肌酐变化不明显;丹参治疗组结果类似。2、与假手术组比较,模型组肾TGF-β1mRNA呈高表达趋势;丹参治疗组各时点对肾组织TGF-β1mRNA表达未见明显影响,但趋势显示丹参治疗给药可能有轻微抑制TGF-β1mRNA表达。3、病理结果：模型组肾小球及肾小管呈固缩性改变,肾小管广泛坏死;丹参治疗组肾小球及肾小管呈固缩性改变,肾小球个别坏死。[结论]尿路梗阻性肾病大鼠长期注射丹参注射液有助于减少肾小球坏死、改善肾脏功能。     

丹参注射液对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护

目的 探讨丹参注射液对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的影响。方法 采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型。24只雄性Wistar大鼠，随机分为假手术组、模型组和丹参组。术后第10d肾组织做HE、Masson染色及TGF—β1，α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫组化检测。结果 丹参组显著改善梗阻侧肾组织病理变化，下调转化生长因子-β1（TGF-β1）和α-SMA表达。结论 丹参注射液对梗阻性大鼠肾间质纤维化有保护作用。     

黄芪丹参有效组分不同比例配伍对肾纤维化模型大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:研究黄芪丹参有效组分不同比例配伍对肾纤维化模型大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响。方法:将56只雄性SPF级大鼠随机分为正常组(n=8)、造模组(n=48)。造模组建立大鼠肾纤维化模型,分为模型组(n=8)、黄芪丹参药对组分1∶1配伍组(n=10)、黄芪丹参药对组分1∶2配伍组(n=10)、黄芪丹参药对组分2∶1配伍组(n=10)、福辛普利组(n=10)。造模后第2天开始各组给予相应干预措施,共干预14 d。观察大鼠肾组织病理变化,检测大鼠肾功能,并采用免疫组织化学方法检测大鼠肾组织上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果:黄芪丹参有效组分不同剂量配伍各组对肾纤维化大鼠肾脏组织病理变化有不同程度的缓解作用。与正常组比较,模型组的Scr升高,差异有统计学意义(P<0.05),说明造模成功。与模型组比较,不同剂量配伍治疗组肾组织E-cadherin表达灰度值水平均明显降低(P<0.05),其阳性表达增强。而福辛普利组、组分配伍1∶1组肾组织α-SMA表达灰度值均明显升高(P<0.05),其阳性表达降低。结论:黄芪丹参药对有效组分1∶1配伍可以通过抑制肾小管上皮细胞转分化(EMT)而延缓肾纤维化的进展,其抑制转分化作用与福辛普利相当;其余不同剂量配伍对肾小管上皮细胞转分化抑制作用效果不明显。     

丹参对左肾静脉狭窄大鼠肾脏淤血性损伤的保护作用

目的 探讨丹参治疗左肾静脉狭窄大鼠肾脏过氧化损伤和纤维化的效果,为临床药物治疗胡桃夹综合征提供实验依据.方法 将大鼠分为4组,假手术组,模型组、丹参治疗组和手术治疗组.采用左肾静脉不全结扎的方法建立大鼠左肾静脉狭窄模型,术后7周开始对丹参治疗组进行灌胃治疗,手术治疗组同时解除狭窄.术后12周处死动物.肾组织行病理学检查.肾皮质制备匀浆检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SoD)活性.RT-PCR法检测肾皮质转化生长因子-βl(TGF-βl)和I型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)mRNA表达.结果 模型组大鼠左肾皮质MDA含量较假手术组显著增高.SOD活性显著降低,左肾皮质TGF-βl、PAI-1mRNA表达增加,出现病理学损伤.丹参治疗组和手术治疗组MDA含量降低,SOD活性增高,TGF-βl和PAI-1mRNA表达减少,组织病理学损伤减轻.其中手术治疗组改善程度更显著.结论 丹参可通过消除氧自由基,提高抗氧化能力,减少组织纤维化而保护肾脏.虽然其疗效不如手术治疗显著,但结合胡桃夹综合征病变的实际情况考虑,也不失为一种较好的选择.     

丹参多酚酸盐对慢性肾功能衰竭大鼠肾功能和肾内氧耗的影响

目的:观察丹参多酚酸盐(Salvianolate)对慢性肾功能衰竭大鼠肾功能和肾内氧耗的影响。方法:通过5/6肾切除复制大鼠慢性肾功能衰竭模型。将造模成功的大鼠根据血清肌酐水平随机分为模型组、丹参多酚酸盐组、科素亚加蒙诺对照组,同时设立假手术组。干预60 d后,检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、肾血流量,肾动脉和肾静脉血气,计算残余肾内氧耗量。结果:①与假手术组比较,治疗前各组血清BUN、Scr明显升高(P<0.01),组间比较无统计学差异(P>0.05)。②治疗后,假手术组和模型组较治疗前血清BUN、Scr水平无明显变化(P>0.05);与模型组比较,丹参多酚酸盐组大鼠血清BUN、Scr水平下降(P<0.05),内生肌酐清除率上升(P<0.05),肾内氧耗较模型组明显降低(P<0.01),肾静脉血流量升高(P<0.05),血红蛋白升高(P<0.05),丹参多酚酸盐组与科素亚加蒙诺组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:丹参多酚酸盐可通过提高残余肾组织的肾血流量、降低残余肾内氧耗、改善残余肾组织能量代谢以改善肾功能、延缓慢性肾脏疾病的进展。     

丹参对大鼠肾问质纤维化肾组织TSP-1、VEGF及TGF-β1表达的影响

目的观察丹参提取液对肾纤维化模型大鼠肾组织血小板反应蛋白1（TSP-1）、血管内皮生长因子（VEGF）及转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法用单侧输尿管结扎方法复制大鼠肾纤维化模型,同时给予丹参提取液灌胃预防,并设立空白对照组、模型对照组,分别于造模2周后取大鼠肾脏组织,分别采用Masson染色观察各组大鼠肾组织病理变化,并采用免疫组织化学方法测定肾间质TSP-1、VEGF、TGF-β1的表达。结果丹参组VEGF表达明显增加,而TSP-1和TGF-β1的表达量明显低于模型组（P〈0．05）;丹参组和空白组比较,二者对TSP-1、TGF-β1及VEGF表达的影响无显著差异（P〉0．05）。结论丹参提取液可能通过调控TSP-1、TGF-β1及VEGF的表达,从而干预肾纤维化的发生。     

高迁移率族蛋白B1在肾间质纤维化中作用

目的：观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在肾小管间质纤维化大鼠模型中的表达,探讨肾炎舒对肾小管间质纤维化的疗效及作用机制。方法：将36只大鼠随机分为假手术组、模型组、肾炎舒治疗组[378mg／（kg·d）],采用单侧输尿管结扎术（UUO）制作肾小管间质纤维化大鼠模型,术后第7天及第14天分别处死各组中6只大鼠。检测各组大鼠肾小管间质损害程度及组织中HMGB1、转化生长因子-B1（TGF．B1）的表达。结果：模型组HMGB1、TGF—β1的表达及肾小管间质损伤指数明显高于同期假手术组（P〈0．05）,肾炎舒治疗组HMGB1、TGF-β1的表达及肾小管间质损伤指数明显低于同期模型组（P〈0．05）。结论：HMGB1可能协同TGF-β1促进肾小管间质纤维化,肾炎舒胶囊可抑制肾组织中HMGB1及TGF-β1的表达,对肾间质纤维化有一定的防治作用。     

健脾补肾方对腺嘌呤所诱发大鼠肾间质纤维化的治疗作用

[目的]观察健脾补肾方对腺嘌呤所诱发大鼠肾间质纤维化的治疗作用.[方法]灌胃给予200mg/(kg.d)腺嘌呤24d建立大鼠肾间质纤维化模型,将实验动物分为正常对照组、模型对照组、西药组、健脾补肾方小、大剂量组.建立模型后治疗第4周末检测大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、Ca和P含量.取肾组织行HE和直接红染色,观察肾组织的病理变化和纤维组织增生程度,采用免疫组织化学SP法观察肾组织中α-SMA和Ⅳ型胶原的表达.[结果]与西药组比较,健脾补肾方大剂量组大鼠血清BUN与Scr值明显降低,Ca与P平衡改善(P<0.01);西药组及健脾补肾方小、大剂量组肾组织病理改变及间质纤维化减轻,胶原纤维、α-SMA和Ⅳ型胶原阳性面密度明显低于模型对照组(P<0.01,P<0.001).[结论]健脾补肾方可改善肾功能,减轻腺嘌呤诱发大鼠肾间质纤维化,其机制可能与通过抑制肌成纤维细胞的增殖和活化,减少细胞外基质合成和分泌有关.     

阿托伐他汀对肾间质纤维化的作用及机制

目的 探讨阿托伐他汀对肾间质纤维化的作用及其机制。方法 以单侧输尿管梗阻（U U O）的Wist ar大鼠为肾间质纤维化模型,将54只大鼠分为假手术组（S O R）、U U O组及U U O＋阿托伐他汀组（治疗组）,分别给予相应处理。于术后第1、2、3周观察3组大鼠肾小管损伤程度和肾间质纤维化指数;术后第2、3周采用免疫组化染色法,检测大鼠肾脏组织转化生长因子-B（T GF-B）、S mad2蛋白、纤维连接蛋白（F N）及结缔组织生长因子（CT GF）的表达水平。结果 第1、2、3周U U O组、治疗组肾小管损伤程度及肾间质纤维化指数均大于S O R组,治疗组肾小管损伤程度及肾间质纤维化指数均小于UUO组,差异有显著性（F=9 0.09～11.231,P〈0.05）。第2、3周3组间TGF-B1、S mad2、F N及CT GF水平比较,U U O组最高,S OR组最低,差异有显著性（F=10.365～11.775,P〈0.05）。结论 阿托伐他汀能显著减轻U U O导致的肾间质损伤和纤维化倾向,其作用机制与抑制T GF-B1等表达有关。     

益肾化瘀方拮抗肾间质纤维化作用有效部位筛选

目的:筛选益肾化瘀方拮抗肾间质纤维化作用的有效部位。方法:将益肾化瘀方煎煮液采用不同极性的有机溶剂进行萃取分离,分别得到益肾化瘀方石油醚部位、益肾化瘀方乙酸乙酯部位、益肾化瘀方正丁醇部位和水饱和部位。同时将大鼠随机分为假手术组、模型组、益肾化瘀方不同提取部位组、缬沙坦组。除假手术组外,其余6组复制单侧输尿管梗阻模型,比较各给药治疗组在不同时间点对大鼠肾功能、肾脏病理及肾组织中羟脯氨酸含量的影响。结果:大鼠梗阻后均出现明显的肾小管萎缩和肾间质纤维化,并伴有血清尿素氮、血肌酐、胱抑素C水平的升高,且随梗阻时间的延长而逐渐加重。给予益肾化瘀方4个不同极性部位提取物及缬沙坦治疗后,大鼠肾间质细胞炎性浸润、肾小管萎缩和肾间质纤维化病变逐渐减轻,肾功能明显改善,肾组织中羟脯氨酸含量降低。而在改善大鼠肾脏病理损伤、改善肾功能、降低肾组织羟脯氨酸含量方面益肾化瘀方正丁醇部位组疗效与缬沙坦组相当,显著优于其余3个极性部位。结论:益肾化瘀方正丁醇部位为本方发挥抗肾间质纤维化作用的有效部位。     

甘草酸二胺联合前列地尔对大鼠肾间质纤维化的影响

目的 观察甘草酸二胺联合前列地尔对大鼠肾间质纤维化的影响.方法 建立单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,将120只大鼠随机分为假手术组、模型组、甘草酸二胺组、前列地尔组、甘草酸二胺加前列地尔组,每组24只.术后第7、14、21天每组各处死8只大鼠,测定其血清肌酐(CREA)水平,HE染色后观察肾间质变化,免疫组化法观察肾间质转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的表达,酶联法测定血清TGF-β1、CTGF浓度.结果 模型组在术后第14、21天时血清CREA、TGF-β1、CTGF浓度及TGF-β1、CTGF在肾组织的表达较假手术组均显著增加(P均＜0.01);甘草酸二胺加前列地尔组的肾间质损伤指数及TGF-β1、CTGF在肾间质的表达和血清中TGF-β1、CTGF的浓度均明显低于其他治疗组(P均＜0.01).结论 甘草酸二胺联合前列地尔能改善UUO所致的肾间质纤维化,其机制可能与下调肾组织的TGF-β1、CTGF表达有关.     

复方丹参对急性脊髓损伤后大鼠脊髓神经功能的影响

目的研究复方丹参对大鼠急性脊髓损伤后脊髓神经功能的影响。方法成年雄性健康SD大鼠25只,随机分配到中药治疗组、地塞米松治疗组、模型对照组、假手术组、正常对照组。采用脊髓打击型造模方法(改良Allen’s法)。BBB评分法测定大鼠脊髓神经功能情况。结果①实验组大鼠在急性脊髓损伤后脊髓神经功能均有不同程度改善;②与模型对照组比较,中药组与地塞米松组大鼠神经功能恢复较好,其中复方丹参的效果优于地塞米松。结论复方丹参可有效改善大鼠脊髓损伤后的神经功能恢复情况。     

丹参对胃黏膜损伤的保护作用

目的探讨丹参对噪音应激大鼠胃黏膜损伤的保护作用,为临床用药提供一定的理论依据。方法采用工厂实际噪音为施加因素,诱发大鼠产生逃避、烦躁不安等心理应激从而复制应激性胃黏膜损伤模型。丹参组大鼠舌下静脉注射丹参注射液。观察胃黏膜的病理改变并计算溃疡指数（UI）,测定胃液pH值,比色法测定胃黏膜组织及血清中的一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量,用2,6-二氯酚靛酚法测定胃组织线粒体琥珀酸脱氢酶活性。结果与噪音组相比,丹参组的UI明显降低（P〈0.01）;胃液pH值明显升高（P〈0.05）;血清和胃黏膜组织NO、MDA水平均明显降低（P〈0.05）,血清SOD活力升高;胃组织线粒体琥珀酸脱氢酶的活性明显增高（P〈0.01）。结论丹参可能通过抑制胃酸分泌、清除氧自由基、抑制脂质过氧化、提高胃组织线粒体琥珀酸脱氢酶活性等而发挥对噪音应激大鼠胃黏膜损伤的保护作用。     

山莨菪碱对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化的抑制

目的：探讨山莨菪碱对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化（RIF）的影响及机制。方法：将27只SD大鼠随机分为假手术组（SHAM,S组）、模型组（UUO,U组）及山莨菪碱治疗组（A组,14mg·kg^-1·d^-1）。U组和A组采用单侧输尿管结扎术（UUO）制作肾小管间质纤维化的动物模型。术后第11天处死大鼠,肾组织HE染色及Masson染色后进行图像分析,评定各组肾小管间质损害及肾间质纤维化状况;用免疫组织化学方法检测各组大鼠肾间质的转化生长因子-β1（TGF—β1）的表达。结果：U组肾小管间质损伤指数（TDI）及肾间质纤维化指数（TFI）均明显高于S组（P〈0．01）;U组TGF—β1的表达均明显高于S组（P〈0．01）;A组的上述各指标分别较U组降低（P〈0．05）;TDI、TFI分别与TGF—β1的表达呈正相关。结论：山莨菪碱对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化具有一定的抑制作用,其机制可能是抑制肾间质细胞TGF—β1的表达而在一定程度上减轻了RIF。