玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎中的应用

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一,在保存未成熟卵细胞、成熟卵细胞、原核期胚胎、卵裂早期胚胎及囊胚方面均取得成功,并相继有临床妊娠分娩的报道。本文总结了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎方面的应用。     

胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用(附成功分娩1例报道)

目的 探讨胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用效果。方法 运用玻璃化冷冻技术保存75例患者的397个胚胎，复苏13例69个胚胎，并根据患者的情况进行胚胎移植。结果 69个胚胎中，丢失3个，存活26个，存活率为39，4％。复苏后8例患者因胚胎质量差未移植，另外5例患者共移植了14个胚胎，其中1例获得单胎妊娠，分娩1名健康女要。结论 玻璃化冷冻技术简便、经济，并能够有效地冻存人类早期胚胎，可成为胚胎冷冻方法的另一个选择。     

人类卵母细胞玻璃化冷冻的研究进展

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一,玻璃化冷冻可避免冻融过程中细胞内冰晶的形成,降低细胞损伤,在人类配子、胚胎的冷冻保存中取得了不少进展.近十几年来,玻璃化冷冻技术已成功应用于成熟卵母细胞、未成熟卵母细胞等方面的冷冻保存并取得成功.该技术操作简单、迅速快捷,正逐渐成为人类辅助生殖技术中重要的应用技术之一.本文综述了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞方面的研究进展.     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用

目的 探讨玻璃化冷冻技术在人类早期胚胎冻存中的临床应用价值.方法 回顾性分析本中心822个冷冻胚胎复苏周期,依据胚胎冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组(490个周期)和程序化冷冻组(332个周期),比较两组胚胎复苏率、复苏胚胎完整率、胚胎种植率、临床妊娠率等数据.结果 玻璃化冷冻复苏组与程序化冷冻复苏组胚胎复苏率分别为98.8％和82.9％,复苏胚胎完整率分别为96.8％和63.1％,胚胎种植率分别为32.0％和18.1％,临床妊娠率分别为53.9％和33.1％,两组数据比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适合于人类早期胚胎的冷冻保存.     

玻璃化冷冻技术在人卵裂期胚胎冷冻保存中的应用结局分析

低温冷冻保存技术是人类辅助生殖技术的重要组成部分,胚胎冷冻技术的应用大大提高了临床治疗的效果、丰富了临床治疗方案[1,2].目前主要应用的是胚胎冷冻技术,包括程序冷冻和玻璃化冷冻.程序冷冻技术已相对成熟和稳定并已得到广泛应用,而玻璃化冷冻技术作为一项新技术备受关注.     

玻璃化冷冻技术在全胚胎冷冻中的应用价值

目的：观察采用玻璃化冷冻技术行全胚胎冷冻后解冻移植患者的临床结局,并与同期新鲜周期移植患者相比较,探讨玻璃化冷冻技术在全胚胎冷冻并行复苏移植中的应用价值。方法：全胚胎冷冻组为体外受精(IVF)未移植患者40个周期,新鲜周期组为同期体外受精及胚胎移植（IVF-ET）患者300例,对2组的平均移植胚胎数、优质胚胎数、子宫内膜厚度、雌二醇（E2）水平、临床妊娠率进行比较。结果：2组之间在平均移植胚胎数、优质胚胎数、子宫内膜厚度方面的差异均无统计学意义（P＞0.05）;新鲜周期组的E2水平明显高于全胚胎冷冻组（P<0.05）, 临床妊娠率明显低于全胚胎冷冻组（P<0.05）。结论：玻璃化冷冻技术是一种简便、可靠、高效的胚胎冷冻技术;对于符合要求的患者,全胚胎冷冻并适时行冻胚移植是可行的胚胎移植策略,值得临床深入研究和推广。     

抗冷冻蛋白Ⅲ对小鼠胚胎冷冻保护的作用

目的将抗冷冻蛋白III(AFPIII)应用于小鼠2-细胞期胚胎玻璃化冷冻保存,观察其对细胞微丝骨架结构和冷冻复苏后发育潜能是否有保护作用。方法收集小鼠2-细胞期胚胎1 200枚,随机分为新鲜对照组、玻璃化冷冻组和添加AFPIII玻璃化冷冻组(AFPIII终浓度为500 ng/mL),每组400枚,其中200枚胚胎进行复苏后囊胚培养,200枚进行细胞微丝的免疫荧光染色,比较各冷冻组胚胎复苏存活率和其后的囊胚形成率以及各组微丝完整胚胎比率。结果添加AFPIII玻璃化冷冻组胚胎复苏率高于玻璃化冷冻组,差异有统计学意义(P<0.05)。新鲜对照组和添加AFPIII玻璃化冷冻组囊胚形成率、微丝完整胚胎比率均高于玻璃化冷冻组,差异有统计学意义(P<0.05);新鲜对照组和添加AFPIII玻璃化冷冻组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AFPIII对小鼠2-细胞期胚胎玻璃化冷冻有保护作用。     

小鼠胚胎玻璃化冷冻的研究进展

玻璃化冷冻是继常规冷冻方法之后发展起来的一种冷冻方法,它操作简单且不需要高精度的冷冻仪。玻璃化冷冻的效果与玻璃化溶液的种类、冷冻方法及胚胎的不同品种及时期有关。本文综述了近年来有关胚胎玻璃化冷冻的研究进展。     

不同胚胎冷冻方法对人类早期胚胎解冻后的复苏效果及临床结局的影响

目的 比较玻璃化冷冻与程序化冷冻对人类早期胚胎解冻后复苏效果及临床结局的影响.方法 辅助生殖技术获取的剩余可利用人类胚胎2 884枚,其中采用玻璃化冷冻复苏666个周期,解冻胚胎1 516枚、复苏1 383枚、移植胚胎1 375枚;程序化冷冻复苏506个周期,解冻胚胎1 368枚、复苏1 090枚、移植1 077枚.比较两种方法的复苏效果及临床结局.结果 玻璃化冷冻组胚胎复苏率、胚胎完整率分别为92.02％、92.11％,高于程序化冷冻组的79.68％、69.63％(P＜0.05);两组种植率、临床妊娠率、周期取消率、多胎妊娠率、早期流产率、新生儿胎龄、早产率、新生儿出生体重、出生缺陷率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 玻璃化冷冻较程序化冷冻有更高的胚胎复苏率及胚胎完整率,胚胎利用率高,两种冷冻方法的临床结局相似,适用于人类胚胎的冷冻.     

玻璃化冷冻法保存人类胚胎干细胞

[目的]探讨玻璃化冷冻方法保存人类胚胎干细胞的效率.[方法]冷冻保存人类胚胎干细胞,按冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组和慢速冷冻组,比较两组解冻后人类胚胎干细胞的细胞复苏率、克隆生长与分化情况,并比较分析解冻后的与未经冷冻的胚胎干细胞的生长、分化情况,鉴定解冻后人类胚胎干细胞的全能性.[结果]玻璃化冷冻组与慢速冷冻组解冻后的细胞复苏率分别为81.9%和22.8%(P＜0.001).慢速冷冻组解冻后克隆生长较玻璃化冷冻组缓慢且更易分化.两组未分化的胚胎干细胞继续培养的生长与分化情况一致.玻璃化冷冻组解冻后第6代人类胚胎干细胞染色体核型正常,SSEA-4、SSEA-3阳性,表达OCT-4基因.人类胚胎干细胞来源的畸胎瘤包含了来源于3个胚层的组织细胞.[结论]玻璃化冷冻是保存人类胚胎干细胞的有效方法,解冻后的干细胞在继续培养过程中仍可保持其正常核型和全能性.     

玻璃化冷冻在卵巢过度刺激综合征全胚胎冷冻中的应用

目的比较慢速程序化冷冻法(慢速法)和玻璃化冷冻法(玻璃化法)对卵巢过度刺激综合征全胚胎冷冻分裂期胚胎发育潜能的影响。方法选择为避免过度刺激而行全胚胎冷冻的不孕患者162例,按其冷冻方法的不同,分成慢速程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,并对其随后进行首次解冻移植的胚胎复苏率、胚胎种植率、妊娠率和多胎妊娠率进行分析。结果玻璃化冷冻组72例胚胎解冻后,其溶解率、复苏率、种植率、妊娠率、多胎妊娠率分别为7.84%、96.08%、52.38%、69.44%和50.00%,慢速程序化冷冻组90例胚胎解冻后,上述指标分别为17.79%、90.38%、30.32%、52.22%和19.15%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冷冻法能够更好地保存胚胎复苏后的发育潜能,更适合卵巢过度刺激综合征患者胚胎的冷冻保存。     

玻璃化冷冻与慢速程序冷冻对人ICSI的D3胚胎的效果观察

目的 　比较冷冻环玻璃化冷冻法与慢速程序冷冻法对人ICSI的D3冷冻胚胎复苏的效果。　方法 　将接受卵母细胞浆内单精子注射-胚胎移植（ICSI-ET）患者的取卵周期移植后剩余的D3胚胎分别进行慢速程序冷冻法或冷冻环玻璃化法冷冻 ,比较胚胎复苏后的存活率、妊娠率等指标。　结果 　玻璃化冷冻复苏101个周期 ,411个胚胎、存活392个（95.4%）,种植率18.2%,临床妊娠45例(44.6%) ,其中 3例流产（6.7%）。慢速程序冷冻57个复苏周期 ,234 个胚胎、存活185 个（79.1% ）, 种植率15%,临床妊娠15例 （26.3%）。玻璃化冷冻法的胚胎复苏存活率、完整胚胎率高于慢速程序冷冻法（P<0.05）;种植率高于慢速程序冷冻,但差异无统计学意义。结论 玻璃化法的冷冻复苏率比传统的慢速程序冷冻法高,更适于人类ICSI的D3胚胎的冷冻保存。     

玻璃化冷冻法对冻融胚胎移植周期结局的影响

目的:探讨玻璃化冷冻法对冻融胚胎移植周期结局的影响.方法:对324个玻璃化冷冻人卵裂期胚胎复苏周期和146个程序化慢速冷冻胚胎复苏周期进行分析,比较2组冷冻胚胎复苏后的存活率、完整率、种植率、临床妊娠率、孕周、新生儿身高及体质量等指标.结果:玻璃化冷冻组的胚胎完整率、临床妊娠率均高于程序化慢速冷冻组(83.24％ vs...     

玻璃化冷冻技术在人类胚胎中的应用价值

目的探讨玻璃化冷冻技术在人类胚胎中的应用价值。方法选择2014年3月~2016年2月在我院生殖中心做试管婴儿的264例不孕不育患者,经患者知情同意后,将实施体外受精-胚胎移植术患者卵裂期胚胎和囊胚符合冷冻标准的胚胎进行玻璃化冷冻保存。根据患者情况解冻胚胎移植,观察胚胎复苏后的临床妊娠效果。结果玻璃化冷冻74个周期,解冻胚胎149枚,解冻后存活胚胎147枚,存活率98.66%;种植胚胎56枚,种植率38.10%;临床妊娠42例(单胎27例,双胎14例,宫外孕1例),临床妊娠率为56.76%。结论玻璃化冷冻法是人类胚胎保存的优选方法,获得了理想的复苏率、种植率和妊娠率。     

玻璃化与程序化两种不同胚胎冻融方法的临床应用效果比较

目的探讨玻璃化与程序化冻融胚胎的临床应用价值。方法回顾分析广西壮族自治区人口和计划生育研究中心的609个胚胎冷冻周期,其中366个程序化胚胎冻融周期与243个玻璃化冻融周期,比较两种不同冻融方法的胚胎复苏率、胚胎移植率、胚胎种植率、临床妊娠率等指标。结果玻璃化冷冻法与程序化冷冻法比较,其胚胎复苏率（94.75%,74.13%）、解冻移植率（97.94%,87.98%）、种植率（28.88%,16.94%）和临床妊娠率（42.86%,30.75%）,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适于人类胚胎的冷冻保存。     

单胚胎玻璃化冷冻对小鼠胚胎体外发育的影响

目的:比较单胚胎玻璃化冷冻与慢速冷冻对小鼠分裂期胚胎损伤和体外发育的影响,探讨使用玻璃化冷冻保存大量胚胎的可行性。方法:选择8-细胞胚胎随机进行改良的玻璃化和慢速冷冻,复苏后培养至囊胚孵出,计数胚胎复苏率、卵裂球死亡率、囊胚形成率、细胞团数、孵出率,并进行组间比较分析。结果:玻璃化冷冻组复苏率、卵裂球死亡率、囊胚形成率、孵出率、细胞团数分别为100%、12.7%、75.7%、66.4%、112,慢速冷冻组分别为87.1%、31.0%、35.5%、58.7%、78,除囊胚孵出率其余各指标两组间差异均具有统计学意义。结论:单胚胎玻璃化法冻存小鼠分裂期胚胎复苏后细胞成活率高,结构完整,更好的保持了胚胎的发育潜能。     

Straw-top玻璃化与程序化冷冻小鼠8-细胞胚胎效果的比较

目的比较慢速程序化法与玻璃化法冷冻小鼠8-细胞胚胎的效果。方法将小鼠卵母细胞行体外受精后培养至8-细胞,分别采用慢速程序化法与玻璃化法进行冷冻,解冻后比较两组胚胎存活率及囊胚形成率。结果慢速程序化冷冻法解冻后的胚胎存活率为79.6%,囊胚形成率为70.7%;玻璃化冷冻法解冻后的胚胎存活率为94.9%,囊胚形成率为89.9%,胚胎存活率与囊胚形成率均显著高于前者（均P〈0.01）。结论在进行小鼠8-细胞胚胎冷冻时,玻璃化法冷冻效果较慢速程序化法效果好。     

D3卵裂期胚胎玻璃化冷冻技术在IVF实验室中的应用

目的探讨玻璃化冷冻技术在人类卵裂期胚胎冻存中的应用价值。方法回顾性分析本中心261个冷冻胚胎复苏周期,比较2种冷冻方法的胚胎存活率、完好率、妊娠率和种植率等数据。结果玻璃化冷冻组的存活率(97.11%)、完好率(89.02%)和种植率(23.12%)显著高于程序化组(91.31%、63.73%、16.31%)(P<0.05),而妊娠率和平均年龄、平均移植胚胎数、平均内膜厚度两组间无统计学差异(40.26%vs40.22%、31.3±5.3vs32.2±5.5、2.25±0.55vs2.27±0.70、8.9±1.1vs9.1±1.6)(P>0.05)。结论玻璃化冷冻是卵裂期胚胎保存的优选方法。     

小鼠胚胎的冷冻保存

1972年Whittingham等和Wilmut分别在超低温条件下冻存小鼠胚胎获得成功。20年来,先后研究出常规冷冻法、玻璃化法和快速冷冻法,已有十五种动物胚胎的冻存获得成功。这些方法和技术的出现极大地推动了低温生物学、畜牧业生产及医学的发展。胚胎冷冻保存现已成为实验动物长期保种的重要手段之一。应用冷冻胚胎技术建立实验动物胚胎库(embryo banking)可有效地防止种群的遗传漂变(genetic dreft)。遗传资源丢失和污染。     

两组冷冻保护剂对卵裂期胚胎玻璃化冷冻效果的研究

目的：评价两组玻璃化冷冻保护剂对卵裂期胚胎的冷冻效果。方法以体外受精-胚胎移植周期患者受精后第3天废弃胚胎为实验对象,共102枚胚胎入选,随机分为乙二醇＋丙二醇（EG＋PROH）组52枚,乙二醇＋二甲基亚砜（EG＋DMSO）组50枚。比较观察两组玻璃化冷冻保护剂对卵裂期胚胎冷冻解冻后胚胎的复苏效果。结果玻璃化冻融后两组在复苏率上无显著差异,但在完整胚胎复苏率和卵裂球复苏率上EG＋PROH组显著高于EG＋DMSO组（P＜0.05）。结论对于卵裂期胚胎的玻璃化冷冻,选用EG＋PROH作为冷冻保护剂可取得较好的效果。