IIFT法检测血清抗-PLA2R抗体诊断特发性膜性肾病的效应

目的：探讨间接免疫荧光试验（IIFT）法检测血清抗-PLA2R抗体对诊断特发性膜性肾病（IMN）的敏感性和特异性。方法：收集2016年1月至2017年7月间在温州医科大学附属第一医院肾内科经肾活检诊断的104例肾小球疾病患者,其中成人IMN 80例、拟诊的继发性膜性肾病（SMN）7例和其他病理类型17例。抽取清晨空腹血样,按照血清抗-PLA2R抗体的检测方法分IIFT法组和ELISA法组,2组分别设部分SMN和其他病理类型病例作为对照。结果：IIFT法检测血清抗-PLA2R抗体40例,其中33例IMN血清抗-PLA2R抗体阳性26例,灵敏度为78.8%;2例SMN均阴性;5例其他病理类型中仅1例狼疮性肾炎IV型可疑阳性,其余4例阴性;IIFT法的特异度为85.7%（6/7）。ELISA法检测血清抗-PLA2R抗体64例,其中47例IMN患者中37例血清抗-PLA2R抗体阳性,灵敏度为78.7%;在5例SMN中,慢性乙型病毒性肝炎合并不典型膜性肾病1例和结肠癌合并IMN 1例阳性,另外3例阴性;12例非膜性肾病均阴性;ELISA法的特异度为94.1%（16/17）。结论：在成人IMN的诊断价值上,IIFT法检测血清抗-PLA2R抗体的敏感性和特异性与ELISA法基本相同。     

成人特发性膜性肾病肾组织M型磷脂酶A2受体1抗原的检测

目的检测在成人特发性膜性肾病患者肾组织中M型磷脂酶A2受体1（PLA2R1）抗原的阳性率及其与特发性膜性肾病关
系。方法选取经肾活检证实的108例肾小球疾病患者,其中包括41例特发性膜性肾病、2例乙型肝炎病毒相关性膜性肾病、8
例V型狼疮肾炎、27例IgA肾病、19例微小病变性肾病、5例轻度系膜增生性肾小球肾炎和6例局灶节段性肾小球硬化。应用间
接免疫荧光法检测患者肾组织中PLA2R1抗原。结果41例特发性膜性肾病患者中35例肾组织PLA2R1抗原阳性,阳性率为
85.37%。其中PLA2R1沿着肾小球毛细血管襻呈细颗粒状沉积。在V型狼疮性肾炎、乙型肝炎病毒相关性膜性肾病及其他肾
小球疾病肾组织中均未发现PLA2R1抗原沉积。特发性膜性肾病PLA2R1阳性患者与PLA2R1阴性患者相比较,年龄、血肌酐、
血清白蛋白、24 h尿蛋白定量均无统计学差异（P>0.05）。结论在成人特发性膜性肾病患者肾组织中应用间接免疫荧光法证实
PLA2R1抗原的阳性率为85.37%,PLA2R1阳性与阴性患者在临床表现上无统计学差异。
     

特发性膜性肾病治疗中抗M型磷脂酶A2受体抗体的临床意义和指导价值

目的 观察特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)患者免疫治疗中血清抗M型磷脂酶A2受体(M-type phospholipase A2 receptor antibody,anti-PLA2R)抗体的表达情况及与疗效相关性。方法 选取2017年1月至2019年1月期间收治100例经肾活检确诊IMN患者,通过间接免疫荧光法对患者血清抗antiPLA2R抗体进行检测,依据血清抗anti-PLA2R抗体的检测结果分为抗anti-PLA2R抗体阳性组(研究组,n=68)、抗anti-PLA2R抗体阴性组(对照组,n=32),患者均予以激素结合环磷酰胺方案进行治疗。比较分析治疗前后两组患者血清白蛋白、24 h尿蛋白、血肌酐、肾小球滤过率(eGFR)及抗anti-PLA2R抗体转阴情况。结果 治疗3～12个月后研究组患者24 h尿蛋白水平相比对照组显著更高(t=2.563、2.581、7.990、8.982,P=0.012、0.000、0.000、0.000);治疗3～12个月后研究组患者血清白蛋白水平相比对照组显著更低(t=9.248、12.001、13.410、16.226,P=0.000、0.000、0.000、0.000);研究组患者治疗6个月后缓解率相比对照组显著更低(χ2=9.224,P=0.002);研究组患者治疗12个月后缓解率相比对照组显著更低(χ2=18.301,P=0.000);研究组患者治疗12个月后复查抗antiPLA2R抗体提示阳性35例,阳性率51.47%;两组治疗后不良反应率比较差异无统计学意义(χ2=0.000,P=1.000)。结论 血清抗anti-PLA2R抗体检测阳性患者的免疫治疗效果相比检测阴性者更差,血清抗anti-PLA2R抗体检测有助于判断IMN患者病情与临床治疗效果。     

M型磷脂酶A_2受体和Ig G4与特发性膜性肾病相关性的研究进展

膜性肾病是一种自身免疫性肾小球疾病,是成人肾病综合征的主要病因。肾组织M型磷脂酶A_2受体(PLA_2R)及其血清中的特异性抗体是特发性膜性肾病(IMN)的特异性标志物,其可以将IMN与继发性膜性肾病和其他肾小球疾病区分开。目前,尚缺乏诊断及指导IMN治疗的有效标志物,而肾组织PLA_2R抗原及血清中的PLA_2R抗体和Ig G4抗体与IMN的发病密切相关,三者不仅与机体的免疫反应有关,还易于检测。未来,三者联合应用可能对IMN的诊断、疾病进程判断、预测疾病预后及指导IMN的治疗有一定作用。     

免疫指标阳性的不典型膜性肾病临床与病理分析

目的 比较免疫指标阳性的不典型膜性肾病(AMN)与特发性膜性肾病(IMN)的临床特征与病理改变,以助于鉴别诊断和指导治疗。方法 回顾性分析2012年1月~2019年9月肾内科住院临床资料完整患者,其中肾穿刺病理诊断为AMN伴抗核抗体(ANA)等免疫指标阳性的患者28例(AMN组),肾穿刺病理诊断为膜性肾病的IMN患者123例(IMN组),比较两组患者一般资料及临床表现、实验室检查结果、肾脏病理学结果。结果 免疫指标阳性的AMN组患者和IMN患者比较,AMN组发病年龄轻,女性比例高,镜下血尿明显,补体C3、C4降低,伴有白细胞计数降低等血液系统异常,免疫荧光包含C1q的多种免疫复合物沉积比例升高,IMN患者PLA2R阳性比例高。结论 免疫指标阳性的不典型膜性肾病,病理类型类似于Ⅴ型狼疮,临床多表现为肾病综合征,ANA、抗SSA抗体、抗SSB抗体等免疫指标阳性率高,病理免疫荧光多种免疫复合物沉积,特别伴有“满堂亮”,高度提示狼疮性肾炎,应早期给予积极治疗。     

肾组织磷脂酶A2受体和血清抗磷脂酶A2受体抗体在膜性肾病中的诊断价值

目的：检测特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)、继发性膜性肾病(secondary membranous nephropathy,SMN)患者肾组织中磷脂酶A2受体(phospholipase A2 receptor,PLA2R)的表达及血清抗PLA2R 抗体滴度,分析其在诊断IMN中的价值。方法：2014年5月至2015年2月中南大学湘雅二医院肾内科肾活检患者73例, 分为IMN组(n=48)、SMN组(n=17)和微小病变性肾病组(n=8)。采用间接免疫荧光法检测各组肾组织PLA2R及血清抗 PLA2R抗体的表达。结果：IMN组肾组织PLA2R阳性率为91.7%,SMN组阳性率为29.4%,IMN组阳性率、荧光强度明 显高于SMN组(均P<0.05);IMN组血清PLA2R抗体阳性率为85.4%,SMN组阳性率为29.4%,IMN组抗体阳性率及滴度 明显高于SMN组(均P<0.05);微小病变性肾病组肾组织PLA2R抗原及血清抗体均呈阴性。IMN组血清PLA2R抗体滴度 与24 h尿蛋白呈正相关(r=0.432,P<0.01),与血清白蛋白呈负相关(r=–0.307,P<0.05)。结论：检测肾组织PLA2R和血 清PLA2R抗体的表达有助于IMN的诊断及鉴别诊断,监测血清PLA2R抗体滴度有助于评估疾病活跃程度和治疗效果。     

间接免疫荧光法检测抗核抗体的性能验证

目的探讨间接免疫荧光法检测抗核抗体的性能验证。方法对间接免疫荧光法检测抗核抗体的重复性(批内重复性、批间重复性、批批重复性)和准确度进行评价。结果批内重复性、批间重复性、批批重复性及100份患者标本的阴性、阳性符合率均为100%。准确度验证阴性、阳性符合率均为100%,Kappa为1.0。结论本室间接免疫荧光法检测抗核抗体的重复性、准确度能满足实验性能验证的要求。     

尿红细胞THP免疫荧光染色在血尿红细胞来源鉴定中的应用价值

目的探讨尿红细胞T-H蛋白(Tamm-Horsfall protein,THP)免疫荧光检测在鉴定尿红细胞来源中的临床应用价值,并对2004-2007年临床诊断单纯血尿情况进行总结,了解肾性血尿与非肾性血尿的病因和分布特点。方法利用尿红细胞THP免疫荧光染色技术对明确诊断的30例肾小球性血尿和25例非肾小球性血尿标本进行尿红细胞的THP免疫荧光染色,并与病理结果进行比较分析。结果在病理诊断确定的30例肾小球性血尿中,THP检测诊断肾性血尿28例,符合率为93.3%;在临床明确诊断的非肾性血尿25例中,THP检测确定非肾性血尿22例,符合率为88%。病理分析显示肾性血尿中,IgA肾病16例(53.3%),肾小球微小病变10例(33.3%),非IgA肾病的系膜细胞增殖性肾小球肾炎3例(10.0%),局灶阶段性硬化性肾炎1例(3.3%)。结论 THP免疫荧光染色鉴别尿红细胞来源的方法特异性强,是鉴别肾性与非肾性血尿的一种有价值的诊断方法,能够为血尿患者的早期诊断与治疗提供临床依据。     

血清抗M型磷脂酶A2受体抗体对成年人特发性膜性肾病诊治的指导作用

目的 探讨血清抗M型磷脂酶A2受体抗体（anti-PLA2R）对成年人特发性膜性肾病（IMN）诊治的指导作用。方法 选取2014年1月-2015年5月广州中医药大学第一附属医院经肾穿刺活检确诊的肾小球疾病患者58例,其中IMN者31例（IMN组）,非IMN者27例（非IMN组）。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测患者血清anti-PLA2R,判断anti-PLA2R阴阳性。比较IMN组和非IMN组、IMN患者中anti-PLA2R阳性者和阴性者一般资料、实验室检查指标〔24 h尿蛋白总量（UTP）、血清清蛋白（Alb）、血肌酐（Scr）、尿红细胞计数（RBC）（HPF）、尿酸（UA）、血浆凝血酶原时间（PT）、国际标准化比值（INR）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）〕、病理指标（系膜增生、新月体、肾小球硬化、肾小管萎缩/纤维化、肾间质炎性细胞浸润、肾间质血管病变及免疫荧光沉积）和治疗效果。结果 IMN患者中血清anti-PLA2R阳性者21例,阳性率为67.7%;非IMN患者中血清anti-PLA2R阳性者1例,阳性率为3.7%。IMN组年龄、血清anti-PLA2R光密度高于非IMN组,尿RBC（HPF）、PT、INR、APTT低于非IMN组（P＜0.05）;两组性别、平均动脉压（MAP）、UTP、Alb、Scr、UA、FIB比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。血清anti-PLA2R阳性者anti-PLA2R光密度高于阴性者（P＜0.05）;两组性别、年龄、病程、MAP、UTP、Alb、Scr比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。Spearman相关分析结果显示,血清anti-PLA2R光密度与MAP、UTP、Alb、Scr无相关关系（rs=0.097、-0.208、0.266、-0.358,P＞0.05）。血清anti-PLA2R阳性者和阴性者系膜增生、新月体、肾小球硬化、肾小管萎缩/纤维化、肾间质炎性细胞浸润、肾间质血管病变及免疫荧光IgA、C3阳性率比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。血清anti-PLA2R阳性者中5例（23.8%）患者接受免疫抑制剂治疗,血清anti-PLA2R阴性者中5例（50.0%）患者接受免疫抑制剂治疗,两组患者接受免疫抑制治疗率比较,差异无统计学意义（P=0.222）。血清anti-PLA2R阳性者中坚持随访者12例,尿蛋白缓解者4例;血清anti-PLA2R阴性者中坚持随访者7例,尿蛋白缓解者6例。两组尿蛋白缓解率比较,差异有统计学意义（P=0.028）。结论 血清anti-PLA2R可用于IMN与非IMN的鉴别诊断;对于IMN患者,在治疗前、治疗过程中检测该抗体有助于判断疾病发展趋势。     

膜性肾病患者肾组织M型磷脂酶A2受体1抗原及其抗体的表达差异

目的 探讨肾组织M型磷脂酶A2受体1(PLA2R1)抗原及其抗体在膜性肾病(MN)患者中的表达水平.方法 选取经肾活检证实的特发性MN(IMN)58例、乙型肝炎病毒相关性MN(HBV-MN) 15例、V型狼疮性肾炎(V-LN) 17例.采用间接免疫荧光法检测肾组织PLA2R1抗原,并与IgG4共定位.同时检测上述MN患者血清抗PLA2R1抗体.分析肾组织PLA2R1抗原及其抗体在MN中的表达差异,以及PLA2R1阳性与阴性患者临床资料的差异.结果 VLN及HBV-MN患者肾组织及血清中均未发现PLA2R1抗体;在81.03％ IMN患者肾组织检测到PLA2R1抗原,70.69％ IMN患者血清中检测到PLA2R1抗体,PLA2R1抗原与IgG4共定位,均沿肾小球毛细血管袢呈细颗粒状沉积.PLA2R1抗原阳性患者24 h尿蛋白定量高于阴性患者(P＜0.05),并且血清清蛋白低于阴性患者(P＜0.05).结论 肾组织PLA2R1抗原在IMN的诊断中敏感性及特异性均较高,且表达与临床病情严重性明显相关.     

塞来昔布抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成

目的研究塞来昔布对实验性大鼠腹主动脉瘤形成的抑制作用。方法Wister大鼠24只,随机分为2组,实验组12只,对照组12只。实验组术后胃灌注塞来昔布,对照组胃灌注生理盐水。观察两组动脉瘤的形成率和动脉壁组织学改变,并用免疫组织化学技术和分子原位杂交技术检测基质金属蛋白酶2和9的表达。结果 灌注两周后实验组大鼠腹主动脉瘤形成率8.33％,对照组大鼠腹主动脉瘤形成率100％,两组差异有显著意义(P<0.01)实验组大鼠动脉壁组织基质金属蛋白酶2和9的表达为弱阳性或阴性,对照组动脉壁组织中两着表达明显增高。原位杂交检测结果表明两组mRNA表达强度无明显差异。结论塞来昔布能够通过抑制动脉瘤组织中基质金属蛋白酶2和9的表达来阻止动脉壁组织弹力纤维的降解,并抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成。这为人类对小腹主动脉瘤的药物治疗提供了可行性的理论依据。     

MMP-2和TIMP-2在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和组织金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤的侵袭发展、分级之间的关系。方法 采用免疫组化SP法对61例脑胶质瘤标本进行了MMP-2、TIMP-2表达情况的检测。结果 MMP-2在Ⅰ～Ⅱ级组和Ⅲ～Ⅳ级组表达率分别为43．7％和75．9％．TIMP-2在这两组中的表达率分别为28．1％和6．9％，胶质瘤Ⅰ～Ⅱ级组和Ⅲ～Ⅳ级组之间两指标的差异均有统计学意义（P〈0．01），MMP-2与TIMP-2的表达呈显著负相关（P〈0．01）。结论 MMP-2及TIMP-2对胶质瘤恶性程度的评估有重要的意义。     

Ⅱ型糖尿病患者血管并发症与生长激素、性激素水平变化观察

笔者观察了38例Ⅱ型糖尿病(NIDDM)患者血管并发症与生长激素(GH)、性激素(睾丸酮T、雌二醇E_2)的变化关系。结果显示了NIDDM患者GH水平增高,与果糖胺(FM)水平相关。男性NIDDM患者E_2增高,T降低,E_2/T增高,以及血管病变组增高显著;而女性NIDDM患者E_2降低,T变化不显著。提示NIDDM患者血管病变与Gh、性激素的内环境紊乱关系密切。     

克隆T细胞(CTLL_2)适宜培养条件的选择和应用

本文对引进的CTLL_2—IL_2依赖细胞株筛选了适宜生长和增殖条件。在此培养条件下,观察研究了CTLL_2的生长特性,同时用此CTLL_2以MTT比色分析法检测了本室制备的人、大鼠和小鼠等不同来源IL_2的生物活性。实验结果表明,在适宜的条件下,此株CTLL_2对几种来源的IL_2反应都很稳定,用其检测IL_2活性简便、稳定、检测所需时间短、重复性好。为进一步研究IL_2提供稳定的检测系统,并为研究T细胞提供一个良好的培养条件。     

维生素E对老年雌性大鼠血清雌二醇及心肌细胞Bcl-2的影响

目的 以自然衰老的雌性大鼠为模型,探讨维生素E(VE)对心肌细胞保护作用的机制.方法 以注射植物油的老年大鼠为对照,给予低、中、高剂量组(5、15、60mg/kg)模型大鼠经腹腔注射VE注射液,连续注射9周,放免法检测血清雌二醇(E2)水平,免疫组化法观察心肌Bcl-2的表达.结果 各VE实验组E2水平均高于老年对照组,Bcl-2的表达在中、大剂量明显高于对照组.结论 VE可通过增加血清中的E2含量,增加心肌细胞Bcl-2的表达数量,减少心肌细胞的损伤,对心肌细胞起到保护作用.     

老年2型糖尿病患者血尿酸浓度与代谢综合征的相关性分析

目的 探讨老年2型糖尿病患者血清尿酸与代谢综合征的关系。方法 回顾分析首都医科大学附属北京同仁医院内分泌科2018年1月至2020年12月住院的612例老年2型糖尿病患者,其中合并代谢综合征(metabolic syndrome, MS)组439例,不合并MS(non-metabolic syndrome, NMS)组173例。比较两组基本临床资料及血清尿酸浓度;比较不同代谢综合征组分的尿酸浓度;使用Person相关法分析血尿酸与MS各组分因子之间的关系;使用Logistic回归模型,进行血尿酸与MS关系的多因素分析;使用受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线观察血尿酸预测MS的作用,并筛选截断值。结果 MS组血清尿酸浓度显著高于NMS组(P<0.05),随着MS组分数目增加,尿酸浓度升高;Person相关分析结果显示,尿酸与高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol, HDL-C)相关(r=-0.233,P=0.000);多因素Logistic回归分析结果显示,尿酸(u...     

MMP-2、TIMP-2的表达与骨巨细胞瘤复发的相关性

目的研究骨巨细胞瘤组织中基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2)及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子-2(Tissue inhibitor of metalloproteinase-2)的表达与肿瘤血管形成和关系。方法用免疫组化SP法检测45例骨巨细胞瘤组织中MMP-2、TIMP-2的表达情况,以CD31标记检测微血管密度(MVD),计算肿瘤复发组和非复发组MMP-2/TIMP-2的比值,分析这些指标与骨巨细胞瘤预后的关系。结果骨巨细胞瘤组织有高水平的MMP-2、TIMP-2和CD31表达。复发组表达MMP-2、MMP-2/TIMP-2比值以及MVD均显著高于非复发组,但与组织学分级无关。MMP-2与MVD呈正的直线相关。结论MMP-2/TIMP-2比值升高与骨巨细胞瘤的复发以及肿瘤血管形成有关。     

舒喘灵对晚孕家兔血浆PGI_2和TXA_2代谢物含量的影响

采用放射免疫测定法观察了舒喘灵对晚孕家兔血浆前列腺环素(PGI_2)和血栓素(TXA_2)含量的影响。实验结果证明,静脉注射舒喘灵(1.0～2.0mg/kg)均可使6-keto-PGF_(1α)的含量明显升高。与给药前相比分别增加29.5±8.2％和47.2±11.3％,经统计处理差异有非常显著性意义(P<0.01)。说明舒喘灵有剂量依赖性增加PGI_2的作用。用同样方法检测用药前后血浆TXB_2的含量未见明显改变。证明在本实验条件下舒喘灵不影响TXB_2的生成。6-keto-PGF_(1α)与TXB_2的比值明显升高(P<0.05),对改善妊娠期母胎血流动力和血液流变特性是非常有益的。     

安宫牛黄丸对脂多糖致急性肺损伤大鼠肺组织Nrf2蛋白表达的影响

目的 探讨安宫牛黄丸对脂多糖引起的急性肺损伤的保护机制.方法 将40只SD大鼠按随机数字表法分为对照组(Control组,n=10)、脂多糖组(LPS组,n=10)、脂多糖+安宫牛黄丸组(LPS+AG组,n=10)和安宫牛黄丸组(AG组,n=10).采用一次性腹腔注射脂多糖30 mg/kg建立大鼠急性肺损伤模型.分别检测各组大鼠肺湿重/干重比、支气管肺泡灌洗液蛋白浓度和白细胞计数、肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量、肺组织内转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)水平.结果 LPS+AG组肺组织SOD活性为(325.67±7.85)kU/g,明显高于LPS组的(298.75±6.25)kU/g,差异有统计学意义(P<0.05).MDA、INF-α含量分别为(1.89±0.35)μmol/L、(35.21±3.12)ng/g,均低于LPS组的(2.78±0.41)μmol/L、(41.52±4.87)ng/g,差异均有统计学意义(P<0.05).LPS+AG组肺组织Nrf2蛋白表达为(0.87±0.19),明显高于LPS组的(0.34±0.11),差异有统计学意义(P<0.05).结论 安宫牛黄丸对脂多糖诱发的急性肺损伤具有保护作用,可能与其能激活肺组织Nrf2表达有关.     

降脂膏对高脂大鼠血液流变学的影响

目的:研究降脂膏(JZG)对高脂大鼠一氧化氮/内皮素、前列环素/血栓烷B_2及血液流变学的影响。方法:用高脂乳剂喂饲40d以形成大鼠高脂血症及动脉粥样硬化模型,同时给药组igJZG40、60、80/kg,测定血中NO、ET-1、6-keto-PGF_(1a)、TXB_2及血液流变学各指标。结果:JZG对正常及高脂大鼠血清NO水平有一定升高,明显降低ET-1水平,大剂量能显著升高、6-keto-PGF_(1a)含量,有利于维持6-keto-PGF_(1a)-PGF_1/ TXB_2平衡;可降低全血比粘度、全血还原比粘度、血浆比粘度、降低RBC聚集指数、压积,缩短RBC电泳时间,并能降低纤维蛋白原含量,对二磷酸腺苷诱导的正常大鼠血小板聚集,亦有一定的抑制作用。结论:JZG改善高脂大鼠血液流变学异常、恢复NO、ET-1、6-keto-PGF_(1a)、TXB_2平衡,可能是其抗动脉粥样硬化作用的机制之一。