逍遥散对慢性应激大鼠HPA轴负反馈调节功能的影响

目的：研究中药复方逍遥散及糖皮质激素受体（GR）阻滞剂米非司酮（RU-38486）对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴的负反馈调节功能。方法：健康雄性Wistar大鼠随机分为5组,模型组、地塞米松（DEX）组、RU-38486组、逍遥散组、Ru-38486联合逍遥散组。除模型组外,其余各组大鼠每天均在慢性应激刺激前2h腹腔注射DEX（0.1mg／kg）,然后各组大鼠均给予慢性应激刺激,共21d。第21天,各组大鼠麻醉后,腹腔主动脉取血2mL,分离血清,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠血清皮质酮水平。结果：模型组大鼠血清皮质酮浓度显著高于其余各组（P〈0.05）,RU-38486组大鼠血清皮质酮浓度显著低于其余各组（P〈0.01）。结论：RU-38486可能通过作用于海马神经元细胞的GR受体而抑制HPA轴的负反馈功能;甲药复方逍遥散也可抑制HPA轴的负反馈功能,但其作用机制尚需进一步研究。     

柴疏四君汤对肝郁脾虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴变化的调整作用

目的：观察肝郁脾虚证大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质（hypothatamic—pituitary—adrenocoritcal,HPA）轴的变化及疏肝健脾方的干预作用。方法：采用慢性束缚＋饮食失节＋过度疲劳的复合因素复制肝郁脾虚证大鼠模型,模型动物连续给予疏肝健脾方药（柴疏四君汤）2周,观测大鼠血浆皮质醇（cortisol,COR）、促肾上腺皮质激素（adrenocorticotrophic hormone,ACTH）、促肾上腺皮质激素释放激素（corticotrophin releasing hormone,CRH）及下丘脑CRH含量变化。结果：模型动物COR、CRH含量显著增加,血浆ACTH含量明显降低;柴疏四君汤能显著降低COR、CRH含量,明显增加ACTH含量。结论：肝郁脾虚证模型动物HPA轴功能出现明显异常,柴疏四君汤对HPA轴有显著的调节作用。     

健脾化湿通络法对佐剂性关节炎大鼠HPA轴功能的影响

目的观察佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠血清ACTH、CORT水平及下丘脑CRHmRNA、大脑皮质GRmRNA的表达,研究AA大鼠HPA轴的功能变化及中药干预机制。方法将84只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、MTX组(甲氨蝶呤组)、TPT组(雷公藤多苷片组)、XFC低、中、高剂量组(新风胶囊低、中、高剂量组),每组12只。除正常对照组外,向每只大鼠右足跖皮内注射FCA0.1 mL致炎,复制佐剂性关节炎大鼠模型,致炎后第19天开始分组处理30d。采用ELISA法检测各组大鼠血清ACTH、CORT水平,RT-PCR法检测各组大鼠下丘脑CRHmR-NA、大脑皮质GRmRNA的表达。结果AA大鼠血清ACTH、CORT、大脑皮质GRmRNA表达显著升高(P0.01),下丘脑中CRHmRNA表达显著降低(P0.01);XFC治疗组能显著降低血清ACTH、CORT水平(P0.01),下调大脑皮质GRmRNA表达(P0.01),上调下丘脑CRHmRNA表达(P0.01)。结论AA大鼠存在CRH分泌调节受损或下丘脑水平生物合成不足,健脾化湿通络方药通过降低血清ACTH及CORT水平,下调大脑皮质GRmRNA表达,上调下丘脑CRHmRNA表达,改善AA大鼠HPA轴功能紊乱,起到抗炎抗免疫的作用。     

电针对POCD模型中老龄大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及认知功能的影响

[目的]观察手术创伤应激反应对术后认知功能的影响,探讨电针对术后认知功能障碍（postoperation cognitive dysfunction,POCD）干预效应的下丘脑-垂体-肾上腺轴（Hypothalamic-pituitary-adrenocortical Axis,HPA轴）调节机制。[方法]将100只雌性中老龄SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和药物组,后三组又分为1d、3d、7d三个亚组,每组10只。采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质酮（CORT）水平,利用morris水迷宫检测电针对大鼠认知功能的改善作用。[结果]POCD模型组动物血清中ACTH、CORT和CRH水平较正常组有显著升高（P〈0.05或P〈0.01）;与模型组相比电针组和药物组血清中ACTH、CORT和CRH水平显著下降（P〈0.05或P〈0.01）,电针组和药物组大鼠在原平台象限停留时间较之模型组均有显著升高（P〈0.05或P〈0.01）。[结论]手术引起的创伤性应激反应可能是POCD诱发机制之一,电针可通过调节HPA轴对POCD产生治疗作用。     

宁肠汤对肠易激综合征大鼠HPA轴的调节作用

目的：研究心理应激法诱导IBS大鼠模型及宁肠汤对神经内分泌功能变化的调节作用。方法：以慢性束缚应激加夹尾刺激作为心理应激原诱导IBS大鼠模型。采用放免法检测模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）功能，观察宁肠汤的调节作用。结果：慢性束缚应激加夹尾刺激诱导IBS大鼠HPA轴兴奋性升高，皮质醇（Cor）、促肾上腺皮质激素（ACTH）含量明显升高（P〈0．01）。而宁肠汤能降低IBS大鼠Cor、ACTH的含量（P〈0．05），抑制HPA轴的兴奋性。结论：宁肠汤对心理应激致IBS大鼠的神经内分泌功能紊乱有一定的调节作用。     

白松片对大鼠慢性应激抑郁模型的抗抑郁实验研究

目的：探讨慢性应激抑郁模型大鼠神经生化、神经内分泌的变化及白松片对其的干预作用。方法：60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（NC组）、模型对照组（MC组）、氟西汀对照组（FC组）和白松片治疗组（BST），每组15只。采用长期轻度不可预见性应激＋孤养复制大鼠抑郁模型，用高效液相色谱仪法检测海马5-羟色胺（5-HT）、谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）含量；放射免疫方法测定大鼠血浆促肾上腺皮质素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）的水平；应用逆转录聚合酶联反应方法测定大鼠下丘脑和大脑皮质CRH mRNA表达水平；免疫组织化学法测定海马脑源性神经营养因子、酪氨酸羟化酶的表达。结果：与NC比较，模型大鼠海马5-HT，GABA含量显著降低；血浆CRH，ACTH，CORT及海马Glu含量增加；脑内CRH mRNA表达显著升高（P〈0．01）；与MC组比，BST组和FC组大鼠海马5-HT，GABA含量升高（P〈0.01，或P〈0.05）；血浆CRH，ACTH，CORT及海马Glu含量降低；脑内CRH mRNA表达下降（P〈0．01）。结论：慢性轻度不可预见性应激可使大鼠神经内分泌、神经生化发生异常改变，白松片对此具有一定调节作用。     

雌、雄大鼠去势对HPA轴分泌功能影响的比较

目的 观察去势手术后雌、雄大鼠在低性激素状态下下丘脑—垂体—肾上腺（HPA）轴功能的变化,证实性激素可对HPA轴的功能产生影响,并分析这种影响是否存在性别差异和时长效应。方法 选用SPF级8周龄SD大鼠80只（雌雄各半）,体重180～220g,采用完全随机设计法,利用随机数字表将其分为雄性模型组、雄性对照组、雌性模型组、雌性对照组,每组20只大鼠,适应性饲养一周后行去势手术,于造模后第3周及第13周心尖取血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT）含量并进行统计分析。结果 经检测造模第3周雄性模型组大鼠血清CRH、CORT含量显著低于对照组（P<0.01）,血清ACTH含量低于对照组（P<0.05）;雌性模型组大鼠血清CRH、CORT含量均低于对照组（P<0.05）,血清ACTH含量有下降趋势。造模第13周,雄性模型组大鼠血清CORT含量显著低于对照组（P<0.01）,其他激素含量变化不明显;雌性模型组大鼠血清CORT含量低于对照组(P<0.05),其他激素含量变化不明显。雌、雄模型组大鼠造模后第13周与第3周组内相比CRH、ACTH、CORT的含量均无统计学差异（P>0.05）。结论 无论雌、雄,去势均可造成大鼠HPA轴功能的紊乱,表现为外周血CRH、ACTH、CORT水平下降,雄激素对雄鼠HPA轴的影响要大于雌激素对雌鼠的影响。推测雄激素可能更加有利于上述三种激素的产生。当雌、雄大鼠处于稳定的低性激素状态,其HPA轴分泌功能不随着大鼠周龄的增长而发生改变。     

左旋精氨酸对糖尿病大鼠的肾脏保护作用

目的：探讨左旋精氨酸（L—arginine,L—Arg）对链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制。方法：建立STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病模型组（DM组）和DM4周后L—Arg治疗组（L—Arg组）,并以正常组作对照。观察8周后,测定各组大鼠尿白蛋白排泄率（UAER）、血肌酐（SCr）和血尿素氮（BUN）,光镜观察肾组织形态。检测血清和肾皮质中氧化亚氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）含量,测定肾脏线粒体膜电位及肿胀度。结果：与DM组相比,L—Arg组大鼠UAER,SCr,BUN显著降低（P〈0．05）,肾脏病理形态得到一定改善;血清和肾皮质中NO及SOD含量显著升高（P〈0．01,P〈0．05）,MDA显著降低（P〈0．05）;肾脏线粒体膜电位显著升高（P〈0．05）,肿胀度趋势增强。结论：左旋精氨酸对糖尿病大鼠。肾脏的保护作用可能与增加NO合成,同时保护肾脏线粒体的功能有关。     

花生油对2型糖尿病大鼠海马CA1区神经生长因子及胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的通过观察2型糖尿病大鼠海马CA1区神经生长因子（NGF）和胆碱乙酰转移酶（ChAT）表达的改变,研究花生油对2型糖尿病大鼠海马神经元NGF及ChAT表达的影响,探讨花生油在防治糖尿病脑病中的作用。方法 60只健康雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组（C组）、2型糖尿病组（T2DM组）、2型糖尿病给予2 mL花生油组（T2DM＋2 mL组）及2型糖尿病给予5 mL花生油组（T2DM＋5 mL组）。其中C组给予正常饮食,糖尿病组大鼠给予高脂饮食喂养,2个月后,按25 mg/kg体质量腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制成2型糖尿病模型,T2DM组、T2DM＋2 mL组及T2DM＋5 mL组大鼠继续给予高脂饮食。糖尿病造模1个月后处死全部大鼠,行脑冰冻切片,用免疫组织化学方法检测各组大鼠海马CA1区NGF和ChAT的表达。结果 （1）T2DM组大鼠海马CA1区NGF表达比C组明显降低（P〈0.05）,T2DM＋2 mL组及T2DM＋5 mL组大鼠海马CA1区NGF表达均明显高于未给予花生油的T2DM组（P〈0.05）。（2）T2DM组大鼠海马CA1区ChAT表达显著低于C组（P〈0.05）,T2DM＋2 mL组和T2DM＋5 mL组大鼠海马CA1区ChAT表达均明显高于未给予花生油的T2DM组（P〈0.05）。结论 2型糖尿病大鼠海马CA1区神经生长因子表达降低,胆碱能神经元数量减少,这可能是2型糖尿病脑病发生的原因之一。花生油能增加2型糖尿病大鼠海马区内神经生长因子表达,促进胆碱能神经元存活,表明花生油具有一定的保护大鼠糖尿病脑病的作用。     

穴位埋线对慢性疲劳大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴激素水平的影响

目的：探讨穴位埋线对慢性疲劳大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴（HPA-axis）相关激素的影响。方法：采用悬吊冷水游泳复合应激的方法复制慢性疲劳大鼠模型,埋线组在造模的同时给予双侧肝俞、脾俞、肾俞埋线;通过morris迷宫实验、鼠尾悬挂实验、力竭游泳实验进行行为学检测;采用放免法检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）的浓度。结果：（1）模型组大鼠空间学习记忆力下降、力竭游泳时间缩短、悬挂不动时间延长,下丘脑CRH、血浆ACTH和CORT浓度明显升高,与正常组比较有统计学意义（P〈0.01）。（2）穴位埋线对疲劳大鼠的行为学、HPA轴相关激素有良性调节作用,与模型组比较有统计学意义（P〈0．01）;结论：穴位埋线能够抑制下丘脑CRH、血浆ACTH、CORT的过度分泌,以纠正异常的HPA轴功能,达到治疗CFS目的。     

艾灸疗法对慢性疲劳鼠行为学变化及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴相关激素的影响

目的：探讨艾灸疗法调节慢性疲劳（chronic fatigue syndrome,CFS）的作用机制。方法：采用悬吊冷水游泳复合应激的方法复制CFS大鼠模型,艾灸组在复制模型同时艾灸双侧肝俞、脾俞、肾俞;通过Morris迷宫实验、鼠尾悬挂实验、力竭游泳实验进行行为学检测;采用放射免疫法检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（corticotrophin releasing hormone,CRH）、血浆促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropic hormone,ACTH）、皮质醇（cortisol,CORT）水平。结果：①模型组大鼠空间学习记忆力显著下降、力竭游泳时间显著缩短、悬挂不动时间显著延长,下丘脑CRH、血浆AcTH和cORT、浓度显著升高,与正常组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。②与模型组比较,艾灸组大鼠的行为学变化显著改善,下丘脑CRH、血浆ACTH和CORT水平显著降低（P〈0．01）。结论：艾灸通过抑制下丘脑CRH,血浆ACTH、CORT的过度分泌,以纠正异常的HPA轴功能,达到治疗CFS目的。     

黄芪多糖对糖尿病大鼠神经肽Y及其Y_2受体表达的影响

目的：探讨黄芪多糖（APS）对糖尿病大鼠肾脏神经肽Y（NPY）及其Y2受体（Y2R）表达的影响。方法：采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病大鼠动物模型,随机分为对照组、糖尿病组和黄芪多糖干预组;采用放射免疫法检测血浆和肾皮质NPY水平,实时荧光定量PCR方法检测肾皮质NPYmRNA的表达,免疫组织化学方法检测肾皮质Y2R蛋白表达,同时检测大鼠的血糖、尿白蛋白排泄率（UAER）、肾重/体重。结果：①APS干预能显著削弱糖尿病大鼠血糖、UAER和肾重/体重的增加;②APS干预后显著降低糖尿病大鼠血浆和肾皮质NPY水平（P〈0.01）;③APS干预组大鼠肾皮质NPYmRNA和Y2R蛋白表达显著低于糖尿病组（P〈0.05）。结论：APS对糖尿病肾病的保护作用机制可能与下调肾脏NPY及其Y2R的表达有关。     

应激状态下患者下丘脑-垂体-肾上腺轴功能的变化

目的观察急、慢性应激状态下患者下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)功能的变化。方法选择2011年1月至2013年1月在东风医院外科住院的31例手术创伤患者为急性应激组,在内分泌科住院的代谢综合征患者31例为慢性应激组,同期在东风医院体检的无内分泌疾病的31例健康查体者为健康对照组。分别测定8:00、16:00及24:00血清皮质醇和促肾上腺皮质激素(ACTH)的水平。结果①急性应激组患者血清皮质醇、ACTH在不同时点间均升高,且高皮质醇与高ACTH发生率高,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);②慢性应激组患者血清皮质醇、ACTH在不同时点间均升高,且皮质醇与ACTH昼夜节律紊乱发生率高,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);③慢性应激组与急性应激组患者比较,血清皮质醇(8:00、16:00)和ACTH(8:00、24:00)均减低,差异有统计学意义(P<0.01);④相关性分析:血清皮质醇与ACTH在急、慢性应激组均呈正相关关系。结论急性应激组患者HPA分泌亢进,慢性应激组患者HPA分泌昼夜节律紊乱。     

硫化氢对海洛因依赖大鼠一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的探讨硫化氢（H2S）对海洛因依赖大鼠一氧化氮（NO）/一氧化氮合酶（NOS）体系的影响。方法实验大鼠随机分成3组：正常对照组、海洛因依赖组（herion组）、海洛因依赖＋NaHS组（heroin＋NaHS组）。采用比色法测定大鼠血浆及海马组织NO含量,Real time PCR测定海马组织nNOS mRNA表达量。结果血浆及海马NO含量比较,herion组与heroin＋NaHS组均高于对照组（〈0.05）,heroin＋NaHS组低于herion组（〈0.05）;海马组织nNOS mRNA表达量比较,herion组高于对照组（〈0.05）,heroin＋NaHS组与对照组无显著差异（〉0.05）,heroin＋NaHS组低于herion组（〈0.05）。结论海洛因依赖可导致大鼠体内NO水平升高,H2S供体NaHS可抑制NO的产生,下调nNOS mRNA表达。     

葛根素对糖尿病大鼠坐骨神经损伤的影响

目的：探讨葛根素对糖尿病大鼠坐骨神经的保护作用及其机制。方法：雄性SD大鼠随机分成6组：正常对照组,糖尿病模型组,葛根素高（160mg·kg^-1）、中（120mg·kg^-1）、低（80mg·kg^-1）剂量治疗组,氨基胍（100mg·kg^-1）治疗组;各组大鼠每天腹腔注射相应药物1次,正常对照组及糖尿病模型组腹腔注射等体积丙二醇。治疗12周后,测定6组大鼠血清、坐骨神经一氧化氮（NO）含量、一氧化氮合酶（NOS）活性和血浆内皮素-1（ET-1）、降钙素基因相关肽（CGRP）含量及坐骨神经丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、Ca^2＋-ATPase、Na^＋-K^＋-ATPase活性和神经元型NOS（nNOS）、醛糖还原酶（AR） mRNA的表达水平。结果：糖尿病组大鼠血液NO、CGRP含量及坐骨神经NOS、SOD、Ca^2＋-ATPase、Na^＋-K^＋-ATPase活性、NO含量和nNOS mRNA的表达均明显低于正常对照组（P〈0.01或P〈0.05）,而血液NOS活性、ET-1含量和坐骨神经MDA含量、AR mRNA的表达均明显高于正常对照组（P〈0.01或P〈0.05）;经葛根素治疗后,上述改变逆转,与糖尿病模型组比较差异有显著性（P〈0.01或P〈0.05）。结论：葛根素对糖尿病大鼠坐骨神经具有一定的保护作用,其机制可能与改善神经内膜血供及减轻氧化应激损伤有关。     

针刺对慢性神经痛大鼠海马EphrinBs/EphBs mRNA和EphrinB3蛋白表达的影响

目的:观察长期针刺治疗对慢性神经痛大鼠海马EphrinBs/EphBs mRNA和EphrinB3蛋白表达的影响,探讨针刺镇痛可能的机制。方法:SD雄性大鼠共35只,随机分为假手术组(n=9)、模型组(n=8)、电针组(n=9)、手针组(n=9)。采用慢性坐骨神经结扎性损伤(CCI)模型,电针组和手针组大鼠从造模后第8天开始至第34天分别给予电针、手针干预大鼠"足三里"和"三阴交"穴,隔日1次。所有大鼠均在造模前、造模后第7、14、21、28和35天进行机械性痛阈(MWT)测定;各组大鼠于术后第35天处死取材,采用定量Q-PCR的方法检测海马EphrinBs/EphBs各型mRNA的表达,并采用Western blot方法检测EphrinB3蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组造模后第7天起各时间点MWT值显著降低(P0.01)。与模型组比较,电针组、手针组大鼠造模后第14至35天大鼠MWT值均显著上调(P0.05,P0.01),与假手术组相比,模型组大鼠海马中EphB1、EphB2、EphB3和EphrinB2的mRNA表达水平均显著增加(P0.05,P0.01);与模型组比较,手针组及电针组大鼠EphB1、EphB2、EphB4和EphrinB3 mRNA表达水平显著下降(P0.05,P0.01),电针组EphB6 mRNA的表达显著下调(P0.01);电针组和手针组海马EphrinB3蛋白表达水平明显降低(P0.05)。结论:针刺广泛调节海马EphrinBs/EphBs系统的表达可能是针刺治疗神经病理性疼痛的机制之一。     

补肾益气方对老年大鼠内源性皮质酮分泌及IL-2基因表达的影响

目的:观察补肾益气方对自然衰老大鼠皮质酮及IL-2基因表达的影响。方法:将20月龄老年大鼠随机分为对照组与补肾组,各10只。另设3月龄青年组。其中老年补肾组自分组日起以饮料方式饲喂补肾益气方药液,连续3个月,其余两组予正常饮水和饲料。于干预3月结束时,取腹主动脉血和脾脏。采用ELISA法检测大鼠血清IL-2含量;EIA法检测大鼠血清皮质酮含量;qRT-PCR法检测大鼠脾淋巴细胞中IL-2、糖皮质激素受体(GR)mRNA的表达;Western blotting法检测大鼠脾淋巴细胞GR蛋白表达。结果:与青年组相比,老年对照组大鼠血清皮质酮含量明显升高(P0.05),血清IL-2含量明显降低(P0.05),脾淋巴细胞IL-2 mRNA、GR mRNA和蛋白表达明显下降(P0.05);与老年对照组比较,老年补肾组血清IL-2水平明显升高(P0.05),GR mRNA和蛋白表达明显升高(P0.05)。结论:补肾益气方可通过调节老年大鼠异常的皮质酮/糖皮质激素受体通路,改善IL-2基因表达的增龄性衰退。     

黄芪多糖对肾阳虚型糖尿病大鼠肾组织中TGF-β1表达的影响

目的研究黄芪多糖（astragalus polysaccharide，APS）对肾阳虚型糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达的影响。方法用SD雄性大鼠制作肾阳虚糖尿病大鼠模型；将模型鼠随机分为3组：对照组，苯那普利治疗组，黄芪多糖治疗组。于实验第8周时统一处死各组老鼠，测定大鼠肾脏重量／体重、血糖、血脂；用RT-PCR检测各组大鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达。结果APS可明显降低肾脏重量／体重、血糖、血脂，并能使大鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达减少。结论APS可能通过改善大鼠血糖、血脂降低TGF-β1 mRNA的表达，进而阻滞糖尿病肾病的发生和发展；APS有可能成为临床治疗肾阳虚型糖尿病的有效药物。