养肝益水颗粒对自发性高血压大鼠肾脏Smad2、Smad3、Smad7表达的影响

目的观察养肝益水颗粒对自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat,SHR）肾脏smad2、smad3、smad7表达的影响,探讨养肝益水颗粒保护肾脏的机制。方法将40只12周雄性SHR大鼠随机分为模型组、贝拉普利组（每日1.8 mg/kg）、养肝益水颗粒低剂量组（每日5.4 g/kg）、养肝益水颗粒高剂量组（每日27 g/kg）,每组10只;并设Wista-rKyoto（WKY）大鼠10只作正常对照组;模型组和正常对照组给予等容积生理盐水灌胃,每天1次,共6周。采用免疫组织化学法检测各组大鼠肾脏smad2、smad3、smad7的表达水平。结果与正常组相比,模型组肾脏Smad2、Smad3的表达明显上调（P〈0.01）,Smad7的表达明显下调（P〈0.01）;各治疗组与模型组相比,肾脏Smad2、Smad3的表达明显下调（P〈0.01）,Smad7的表达明显上调（P〈0.01）,且养肝益水颗粒低剂量组与贝拉普利组相比疗效相近（P〉0.05）,养肝益水颗粒高剂量组疗效优于养肝益水颗粒低剂量组与贝拉普利组（P〈0.05,或P〈0.01）。结论养肝益水颗粒可能是通过下调肾脏Smad2、Smad3和上调肾脏Smad7的表达以阻断转化生长因子及其受体（transforming growth factor-transfor-ming growth factor receptor,TGF-β-TβR）-Smads信号转导通路而抗高血压肾脏纤维化。     

甘草甜素对大鼠肾小球硬化早期的防护作用

目的 探讨甘草甜素对大鼠肾小球硬化早期的保护作用。方法 采用两次经尾 iv 阿霉素方法建立大鼠肾小球硬化模型。实验随机分为3组,模型组、甘草甜素治疗组和对照组。检测各组大鼠第4、6、8周各项指标的变化,包括24 h 尿蛋白定量、血清尿素氮 (BUN)、肌酐 (SCr)、胆固醇 (TC) 和白蛋白 (Alb)。各组取肾皮质进行光镜等组织病理学检测。应用免疫组织化学方法检测肾组织内转化生长因子β1 (TGF-β1)、结缔组织生长因子 (CTGF) 蛋白的表达。采用标准曲线法进行荧光定量 PCR 检测肾组织内 TGFβ1、CTGF 和金属蛋白酶组织抑制物-1 (TIMP-1) mRNA 的表达。结果 甘草甜素治疗组大鼠 24 h 尿蛋白定量、BUN、SCr、TC 和 Alb 等指标与模型组相比较均有不同程度改善 (P＜0.05)。肾小球硬化程度治疗组明显轻于模型组。治疗组与模型组比较肾组织内 TGF-β1 和 CTGF 蛋白表达均有不同程度降低,表达峰值下降 (P＜0.05)。治疗组与模型组比较 TGF-β1、CTGF 和 TIMP1 mRNA 表达均有不同程度降低,表达峰值下降 (P＜0.05)。结论 从蛋白和 mRNA 水平同时证实甘草甜素对 TGF-β1、CTGF 和 TIMP-1 的表达有明显的抑制作用,证实甘草甜素对大鼠肾小球硬化有早期保护作用。     

十味芪黄益肾方对慢性肾衰竭大鼠肾纤维化的干预作用

目的 观察十味芪黄益肾方对腺嘌呤肾纤维化模型大鼠转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）的影响,探讨其抗肾纤维化的作用机制。方法 将55只SD大鼠随机分为益肾方组（n=14）、缬沙坦组（n=14）、模型组（n=12）和正常组（n=15）。益肾方组按10 mL/kg给予大鼠灌胃浓缩为2.4 g/mL的十味芪黄益肾方水煎剂;缬沙坦组按10 mL/kg给予大鼠灌胃0.002 g/mL的混悬液;正常组和模型组给予等量蒸馏水,按10 mL/kg灌胃。疗程均为8周。检测各组大鼠血清肌酐（serum creatinine,SCr）、血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、24 h尿蛋白（24-hour urinary protein,24hUPro）及肾组织中TGF-β1、HGF、α-SMA、FN蛋白的表达水平,并采用苏木精-伊红染色、Masson染色观察肾组织病理变化。结果 模型组、缬沙坦组、益肾方组BUN、SCr、24hUPro水平均高于正常组（P＜0.05）;与模型组比较,缬沙坦组和益肾方组BUN、SCr、24hUPro水平明显降低（P＜0.05）;与缬沙坦组比较,益肾方组BUN、SCr、24hUPro水平明显降低（P＜0.05）。模型组、缬沙坦组和益肾方组TGF-β1、α-SMA、FN、HGF水平均明显高于正常组（P<0.05）;与模型组比较,缬沙坦组和益肾方组TGF-β1、α-SMA、FN蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）,HGF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与缬沙坦组比较,益肾方组TGF-β1、α-SMA、FN蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,HGF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。缬沙坦组和益肾方组肾脏病理损害明显减轻,其中益肾方组优于缬沙坦组。结论 十味芪黄益肾方可以降低肾纤维化模型大鼠尿蛋白,保护肾功能,降低TGF-β1、α-SMA、FN水平,升高HGF水平,减轻肾脏病理损害,具有改善慢性肾衰竭大鼠肾纤维化的作用。     

芪贞降糖颗粒对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/Smad信号通路的调控作用

目的 观察芪贞降糖颗粒对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/Smad信号通路的调控作用,探讨其改善糖尿病肾病的作用机制。方法 采用高脂饲料喂养联合链尿佐菌素腹腔注射方法复制2型糖尿病肾病大鼠模型,选取模型复制成功的大鼠,随机分为模型组,二甲双胍组,芪贞降糖颗粒低、中、高剂量组,每组10只,另取10只正常大鼠作为正常对照组。灌胃给药8周,检测各组大鼠尿α1微球蛋白、β2微球蛋白和白蛋白含量。苏木素-伊红染色观察大鼠肾组织的损伤程度,免疫荧光染色观察大鼠肾组织转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）和转化生长因子βⅠ型受体（transforming growth factor beta type Ⅰ receptor,TGF-βRⅠ）的表达分布。RT-PCR检测肾组织TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad3和Smad7 mRNA的表达水平,Western blot检测肾组织TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad3、p-Smad3、Smad7和p-Smad7的蛋白表达水平。结果 与正常对照组相比,模型组大鼠尿α1微球蛋白、β2微球蛋白及白蛋白含量均明显增加（P＜0.05）,肾组织损伤明显,TGF-β1和TGFβ-RⅠ表达增加;TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad3 mRNA表达水平显著增高（P＜0.05）,Smad7 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）,TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad3和p-Smad3蛋白表达水平显著增加（P＜0.05）,Smad7和p-Smad7蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,芪贞降糖颗粒组上述指标均具有不同程度的逆转,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 芪贞降糖颗粒能够改善糖尿病大鼠肾组织的损伤程度,其机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路的蛋白表达有关。     

AngⅡ抑制剂对HIF-1α在慢性肾衰大鼠肾组织中表达的影响

目的 观察AngⅡ抑制剂对于5/6( ablation/infarction,A/I)肾切除慢性肾衰大鼠残余肾组织HIF-1α蛋白及mRNA表达的影响,并初步探讨其作用机制.方法 将SD雄性大鼠随机抽取15只设为假手术组(A组),其余采用5/6(A/I)肾切除慢性肾衰模型法制作成慢性肾功能衰竭动物模型,随机分为模型组(B组)和AngⅡ抑制剂(氯沙坦钾合福辛普利钠)组(C组),每组15只,分别给予相应干预,60 d后检测生化指标,并采用蛋白质印迹法和荧光定量PCR分别测定大鼠残余肾皮质、髓质HIF-1α蛋白及mRNA的表达.结果 模型组与假手术组比较,SCr、BUN升高,CCr降低(P均＜0.01);AngⅡ抑制剂组与模型组干预后比较,SCr、BUN水平下降,CCr水平升高(P均＜0.05).模型组大鼠肾皮质、髓质HIF-1α蛋白和mRNA的表达均较假手术组升高(P＜0.05),AngⅡ抑制剂组HIF-1α蛋白和mRNA在肾皮质和髓质中的表达均较模型组减少(P＜0.05).结论 AngⅡ抑制剂可以改善5/6(A/I)肾切除慢性肾衰大鼠的肾功能,其作用机制可能与HIF-1α信号通路有关.     

参芪解毒汤治疗慢性肾功能衰竭的实验研究

目的：验证参芪解毒汤治疗慢性肾功能衰竭（CRF）的疗效。方法：采用腺嘌呤制作大鼠CRF模型，将其分为正常组、模型组、科索亚组及参芪解毒汤高、低剂量组，治疗8周后，测量各组血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、血清白蛋白（ALB）、甘油三脂(TG)、胆固醇（CHO）、血清瘦素（Leptin）水平，并对大鼠肾脏组织进行病理观察检测转化生长因子β1(TGF-β1)在肾组织的表达。结果：参芪解毒汤高、低剂量组，科索亚组SCr、BUN、Leptin水平均低于模型组，ALB高于模型组（P＜0.05）。病理结果表明，各用药组大鼠的肾组织病理损伤要明显轻于模型组，高剂量组损伤最轻。各用药组TGF-β1在肾组织的表达均明显低于模型组（P＜0.05）。结论：参芪解毒汤可有效降低CRF大鼠SCr、BUN、Leptin水平，升高ALB水平，具有减轻大鼠肾组织的损伤、减少TGF-β1在肾组织的表达、延缓CRF进展的作用。     

联合用药延缓阿霉素肾病大鼠肾间质纤维化的研究

目的：探讨贝那普利和蝙蝠蛾拟青酶Cs-4联合应用对阿霉素肾病模型大鼠肾纤维化的保护作用及调节机制。方法：将60只SD大鼠随机分为模型组（M组）、贝那普利组（B组）、联合治疗组（U组）3组，每组20只。8周后观察各组大鼠24h尿蛋白定量、血脂、血浆总蛋白（TP）、血浆白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的水平及肾脏病理改变，免疫组化检测肾层粘连蛋白（LN）、肾组织中纤连蛋白(FN)、胶原蛋白Ⅳ(Col Ⅳ)、转化生长因子β1(TGF-β1)的表达，RT PCR方法测定肾皮质转化生长因子β1（TGF-β1）和纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）、组织性金属蛋白酶抑制物1(TIMP 1)mRNA的表达。结果：U组、B组分别和M组相比，24h尿蛋白定量、BUN、Scr、甘油三脂(TG)、总胆固醇(Cho)明显降低（P＜0.01），TP和ALB明显升高（P＜0.01）,U组和B组相比，BUN、Scr、TG、Cho亦明显降低（P＜0.05）；M组肾脏病理肾间质纤维化较重，而B组较轻，U组最轻；免疫组化可见B组和U组中LN、FN、Col Ⅳ、TGF-β1的表达明显低于M组（P＜0.01），并且U组和B组相比，Col Ⅳ、TGF-β1的表达明显降低（P＜0.05）；RT PCR显示B组、U组TGF-1mRNA、PAI-1mRNA、TIMP-1mRNA的表达，均较M组降低（P＜0.01），U组较B组亦明显降低（P＜0.05）。结论：蝙蝠蛾拟青酶Cs-4和贝那普利联合应用有相加作用，能有效的延缓肾间质纤维化。     

尿毒清胶囊及其拆方对5/6肾切除大鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达的影响

[目的]观察尿毒清胶囊及其拆方对慢性肾功能哀竭(CRF)模型大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的影响.[方法]采用5/6肾切除法复制CRF大鼠模型,造模成功的SD大鼠随机分为模型组、黄芪组(剂量1.5 g·kg-1·d-1)、丹参组(剂量为1 g·kg-1·d-1)、大黄组(剂量为1 g·kg-1·d-1)、黄芪丹参大黄组(剂量为1 g·kg-1·d-1)、尿毒清组(剂量为1 g·kg-1·d-1);各给药组灌胃给药6周后,检测各组大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)水平,并采用逆转录聚合酶链反应检测各组大鼠肾组织TGF-β1 mRNA的表达水平.[结果]各给药组均可降低血清BUN、SCr水平,与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01),其中尿毒清组降低SCr水平作用优于大黄组(P＜0.05);TGF-β1 mRNA在各组肾组织中均有不同程度的表达,其中模型组表达最强烈,尿毒清组和黄芪丹参大黄组表达最轻.[结论]尿毒清治疗CRF的作用与其能下调TGF-β1 mRNA在肾组织中表达有关,且中药复方作用优于单味中药.     

复方仙草颗粒对IgA肾病大鼠转化生长因子β1及其Ⅱ型受体表达的影响

目的 观察复方仙草颗粒对IgA肾病大鼠转化生长因子-β1（transforming growth factor β1,TGF-β1）信号通路的影响。方法 采用一侧肾切除、反复尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B的方法,复制IgA肾病大鼠模型。将大鼠随机分为模型组,福辛普利组,复方仙草颗粒小、中、大剂量组,另设正常对照组,每组10只。治疗8周后检测24 h尿蛋白、尿红细胞计数,采用RT-PCR法检测肾组织TGF-β1及其Ⅱ型受体（TβRⅡ）mRNA的表达,采用Western 印迹法检测TGF-β1及TβRⅡ蛋白的表达,采用免疫组织化学法检测纤连蛋白（fibronectin,FN）的表达。结果 与正常对照组比较,模型组24 h尿蛋白,尿红细胞计数,TGF-β1、TβRⅡ mRNA及其蛋白表达水平,以及FN表达水平显著升高（P＜0.01）;复方仙草颗粒能够剂量依赖性地降低上述指标的水平,其中复方仙草颗粒大剂量组上述指标的水平显著低于小剂量组（P<0.05,或P<0.01）,复方仙草颗粒大剂量组在降低24 h尿蛋白,TGF-β1 mRNA及其蛋白,以及FN方面与福辛普利组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 复方仙草颗粒能延缓IgA肾病肾小球硬化,减轻血尿、蛋白尿,其作用机制可能与抑制TGF-β1信号通路有关。     

尿毒清胶囊及其拆方对5/6肾切除大鼠肾组织TGF-β_1 mVRNA表达的影响

【目的】观察尿毒清胶囊及其拆方对慢性肾功能哀竭（CRF）模型大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA表达的影响。【方法】采用5/6肾切除法复制CRF大鼠模型,造模成功的SD大鼠随机分为模型组、黄芪组（剂量1.5 g&#183; kg^-1&#183; d^-1）、丹参组（剂量为1 g&#183; kg^-1&#183; d^-1）、大黄组（剂量为1 g&#183; kg^-1&#183; d^-1）、黄芪丹参大黄组（剂量为1 g&#183; kg^-1&#183; d^-1）、尿毒清组（剂量为1 g&#183; kg^-1&#183; d^-1）;各给药组灌胃给药6周后,检测各组大鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）水平,并采用逆转录聚合酶链反应检测各组大鼠肾组织TGF-β1mRNA的表达水平。【结果】各给药组均可降低血清BUN、SCr水平,与模型组比较均有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）,其中尿毒清组降低SCr水平作用优于大黄组（P〈0.05）;TGF-β1mRNA在各组肾组织中均有不同程度的表达,其中模型组表达最强烈,尿毒清组和黄芪丹参大黄组表达最轻。【结论】尿毒清治疗CRF的作用与其能下调TGF-β1mRNA在肾组织中表达有关,且中药复方作用优于单味中药。     

p21与TGF-β在大鼠肾间质纤维化模型中的表达

目的：探讨p21及TGF-β在肾间质纤维化中的作用及其可能的调控机制。方法：将SD大鼠随机分为假手术组（SOR组）和单侧输尿管结扎组（UUO组）。HE染色观察2组大鼠术后第7,14和21天肾小管间质的形态学改变;用RT—PCR法检测肾皮质p21mRNA和TGF-βmRNA的变化。结果-在UUO大鼠模型早期,肾皮质p21mRNA和TGF-βmRNA的表达即有明显增高,与SOR组大鼠比较,差异有显著性（分别P〈0．01及P〈0．05）,随着梗阻时间的延长,p21和TGF-β的表达逐渐增强（P〈0．05）,并且UUO组大鼠各时间点p21和TGF-β的表达呈正相关（各时间点分别为r=0．745、0．700、0．662,P〈0．05）。结论：p21可能参与了单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化的发病过程,TGF-β可能参与介导了p21在肾皮质表达的调控。     

参地颗粒对系膜增生性肾小球肾炎大鼠单个核细胞凋亡及炎症紊乱的干预作用

目的 观察参地颗粒作用于系膜增生性肾小球肾炎（mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN）大鼠后,外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）的凋亡,B淋巴细胞瘤- 2（B- cell lymphoma- 2,Bcl- 2）蛋白、Fas蛋白的表达,单核细胞趋化蛋白- 1（monocyte chemotactic protein 1,MCP- 1）、转化生长因子- β1（transforming growth factor- β1,TGF- β1）水平的变化,探讨其作用机制。方法 从60只SD大鼠中随机抽取10只作为正常组,剩余50只均用于MsPGN模型复制,模型制作成功后,再分为模型组（11只）、缬沙坦组（10只）、参地颗粒组（10只）。各组大鼠在模型复制完成后第21天开始给药,缬沙坦组每日予缬沙坦溶液灌胃,参地颗粒组予参地颗粒溶液灌胃,模型组、正常组予生理盐水灌胃,连续干预12周。光学显微镜下观察各组大鼠病理损伤情况,实验室方法检测各组大鼠24 h尿蛋白（24- hour urinary protein,24hUPr）、PBMCs凋亡率、Bcl- 2蛋白、Fas蛋白表达水平及血清MCP- 1、TGF- β1水平。结果 治疗第8、12周参地颗粒组24hUPr水平较缬沙坦组显著降低（P<0.05）。与正常组比较,模型组大鼠PBMCs凋亡率、血清MCP- 1、TGF- β1水平升高（P<0.05）,Bcl- 2蛋白表达水平下降,Fas蛋白表达水平上升（P<0.05）;与模型组比较,缬沙坦组、参地颗粒组PBMCs凋亡率、MCP- 1、TGF- β1水平均降低（P<0.05）,Bcl- 2蛋白表达水平上升,Fas蛋白表达水平下降（P<0.05）;参地颗粒组PBMCs凋亡率、血清TGF- β1水平低于缬沙坦组（P<0.05）,Bcl- 2蛋白表达水平上升程度大于缬沙坦组（P<0.05）。参地颗粒组MsPGN大鼠肾脏系膜细胞增生被明显抑制。结论 参地颗粒可以减轻肾脏炎症反应,消减尿蛋白,改善MsPGN大鼠的肾脏病理损害,其机制可能是通过调节凋亡调控蛋白Bcl- 2、Fas蛋白表达水平,降低MsPGN大鼠PBMCs凋亡率,下调MCP- 1、TGF- β1的表达水平实现的。     

基于TGF-β/Smads信号通路探讨桃核承气汤治疗慢性肾衰竭的机制

目的 观察桃核承气汤对慢性肾衰竭（chronic renal failure,CRF）大鼠肾脏功能、肾脏病理形态及对TGF-β/Smads信号通路的影响,探讨本方治疗CRF的机制。方法 将60只雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、尿毒清组、桃核承气汤组。模型组、尿毒清组与桃核承气汤组行5/6肾切除手术,假手术组仅行双肾被膜剥离术,空白组不进行手术,术后4周予不同的药物治疗,空白组、模型组、假手术组大鼠给予蒸馏水灌胃,尿毒清组予尿毒清灌胃,桃核承气汤组予桃核承气汤灌胃;治疗后观察肾组织病理变化、免疫功能指标及肾功能指标。结果 与假手术组比较,模型组大鼠SCr、BUN、血β2-MG、尿β2-MG、尿RBP及24 h尿蛋白含量,肾组织TGF-β1、Smad2、Smad3表达水平均显著升高（P<0.05）;模型组大鼠Smad4和Smad7表达水平均显著降低（P<0.05）。与模型组比较,尿毒清组、桃核承气汤组大鼠SCr、BUN、血β2-MG、尿β2-MG、尿RBP及24 h尿蛋白含量,肾组织TGF-β1、Smad2、Smad3表达水平均显著降低（P<0.05）;Smad4和Smad7表达水平显著升高（P<0.05）。与尿毒清组比较,桃核承气汤组大鼠SCr、BUN、血β2-MG、尿β2-MG、尿RBP及24 h尿蛋白含量,肾组织TGF-β1、Smad2、Smad3表达水平均显著降低（P<0.05）;Smad4和Smad7表达水平显著升高（P<0.05）。结论 桃核承气汤可以明显改善CRF大鼠的肾功能,降低血清SCr、BUN、β2-MG及24 h尿蛋白、尿β2-MG、RBP的含量;桃核承气汤可以通过影响TGF-β/Smads信号通路抑制TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白和促进Smad4、Smad7蛋白的表达来实现肾间质纤维化。     

复肾功方对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏nephrin mRNA表达的影响

目的 研究复肾功方对慢性肾功能衰竭（chronic renal failure,CRF）大鼠肾组织足细胞裂孔隔膜蛋白（nephrin） mRNA表达的影响,探讨其降低尿蛋白、减轻肾损害的作用机制。方法 将55只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。正常组常规饲养,其余4组大鼠食用含腺嘌呤饲料建立慢性肾功能衰竭模型,连续喂养21 d。造模成功后,所有大鼠改用常规饲料。正常组和模型组按20 mL/(kg·d)灌胃给予生理盐水;复肾功方低、中、高剂量组按大鼠体质量分别以生药4、8、16 g/kg灌胃复肾功方,1次/d,连续灌胃30 d。实验结束后,收集大鼠尿液测定24 h尿蛋白定量,检测各组大鼠血清血肌酐(SCr)和尿素氮（BUN）水平,HE染色检测肾小球组织形态学改变,免疫荧光检测nephrin蛋白表达,Real-Time PCR法观察肾脏nephrin mRNA表达情况。结果 与正常组比较,模型组24 h尿蛋白定量、SCr和BUN水平升高(P<0.05),nephrin蛋白及mRNA表达下降（P<0.05);与模型组比较,经复肾功方治疗后,24 h尿蛋白定量、SCr和BUN水平降低（P<0.05）,肾组织nephrin蛋白及mRNA的表达升高（P<0.05）。结论 复肾功方降低CRF大鼠尿蛋白,减轻肾损害程度,其机制可能与升高肾组织nephrin蛋白及mRNA的表达、减轻足细胞损伤有关。     

傣药雅盼对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1/Smads信号转导通路的影响

目的 观察傣药雅盼对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠转化生长因子(TGF)-β1/Smads信号转导通路的影响,从而探讨该药对肾间质纤维化抑制作用的可能机制.方法 120只雄性大鼠行单侧输尿管结扎建立UUO大鼠模型,生理盐水灌胃或给药28 d后收集血清检测尿素氮(BUN)、肌酐(Scr),处死大鼠,取其肾组织行HE染色和Masson染色,免疫组织化学法检测TGF-β1、Smad2、Smad7在肾组织的表达;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测mRNA的表达;Western blot检测蛋白表达.结果 傣药雅盼各剂量组能降低大鼠BUN、Scr水平,并减轻肾小管-间质炎性细胞及肾间质纤维化程度,同时使TGF-β1、Smad2 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05),而Smad7 mRNA和蛋白表达下调(P＜0.05).结论 傣药雅盼备浓度组均可以在一定程度抑制Smad2 mRNA的表达,上调Smad7 mRNA的表达,通过干预TGF-β1/Smads信号转导通路抑制了TGF-β1在肾组织的表达从而对UUO大鼠肾间质纤维化.     

肾阳虚大鼠模型的水通道蛋白1改变

目的：探讨中医学肾阳虚证的物质基础。方法：运用腺嘌呤灌服和氢化可的松肌肉注射2种方法制备大鼠肾阳虚模型（分别称为模型Ⅰ和模型Ⅱ）,100只Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型Ⅰ组,模型Ⅱ大、中和小剂量组。造模结束后,常规生化法检测血肌酐（serum creatinine,SCr）、血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、尿肌酐（urine creatinine,UCr）含量,冰点比重法检测尿渗透压（urine osmotic pressure,Uosm）、高岭土法检测尿17-羟皮质类固醇含量。实时逆转录聚合酶链式反应检测肾脏组织中水通道蛋白-1表达。结果：两种模型大鼠均出现类似肾阳虚证表现。与正常对照组和模型Ⅱ各剂量组比较,模型Ⅰ组大鼠SCr和BUN含量升高（P〈0.05）,UCr含量和Uosm降低（P〈0.05）。模型Ⅰ组大鼠尿17-羟皮质类固醇含量和肾组织AQP-1表达比正常对照组下降（P〈0.05）。与正常对照组比较,模型Ⅱ中剂量组SCr含量增加（P〈0.05）,尿17-羟皮质类固醇含量降低（P〈0.05）,而模型Ⅱ各剂量组大鼠肾组织AQP-1表达升高（P〈0.05）,并显示出一定的剂量依赖关系,以高剂量组升高最为明显。结论：水通道蛋白可能是肾阳虚证的物质基础之一。     

萝卜硫素通过TGF-β/Smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响

【摘要】 目的 探讨萝卜硫素通过转化生长因子（TGF-β）/smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响及其作用机制。方法 采用2μM TGF-β诱导大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1）增生,将细胞分为对照组、TGF-β刺激组、TGF β联合20 μM萝卜硫素组及TGF-β联合40 μM萝卜硫素组。5 mg/kg阿霉素诱导肾病综合征大鼠模型,不同剂量萝卜硫素处理HBZY-1细胞及肾病综合征大鼠,将大鼠分为空白对照组、阿霉素刺激组、阿霉素联合30 mg/kg萝卜硫素组及阿霉素联合60 mg/kg萝卜硫素组,每组各8只;采用CCK8法检测HBZY-1细胞增殖,HE染色分析肾病综合征大鼠肾组织系膜基质沉积,Western Blotting方法检测粘连蛋白（FN）、Ⅳ胶原蛋白（Col4）、TGF-β及p Smad3蛋白表达水平。结果 TGF-β刺激组能明显诱导HBZY-1细胞增生及HBZY-1细胞FN和Col4蛋白表达,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;TGF-β联合20、40 μM萝卜硫组与TGF-β刺激组相比能明显抑制TGF-β诱导的HBZY-1细胞增殖和明显抑制TGF β诱导的FN和Col4蛋白表达（P＜0.05）。阿霉素诱导肾病综合症大鼠肾脏系膜基质沉积增多（P＜0.05）,而不同剂量萝卜硫素治疗后,能显著降低肾脏系膜基质沉积（P＜0.05）。阿霉素刺激组能明显诱导大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平升高和大鼠肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;与阿霉素刺激组相比,不同剂量萝卜硫素能明显降低大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平、降低肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达水平（P＜0.05）。结论 萝卜硫素可通过下调TGF-β/Smad3信号传导抑制基质合成相关蛋白表达,进而降低了肾病综合征大鼠肾小球系膜细胞增生。     

益气清利化瘀方对慢性肾衰竭大鼠肾组织形态及转化生长因子-β_1表达的影响

目的:观察益气清利化瘀方颗粒对慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠肾组织形态及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:选择清洁级雄性SD大鼠,采用5/6肾切除方法建立CRF模型。实验设假手术组、模型组、中药组(益气清利化瘀配方颗粒,含生药7.58 g/ml)、西药组(氯沙坦钾片,6.42 g/L);假手术组、模型组均灌胃纯净水,中药组、西药组分别灌胃相应的药物,均2 ml/d。干预60 d后检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN),计算肌酐清除率(CCr);HE染色观察肾组织病理形态,Western blot法检测TGF-β1蛋白含量。结果:与模型组比较,两药物组SCr、BUN均明显下降(P0.05,P0.01),CCr水平显著升高(P0.01),且中药组对肾功能的改善明显优于西药组(P0.05)。HE染色显示,两药物组的肾小球纤维化均较模型组有所减轻,且中药组肾小球结构较清晰;与模型组比较,两治疗组皮质、髓质的TGF-β1蛋白表达均较模型组明显减少(P0.01),且中药组优于西药组(P0.01)。结论:益气清利化瘀方可改善CRF大鼠肾功能,减轻肾纤维化,下调CRF大鼠TGF-β1表达,其抗肾间质纤维化、改善肾功能的作用可能与抑制肾组织TGF-β1表达及信号转导通路有关。     

转化生长因子β1和波形蛋白及结蛋白在糖尿病大鼠肾皮质中早期表达的研究

目的:探讨糖尿病大鼠早期不同阶段转化生长因子β1(TGF-β1)和波形蛋白(vimentin)、结蛋白(desmin)在大鼠肾皮质中表达的变化规律及其相互关系.方法:建立STZ诱导的SD大鼠糖尿病模型;用RT-PCR法半定量检测早期各观察时点糖尿病大鼠肾皮质中TGF-β1和vimentin、desmin mRNA的表达水平.结果:①随着糖尿病病情的进展,TGF-β1和vimentin mRNA的表达量分别从模型建立后第7 d和第14 d起逐渐增多(P=0.001),desmin mRNA表达从第14 d起却逐渐减少(P＜0.05).②糖尿病组的TGF-β1与vimentin的mRNA表达呈正相关(r＝0.740,P=0.000),desmin与TGF-β1的mRNA表达呈负相关(r＝-0.695,P=0.000),desmin与vimentin的mRNA表达也呈负相关(r＝-0.591,P=0.002).结论:糖尿病大鼠早期肾皮质中TGF-β1和vimentin的表达逐渐增多,desmin的表达却逐渐减少,提示TGF-β1可能促进小管上皮细胞向成纤维细胞转化.     

miR-214靶向PTEN介导PI3K/AKT信号通路对糖尿病肾病大鼠的保护机制

目的 探讨微小RNA（miR-214）靶向磷酸酶与张力蛋白同源物（PTEN）介导磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路减轻糖尿病肾病(DN)大鼠的氧化应激和肾间质纤维化的作用和机制。方法 将40只SD雄性大鼠分为对照组（control组）、模型组（DN组）、miR-214阴性对照组（DN+miR-NC组）和miR-214模拟物组（DN+miR-214 mimics组）,每组10只;qRT-PCR检测各组大鼠肾组织中miR-214的表达;电子天平称量各组大鼠体质量和肾质量,计算肾指数;血糖仪测定各组大鼠的空腹血糖（FPG）;双缩脲法测定各组大鼠24 h尿蛋白（UP）水平;全自动生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐（Scr）和血清尿素氮（BUN）的水平;HE染色观察各组大鼠肾组织病理变化;Masson染色观察各组大鼠肾组织间质纤维化;ELISA检测各组大鼠血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的表达;免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达;生物信息学工具预测靶基因;双荧光素酶报告基因检测基因或蛋白之间的相互作用;Western blot检测各组大鼠肾组织中PTEN、p-PI3K、p-AKT和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）的表达。结果 miR-214在DN大鼠肾组织中呈低表达,在DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中表达显著上调（均P＜0.001）;miR-214 mimics使大鼠的体质量升高,肾指数、FPG、UP、Scr及BUN水平下调（均P＜0.05）;DN+miR-214 mimics组大鼠肾组织中肾间质中的炎性细胞浸润减少,胶原纤维沉积减少（P＜0.01）;miR-214 mimics使大鼠血清中MDA的水平降低,SOD、GSH、GSH-PX的水平升高（均P＜0.05）,大鼠肾组织中TGF-β1的表达水平下降（P＜0.05）;miR-214与PTEN存在靶向关系;miR 214 mimics使大鼠肾组织中PTEN蛋白表达下调,p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达上调（均P＜0.05）。结论 miR-214在DN大鼠肾组织中低表达,过表达miR-214对DN大鼠的肾组织有保护作用,可能与降低肾组织的氧化应激水平、TGF-β1蛋白表达和抑制PI3K/AKT通路激活有关。